羊水中白细胞介素-8水平与绒毛膜羊膜炎的关系

目的探讨胎膜早破孕妇羊水中白细胞介素-8（IL-8）水平与绒毛膜羊膜炎的关系。方法用酶联免疫法（ELISA法）测定62例胎膜早破孕妇和46例正常足月妊娠未临产孕妇羊水中IL-8浓度;病理检查两组分娩后的胎膜组织,确定有无绒毛膜羊膜炎。结果胎膜早破组羊水中IL-8浓度高于对照组（P〈0.05）,破膜时间超过24h其羊水中IL-8水平明显高于破膜时间小于12h内的患者,绒毛膜羊膜炎组羊水中IL-8浓度高于对照组（P〈0.05）。结论胎膜早破及绒毛膜羊膜炎孕妇羊水中IL-8水平显著升高,可作为绒毛膜羊膜炎的早期诊断指标。     

胎儿羊水、血清β2-微球蛋白水平分析

目的检测15-38w胎儿羊水、血液β2-微球蛋白（β2-MG）水平，为胎儿泌尿系统疾病等胎儿发育异常的诊断和预后评估提供理论依据。方法应用B超引导下经母腹羊膜腔、脐静脉穿刺术获取121例孕15—38w胎儿羊水和81例19—38w胎儿脐血（经胎血鉴定），应用Bayer1650全自动生化分析仪β2-微球蛋白水平，并进行分组统计。结果胎儿血β2-微球蛋白水平，随孕周增加而下降，但15-34w间无显著差异，而均与35w后组有显著差异；羊水β2-微球蛋白水平。也随孕周增加而下降。但15—30w间无显著差异，31—38w间无显著差异，而两者间组有显著差异，有统计学意义。结论胎儿血、羊水β2-微球蛋白水平随孕周增加而下降，有统计学意义。     

2475份绒毛、羊水及脐血穿刺标本的细胞遗传学分析

目的 对不同孕期的绒毛、羊水以及脐血穿刺标本进行细胞遗传学分析.方法 收集2010年1月至2011年10月就诊的2475位单胎孕妇,年龄19～45岁,孕龄为12～31周.其中绒毛穿刺标本115例,羊水穿刺标本1674例,脐带穿刺标本686例.结果 共检出异常核型101例,阳性率为4.08％.结论 对具有指征的孕妇进行产前核型分析有利于及时发现染色体异常胎儿.     

白细胞介素-2在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的:研究白细胞介素-2(IL-2)在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达水平及意义.方法:应用免疫组织化学和图像分析,分别对30例反复自然流产患者(病例组)和30例正常妊娠者(对照组)绒毛和蜕膜组织中IL-2的表达进行定位和半定量分析;应用显微镜观察反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织的形态学变化.结果:免疫组织化学显色显示,IL-2蛋白定位于绒毛组织的滋养层细胞和蜕膜组织的蜕膜细胞细胞质内,且病例组的IL-2蛋白表达高于对照组.H-E染色结果显示,病例组的蜕膜组织结构模糊、细胞变性坏死、部分细胞连接消失,血管内皮有缺损;绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性坏死,细胞嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强.结论:绒毛和蜕膜组织中IL-2蛋白的高表达与反复自然流产有关,可能参与反复自然流产的病理过程.     

一个糖原累积病Ⅱ型家系的酸性-α-葡萄糖苷酶及其产前基因诊断

目的 为1个糖原累积病Ⅱ型(glycogen storage disease typeⅡ,GSDⅡ)家系进行酶学和产前基因诊断.方法 用酸性-α-葡萄糖苷酶(acid-alpha-glucosidase,GAA)特异性水解荧光底物4-甲基伞型酮-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-methylumbelliferyl-α-D-glucopyranoside,4-MUG)和阿卡波糖抑制其同工酶的方法检测外周血白细胞和羊水细胞GAA酶活性,聚合酶链反应扩增GAA基因外显子编码区序列,直接测序分析GAA基因突变情况.结果 先证者外周血白细胞与胎儿羊水细胞GAA酶活性均明显低于正常参考值范围,分别为正常对照平均值的12.3% 和1.1%.先证者和胎儿均携带新无义突变 p.W738X 和已报道的无义突变p.E888X;先证者、母亲和胎儿均携带假性缺陷等位基因[c.1726G>A; c.2065G>A].结论 通过GAA酶活性检测结合GAA基因分析对1个GSDⅡ家系进行了产前诊断.由于假性缺陷等位基因可引起GAA酶活性降低,故GAA基因分析应作为亚洲人群GSDⅡ产前诊断的常规手段.

Abstract：

Objective To carry out prenatal diagnosis for a glycogen storage disease typeⅡ(GSDⅡ) affected family. Methods The acid-α-glucosidase (GAA) activity was measured in whole leukocytes and cultured amniocytes with 4-methylumbelliferyl-α-D-glucopyranoside as substrate and with acarbose as inhibitor. The coding regions of GAA gene were amplified by polymerase chain reaction and analyzed by direct DNA sequencing. Results The proband and the fetus had low GAA activity (12.3% and 1.1% of the average normal range, respectively). Mutation analysis of the GAA gene revealed a novel nonsense mutation p.W738X and a reported nonsense mutation p.E888X in both the proband and the fetus; the reported pseudodeficiency allele c.[1726G>A;2065G>A] was found in the proband, the mother and the fetus. Conclusion The proband and the fetus were both GSDⅡaffected. A combination of GAA activity analysis and mutation analysis is efficient for the prenatal diagnosis of GSDⅡ. Mutation analysis should be a routine method in the prenatal diagnosis of GSDⅡ in Asian population, where pseudodeficiency allele can cause low GAA activity in normal individuals which is relatively common in Asian.     

白细胞介素-22、β-防御素-2与呼吸系统的免疫调节及哮喘关系的研究进展

白细胞介素(IL)-22是一种有活性的细胞因子,具有抗炎和促炎两种活性,其受体在呼吸道上皮细胞高度表达,参与呼吸道的固有免疫.人类β-防御素有6种,其中人β-防御素-2是最早被发现的具有诱导性表达的防御素,主要来源于呼吸系统,与呼吸系统疾病的发生发展密切相关.IL-22及β-防御素-2在呼吸道均具有免疫调节作用,在一定程度上参与哮喘的发生发展.     

复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8的表达

目的:研究复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的表达。方法:应用免疫组化法及图像分析技术,对30例复发性自然流产患者绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析;H- E染色后光镜下观察绒毛及蜕膜组织的形态学变化。结果:在绒毛组织中,IL-8蛋白定位于绒毛上皮细胞的细胞质内,且病例组的表达明显高于对照组;在蜕膜组织中,病例组蜕膜细胞的胞质内可见IL-8蛋白表达,且高于对照组;H- E染色可见病例组绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性甚至坏死、嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞失去细胞间连接,部分蜕膜细胞解体、核消失。结论:病例组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达的增强与复发性自然流产有关,IL-8可能参与复发性自然流产的病理过程。     

基质金属蛋白酶-9、白介素-1β与未足月胎膜早破的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、白细胞介素-1β（IL-1β）与未足月胎膜早破（PPROM）及绒毛膜羊膜炎的关系。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测未足月胎膜早破组56例、足月胎膜早破组38例、正常妊娠组30例孕妇的血清、羊水、脐血中MMP-9、IL-1β的水平,并进行胎膜的病理检查。结果胎膜早破孕妇的血清、羊水、脐血中MMP-9、IL-1β水平明显高于对照组,而且未足月胎膜早破孕妇的MMP-9、IL-1β水平亦高于足月胎膜早破者（P〈0.01）;未足月胎膜早破组的绒毛膜羊膜炎的发生率明显高于足月胎膜早破组（P〈0.01）;发生绒毛膜羊膜炎的胎膜早破孕妇的血清、羊水、脐血中MMP-9、IL-1β水平明显高于非绒毛膜羊膜炎的胎膜早破孕妇（P〈0.01）。结论检测孕妇血清的MMP-9、IL-1β水平可作为未足月胎膜早破良好的预测指标,测定孕妇血清、羊水的MMP-9、IL-1β水平还有助于胎膜早破并绒毛膜羊膜炎的早期诊断。     

广西壮族人群白细胞介素-1α与β的基因多态性分布

目的：了解白细胞介素-1α（IL-1α）基因-889位点和IL-1β基因-511位点多态性在广西壮族健康人群中的分布。方法：采用PCR-RFLP方法,对上述两位点进行了检测,计算其基因型和等位基因频率。结果：II-1α（-889）和IL-1β（-511）等位基因C、T频率在壮族正常人群中分别为93．9％、6．1％和53．4％、46．6％;与奥地利、非洲黑人、非洲白人健康人群相比,IL-1α（-889）基因型分布及等位基因频率均存在高度显著性差异;与奥地利、非洲白人健康人群相比,IL-1β（-511）基因型分布及等位基因频率存在显著性差异。结论：广西壮族健康人群IL-1α（-889）基因多态性分布与奥地利、非洲黑人、非洲白人不同;IL-1β（-511）基因多态性分布与奥地利、非洲白人不同。     

尿微量蛋白和尿NAG对妊娠期糖尿病患者肾功能评价的临床意义

目的 探讨尿微量蛋白α1-微球蛋白（α1—MG）、β2-微球蛋白（β2-MG）、白蛋白（mAlb）、免疫球蛋白G（IgG）和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）对妊娠期糖尿病（GDM）患者肾脏损害的早期诊断价值。方法 以30例正常妊娠妇女为正常对照组，60例GDM妇女根据血液HbA1c的水平（HbA1c〈6.5％，6．5～8.0％，〉8．0％）分为3组。所有受试者留晨尿10ml离心，收集上清液，检测尿四项微量蛋白和NAG。结果 GDM1组患者，尿α1-MG、β2-MG与对照组的有显著性差异（P〈0．01），其余各项指标无差异（P〉0，05）；GDM2组患者，尿α1-MG、β2-MG、mAlb与正常对照组和GDM1组的有显著性差异（P〈0．01），尿NAG和IsG尿NAG和IgG与上述两组无显著性差异（P〉0．05）；GDM3组患者，尿NAG和α1—MG、β2-MG、mAlb、IgG与正常对照组和GDM1、2组比较均有显著差异（P〈0．01）。结论 尿微量蛋白和NAG可作为妊娠期糖尿病肾脏损害的早期诊断指标。     

哮喘儿童血清白细胞介素-25、嗜酸细胞趋化因子的动态变化和意义

目的:通过监测哮喘儿童血清白细胞介素(IL)-25、嗜酸细胞趋化因子(Eotaxin)表达水平, 探讨其水平变化及其在哮喘发病中的作用.方法:收集哮喘急性发作期、缓解期儿童及健康儿童的静脉血标本, 用双抗体夹心ELISA法测定血清IL-25、Eotaxin的水平.结果:哮喘儿童急性发作期组血清IL-25水平(56.75±11.68) ng/L显著高于缓解期组(47.09±10.96) ng/L及健康对照组(45.77±10.43) ng/L, 差异有统计学意义(P＜0.05), 缓解期组与健康对照组比较差异无统计学意义;哮喘急性发作期组儿童血清Eotaxin水平(120.95±23.97) ng/L显著高于缓解期组(105.47±22.01) ng/L及健康对照组(105.01±18.47) ng/L , 差异有统计学意义(P＜0.05), 缓解期组与健康对照组比较差异无统计学意义.哮喘儿童血清IL-25水平与Eotaxin之间存在明显正相关关系(r=0.642, P＜0.01).结论:哮喘儿童血清IL-25及Eotaxin 水平能反应哮喘气道炎症活动情况及疾病严重程度, 两者存在正相关关系.     

白细胞介素-1β或白细胞介素-6致痫大鼠脑内γ-氨基丁酸和谷氨酸免疫反应性的变化

目的研究白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）致痫过程中谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）在大脑皮质及海马内表达的变化,探讨IL-1β及IL-6在癫痫发病中的作用机制。方法大鼠随机分为生理盐水对照组、IL-1β组、IL-6组,侧脑室注射相应试剂120min后观察大鼠行为变化,并采用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马内Glu及GABA的表达变化。结果动物行为学观察,生理盐水对照组无明显癫痫发作,IL-1β组、IL-6组发作程度达中度。免疫组织化学染色显示,在注射IL-1β或IL-6 120min后,IL-1β、IL-6组Glu表达在大脑皮质及海马较对照组明显升高,GABA表达较对照组明显降低,差异显著。结论IL-1β或IL-6可能通过升高Glu含量并降低γ-氨基丁酸的含量参与促痫和致痫过程,从而使神经元兴奋性升高促进癫痫发作。     

白细胞介素-8蛋白在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的 探讨反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素-8 （IL-8）蛋白水平的表达。 方法 应用免疫组织化学染色和Western blotting 技术,分别对30例反复自然流产患者（流产组）和30例正常妊娠者（对照组）绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析。 结果 免疫组织化学染色结果显示,在绒毛组织中,流产组和对照组IL-8的蛋白表达主要定位于绒毛上皮细胞的细胞质内;在蜕膜组织中,流产组IL-8蛋白表达于蜕膜细胞的胞质内,对照组蜕膜细胞则为阴性,但两组腺上皮细胞均为阳性反应。Western blotting结果显示,在绒毛组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量明显高于对照组（P﹤0.01）;在蜕膜组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量高于对照组（P﹤0.05）。 结论 流产组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达增强与反复自然流产有关,IL-8可能参与反复自然流产的病理过程。     

谷氨酸和白细胞介素-1β致痫大鼠海马PKAcβ、PKCα的免疫反应变化

目的：研究谷氨酸和白细胞介素-1β(IL-1β)致痫大鼠海马PKAcβ、PKCα的免疫反应变化。方法：大鼠于脑立体定位仪上行侧脑室注射,A组为生理盐水对照组;B组注射阈下致痫量的L-谷氨酸钠;C组注射致痫剂量的L-谷氮酸钠;D组单纯注射IL-1β;E组联合注射IL-1β和阈下致痫量的L-谷氨酸钠。注射完毕1h后用SABC法显示5组大鼠海马的PKAcβ、PKCα的免疫反应变化。结果：C、D、E3组大鼠均有明显的痫性发作,且海马PKAcβ、PKCα的免疫反应均明显强于A组。结论：在谷氨酸和IL-1β的致痫活动中,PKAcβ、PKCα参与了其细胞内信号转导过程。     

糖尿病大鼠肝过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的初步研究

目的:观察糖尿病大鼠肝过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的变化。方法:以链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型，通过透射电镜观察肝脏过氧化物酶体数量和形态学的改变，采用分光光度法和荧光光度法分析参与过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的多种酶活性的改变。结果:糖尿病大鼠血清甘油三酯高于对照组，高密度脂蛋白胆固醇低于对照组；肝脏过氧化物酶体数量多于对照组，脂酰CoA氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶体脂肪酸β-氧化活性显著大于对照组。结论:糖尿病大鼠肝过氧化物酶体脂肪酸β-氧化增强，与糖尿病状态下脂质代谢紊乱有关。     

贵州少数民族胱硫醚-β-合酶基因C699T的分布

目的 对中国贵州雷山苗族和三都水族群体胱硫醚-β-合酶基因C699T进行多态性分析,计算其基因频率,获取相应的遗传信息.方法 采用nest-PCR和变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术寻找突变基因,对突变基因的PCR产物进行基因直接测序,并与文献报道的各种人群的相应数据进行比较.结果 雷山苗族和三都水族群体的胱硫醚-β-合酶基因699T等位基因频率分别为5.1%和5.4%.结论 雷山苗族和三都水族两个群体间胱硫醚-β-合酶基因699T等位基因差异无统计学意义,但它们均显著低于黑种人和白种人群体.     

正常人成纤维细胞老化过程中β-半乳糖苷酶的变化

目的　研究正常人成纤维细胞老化过程中 β 半乳糖苷酶的变化规律。 方法　取正常人二倍体成纤维细胞进行传代培养 ,以不同代龄的细胞为实验对象 ,通过细胞生长曲线、群体倍增时间和β 半乳糖苷酶染色等一系列检测方法 ,对成纤维细胞老化过程进行了观察。结果　随着成纤维细胞的连续传代培养 ,SA Gal表达呈现从弱 (在年轻细胞中占 4 % )到强 (在老化细胞中占 6 0 % )的趋势。结论　本实验结果为建立成纤维细胞衰老模型提供了实验依据     

TNF-α及IL-1β促进肝癌细胞系SMMC-7721乙酰肝素酶表达

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)对人肝癌细胞系乙酰肝素酶(HPA)表达的影响。方法将肝癌细胞系SMMC-7721分为对照组和试验组。对照组细胞常规培养,试验组细胞分别施加TNF-α、IL-1β干预,设浓度梯度和时间梯度。RT-PCR半定量法测定细胞HPAmRNA含量,Western blot法测定细胞胞质HPA蛋白含量。结果不同浓度的TNF-α和IL-1β作用不同时间后,SMMC-7721细胞HPAmRNA表达较对照组逐渐增高,且在TNF-α浓度为104~106U/L、IL-1β浓度为0.5~5.0μg/L范围内存在浓度依赖性(P<0.05),无时间依赖性。不同浓度的TNF-α、IL-1β作用不同时间对SMMC-7721细胞胞质HPA蛋白表达亦有促进作用,其随药物浓度变化的趋势与HPAmRNA的表达结果一致,且该促进作用存在时间性差异(P<0.05)。结论TNF-α及IL-1β能够在核酸和蛋白水平上促进肝癌细胞HPA的表达。     

衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义

目的:研究衰老相关-β-半乳糖苷酶和P16在老年大鼠脾内的表达及意义.方法:采用组织化学及SABC免疫组织化学检测成年及老年Wistar大鼠脾组织内衰老相关-β-半乳糖甘酶及P16蛋白的表达.结果:衰老相关-β-半乳糖苷酶阳性细胞主要分布于脾内的边缘区及脾索,老年大鼠较成年大鼠阳性细胞数量显著增多.P16阳性细胞也主要分布于脾内的边缘区及脾索;与成年鼠相比,老年大鼠P16阳性细胞显著增多.结论:P16和衰老相关-β-半乳糖苷酶在大鼠脾内高表达,可能与脾的衰老相关.