MPTP处理的小鼠和6—OHDA损毁的大鼠帕金林病模型病理变化 …

目的 比较ＭＰＴＰ处理的小鼠与６－ＯＨＤＡ损毁大鼠ＰＤ模型的病理变化。方法 应用免疫组化方法观察两种ＰＤ模型的中脑腹侧多巴胺能神经元,星形胶质细胞的变化。结果 免疫组化方法结果表明：Ｃ５７ＢＬ小鼠在ＭＰＴＰ处理后,脑内酪氨酸羟化酶阳性神经元的数目从第４ｄ开始有所减少,黑质区域的ＧＦＡＰ免疫阳性星形胶质细胞数目从第１ｄ起即有增加,大鼠ＰＤ模型较早出现损毁侧ＴＨ免疫阳性神经元明显减少的现象,损毁２月后     

C57BL小鼠帕金森病模型多巴胺转运蛋白99mTc-TRODAT-1放射自显影研究

目的　评价不同损毁程度 Ｃ５７ Ｂ Ｌ 小鼠帕金森病（ Ｐ Ｄ）模型纹状体多巴胺转运蛋白（ Ｄ Ａ Ｔ）的变化。方法　根据腹腔注射 Ｍ Ｐ Ｔ Ｐ 的天数将小鼠分为 １、３、５ 和 ７ｄ 模型组以及对照组,静脉注射９９ｍ Ｔｃ Ｔ Ｒ Ｏ Ｄ Ａ Ｔ１６ｍ Ｃｉ,１ｈ 后处死行脑纹状体放射自显影,同时行免疫组化酪氨酸羟化酶（ Ｔ Ｈ）染色。结果　对照组的放射自显影可见９９ｍ Ｔｃ Ｔ Ｒ Ｏ Ｄ Ａ Ｔ１ 于纹状体部位有高度放射性聚集,且两侧纹状体基本相同。注射 Ｍ Ｐ Ｔ Ｐ １ｄ 者,其纹状体的放射性浓集比对照组有所下降。注射 Ｍ Ｐ Ｔ Ｐ ３、５ 及 ７ｄ 者,两侧纹状体的放射性浓集逐日降低,第 ７ｄ 者几乎消失。 Ｔ Ｈ 染色发现黑质 Ｔ Ｈ 阳性神经元亦随注射 Ｍ Ｐ Ｔ Ｐ 天数的增加而数量减少。结论　不同程度损毁的 Ｃ５７ Ｂ Ｌ 小鼠 Ｐ Ｄ 模型可模拟 Ｐ Ｄ 的发展过程,９９ｍ Ｔｃ Ｔ Ｒ Ｏ Ｄ Ａ Ｔ１ 作为 Ｄ Ａ Ｔ 的显影剂可用于早期诊断的神经显像学研究。     

一氧化氮与帕金森病小鼠模型神经损害的研究

目的　研究一氧化氮（ＮＯ） 在帕金森病（ＰＤ）小鼠模型神经损害中的作用。方法　用比色分析、高效液相色谱电化学及免疫组化法检测１甲基４苯基四氢吡啶（ＭＰＴＰ）和７硝基吲唑（７ＮＩ）对Ｃ５７ＢＬ小鼠纹状体一氧化氮合酶（ＮＯＳ） 活性,多巴胺（ＤＡ）、二羟基苯乙酸（ＤＯＰＡＣ）、高香草酸（ＨＶＡ） 水平和酪氨酸羟化酶（ＴＨ） 免疫阳性神经纤维的影响。结果　注射ＭＰＴＰ后Ｃ５７ＢＬ小鼠纹状体ＮＯＳ活性增加,７ＮＩ能明显抑制ＭＰＴＰ引起的ＮＯＳ活性的升高（ 分别为０ ．９３ ±０．２４ 和０．５４ ±０．１６,ｎｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１ 组织,Ｐ＜０．０１） 。７ＮＩ能明显减轻ＭＰＴＰ引起的Ｃ５７ＢＬ小鼠纹状体ＤＡ（ 分别为０ ．８ ±０ ．２ 和６．８±０．５,μｇ／ｇ 组织,Ｐ＜０．０１） 、ＤＰＯＡＣ（ 分别为０．３ ±０．１ 和０ ．９ ±０ ．３ ,μｇ／ｇ 组织,Ｐ＜ ０ ．０１）、ＨＶＡ（分别为０．４±０．２ 和０．９ ±０ ．２,μｇ／ｇ 湿组织,Ｐ＜ ０．０１） 的降低及ＴＨ 阳性神经纤维损害。结论神经元来源的ＮＯ 参与了ＭＰＴＰ的毒性机制,神经元型ＮＯＳ抑制剂可能有益于ＰＤ的治疗。     

尼古丁对帕金森病小鼠脑组织一氧化氮合酶活性的影响

帕金森病 (ＰＤ)的主要病理变化为黑质纹状体多巴胺(ＤＡ)能神经元变性 ,其病因及发病机制尚不明确。有研究发现 ,应用甲基 苯基 四氢吡啶 (ＭＰＴＰ)制作的ＰＤ小鼠脑组织神经元型一氧化氮合酶 (ｎＮＯＳ)活性增高 ,认为一氧化氮(ＮＯ)参与了ＭＰＴＰ的神经毒作用。某些流行病学及生物学资料表明 ,吸烟对ＰＤ的发病具有保护作用 ,但其作用机制尚不清楚。本实验采用雄性Ｃ5 7ＢＬ小鼠腹腔注射ＭＰＴＰ建立小鼠ＰＤ模型 ,观察尼古丁对ＰＤ小鼠脑组织ｎＮＯＳ活性的影响 ,以探讨尼古丁对ＭＰＴＰ神经毒性的可能保护机制。材料和方法 :选用 8周…     

C57BL小鼠帕金森病模型多巴胺转运蛋白^99mTc—TRODAT—1放 …

目的 评价不同损毁程序Ｃ５７ＢＬ小鼠帕金森病（ＰＤ）模型纹状体多巴胺转运蛋白（ＤＡＴ）的变化。方法 根据腹腔注射ＭＰＴＰ的天数将小鼠分为１、３、５和７ｄ模型组以及对照组,静脉注射＾９９ｍＴｃ－ＴＲＯＤＡＴ－１６ｍＣｉ,１ｈ后处死行脑纹状体放射自显像,同时行免疫组化酪氨酸羟化酶（ＴＨ）染色。结果 对照组的放射自显影可见＾９９ｍＴｃ－ＴＲＯＤＡＴ－１于纹状体部位有高度放射性聚集,且两侧纹状体基本相同。     

损毁丘脑底核阻止6—OHDA对大鼠多巴胺能神经元的损？…

目的观察不同时期毁损丘脑底核对大鼠中脑黑质多巴胺神经元６－羟基多巴胺（６－ＯＨＤＡ）损伤的保护作用。方法将６０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为６组,每组１０只。对照组采用６－０ＨＤＡ立体定向注入大鼠右侧前脑内侧束（ＭＦＢ）和中脑被盖腹侧区（ＶＴＡ）,制成偏侧帕金森病（ＰＤ）模型。实验组分为第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组,分别于６－ＯＨＤＡ注射前７ｄ、注射后１ｈ、２ｈ、３ｄ、７ｄ５个不同时间点,局部注射海藻氨酸（     

帕金森病小鼠黑质细胞凋亡的实验研究

目的探讨细胞凋亡在帕金森病发病机制中的作用。方法给Ｃ５７ＢＬ小鼠腹腔注射不同剂量、不同时限的１甲基４苯基１，２，３，６四氢吡啶（ＭＰＴＰ），在用ＭＰＴＰ之前，给Ｃ５７ＢＬ小鼠口服咪多吡（Ｅｌｄｅｐｒｙｌ）或Ｒｉｌｕｚｏｌｅ，分别用ＤＮＡ末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＡＣＳ）对小鼠黑质细胞检测凋亡，并用同样方法检测分别用等浓度的１甲基４苯基吡啶离子（ＭＰＰ＋）及ＭＰＴＰ处理的ＰＣ１２细胞。结果３０ｍｇ／ｋｇ体重ＭＰＴＰ连续应用３天以上诱发黑质细胞凋亡，而１０ｍｇ／ｋｇ体重ＭＰＴＰ无致凋亡作用。咪多吡预处理可防止ＭＰＴＰ诱发的黑质细胞凋亡；Ｒｉｌｕｚｏｌｅ能减轻ＭＰＴＰ诱发的黑质细胞凋亡程度。２０μｍｏｌ／Ｌ浓度的ＭＰＰ＋使ＰＣ１２细胞发生凋亡，等浓度的ＭＰＴＰ对ＰＣ１２细胞无致凋亡作用。结论帕金森病发病机制可能与细胞凋亡有关。ＭＰＴＰ在体内转化为ＭＰＰ＋导致黑质细胞凋亡。     

双靶点注射6-OHDA建立帕金森病大鼠模型并提高成功率

目的建立大鼠帕金森病模型,观测其行为学、中脑黑质多巴胺能神经元及超微结构的变化。方法利用立体定向技术,注射6-OHDA至大鼠中脑黑质SNc和中脑腹侧被盖区VTA,于注射后2、4、6、8周观测阿朴吗啡诱导的大鼠旋转行为学变化;采用免疫组化染色检测TH的表达,了解中脑黑质多巴胺能阳性神经元变化;利用透射电镜了解黑质区超微结构的变化。结果所有大鼠进行阿朴吗啡诱导旋转行为测试,旋转圈数>7r/min,并且>210r/30min,为合格的PD大鼠模型。大鼠模型于第4、6和8周时,大鼠行为学变化较为恒定。第8周时,50只大鼠中出现32只大鼠大鼠旋转次数平均为11.5±1.2/分,造模成功率为64%。PD模型大鼠超微结构观察,黑质神经元数目明显减少,线粒体肿胀,粗面内质网囊性扩张、脱颗粒,髓鞘扩张。免疫组化检测,成功模型光镜下分别计数双侧黑质TH阳性神经元,损毁侧黑质TH阳性神经元占正常侧的3.0%,即毁损侧TH阳性神经元减少97.0%。结论利用立体定向技术,选择黑质和中脑腹侧被盖区等双靶点,可建立6-OHDA大鼠PD模型,具有明确病理变化,提高模型成功率。     

脑源性神经营养因子对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元 …

目的 观察脑源性神经营养因子对帕金森病大鼠模型黑质多巴胺能神经元的影响。方法 将６－羟基多巴胺用立体定向注入大鼠一侧中脑黑质制作ＰＤ大鼠模型,并在注入６－羟基多巴胺之间每天向预伤侧壳核区定位注入ＢＤＮＦ,采用酪氨酸羟化酶免疫组化方法及透视电镜等观察ＢＤＮＦ对黑质多巴胺能神经元的显微超微结构影响。结果 ＢＤＮＦ能改善６－羟基多巴胺造成的ＰＤ大鼠黑质多巴胺能神经元数目减少及超微结构影响。结论 ＢＤＮＦ     

甲苯四氢吡啶抑制单胺氧化酶B免疫反应的区域特征

应用免疫组织化学方法研究甲苯四氢吡啶（ＭＰＴＰ）对单胺氧化酶Ｂ的作用。单胺氧化酶Ｂ被认为可使ＭＰＴＰ转化为甲苯吡啶（ＭＰＰ＋ ）,而ＭＰＰ＋ 是损毁黑质致密部神经元的细胞毒性物质。在猫腹腔注射ＭＰＴＰ导致选择性的抑制中缝核神经元内的单胺氧化酶Ｂ免疫反应,分布显示中缝吻侧完全被抑制,而尾侧仅存少量免疫染色非常弱的神经元。但是ＭＰＴＰ对下丘脑及各脑区星状胶质细胞内的单胺氧化酶Ｂ无任何作用。这些作用伴随黑质多巴胺能神经元的丢失,但中缝核的细胞数量和形态以及５－羟色胺（５－ＨＴ）免疫组织化学反应与对照组相同。根据上述结果我们认为,ＭＰＴＰ抑制中缝核内单胺氧化酶Ｂ,但不破坏５－ＨＴ能神经元,并且中缝核内单胺氧化酶Ｂ在ＭＰＴＰ导致黑质损伤的过程中不起关键作用。     

帕金森病大鼠模型神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的实验研究

目的 观察研究帕金森病(PD)大鼠模型纹状体神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元，探讨一氧化氮(NO)在PD发病机制中所起作用。方法 应用立体定向技术建立6-OHDA毁损的大鼠PD模型，通过多巴胺受体激动剂阿扑吗啡(APO)测试大鼠旋转行为，免疫组化方法观察黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元和纹状体nNOS阳性神经元的变化。结果 大鼠6-OHDA损毁侧黑质TH阳性神经元数目较对侧明显减少，双侧纹状体nNOS阳性神经元数目无显著差异。结论 6-OHDA对TH阳性神经元有损伤作用，而NOS阳性神经元对其具有抵抗作用。NO可能参与了PD发病机制。     

Astrocyte reactivity in related brain regions in a mouse model of MPTP-induced Parkinson's disease

BACKGROUND: Severe injury to dopaminergic neuronal cell bodies and their axon terminals in the substantia nigra pars compacta (SNC) has been observed in both Parkinson's disease (PD) patients or in 1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyrindine(MPTP)-induced PD animal models, but only slight injury occurs in the adjacent ventral tegmental area (VTA). The mechanisms underlying this selective injury remain poorly understood.OBJECTIVE: To comparatively observe astrocyte reactivity in the SNC, caudate putamen (Cpu), VTA, and frontal association cortex (FrA).DESIGN, TIME AND SETTING: A cellular and molecular biology, randomized, controlled experiment was performed at the Institute of Neurobiology, Department of Human Anatomy, Medical School of Nantong University, between December 2006 and September 2008.MATERIALS: A total of 80 healthy adult male C57BL/6 mice were included in this study. MPTP was purchased from Sigma, USA.METHODS: Mice were randomly divided into a model group (n = 64) and a sham-operated group (n = 16). PD was induced in the mice from the model group by intraperitoneal injection of 20 mg/kg MPTP, once every three hours, for a total of 4 times.MAIN OUTCOME MEASURES: Tyrosine hydroxylase (TH)-immunoreactive neurons and glial fibrillary acidic protein (GFAP)-immunoreactive astrocytes were examined by dual immunofluorescence labeling. GFAP-immunoreactive astrocytes in the Cpu and FrA were determined by immunofluorescent staining. GFAP mRNA expression in the SNC, Cpu, VTA, and FrA was detected using real-time polymerase chain reaction. TH protein levels in the TH-immunoreactive axon terminals of the Cpu and FrA were detected by Western blotting.RESULTS: Numbers of TH-immunoreactive neurons in the SNC, and TH protein level in the Cpu, markedly decreased (by approximately 68%) 1 day after MPTP injection, and gradually increased at 3 days. Simultaneously, astrocyte reactivity was strengthened, in particular at 7 days. However, after MPTP injection, decreases in the numbers of TH-immunoreactive neurons in the VTA, and TH protein levels in the FrA, were less apparent (approximately 15%). Also, no obvious astrocyte reactivity was observed.CONCLUSION: In a mouse model of PD, astrocyte reactivity was apparent in the SNC and Cpu, but not the VTA or FrA. In addition, astrocyte reactivity was greater in regions where injury to dopaminergic neurons was more severe.     

帕金森病大鼠黑质NurrlmRNA表达的动态变化

目的　探讨帕金森病大鼠黑质核内受体相关因子 1(Nurr1)mRNA表达的动态变化。方法　通过脑立体定位注射 6 羟基多巴胺 (6 OHDA)的方法建立大鼠帕金森病 (Parkinson’sdisease,PD)模型 ,采用HE染色 ,酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组织化学染色、原位杂交技术 ,选择 6 OHDA注射术后 1d、3d、5d、7d、2 1d为研究时点 ,观察大鼠PD模型形成过程中黑质TH 多巴胺细胞数量及Nurr1mRNA表达的改变。结果　与健侧比较 ,注射 6 OHDA 5d组损毁侧黑质TH 细胞显著减少 (P <0 .0 1) ,2 1d时仅为健侧的 15 %且出现明显的旋转行为 ;同时 ,注射 6 OHDA 1d组损毁侧黑质Nurr1mRNA表达即开始下降 ,且以 3d组最为显著 (P <0 .0 1) ,7d以后各组完全消失。结论　本实验研究结果表明 ,6 OHDA能下调大鼠黑质Nurr1mRNA的表达早于诱导多巴胺细胞的死亡     

PD模型中GDNF与星形胶质细胞对黑质DA能神经元的影响

目的探讨星形胶质细胞和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)在帕金森病(Parkinson's disease,PD)中对多巴胺(dopamine neurons,DA)能神经元损伤的影响。方法成年大鼠右侧前脑侧束注射6羟多巴胺(6-OHDA)制备PD模型。PD模型右侧黑质内注射GDNF,于注射后第6周采用免疫组织化学方法观察星形胶质细胞神经纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)以及多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylasa,TH)的变化。结果模型组、PBS和GDNF组注射侧与非注射侧星形胶质细胞相比,均发现GFAP阳性细胞明显增多,DA能神经元数量明显减少(P<0.05)。GDNF组与模型组相比,发现GFAP阳性细胞明显增多,同时残存的DA能神经元数量有所增加(P<0.05)。结论黑质内注射GDNF可能通过激活的星形胶质细胞保护PD大鼠模型黑质DA能神经元。     

The dual dopamine‐glutamate phenotype of growing mesencephalic neurons regresses in mature rat brain

Coexpression of tyrosine hydroxylase (TH) and vesicular glutamate transporter 2 (VGLUT2) mRNAs in the ventral tegmental area (VTA) and colocalization of these proteins in axon terminals of the nucleus accumbens (nAcb) have recently been demonstrated in immature (15‐day‐old) rat. After neonatal 6‐hydroxydopamine (6‐OHDA) lesion, the proportion of VTA neurons expressing both mRNAs and of nAcb terminals displaying the two proteins was enhanced. To determine the fate of this dual phenotype in adults, double in situ hybridization and dual immunolabeling for TH and VGLUT2 were performed in 90‐day‐old rats subjected or not to the neonatal 6‐OHDA lesion. Very few neurons expressed both mRNAs in the VTA and substantia nigra (SN) of P90 rats, even after neonatal 6‐OHDA. Dually immunolabeled terminals were no longer found in the nAcb of normal P90 rats and were exceedingly rare in the nAcb of 6‐OHDA‐lesioned rats, although they had represented 28% and 37% of all TH terminals at P15. Similarly, 17% of all TH terminals in normal neostriatum and 46% in the dopamine neoinnervation of SN in 6‐OHDA‐lesioned rats were also immunoreactive for VGLUT2 at P15, but none at P90. In these three regions, all dually labeled terminals made synapse, in contradistinction to those immunolabeled for only TH or VGLUT2 at P15. These results suggest a regression of the VGLUT2 phenotype of dopamine neurons with age, following normal development, lesion, or sprouting after injury, and a role for glutamate in the establishment of synapses by these neurons. J. Comp. Neurol. 517:873–891, 2009. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

阿朴吗啡对颈动脉体球细胞帕金森病大鼠纹状体移植区C-FOS和JUN-B表达的影响

目的 :探讨帕金森病 (PD)大鼠颈动脉体球细胞移植治疗后多巴胺细胞的功能状况。方法 :采用 6 -羟多巴胺损毁制备 PD大鼠模型 ,腹腔注射阿朴吗啡 2 h后诱导移植后 12周纹状体组织内 c- fos和 Jun- B的表达 ,分析其分布和阳性细胞数目。结果 :移植后 12周 ,移植物内和与宿主接触面 c- fos表达增高 ,而 Jun- B的表达没有变化。结论 :移植物内和与宿主接触面 c- fos表达增高表明移植细胞仍保持着其生理功能     

利福平保护MPTP所致PD小鼠中脑多巴胺能神经元凋亡的实验研究

目的观察利福平(RFP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(PD) C57BL小鼠模型的神经保护作用。方法用MPTP建立C57BL小鼠PD模型,在应用MPTP前或后给予RFP,通过行为学观察、Nissl染色、免疫组织化学染色,观察RFP对PD小鼠模型的行为学表现及黑质致密部(SNc)Nissl、TH、Bcl-2、caspase-3阳性细胞的影响。结果小鼠注射MPTP后出现震颤、竖尾、竖毛、运动迟缓、步态不稳、肢体僵硬,活动明显减少,同时SNc的Nissl、TH阳性细胞明显减少,Bcl-2阳性细胞有所增多,caspase-3阳性细胞明显增多；应用RFP后较MPTP组症状减轻,Nissl、TH、Bcl-2阳性细胞增多．而caspase-3阳性细胞减少；预使用RFP组作用最为明显。结论RFP对MPTP所致的PD小鼠中脑多巴胺能神经元凋亡具有保护作用。     

姜黄素对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的研究姜黄素对由MPTP诱发的帕金森病小鼠模型的脑保护作用及其可能机制。方法应用免疫组织化学染色法和蛋白质印迹法(Western blotting)分别观察姜黄素干预前后帕金森病小鼠中脑黑质-纹状体系统中酪氨酸羟化酶、胶质纤维酸性蛋白阳性神经元数目的变化,以及酪氨酸羟化酶、诱导型一氧化氮合酶和胶质纤维酸性蛋白表达水平的变化。结果MPTP组小鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性神经元数目明显减少,与正常对照组及治疗组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。经不同剂量(5mg/kg、50mg/kg和150mg/kg)的姜黄素干预治疗后,小鼠中脑纹状体中的酪氨酸羟化酶蛋白表达水平(相对灰度值)明显升高,而黑质中诱导型一氧化氮合酶和胶质纤维酸性蛋白表达水平明显降低,与MPTP组比较差异均有统计学意义(P<0.05);MPTP组与溶剂对照组(MPTP DMSO)之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论姜黄素可以有效地拮抗MPTP诱导的帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的丢失,其机制可能与姜黄素降低黑质多巴胺能神经元活性氧含量以及抑制炎症反应等作用有关。     

抗帕颗粒对帕金森病模型小鼠酪氨酸羟化酶神经元的影响

目的 探讨抗帕颗粒对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的影响。方法 90只健康雄性C57BL/6小鼠,鼠龄8～12周,并随机分为3组,即正常对照组30只、PD模型对照组30只、PD模型干预组30只; MPTP腹腔注射(40 mg·kg^-1·d^-1×7 d)制备小鼠PD模型; 正常对照组及PD模型对照组予生理盐水1 mL·d^-1灌胃,PD模型干预组给予抗帕颗粒40 mg·kg^-1·d^-1灌胃,连续喂养4个月; 黑质纹状体切片、HE染色、免疫组织化学染色TH神经元及Western blotting检测TH蛋白的表达量。结果 ①正常对照组30只(30/30只)最终均存活,PD模型对照组4个月存活27只(27/30只),PD模型干预组4个月存活28只(28/30只); ②PD模型对照组、PD模型干预组小鼠每次注射MPTP后先有短暂兴奋[持续(7.61±2.17)min],表现为四处窜跳,随即出现全身中重度震颤,皮毛及尾巴时有竖立,活动减少,持续(24.23±3.89)min后震颤消失,随后出现活动减少; ③HE染色显示正常对照组大量褐色TH阳性细胞,PD模型对照组TH阳性细胞数明显减少,PD模型干预组TH阳性细胞数有所增加; ④免疫组织化学染色后经Imagepro-Plus 5.1系统分析,正常对照组TH阳性细胞面积为64 145 μm²,高倍镜下可见大量胞质为褐色颗粒的TH阳性细胞; PD模型对照组TH阳性细胞染色面积为40 012 μm²,高倍镜下见TH细胞数明显减少; PD模型干预组TH阳性细胞染色面积为60 952 μm²,高倍镜下见TH阳性细胞数较PD模型对照组增加; ⑤Western blotting检测显示正常对照组TH蛋白表达量与PD模型对照组和PD模型干预组比较均有明显差异(P<0.001),PD模型对照组TH蛋白表达量与PD模型干预组比较也有明显差异(P<0.05)。结论 抗帕颗粒可使PD小鼠黑质纹状体中多巴胺能神经元一定程度地减少丢失,对多巴胺能神经元的数量、形态及功能具有一定的保护作用。     

生酮饮食对MPTP 小鼠帕金森病模型黑质TH、Bcl-2和caspase-3基因表达的影响

目的 研究生酮饮食对PD小鼠黑质多巴胺能神经元的抗凋亡作用. 方法 1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射方法 制备PD模型小鼠.实验分为正常饮食模型组(正常饮食喂养后造模)、实验组(生酮饮食喂养后造模)、正常饮食组(不造模,正常饮食喂养)和生酮饮食组(不造模,生酮饮食喂养).初次MPTP给药前及末次给药后的次日进行滚轴实验并采集血清样本检测血清酮体和血糖浓度.荧光定量PCR技术检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)、Bcl-2及caspase-3基因水平的表达情况. 结果 经过生酮饮食喂养后的小鼠经MPTP给药后,死亡率较正常饮食模型组降低;滚轴实验中实验组在转盘上停留时间较正常饮食模型组延长,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组和生酮饮食组的血清酮体浓度较其他2组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).荧光定量PCR检测发现,与正常饮食模型组相比,实验组黑质中TH基因的表达明显升高,抗凋亡作用的Bcl-2基因也明显升高,促凋亡作用的caspase-3基因的表达明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 生酮饮食逆转了MPTP给药后的黑质中Bcl-2基因表达的下调和caspase-3基因表达的上调,进而抑制了多巴胺能神经元的凋亡,起到了保护黑质多巴胺能神经元的作用.