乳腺组织中钠碘转运体表达与功能的研究进展

对乳腺组织中钠碘转运体(NIS)的表达与功能研究进展进行综述。哺乳期乳腺和乳腺癌组织NIS的表达明显高于非哺乳期乳腺。雌激素、催产紊和泌乳紊可以使乳腺NIS表达增加，而高氯酸盐可以抑制乳腺对碘的摄取。NIS基因序列中的GC盒子是调节NIS转录启动子的关键因素。尽管乳腺癌表达NIS，但其摄碘能力降低或缺如。维甲酸不仅可以促进乳腺癌细胞NIS的表达增加，而且促进摄碘增多。除NIS基因突变或转录翻译水平受损外，NIS蛋白的正常定位、锚着和转位功能对摄碘能力的维持至关重要。NIS介导的同位紊方法在乳腺癌诊断和治疗中具有广阔前景。     

乳腺组织中钠碘转运体表达与功能的研究进展

对乳腺组织中钠碘转运体(NIS)的表达与功能研究进展进行综述。哺乳期乳腺和乳腺癌组织NIS的表达明显高于非哺乳期乳腺。雌激素、催产素和泌乳素可以使乳腺NIS表达增加,而高氯酸盐可以抑制乳腺对碘的摄取。NIS基因序列中的GC盒子是调节NIS转录启动子的关键因素。尽管乳腺癌表达NIS,但其摄碘能力降低或缺如。维甲酸不仅可以促进乳腺癌细胞NIS的表达增加,而且促进摄碘增多。除NIS基因突变或转录翻译水平受损外,NIS蛋白的正常定位、锚着和转位功能对摄碘能力的维持至关重要。NIS介导的同位素方法在乳腺癌诊断和治疗中具有广阔前景。     

乳腺组织中钠/碘转运体基因及蛋白的表达与乳腺疾病发生的关系

目的:研究正常和良/恶性乳腺肿瘤组织中钠-碘转运体(sodium-iodidesymporter,NIS)基因和蛋白的表达情况,探讨NIS与乳腺疾病之间的关系。方法:乳腺组织取自4例乳腺纤维瘤患者,3例乳腺小叶增生患者,8例乳腺癌患者,5例癌旁正常乳腺组织,运用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测NIS的基因与蛋白表达情况。结果:癌旁正常乳腺组织和良性乳腺肿瘤组织未检出NIS基因和蛋白的表达,而乳腺癌组织NIS基因均见NIS基因表达,且NIS蛋白主要表达在胞浆中。结论:正常乳腺组织中未检测到NIS基因,而乳腺癌组织NIS基因表达明显增加,而NIS蛋白翻译和翻译后水平的缺陷可能是乳腺癌组织摄碘率降低的原因之一。     

钠/碘同向转运体基因获取及其克隆与测序

目的：获取、构建并鉴定携带人钠／碘同向转运体(NLS)基因的pGEMTeasy质粒载体。方法：利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)获取Graves甲亢病人甲状腺NIS基因可编码区片段,与pGEMIeasy质粒载体连接、经转化、蓝白斑筛选、酶切鉴定,获得pGEMIeasy-NIS重组质粒,进行序列测定鉴定。结果：所构建的pGEMIeasy-NIS重组质粒中NIS与文献报告序列99％同源性。结论：成功构建pGEMTeasy-NIS重组质粒。     

分化型甲状腺癌钠碘转运体的表达及其与甲状腺超声表现关系的研究

目的探讨分化型甲状腺癌(DTC)不同病理类型[乳头状癌(PTC)和滤泡状癌(FTC)]癌组织的钠碘转运体(NIS)表达、甲状腺超声表现差异及NIS表达与甲状腺超声表现的关系。方法采用免疫组织化学染色技术检测结节性甲状腺肿和DTC组织NIS的表达,比较结节性甲状腺肿、PTC及FTC患者的癌组织NIS表达差异,分别分析PTC组和FTC组NIS表达与甲状腺超声表现的关系。结果 PTC组和FTC组NIS的表达均显著高于结节组(P<0.05);PTC组与FTC组癌组织NIS表达IHS评分存在统计学差异(P<0.05),NIS表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05);甲状腺超声表现中,PTC组与FTC组结节在直径、回声、形态、边界、钙化、血流方面的表现存在统计学差异(P<0.05);所有PTC中,NIS阳性组与阴性组结节血流信号存在统计学差异(P<0.05);所有FTC中,NIS阳性组与阴性组甲状腺超声表现无统计学差异(P>0.05)。结论 PTC与FTC癌组织的NIS表达IHS评分和部分甲状腺超声表现均存在差异;PTC癌组织NIS阳性表达者较阴性表达者血流信号丰富。     

急性碘过量对大鼠甲状腺钠碘转运体表达的影响

目的 观察单次大剂量碘对大鼠甲状腺内钠碘转运体(NIS)蛋白表达量的影响,探讨应用99m TcO4-进行甲状腺扫描前是否应对碘的摄入进行限制.方法 将SD大鼠分成给碘后1d处死组、给碘后7d处死组和对照组,每组8只;将2000 ug碘化钠(NaI)溶于0.5 ml生理盐水注入前两组大鼠腹腔内,对照组注射等量生理盐水.各组大鼠处死后,取其甲状腺,应用Western免疫印迹方法探测NIS蛋白含量,通过光密度分析方法对信号强度进行半定量分析.结果 给碘后1 d处死组大鼠甲状腺内NIS蛋白含量明显低于对照组和给碘后7 d处死组(P均<0.001),而给碘后7 d处死组与对照组间NIS蛋白表达量的差异无统计学意义(P>0.05).结论 单次大剂量碘摄入可降低甲状腺内NIS蛋白的表达量,此效应在给碘1 d后明显,7 d后可恢复至正常水平.     

钠碘转运体应用于人下咽鳞癌显像和诊断的可行性研究

目的:探讨杆状病毒介导的人钠碘转运体(human sodium/iodine symporter,hNIS)应用于人下咽鳞癌显像和诊断的可行性。方法:通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统包装分别含GFP和hNIS的重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-hNIS),用流式细胞仪检测Bac-GFP对人下咽癌细胞(FaDu)的转导效率,并用间接免疫荧光检测hNIS在FaDu细胞中的定位。进行hNIS介导的碘摄取、动态摄碘和NaClO4碘摄取抑制实验,并检测共转染了Bac-GFP和Bac-hNIS的FaDu细胞中的荧光强度和放射性计数。结果:在丁酸钠的作用下,Bac-GFP在感染复数为400时,对FaDu细胞的转导效率可达95.16%;hNIS可准确定位于FaDu细胞膜上,具备摄碘功能;放射性计数与荧光强度间呈线性正相关(相关系数为0.943),可通过放射性计数的变化来反映荧光强度的变化。结论:杆状病毒对FaDu细胞具有高转导效率,Bac-hNIS可有效介导FaDu细胞的碘摄取,hNIS可用于人下咽鳞癌的显像和诊断。     

裸鼠模型的人钠/碘转运体基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像

目的在动物体内实验观察人钠/碘转运体(hNIS)基因转染人大细胞肺癌介导放射性核素显像是否可行。方法①利用重组质粒以脂质体转染法将hNIS基因转染入人大细胞肺癌H460细胞系中,获得稳定表达hNIS的细胞株(hNIS-H460)。②用hNIS-H460细胞株建立大细胞肺癌荷瘤裸鼠模型,进行放射性核素99mTcO4-显像和131I显像。结果①体外实验表明hNIS-H460细胞株可以摄取碘。②裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤的99mTcO4-和131I显像结果较清晰。结论转染后的hNIS-H460细胞具有一定的摄碘能力。裸鼠大细胞肺癌(hNIS-H460)移植瘤可以进行99mTcO4-和131I显像;99mTcO4-显像的质量优于131I显像。     

乳腺疾病的超声诊断

自20世纪50年代起,国外Wild,Wagai及Howry三人首先应用超声进行乳腺检查,称为乳腺超声的开拓者。国内自60年代起,即用A型超声诊断乳腺囊性及实性肿物,70年代末,先后在北京、上海等地开始B型超声,直到90年代彩色多普勒超声(CDFI)普及后,乳腺疾病的超声诊断才得到广泛的开展。     

人端粒酶反转录酶启动子调控人钠碘同向转运体基因肿瘤靶向治疗的实验研究

目的:探讨肿瘤特异性人端粒酶反转录酶(hTERT)启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)的特异性抗肿瘤作用。方法:将质粒pcDNA3.1-CMV-hNIS中的hNIS cDNA亚克隆至含hTERT核心启动子的质粒载体pGL3-hTERT-luc中,以构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,并以质粒pGL3-hTERT-luc及pcDNA3.1-CMV-hNIS分别作为阴性对照及阳性对照,然后采用脂质体将其转染至人胚肺成纤维细胞MRC-5及肿瘤细胞HeLa、A549和U87中,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hNIS mRNA水平;免疫细胞化学法及流式细胞术(FCM)检测hNIS蛋白的表达情况;摄碘实验验证hNIS蛋白的功能;同时采用MTT观察131I的细胞杀伤作用。结果:成功构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,转染4种细胞后,3种肿瘤细胞的hNIS mRNA水平明显高于MRC-5细胞(P<0.05)。结论:hTERT启动子调控hNIS基因在肿瘤细胞中特异性表达,这些细胞可特异性摄碘并被其有效杀伤,为行进一步体内实验奠定基础。     

乳腺癌相关分子人乳腺珠蛋白基因的克隆及原核表达

[目的]克隆乳腺癌相关分子人乳腺珠蛋白（hmnan mammaglobin，hMAM）基因并诱导其表达，为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础，从而为早期发现乳腺癌提供科学的监测方法。[方法]从乳腺癌组织提取总RNA，通过逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）扩增hMAM基因编码序列．将扩增产物克隆至PGEM-T载体中，DNA测序。用限制性内切酶切下目的基因，与相同酶切的表达载体pQFA0连接、筛选、鉴定，构建pOE40-hMAM融合表达质粒，以硫代半乳糖苷（IPTG）诱导在大肠杆菌M15中表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）分析表达结果.[结果]琼脂糖凝胶电泳显示聚合酶链反应（PCR）扩增产物的分子量大小与预期相符。对重组质粒分析表明，插入片段的序列与文献报道hMAM基因编码序列一致。在IPTFG的诱导下，M15重组菌高效表达出一个相对分子质量约为34kD的产物。[结论]重组表达质粒pQE40hMAM表达成功。     

胆囊癌组织中p53基因蛋白的表达

目的：探讨胆囊癌组织中抑癌基因p53蛋白的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化技术检测了43例胆囊癌标本中p53蛋白的表达。结果：有23例胆囊癌组织p53蛋白表达阳性，阳性率为53．49％。结论：p53基因蛋白的过度表达可能与胆囊癌的发生发展相关。     

女性性腺激素水平与乳腺疾病的相关性研究

目的 研究绝经前和绝经后乳腺增生病和乳腺癌患者体内性腺激素变化规律,揭示性腺激素变化与该类疾病的内在联系.方法 分析了绝经前和绝经后乳腺增生病、乳腺癌和健康女性血清促卵泡成熟素(FSH),黄体生成素(LH),雌二醇(E2)、泌乳素(PRL),孕酮(P)、睾酮(T)浓度.结果 与正常对照组比较,绝经前乳腺增生病组患者血清PRL和P明显增高,绝经前乳腺癌组患者血清E2、PRL和P浓度显著增高.与乳腺增生病组患者比较,绝经前乳腺癌患者血清E2和P浓度显著增高;与正常对照组比较,绝经后乳腺增生病组和乳腺癌组患者血清E2浓度明显增高.与乳腺增生病组患者比较,绝经后乳腺癌患者血清E2浓度显著增高.结论 绝经前乳腺增生病患者以血清PRL和P浓度明显增高为特征,而绝经后乳腺增生病则表现为E2明显增高.绝经前和绝经后乳腺癌组E2浓度保持较高的水平,提示高浓度的E2水平在乳腺癌的发生和发展中有着重要的作用.     

绍兴地区尿碘与甲状腺疾病的关系

目的探讨绍兴地区尿碘与甲状腺疾病的关系。方法测定甲状腺疾病组和正常对照组的血清TSH、FT3、FT4,甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）,甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、甲状腺B超及尿碘。结果正常对照组的尿碘中位数为106μg/L,甲状腺功能异常、甲状腺肿及甲状腺结节患者的尿碘中位数显著高于正常对照组（P〈0.01）,且在甲状腺功能异常、甲状腺肿和甲状腺结节患者中,尿碘浓度〉300μg/L,患者分布频率显著高于对照组（P〈0.01）;尿碘与甲状腺功能（FT3、FT4、TSH、TPO、TGA）及甲状腺结节有无之间无明确的相关性。结论绍兴地区属于碘充足地区,碘过量会增加甲状腺疾病发生率,尿碘测定有助于指导个体化补碘。     

乳腺疾病的MRI与钼钯诊断

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率呈逐年上升趋势,在我国部分城市已居女性恶性肿瘤的首位,且发病年龄越来越年轻化,严重危害女性身体健康。早发现、早诊断、早治疗是降低死亡率的关键。钼靶虽被公认为乳腺癌早期普查筛选的重要方法,但对乳腺癌诊断的敏感性和特异性仍嫌不足。近年来,随着MRI软硬件的不断发展及脂肪抑制技术和(?)强技术的应用,MRI诊断乳腺疾病的敏感性和特异性得到进一步提高,对乳腺病变性质的鉴别能力较常规钼靶检查更为优越,被公认为患者术前评价的金标准。本文就MRI与钼靶对乳腺疾病检查的特点及价值作一综述。     

大肠癌发生过程中P16蛋白的表达及临床意义

结直肠癌绝大多数来自原先存在的腺瘤 ,即所谓腺瘤腺癌顺序 ,另一部分结、直肠癌则发自正常的粘膜。近年来 ,人们应用分子生物学技术对人体标本从正常经癌前病变到癌的发展过程进行基因水平的研究发现 ,在腺瘤向癌演变过程中涉及多种癌基因、抑癌基因的异常改变。P16蛋白是一种     

~(131)I照射对分化型甲状腺癌细胞摄碘水平及NISmRNA表达的影响

目的分析131I照射对分化型甲状腺癌细胞摄碘水平及钠/碘转运体(NIS)mRNA表达的影响。方法收集50例分化型甲状腺癌(DTC)患者的临床资料,所有患者均应用同一活度的131I进行照射治疗,治疗前后应用γ计数仪测定125I摄取率,采用RT～PCR法检测甲状腺癌细胞的NISmRNA表达,对其相关性进行分析。结果随着照射时间的延长,甲状腺癌患者对125I摄取率出现下降,凝胶电泳显示甲状腺癌细胞组细胞NISmRNA表达降低,前后比较差异明显,有统计学意义(P<0.05)。结论131I照射可降低分化型甲状腺癌患者125I摄取率,可能与甲状腺癌细胞NISmRNA表达降低有关。     

不同亚型乳腺癌组织中p16基因甲基化与蛋白表达及临床病理特征的关系

目的探讨不同亚型乳腺癌组织中p16基因甲基化与蛋白表达及临床病理特征的关系。方法 PCR法检测55例乳腺浸润型导管癌组织中p16基因甲基化情况,免疫组化法检测p16蛋白表达情况,分析p16基因甲基化与蛋白表达及临床病理特征的关系。结果 55例标本中,共12例(21.82%)发生p16基因甲基化,21例(38.18%)p16蛋白表达阳性,其中基底样型基因甲基化发生率显著高于Luminal A型(P0.05),蛋白表达阳性率显著低于Luminal A型(P0.05)。发生基因甲基化的组织中p16蛋白阳性表达率为16.67%,未发生甲基化的组织中阳性表达率为44.19%,差异有统计学意义(P0.05)。组织学分级Ⅱ~Ⅲ级、伴淋巴结转移及ER蛋白表达阴性的组织中甲基化发生率高于组织学Ⅰ级、无淋巴结转移及ER蛋白表达阳性的组织(P0.05)。结论 p16基因甲基化可能是基底样型乳腺癌的重要分子特征之一,且与乳腺癌的病情进展有关,可能成为预后评估及靶向治疗的重要指标。