华蟾素对人乳腺癌细胞阿霉素多药耐药性的逆转作用

目的以耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM为对象,验证华蟾素(cinobufacine,Cino)能否逆转其对阿霉素(ADM)的耐药性。方法采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,高效液相色谱法检测细胞内ADM的浓度,流式细胞术测定P-糖蛋白(permeability glycoprotein,P-gp)的表达。结果Cino15mg·L-1能增加MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性,使ADM的半数抑制浓度(IC50)由38.14mg·L-1降至12.93mg·L-1;能提高ADM在MCF-7/ADM细胞内的浓度,降低MCF-7/ADM细胞P-gp的表达。结论研究表明Cino能部分逆转MCF-7/ADM细胞的MDR,其机制与抑制P-gp的功能与表达,增加细胞内ADM的含量有关。     

补骨脂素对人乳腺癌多药耐药 Bcl-2基因蛋白表达的影响

多药耐药性（MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因之一。补骨脂是补益药中少有的钙离子通道拮抗剂，补骨脂素是其主要成分之一，以往我们对其逆转MDR进行了几方面研究，明确其有明显的逆转耐药作用。目前已有报道探讨Bcl-2家族与白血病MDR形成的关系。本实验就补骨脂素对MCF-7多药耐药细胞株Bcl-2基因蛋白表达影响报道如下。     

多药耐药性相关ATP结合盒转运蛋白

ATP结合盒（ABC）转运蛋白超家族是一大类以ATP水解为动力的转运蛋白，在肿瘤细胞和正常组织都有分布，有多种重要功能。ABC转运蛋白家族中与多药耐药性相关的转运蛋白有P-糖蛋白、多药耐药性相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白。本文对这些多药耐药性ABC转运蛋白的生理、生化特性进行综述。     

多药耐药性

多药耐药性(multidrug resistance,MDR)或称多向耐药性(pleiotropie drug resistance)是指肿瘤细胞在接触一种抗恶性肿瘤药后，产生了对多种结构不同、作用机制各异的其他抗恶性肿瘤药的耐药性。     

人参皂苷Rh2逆转MCF-7/ADM多药耐药性的研究

目的观察人采用人参苷Rh2对逆转人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM的分子机制。方法采用MTT比色法对不同浓度下人参皂苷Rh2对MCF-7/ADM的阿霉素(ADM)以及氟尿嘧啶(Fu)耐药逆转指标检测,同时使用多功能酶标仪检测人参皂苷Rh2干预对细胞内罗丹明123荧光强度以反映其对细胞多药耐药蛋白P-gp活性的影响。结果经过人参皂苷Rh2的干预,MCF-7/ADM对ADM以及Fu两种临床常用化疗的敏感性增强。另外,人参皂苷Rh2还对细胞的罗丹明123外排有显著的浓度依赖性抑制作用。结论人参皂苷Rh2能够有效逆转MCF-7/ADM多药耐药性,其作用机制可能主要为抑制了细胞多药耐药蛋白P-gp的活性。     

黄芩苷对肺腺癌细胞多药耐药性的影响及机制

目的探讨黄芩苷对人肺腺癌细胞株A549多药耐药性(MDR)的影响及作用机制。方法体外培养人肺腺癌细胞株A549后给予0、0.5、1、2、4、8mg/L黄芩苷对细胞进行处理,MTT法检测不同浓度黄芩苷对A549细胞生长的影响情况;逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组细胞多药耐药基因1(MDR-1)、多药耐药相关蛋白-1(MRP1)、谷胱苷肽转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶(TOPO)ⅡαmRNA的表达情况。结果与对照组相比,黄芩苷组细胞生长明显受到抑制(P<0.05或<0.01);黄芩苷处理后肿瘤细胞MDR-1、MRP1、GST-π、TOPOⅡαmRNA表达水平降低,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 baicalin可以调节多种MDR基因的表达,具有明显的逆转肺腺癌细胞MDR的作用。     

肿瘤细胞多药耐药性的研究进展

肿瘤细胞的耐药性,是肿瘤化疗失败的主要原因之一.近年国内外研究进展迅速.现就收集到的部分肿瘤耐药机理及其有关逆转剂作一简要综述.1 多药耐药性(multidrug resistance,MDR)MDR是指肿瘤细胞先天存在或经化疗药物诱导后表现出的对一种抗肿瘤药物出现耐药的同时,对其他结构不同,作用靶位不同的抗肿瘤药物也具有抗药性,这一现象被称之为多药耐药性.1968年美国kesscl等首次报道小鼠白血病瘤株的交叉耐药性以后,越来越多研究表明:肿瘤细胞的耐药性不但与肿瘤细胞本身的特点有关,也与肿瘤细胞外的环境因素有关.肿瘤细胞耐药可具有1种或1种以上耐药机制,不同的瘤细胞及不同部位的同种肿瘤细胞可具有不同的耐药机理和不同程度的耐药性.MDR形成机理复杂,     

红霉素逆转人胃癌细胞多药耐药性的研究

胃肠道肿瘤化疗的耐药性一直是困扰临床医师的一个难题。常用的肿瘤多药耐药性逆转剂由于严重的临床毒副作用 ,很难在体内达到体外有效的浓度 ,因而很难在临床上得到应用。红霉素是大环内酯类抗生素 ,是当今应用最为广泛的抗菌药物。随着临床和药理的深入研究 ,其应用日益拓宽。 1989年Hofsli等[1] 发现 ,红霉素在体内可增强阿糖胞苷、放射菌素D、高三尖酯碱、柔红霉素等抗肿瘤药物的抗癌作用 ,并可逆转某些恶性肿瘤的多药耐药性。但有关红霉素对人胃癌耐药细胞的逆转作用方面的研究尚未见诸文献。本文拟诱导建立人胃癌耐药细胞亚株 ,并研…     

某些抗肿瘤药物的多药耐药性机制

肿瘤细胞的多药耐药性(MDR)是阻碍化疗药物达到理想治疗效果的主要原因之一。本文通过分析所选化疗药物产生MDR的机制表明，糖蛋白的表达、谷胱甘肽作用的改变、拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ表达的降低均与产生MDR有关。文章同时还介绍了化疗增敏剂的应用现状、副作用及今后相关领域的研究重点等问题。     

Bcl-2基因反义寡核苷酸对乳腺癌细胞株药物敏感性的影响

目的:探讨bcl-2基因反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株MCF-7的bcl-2蛋白的表达和药物敏感性的影响.方法:用人工合成bcl-2基因反义寡核苷酸预培养人乳腺癌细胞株MCF-7,以免疫组化法检测细胞bcl-2蛋白的表达水平;以MTT法检测bcl-2反义寡核苷酸、阿霉素单独及联合应用对MCF-7细胞生长的抑制情况,比较bcl-2蛋白表达与肿瘤细胞药物敏感性之间的相关性.结果:联合应用bcl-2反义寡核苷酸与阿霉素能够明显增加MCF-7细胞对阿霉素的敏感性,细胞存活率明显下降.免疫组化结果显示MCF-7细胞bcl-2表达水平与细胞药物敏感性有相关性.结论:bcl-2反义寡核苷酸能够抑制MCF-7乳腺癌细胞bcl-2基因的表达,提高MCF-7细胞对阿霉素的敏感性.     

胃癌细胞的体外药敏试验与多药耐药基因表达的关系

目的:分析胃癌细胞的体外药敏试验与多药耐药基因的表达之间的相关性。方法:采用MTT法测定化疗药物对胃癌肿瘤细胞的敏感性;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定胃癌组织中多药耐药基因(MDR1,MRP1,ABCG2,Topo-2mRNA)的表达水平。结果:单药组抑制率最高为5-FU(36.51%),联合用药组抑制率最高为DCF(56.80%);多药耐药基因(MDR1,MRP1,ABCG2,Topo-2mRNA在胃癌组织中的阳性率分别为33.3%,42.9%,52.4%,66.7%。结论:体外药敏试验测定并结合多药耐药基因表达的相关性可提高预测肿瘤的敏感性或发现其耐药性,为临床实现个体化治疗提供参考依据。     

乳腺癌耐药蛋白在人体正常和肿瘤组织中的表达

目的研究乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体正常和肿瘤组织中的表达及其意义. 方法采用半定量RT-PCR检测BCRP在人体正常组织和乳腺癌、胃癌组织中的表达水平. 结果研究发现BCRP mRNA在胎盘和肝脏组织中表达较高,在结肠、小肠、胃、乳腺和肾脏组织中表达较低,在胰腺、脾脏、外周血白细胞和卵巢组织中检测不到.20例乳腺癌中有5例(25%)BCRP阳性表达,而20例胃癌中BCRP均未表达.结论乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体的一些正常组织和乳腺癌中具有表达,其作用可能与该组织的外排功能有关.     

青藤碱逆转人乳腺癌MCF-7细胞他莫昔芬耐药及机制研究

目的 探究青藤碱（sinomenine,SIN）对人乳腺癌MCF-7细胞他莫昔芬（tamoxifen,TAM）耐药的逆转作用及相关机制。方法 采用高剂量短时间刺激诱导法构建MCF-7/TAM耐药株,并通过MTT法验证细胞耐药性的改变,进一步采用MTT法检测SIN和TAM对MCF-7/TAM细胞的增殖抑制作用,并采用CompuSyn软件评估两者的联合效应。流式细胞术检测SIN和TAM对MCF-7/TAM细胞凋亡和周期的影响,Western blotting检测SIN对MCF-7/TAM细胞中PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。结果 MCF-7/TAM细胞对TAM敏感性显著降低,已产生耐药性;SIN和TAM单用均能够抑制MCF-7/TAM细胞的增殖,TAM和SIN联合使用对MCF-7/TAM细胞的抑制作用显著增强,经CompuSyn软件分析显示两药具有协同作用;SIN和TAM联用能够更显著地诱导MCF-7/TAM细胞凋亡和阻滞细胞周期;MCF-7/TAM细胞中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著高于MCF-7细胞,SIN干预后MCF-7/TAM细胞中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平显著下降。结论 SIN能够通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而逆转MCF-7细胞对TAM耐药。     

Effect of Organic Isothiocyanates on Breast Cancer Resistance Protein (ABCG2)-Mediated Transport

No HeadingPurpose. To investigate the effect of organic isothiocyanates (ITCs), dietary compounds with chemopreventive activity, on breast cancer resistance protein (BCRP)-mediated transport.Methods. The effect of 12 ITCs on the cellular accumulation of mitoxantrone (MX) was measured in both BCRP-overexpressing and BCRP-negative human breast cancer (MCF-7) and large cell lung carcinoma (NCI-H460) cells by flow cytometric analysis. The ITCs showing activity in MX accumulation were examined for their effect on MX cytotoxicity, and the intracellular accumulation of radiolabeled phenethyl isothiocyanate (PEITC) was measured in both BCRP-overexpressing and BCRP-negative NCI-H460 cells.Results. ITCs significantly increased MX accumulation and reversed its cytotoxicity in resistant cells, but had a small or no effect in sensitive cells. The effects of ITCs on MX accumulation and cytotoxicity were ITC-concentration dependent. Significant increases in MX accumulation were observed at ITC concentrations of 10 or 30 gM, and significant reversal of MX cytotoxicity was generally observed at ITC concentrations of 10 M. Intracellular accumulation of radiolabeled PEITC in BCRP-overexpressing cells was significantly lower than that in BCRP-negative cells and was increased significantly by the BCRP inhibitor fumitremorgin C (FTC).Conclusions. Certain ITCs are BCRP inhibitors and PEITC and/or its cellular metabolite(s) may represent BCRP substrates, suggesting the potential for diet-drug interactions.     

外排型转运体与肿瘤多药耐药

肿瘤多药耐药（MDR）是导致肿瘤化疗失败的主要原因之一。肿瘤MDR的机制有多种,其中外排型转运体的过表达是导致MDR的主要机制,因此研究外排型转运体介导的肿瘤MDR机制和发现可以逆转肿瘤MDR的抑制剂成为国内外研究的热点。就目前研究的3种三磷酸腺苷结合盒转运体：P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白介导的MDR及逆转MDR的机制进行综述,以期为提高肿瘤治疗疗效提供依据。     

C421 allele-specific ABCG2 gene amplification confers resistance to the antitumor triazoloacridone C-1305 in human lung cancer cells

The A421 ABCG2 genotype is a frequent polymorphism encoding the K141 transporter, which is associated with a significant decrease in transporter expression and function when compared to the wild type (wt) C421 allele encoding the Q141 ABCG2. Here we show that during the acquisition of resistance to the novel triazoloacridone antitumor agent C-1305 in lung cancer cells harboring a heterozygous C421A genotype, a marked C421 allele-specific ABCG2 gene amplification occurred. This monoallelic C421 ABCG2 gene amplification brought about the overexpression of both C421 ABCG2 mRNA and the transporter at the plasma membrane. This resulted in the lack of cellular drug accumulation due to increased efflux of both C1305 and C-1311, a fluorescent imidazoacridone homologue of C-1305, as well as marked resistance to these antitumor agents and to established ABCG2 substrates including mitoxantrone and SN-38. Consistently, the accumulation and sensitivity to these drugs were restored upon incubation with the potent and specific ABCG2 transport inhibitors Ko143 and fumitremorgin C. Moreover, upon transfection into HEK293 cells, the wt Q141 ABCG2 allele displayed a significantly decreased accumulation of C-1311 and increased resistance to C-1305, C-1311 and mitoxantrone, when compared to the K141 ABCG2 transfectant. Hence, the current study provides the first evidence that during the exposure to anticancer drugs, an allele-specific Q141 ABCG2 gene amplification occurs that confers a drug resistance advantage when compared to the K141 ABCG2. These findings have important implications for the selection and expansion of malignant anticancer drug resistant clones during chemotherapy with ABCG2 drugs.     

小干扰RNA逆转人乳腺癌细胞MCF-7多药耐药的体外研究

目的研究以多药耐药相关蛋白(MRP)为靶标的小干扰RNA(siRNA)抑制相应蛋白表达,对人乳腺癌细胞MCF-7药物敏感性的影响。方法以MRP基因为靶标的siRNA转入MCF-7细胞,检测对MRP mRNA和蛋白表达水平的影响及其对抗肿瘤药物IC50的影响。结果经siRNA干扰后,MRP基因的mR-NA和蛋白的表达均有明显降低,肿瘤细胞对相关化疗药物的敏感性明显增加。结论以MRP基因为靶标的siRNA一定程度上逆转了肿瘤细胞的多药耐药性。     

恶性血液病中乳腺癌耐药蛋白基因的表达

目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因在恶性血液病中的表达。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),β2微球蛋白基因作内参照,以BCRP/β2-MG的比值作为BCRP基因的相对表达水平,检测62例恶性血液病BCRP基因的表达。结果BCRP基因在恶性血液病中,阳性表达率高,表达水平差别较大,由低到高依次为AML、CML、ALL,此外MDS-RAEB和CLL各1例阳性。其中,18例AML(M3除外)中,初次缓解率在BCRP基因表达水平高者明显低于低的患者。结论BCRP基因在恶性血液病中阳性表达率高;BCRP可能与肿瘤的耐药有关,是预后不良的因素之一。     

重组人p53腺病毒联合紫杉醇对胃癌细胞的作用

目的 研究重组人p53腺病毒增加胃癌细胞对紫杉醇敏感性的作用.方法 重组人p53腺病毒感染胃癌细胞BGC-823,Western blot法检测p53蛋白在胃癌细胞中的表达;MTT法测定重组人p53腺病毒单独及联合紫杉醇用药的不同浓度处理细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡.结果 重组人p53腺病毒感染BGC-82348h,p53蛋白在BGC-823中高表达,并产生G2/M期阻滞和细胞凋亡.重组人p53腺病毒联合紫杉醇用药增加紫杉醇的敏感性,有剂量时间的依赖性.结论 腺病毒介导p53基因感染BGC-823细胞诱导凋亡并增加胃癌细胞对紫杉醇的敏感性.本实验为p53基因治疗与胃癌化疗临床结合提供了可靠的实验依据.