热休克蛋白70研究的现状及展望

热休克蛋白（heat shock proteins,HSPs）是一组广泛存在于微生物和动、植物体内的生物进化中高度保守的多肽蛋白。由于这类蛋白的合成与热休克反应有关,故命名为热休克蛋白（heat shock protein,HSP）。除了高热之外,多种应激原如重金属、饥饿、缺氧、缺血等都可以诱导HSP的表达,但人们习惯上仍称为HSP或热应激蛋白（heat stress protein,HSP）,有时也称为应激蛋白（stress protein,SP）。根据HSP的相对分子质量,主要的HSP被分成6个家族：大分子量HSP家族、HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族、小分子量HSP家族和泛素。其中HSP70是HSPs中最保守、最重要的一族,在大多数生物中含量最多,在应激反应中最敏感,因而是HSPs中最受关注、研究最深入的一种。     

针灸诱导HSP70抗细胞损伤及其应用现状的研究

热休克蛋白（HSPs）广泛存在于所有原核和真核细胞内,在机体受到如高温、缺血或缺氧刺激后,引起生物细胞损伤,发生热休克反应（HSR）时所产生的细胞蛋白。一般分为HSP90、HSP70、HSP60和小分子HSP等4个家族。其中HSP70是目前备受关注、探讨最多、研究最深入的一族,是HSPs家族中最重要的一族。针灸作为中医学传统防治疾病的方法,其本身对人体是一个应激原的刺激。近年来研究表明,针灸在治疗脑缺血、心肌缺血再灌注、脊髓损伤、胃肠黏膜损伤、关节炎等方面具有诱导HSPs产生的作用[1-10]。现就近年来运用针灸诱导HSP70抗细胞损伤及其应用的研究现状作一综述。     

针灸、热休克蛋白70与细胞保护

热休克蛋白70(HSP70)是一种非特异性细胞保护蛋白，针灸可诱导其产生。本文综述了针灸、热休克蛋白及细胞保护三者间的联系，并认为通过采用针灸诱导热休克蛋白70的产生，从而保护各器官组织是值得研究的课题。     

艾灸产生热休克蛋白的研究

在正常发育动植物,热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)或应激蛋白可被轻微的体温升高或药物和缺血等其他生理性刺激诱导产生。这种反应对机体发育中的胚胎具有保护作用。以往关于热休克蛋白或应激蛋白进行了针对从细菌到离体培养的椎体细胞多种生物体的广泛的研究,对恒温动物整体的研究却很少。已有人研究了热休克蛋白和艾灸作用的关系。本次主要对艾灸产生的热休克蛋白进行分析研究。     

雷公藤甲素对胶原诱导的关节炎大鼠关节局部热休克蛋白和主要组织相容性复合体Ⅰ类分子表达的影响

目的观察雷公藤甲素对胶原诱导的关节炎大鼠关节局部热休克蛋白(HSPs)和主要组织相容性复合体类分子(MHC-)表达的影响。方法建立胶原诱导的关节炎大鼠模型,雷公藤甲素按40μg/kg im给药,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫酶组织化学染色的方法,观察大鼠关节滑膜细胞和软骨细胞HSP60、HSP70和MHC-类分子的表达情况。结果与正常对照组相比,模型组大鼠关节滑膜细胞及软骨细胞HSP60、HSP70和MHC-类分子的表达均显著增高(P<0.05),与模型组相比,雷公藤甲素可以下调关节炎大鼠关节局部HSP60、HSP70和MHC-类分子的表达(P<0.05)。结论降低关节炎大鼠关节局部软骨细胞和滑膜细胞异常表达的HSPs与MHC-类分子的表达,可能是雷公藤甲素治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制之一。     

不同浓度的远志皂苷对SH-SY5Y细胞内热休克蛋白的调节作用

目的探讨远志皂苷(TEN)对与细胞保护相关的热休克蛋白(HSPs)mRNA水平的调节作用,筛选受TEN调节并在防治阿尔茨海默病(AD)中具有保护神经细胞功能的HSPs基因。方法以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为体外模型,研究在实验中设置对照组(control)、TEN低剂量组(1μg/ml)、TEN中剂量组(2μg/ml)、TEN高剂量组(4μg/ml),每组6孔细胞。将SH-SY5Y以2×103cells/cm2的密度接种于6孔细胞培养板,细胞贴壁并培养24h后进行给药处理,药物作用SH-SY5Y细胞24h后,以TRIZOL试剂提取总RNA并合成c DNA,采用荧光定量PCR检测候选HSPs的mRNA水平。结果相比control组,剂量为4μg/ml的TEN可显著上调HSP27、HSPB5、Grp78、Grp75、Hsc70、HSP70的mRNA水平(P0.05)。结论远志皂苷诱导多个HSPs分子的表达上调,有可能是远志调节神经细胞内Aβ代谢的关键环节和远志预防和治疗老年痴呆药理作用的重要基础之一。     

艾灸对实验性RA大鼠热休克蛋白(HSP70)表达的影响

目的 :探讨艾灸治疗实验性RA的作用机理。方法 :用福氏完全佐剂塑造大鼠实验性RA病理模型 ,观察艾灸“肾俞”、“足三里”对实验性RA大鼠炎症局部组织热休克蛋白 (HSP70 )表达的影响。结果 :艾灸能明显增加实验性RA大鼠局部组织HSP70面积总和、积分光密度总和及平均黑度 (P <0 .0 1)。结论 :艾灸可诱导实验性RA大鼠局部组织热休克蛋白 (HSP70 )的大量合成。     

桂枝汤有效部位A对下丘脑热休克蛋白含量的影响

目的 :研究桂枝汤有效部位A(Fr.A)在双向调节体温的同时对下丘脑热休克蛋白 (HSP)的影响。方法 :取高、低体温大鼠下丘脑组织 ,应用蛋白印迹法测定热休克蛋白含量。结果 :Fr.A在双向调节体温的同时 ,可明显拮抗安痛定性低体温大鼠下丘脑HSP70含量的降低 ,对酵母性高体温大鼠下丘脑HSP70含量具有一定的降低作用。结论 :Fr.A对高、低体温大鼠下丘脑HSP70含量的调节作用是其双向调节体温的机理之一。     

健心平律丸对心房颤动患者血清HSP70的影响

目的:观察健心平律丸对持续性房颤及永久性房颤患者血清热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70,HSP70)的影响。方法:100例确诊患者随机分为两组,对照组(常规治疗组)50例;治疗组(加用健心平律丸组)50例。12个月为1个疗程,1个疗程后统计疗效;观察记录两组治疗前后血清热休克蛋白70水平的变化,同时检测治疗前后血、尿、大便常规、肝肾功能、电解质的变化。结果:两组用药12个月后HSP70与治疗前比较差异有统计学意义(P 0.05),治疗组与对照组治疗后HSP70水平对比差异有统计学意义(P 0.05)。结论:治疗组治疗后HSP70水平增加,可能与HSP70随着心功能好转其保护作用增加有关,提示健心平律丸能通过调节慢性房颤患者HSP70水平起到保护心脏作用。     

桂枝汤有效部位A对下丘脑热休克蛋白含量的影响

目的：研究桂枝汤有效部位A（Fr.A）在双向调节体温的同时对下丘脑热休克蛋白(HSP)的影响。方法：取高、低体温大鼠下丘脑组织,应用蛋白印迹法测定热休克蛋白含量。结果：Fr.A在双向调节体温的同时,可明显拮抗安痛定性低体温大鼠下丘脑HSP70含量的降低,对酵母性高体温大鼠下丘脑HSP70含量具有一定的降低作用。结论：Fr.A对高、低体温大鼠下丘脑HSP70含量的调节作用是其双向调节体温的机理之一。     

健脾益气方对急性胃粘膜损伤大鼠热休克蛋白的影响

目的：探讨健脾益气方（ＪＰＹＱＲ）抑制胃粘膜损伤的作用机理。方法：采用束缚水浸法造成大鼠急性胃粘膜损伤，测定溃疡指数，检测血浆及胃组织中热休克蛋白（ＨＳＰ７０）的变化，并对胃组织细胞ＨＳＰｓ进行免疫组织化学研究。结果：用中药ＪＰＹＱＲ和西药丽珠得乐预处理的大鼠，溃疡指数小于模型组（Ｐ〈０．００１），而ＪＰＹＱＲ组又小于丽珠得乐组（Ｐ〈０．０１）；预处理两组血浆及胃组织中ＨＳＰ７０水平相反明显高于模     

ACUPUNCTURE-MOXIBUSTION, HEAT SHOCK PROTEIN 70 AND CYTOPROTECTION

Heat shock protein 70 (HSP70) is a kind of non-specific cytoprotective protein, and its generation can be induced by acupuncture and moxibustion. In the present paper, the authors review the protective actions of HSP70 on the heart, gastric mucosa, liver, brain tissues, kidney, etc., and the relationship among acupuncture/moxibustion, heat shock protein and the cytoprotective actions. It is worth studying the cytoprotective effect of acupuncture and moxibustion by way of the resultant generation of HSP70 in the organism.     

针刺对缺血再灌注后心脑组织细胞基因表达的影响

随着人口老龄化 ,心脑血管疾患日益增多 ,心脑等脏器疾病是造成临床致死、致残的主要原因 ,目前仍采用综合防治方法。针刺对心脑缺血再灌注有防治作用 ,但其作用机制还不完全清楚。本文汇总了近几年从基因水平研究针刺对缺血再灌注的作用的文献 ,主要描述了针刺对缺血再灌注后心脑组织细胞的基因变化的影响 ,包括热休克蛋白、原癌基因、细胞因子、Bcl 2等 ,并描述了作用机制 ,从而概括地说明针刺在缺血再灌注后损伤中发挥的作用     

干地黄提取物A保护胃黏膜作用的形态学研究及与热休克蛋白的关系

目的观察干地黄提取物A对胃黏膜的保护作用,并探讨其与胃黏膜内热休克蛋白含量之间的关系。方法用常规HE染色法观察胃黏膜损伤深度,用免疫组化方法和图像分析系统观察胃黏膜HSP70阳性细胞比值。结果(1)干地黄提取物A液灌胃可引起胃黏膜下血管充血扩张,但不引起HSP70合成增多；(2)提前给予干地黄提取物A液可明显减少无水乙醇所致的胃黏膜损伤指数和损伤深度；(3)提前给予干地黄提取物A液可使损伤所致的HSP70合成减少。结论干地黄提取物A有明显的胃黏膜保护作用,其机制可能与HSP70无关。     

针灸预刺激诱导热休克蛋白保护神经元的机制研究(英文)

目的:通过观察针灸预刺激对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠热休克蛋白HSP 70、HSP 90及海马神经元凋亡率的影响,探讨针灸防治AD的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为4组,即正常组、假手术组、模型组、预针灸组,每组各10只,取"百会"和双侧"肾俞"穴电针并温和灸刺激3周后,从双侧海马注入Aβ1-42制作AD大鼠模型,然后再电针和艾灸刺激1周。采用免疫组化法测定大鼠海马CA 1区HSP70、HSP 90的平均吸光度值,流式细胞仪检测各组大鼠海马神经元细胞凋亡率。结果:通过4周的预针灸刺激,大鼠海马CA 1区HSP 70、HSP 90的平均吸光度值均较模型组有显著提高(P0.01),细胞凋亡率较模型组显著降低(P0.01)。结论:针灸预刺激能通过诱导脑内HSP 70、HSP 90的表达来抑制细胞凋亡现象,从而起到保护神经元的作用。     

丹酚酸B预适应对缺氧复氧损伤细胞热休克蛋白70mRNA表达的影响

[目的]探讨丹酚酸B(Sal B)预适应的细胞保护机制是否与诱导热休克蛋白70(HSP70)合成有关。[方法]在缺氧复氧损伤大鼠心脏微血管内皮细胞(CMEC)后，采用RT-PCR法观察Sal B预适应对细胞HSP70 mRNA表达的影响。[结果]HSP70 mRNA在正常的CMEC有较低表达，缺氧刺激使其表达明显增强。Sal B预适应促进HSP70 mRNA表达增强，作用明显优于缺氧预适应(HPC)。晚期预适应保护中，Sal B预适应同样促使HSP70 mRNA表达明显增强，与HPC具有增强表达的叠加效应。[结论]Sal B预适应通过诱导HSP70表达升高发挥细胞保护作用。     

补阳还五汤及其有效部位组方对沙土鼠脑缺血再灌注后脑组织热休克蛋白70表达的影响

目的 :比较补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型 ,分别腹腔注射补阳还五汤及其有效部位组方 ,于缺血15min再灌注 4 8h后 ,以Northernblot检测脑组织HSP70mRNA的表达 ,以Westernblot检测其蛋白表达。结果 :沙土鼠脑缺血再灌注后 ,脑组织HSP70mRNA和蛋白表达显著增加 ,补阳还五汤及其有效部位组方可使脑缺血再灌注后HSP70mRNA表达减少 ,补阳还五汤的抑制作用强于有效部位组方 ;但两者对脑缺血再灌注后HSP70蛋白表达的增加均无明显影响。结论 :补阳还五汤及其有效部位组方可能通过抗缺血作用而抑制了缺血后HSP70mRNA的表达。     

补阳还五汤和黄芪对沙土鼠脑缺血再灌注后脑组织热休克蛋白70表达的影响

目的：探讨补阳还五汤和黄芪对脑缺血再灌注后脑组织HSP70mRNA及蛋白表达的影响。方法：采用沙土鼠双侧颈动脉夹闭脑缺血模型,运用Northern blot和Western blot分别检测补阳还五汤和黄芪对沙土鼠脑缺血再灌注后热休克蛋白70基因（HSP70）及蛋白的表达。结果：在脑缺血再灌注后48h,HSP70mRNA及蛋白表达明显增强,补阳还五汤可明显抑制HSP70的转录,而黄芪则除了可明显抑制其转录外,还可轻度降低HSP70的翻译。结论：补阳还五汤和黄芪对脑缺血再灌注后,HSP70的抑制作用有可能对于脑缺血引起的损伤具有保护作用。     

Barberry Treatment Reduces Serum Anti‐Heat Shock Protein 27 and 60 Antibody Titres and High‐sensitivity C‐reactive Protein in Patients with Metabolic Syndrome: A Double‐blind,Randomized Placebo‐controlled Trial

Metabolic syndrome is an important risk factor for cardiovascular disease (CVD). The heat shock proteins (HSPs) are associated with risk factors for CVD. The aim of the present study was to survey the effect of barberry on antibody titres to HSPs and high‐sensitivity C‐reactive protein (hs‐CRP) in patients with metabolic syndrome. In our study, subjects (N = 106, 79 women and 27 men, 18–65 years old) with metabolic syndrome were randomized into two groups: a group of patients who received three capsules of barberry and a control group who received three capsules of placebo for 6 weeks. Antibodies against HSPs 27, 60/65 and 70, hs‐CRP and lipid profile were determined in patients before (week 0) and after (week 6) intervention. spss software (version 16.0; Inc, Chicago, IL) was used for data analysis. Results showed that barberry had no significant effect on serum level of anti‐HSPs 65 and 70. But there was a significant decrease in anti‐HSP 27 in both case and control groups (p = 0.001 and p < 0.001, respectively, in the case and control groups). Barberry decreased significantly anti‐HSP 60 in the case group (p = 0.03). High‐sensitivity CRP was decreased non‐significantly (p = 0.17) in the case group and increased significantly (p = 0.04) in the control group. Barberry decreased significantly low‐density lipoprotein and total cholesterol and increased significantly high‐density cholesterol (p < 0.05). Results of the present study suggested that barberry supplementation in patients with metabolic syndrome decreased significantly anti‐HSPs 27 and 60 and hs‐CRP levels and improved lipid profile. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

贝甲汤(散)治疗痤疮88例

一般资料患者均为2001-2003年门诊病人，其中男48例，女40例，年龄14～35岁。病程最短者两个月，最长者7a。88例中轻度(Ⅰ级)13例，中度(Ⅱ级)21例，中度(Ⅲ级)28例，重度(Ⅳ级)26例。并发皮脂溢出症26例，并发脂溢性皮炎6例，伴便秘33例，形体偏胖者47例。