含IKVAV肽体内诱导血管生成的实验研究*

目的探讨含IKVAV肽体内自组装成凝胶材料诱导血管生成的可行性。方法实验组:配制1%的肽溶液,pH=9．0。对照组:配制16．67%的明胶,pH=7．4。各取1毫升,分别注射植入大鼠背部脊柱两侧皮下。观察植入后一周内鼠的全身反应及植入部位的皮肤变化。结果二周后取材,固定,常规HE染色及VEGF免疫组织化学染色。术后一周实验动物存活良好,无全身不良反应,植入部位皮肤无红肿、无坏死。实验组:植入点的1%的肽自组装成凝胶,HE染色显示,凝胶与周围组织间整合好,无炎性细胞浸润,周围有血管长入凝胶内部,血管腔内可发现红细胞,术后两周,VEGF免疫组织化学染色阳性。对照组:HE染色,明胶与组织的相容性好,在明胶内未发现血管;VEGF免疫组织化学染色阴性。结论含IKVAV肽体内可自组装成凝胶,并且可诱导新生血管在凝胶内生成。     

体外自组装IKVAV纳米纤维凝胶在二维体系中对神经祖细胞分化的影响

背景：大量实验证明体外自组装的纳米支架材料可以促进神经祖细胞增殖与分化。 目的：观察体外自组装含IKVAV纳米纤维凝胶在二维体系中对神经祖细胞分化的影响。 方法：培养SD大鼠乳鼠神经祖细胞并用免疫荧光方法鉴定。在DMEM/F12触发下,含IKVAV的两亲性多肽溶液形成三维多孔凝胶,于透射电镜下观察其结构。将神经祖细胞分别接种到1%含IKVAV的两亲性多肽溶液及0.1 g/L多聚赖氨酸包被的盖玻片上,培养1,3,7 d后采用神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白检测其分化情况。 结果与结论：培养出巢蛋白阳性细胞,并且能分化为神经丝蛋白阳性的神经元与胶质纤维酸性蛋白阳性的胶质细胞,证实为神经祖细胞;含IKVAV的两亲性多肽溶液自组形成凝胶,并在透射电镜下显示为纳米纤维,直径为7.0~8.0 nm,长度为100~1 500 nm; IKVAV的两亲性多肽溶液组向神经元分化得能力明显优于多聚赖氨酸组。说明体外自组装IKVAV纳米纤维凝胶在二维培养体系中对神经祖细胞分化有一定的促进作用。     

纳米纤维凝胶材料IKVAV多肽的自组装及其与骨髓基质干细胞的相容性研究

研究纳米纤维凝胶材料IKVAV多肽的自组装及其与骨髓基质干细胞的相容性，为其应用于神经组织工程提供实验依据。合成IKVAV多肽两亲性分子，进行自组装，用透射电镜检测。将IKVAV多肽纳米纤维凝胶与BMSCs复合培养，倒置显微镜下观察细胞生长情况，Calcein—AM／PI染色计数活细胞比例，检测IKVAV多肽对BMSCs增殖和粘附的影响。IKVAV多肽可成功自组装成为纳米纤维凝胶，其与BMSCs复合培养细胞生长良好，活细胞数达90％以上，IKVAV多肽对BMSCs增殖没有影响，并可促进BMSCs的粘附。IKVAV多肽可自组装形成纳米纤维凝胶，并且与BMSCs有着良好的生物相容性，是一种很有前景的神经组织工程支架材料。     

含IKVAV多肽自组装成凝胶的实验研究*

目的设计合成含IKVAV肽(C16H31O-AAAAGGGEIKVAV),在PBS溶液触发下,观察其自组装成三维多孔凝胶。方法固相法合成肽,高效液相色谱仪(HPLC)测肽纯度,色谱仪测肽的分子量,配制成1%肽,pH值调整为9.5,加入等体积的PBS溶液,透射电镜观察自组装凝胶超微结构。结果HPLC示多肽纯度为95%,MS示肽的分子量的1351.6,1%肽溶液在PBS溶液触发下数秒钟形成凝胶,透射电镜示自组装的凝胶为交织成网状的纤维结构,直径3～6纳米,长度100纳米～1.5微米。结论本实验合成了含IKVAV肽,在PBS溶液中可自组装成多孔凝胶结构。     

多肽自组装纳米纤维凝胶与大鼠嗅鞘细胞相容性的实验研究

为了研究自组装纳米纤维凝胶材料异亮氨酸-赖氨酸-缬氨酸-丙氨酸-缬氨酸(IKVAV)多肽与大鼠嗅鞘细胞(OECs)的生物相容性。将培养纯化的大鼠OECs种植于自组装制成IKVAV多肽纳米纤维凝胶表面(二维培养)和纤维凝胶内部(三维培养),倒置显微镜和免疫荧光镜下观察OECs的黏附、增殖情况,并采用MTT法和S-100阳性细胞计数、胞体面积、细胞周长的图像处理和统计分析检测支架对细胞的毒性来评价细胞的活力。OECs接种到IKVAV凝胶后,大多数OECs能在凝胶中生长良好,MTT检测及荧光显微镜下观察OECs的数目、周长与面积与多聚赖氨酸(PLL)组无显著性差异。证实自组装IKVAV多肽纳米纤维凝胶与大鼠OECs有良好的生物相容性。     

IKVAV多肽生物活性水凝胶修复大鼠脑损伤

目的探索利用组织工程技术修复中枢神经损伤的可行性。方法人工合成PHPMA水凝胶材料,在其表面接枝具有神经生长活性的IKVAV肽段,检测分析性状后植入大鼠大脑皮层,于术后不同时期取脑切片,组织化学染色观察植入部位细胞反应;GFAP免疫组化检测星形胶质细胞在材料中的分布;Glees镀银染色显示移植物中神经纤维生长情况,DAB血管染色法观察新生血管的长入。结果制备的三维活性PHPMA水凝胶植入鼠脑皮层后能与周围组织良好整合。术后6周材料周围及内部均有细胞浸润,GFAP阳性细胞在材料内分布均匀;12周后材料内部可见新生血管;18周后材料中心有神经纤维长入。结论活性PHPMA水凝胶具有良好的脑组织相容性,植入脑缺损部位有助于细胞迁移、血管发生及神经轴突生长。     

缓释血管内皮生长因子的透明质酸水凝胶对大鼠脑损伤的修复作用

目的:探讨缓释血管内皮生长因子(VEGF)的透明质酸(HA)水凝胶对脑损伤大鼠的修复效果。方法:制备HA水凝胶并在其中添加包封VEGF的聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)微球,形成可缓释VEGF的HA水凝胶复合支架。选用成年SD大鼠制备脑损伤模型,随机分为3组:将HA复合支架植入大鼠脑损伤区作为实验组(HA+PLGA组);单纯模型组;不添加PLGA微球的HA水凝胶植入作为HA对照组(HA组)。结果:HA水凝胶复合支架呈疏松多孔网状结构,可缓慢释放VEGF至少2周;术后8周大体观察可见HA水凝胶和脑组织整合良好,表面光滑; Nissl染色显示支架材料内有大量神经细胞;免疫荧光染色显示单纯HA支架可减轻脑损伤区胶质瘢痕的形成,缓释VEGF的HA复合支架对胶质瘢痕有更强的抑制作用;半薄切片组织学染色可见复合支架植入区有大量新生的血管,有大量细胞,血管周围可见神经纤维,而在单纯HA移植区血管和细胞较少。结论:缓释VEGF的HA水凝胶可与脑组织较好的整合,抑制胶质瘢痕的形成,诱导血管再生,进而促进大鼠脑损伤后的组织修复。     

骨髓间充质干细胞复合多肽凝胶及成软骨生成因子修复兔关节软骨缺损

背景：多肽水凝胶因为其具有良好的可塑型性,能够与损伤部位很好的无缝隙结合,所以采用该材料作为支架是骨、软骨组织工程中一种可行的探索。 目的：骨髓间充质干细胞联合新型可注射多肽凝胶及成软骨生成因子修复兔关节软骨缺损,观察其修复效果。 方法：首先分离培养兔骨髓间充质干细胞,兔左侧膝关节处制备直径5 mm,深3 mm的全层骨-软骨缺损模型;右侧造模后空置作为对照。实验分为3组,单纯自组装多肽凝胶移植组,自组装多肽凝胶+成软骨因子组和自组装多肽凝胶+成软骨因子+骨髓间充质干细胞组。采用的成软骨因子包括转化生长因子β1,地塞米松和胰岛素样生长因子1,三者混合后加入到自组装多肽凝胶或骨髓间充质干细胞中。于处理后12周时处死动物行大体及组织学观察、X射线摄片、免疫组织化学法进行组织学评分评估修复情况。 结果与结论：单纯自组装多肽凝胶移植在12周后显示出非常好的修复效果,可见番红O染色,Ⅱ型胶原蛋白免疫组织化学染色强度以及组织学评分明显高于其他组(P < 0.05)。自组装多肽凝胶+成软骨因子组修复效果较好,与自组装多肽凝胶组相似,但其修复区域蛋白聚糖表达比对照组明显升高(P < 0.01)。自组装多肽凝胶+成软骨因子+骨髓间充质干细胞组修复效果不佳,12周未能完全修复缺损区域,与单纯自组装多肽凝胶组比较骨赘的形成有所增加。结果表明,单纯自组装多肽凝胶能够在原位修复骨软骨缺损并促进软骨修复,提示以自组装多肽凝胶支架移植有望提高目前修复软骨缺损的效果。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

血管内皮生长因子、Eph受体酪氨酸激酶A2、基质金属蛋白酶-2和-9在卵巢癌血管生成拟态中的作用

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、Eph受体酪氨酸激酶A2 (EphA2)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9在卵巢癌血管生成拟态中的作用.方法 收集临床和预后资料完整的卵巢癌组织标本84例,切片经明确诊断后进行CD31和过碘酸-雪夫 (PAS) 双重染色,证实肿瘤组织中存在血管生成拟态,行VEGF、EphA2、MMP-2和MMP-9 免疫组织化学染色,根据染色指数统计免疫组织化学染色结果.结果 有血管生成拟态组(36/84)和无血管生成拟态组卵巢癌组织(48/84)的VEGF、EphA2、MMP-9表达差异有统计学意义,有血管生成拟态组的卵巢癌细胞VEGF、EphA2、MMP-9表达明显高于无血管生成拟态组.但有血管生成拟态组和无血管生成拟态组患者的MMP-2表达差异无统计学意义.结论 在卵巢癌中血管生成拟态和内皮依赖性血管并存,VEGF、EphA2和MMP-9等参与了卵巢癌血管生成拟态的形成.检测VEGF、EphA2和MMP-9可作为预测卵巢癌预后的间接指标.     

新型自组装水凝胶NBD/RADA16可促进前成骨细胞的分化

背景：RADA16是较成熟的自组装纳米短肽材料,在亲水面往复形成互补离子键,可组装为纳米纤维,并且能够促MC3T3 E1细胞的黏附、伸展和增殖。 目的：观察新型自组装多肽水凝胶NBD/RADA16对小鼠前成骨细胞MC3T3 E1成骨分化能力的影响。 方法：将MC3T3 E1细胞分别接种于自组装多肽水凝胶NBD/RADA16与RADA16水凝胶中,进行成骨诱导培养,以单纯成骨诱导培养的细胞为对照。诱导培养1,3,6 d检测细胞碱性磷酸酶活性;诱导培养7 d后,Western Blot检测细胞骨形态发生蛋白2的表达;诱导培养21 d后,茜素红染色观察细胞钙化结节。 结果与结论：MC3T3 E1细胞在NBD/RADA16多肽水凝胶上生长状态良好,优于在RADA16上生长的细胞。自组装多肽水凝胶NBD/RADA16上MC3T3 E1细胞的碱性磷酸酶活性高于RADA16水凝胶上及单纯成骨诱导培养的细胞(P < 0.01)。自组装多肽水凝胶NBD/RADA16上MC3T3 E1细胞的矿化基质沉积、骨形态发生蛋白2表达高于RADA16水凝胶上的细胞(P < 0.01)。结果提示NBD/RADA16自组装多肽水凝胶较RADA16水凝胶更能促进MC3T3 E1细胞的成骨分化。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程全文链接：     

APP17肽对快速老化小鼠SAMP10学习、记忆功能和海马神经 细胞线粒体氧化应激水平的影响

目的：观察APP17肽(β-Amyloid precursop protein,APP,319-335肽段)对快速老化小鼠SAMP10（senescence accelerated mouse/pr one 10）学习、记忆功能及海马神经细胞线粒体氧化应激的影响。方法:4月龄的SAMP10小鼠随机分为模型组和APP17肽治疗组，正常对照组采用抗快速老化小鼠SAM R1(senescence accelerated mouse/resistance 1)。APP17肽治疗组给予皮下注射APP17肽 ，每只每次0.34 μg，每周3次；模型组和正常对照给予等量的生理盐水；28周后成模。应 用水迷宫试验观察小鼠学习、记忆功能的变化，应用羟胺法和硫代巴比妥酸（TBA）比色法 分析海马神经细胞线粒体氧化应激反应水平。结果:(1)水迷宫结果显示 ，模型组小鼠存在明显的学习和记忆功能障碍，其游完全程的时间和错误反应次数均较正常 对照组增多（P<0.05）;APP17肽治疗组小鼠的行为学障碍明显轻于模型组，其上述 的水迷宫检测结果与正常对照组比较无显著差异。(2)模型组小鼠海马神经细胞线粒体SOD活 性明显低于正常对照组（P<0.01），MDA含量显著高于正常对照组（P<0.01）；A PP17肽治疗组检测结果与正常对照组接近，SOD活性高于模型组（P<0.05），而MDA含 量低于模型组（P<0.01）。结论:快速老化小鼠SAMP10存在学习和 记忆功能障碍；而且其海马神经细胞线粒体氧化应激反应明显加剧。APP17肽具有清除自由 基和抑制氧化应激反应的作用，从而提高脑组织的抗氧化能力，保护学习、记忆功能。     

APP5肽对体外培养的大鼠海马神经干细胞增殖和分化的影响

目的 研究APP5肽对体外培养的大鼠胚胎海马神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响. 方法 1. 原代培养SD大鼠胚胎脑海马NSCs;2. 利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)和神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞的特异性标记物微管相关蛋白2(MAP2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖脑苷脂(GalC)对培养的NSCs进行鉴定;3. 将培养的NSCs分为对照组、血清组、APP5肽反序列组和APP5肽组, 观察各组细胞形态的变化;4. 将培养的NSCs分为对照组、APP5肽反序列组和APP5肽组,利用细胞计数、干细胞克隆形成率、干细胞克隆形成大小以及四甲基偶氮唑盐(MTT)代谢率测定的方法 ,分析APP5肽对海马NSCs增殖的影响. 结果 1.海马神经干细胞呈神经球聚集生长,BrdU染色阳性;加入血清后神经球周围有细胞呈放射状向四周生长,并带有突起.染色呈MAP2、GFAP或GalC阳性;2. 海马NSCs加入APP5肽及其反序列后细胞形态与对照组相比没有明显改变;3.与对照组相比,加APP5肽后海马NSCs数量明显增加,克隆形成率和克隆形成的直径均有明显的增加, 并有统计学差异;4.与对照组相比,加入5肽后海马NSCs的MTT代谢率明显增加,有统计学差异,反序列组没有明显改变. 结论 APP5肽能促进海马NSCs增殖,但并不促进其分化.     

诱骗受体3γ-干扰素和抗环瓜氨酸肽抗体在风湿性关节炎患者血清中的表达

目的 分析在风湿性关节炎患者中抗环瓜氨酸肽抗体、血清诱骗受体3γ-干扰素检验有效性。方法 选择2018年1月~12月我院收治的风湿性关节炎患者50例作为观察组,另选同期体检健康人群40例作为对照组,检测并比较两组血清抗环瓜氨酸肽抗体、血清诱骗受体3γ-干扰素水平。结果 观察组抗环瓜氨酸肽抗体、风湿因子检测结果高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组单一抗环瓜氨酸肽抗体检测阳性率、单一风湿因子检测阳性率均高于对照组,观察组抗环瓜氨酸肽抗体联合风湿因子检测阳性率高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;观察组抗环瓜氨酸肽抗体、血清诱骗受体3γ-干扰素含量比对照组高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 在风湿性关节炎患者中抗环瓜氨酸肽抗体、血清诱骗受体3γ-干扰素检验,能够明确患者临床指标情况,对于临床治疗有参考价值,值得应用。     

App17肽防治去卵巢大鼠海马神经细胞的凋亡

目的:观察去卵巢大鼠几种神经元凋亡相关蛋白的表达,并用TUNEL试剂盒检测,研究缺乏雌激素是否引起神经元凋亡;评估App17肽是否能改善去卵巢大鼠的神经细胞凋亡,初步探讨App17肽的神经保护作用机制。方法:雌性Wistar大鼠随机分3组:假手术组(shamcontrol组),卵巢去势对照组(OVX组),App17肽实验组(17P+OVX组)。Sham组做假手术,OVX组和17P+OVX组做双侧卵巢切除术。17P+OVX组从卵巢去势第7周开始用App17肽治疗6周,用免疫组化和Westernblot方法观察AIF、Bax、Bcl-2的表达,用TUNEL法检测凋亡情况。结果:免疫组织化学和Westernblot结果表明App17肽实验组AIF、Bax表达明显少于去卵巢组;Bcl-2在App17肽实验组的表达明显高于去卵巢组。TUNEL结果表明App17肽实验组凋亡细胞明显少于去卵巢组。结论:雌激素缺乏引起去卵巢大鼠海马和皮层神经细胞凋亡相关蛋白改变和出现凋亡细胞,App17肽具有明显的防治作用。     

卵泡刺激素受体(FSHR32-44)肽疫苗对雄性小鼠生殖器官影响

目的探讨FSHR32-44肽疫苗对雄性小鼠的生殖器官及机能影响。方法 Balb/c雄性小鼠随机分FSHR32-44(20μg)组、FSHR32-44(80μg)组、FSHR140蛋白组及PBS组(对照组),用竞争性RIA法检测血睾酮水平、HE染色观察睾丸及附睾组织病理改变、硝酸镧示踪法观察血睾屏障的超微结构变化。结果 FSHR32-44(20μg)组、FSHR32-44(80μg)组、FSHR140蛋白组及PBS组(对照组)的血睾酮水平分别为(2.65±0.34)%、(2.63±0.25)%、(2.4±0.56)%及(2.7±0.28)%,肽组与对照组比较,睾酮水平变化无统计学差异(P>0.05);蛋白组与对照组比较,睾酮水平下降(P<0.05)。光镜下肽组及蛋白组中的睾丸及附睾精子数减少,但蛋白组中睾丸的精原细胞出现水肿及点状坏死;电镜下肽组的血睾屏障无损伤。结论 FSHR32-44肽疫苗免疫小鼠后,无论低剂量还是高剂量对生殖器官及性激素不产生任何影响。     

CpG ODN对ZP~(121-140)表位合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响

目的:探讨CpG ODN对透明带(四)抗原表位ZP~(121-140)合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应影响.方法:应用人工合成ZP2~(121-140)表位肽,与20μg CpG ODN或等量完全弗氏佐剂(CFA)混悬后左胫前肌免疫雌性BALB/c小鼠,初次免疫后2、4、6周各加强免疫一次,共免疫四次.在每次加强免疫前和末次免疫后两周断尾取血,分离血清,分析特异性lgG抗体及非特异性细胞因子IFN-γ、TNF-Ⅱ,IL-10水平;收集小鼠阴道冲洗液,离心取上清,分析特异性IgA抗体水平.免疫小鼠生育实验结束后,取卵巢组织行病理学分析.结果:CpG ODN组诱导的特异性IgG和IgA水平较CFA组有增高趋势,但无显著性差异(P＞O.05).CpG ODN组诱导的非特异性IFN-γ和TNF-水平明显高于CFA组(P＜0.05);而CpG ODN组诱导的IL-10水平显著低于CFA 组(P＜0.05).两种佐剂对小鼠的受孕率影响没有显著性差异,但CpG ODN组孕鼠每胎产仔数明显低于CFA组(P＜O.05).病理学分析显示实验小鼠卵巢组织无病理性变化.结论:CpG ODN对Zp~(121-140)合成肽诱导的免疫应答和免疫避孕效应略优于CFA,更适合用于避孕疫苗佐剂研究.     

Effect of peptide seals specific to CD59 on the expression of apoptosis-related genes in HeLa cells.]

AIM: To study the effect of peptide seals specific to CD59 on the expression of apoptosis-related survivin, caspase-3 and bax in HeLa cells and investigate the mechanism of peptide seals specific to CD59 in inducing apoptosis of HeLa cells. METHODS: The peptide seals specific to CD59 were put into HeLa cells and HeLa cells with CD59-transfected gene, respectively. After 24 hours of interaction, the inhibitory ratio of cell proliferation was measured by MTT and the expression of survivin, caspase-3 and bax was detected by immunohistochemistry. RESULTS: The inhibitory ratio of HeLa cells with CD59-transfected gene+peptide seal group was higher than that of HeLa cells+peptide seal group. There was a significant difference in depressing the proliferation between two groups (P<0.01). Compared with HeLa cells+peptide seal group, the survivin expression of HeLa cells with CD59-transfected gene+peptide seal group was decreased (P<0.05) while caspase-3 expression was increased (P<0.05). There was no significant difference in the expression of bax in four groups. CONCLUSION: The peptide seal specific to CD59 can down-regulate the expression of survivin, activate caspase-3 and enhance the apoptosis of HeLa cells.     

Immunization with a synthetic peptide conjugate derived from the N-terminal sequence of either the beta-chain of haemoglobin or the immunosuppressive protein (reOLT 4) reduces the litter size of pregnant rats

A synthetic peptide conjugate based on the N-terminal sequence of a 10 000 MW immunosuppressive serum protein (reOLT 4) was used to immunize female Lewis rats prior to mating, in order to determine whether blocking this protein had an effect on pregnancy. The N-terminal sequence of (reOLT 4) has close sequence homology to the beta-chain of rat haemoglobin so a peptide conjugate based on the N-terminal sequence of this protein was also used to immunize female Lewis rats. Controls included animals that were not immunized and animals that received the peptide carrier, diphtheria toxoid (DT). No statistical differences were found in gestation time or litter sizes in these groups. Differences were, however, evident between these groups and animals that received DT-(reOLT 4) (group 4) or the DT-beta-chain haemoglobin (group 5). There were no statistical differences in litter size or gestation time for group 4 when compared with group 5. Enzyme-linked immunosorbent assay and dot-blot analysis revealed that rats from both groups also had strong responses against DT, the peptide conjugate they were immunized with and the corresponding full-length protein. In both cases, animals from group 4 and group 5 had weak responses to the peptide that they did not receive, together with lower erythrocyte counts and haematocrits, and elevated heart to body weight ratios. Additionally, antibody purified on a (reOLT 4) immunoaffinity column was capable of binding to rat erythrocytes. A second investigation comparing anaemia prior to fertilization and maintained anaemia over the gestation period revealed that only the latter was capable of decreasing litter size to the same degree as obtained for groups 4 and 5. We conclude that for groups 4 and 5 it is the autoimmune effect of continual anaemia over the gestation period, mediated by autoantibodies, which results in the observed lower litter size.     

Induction of polyclonal antibodies to the S1 subunit of pertussis toxin by synthetic peptides coupled to PPD: effect of conjugation method, adjuvant, priming and animal species.

Two peptides, designated L and K, covering a sequence near the NH-terminal end of the S1 subunit of pertussis toxin (PT) were conjugated to the PPD (purified protein derivative) of M. tuberculosis by either glutaraldehyde (GLUT) or succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylate (SMCC) and N-succinimidyl 3-(2-pyridyldithio) propionate (SPDP) and injected into groups of mice and guinea pigs. Initially, the effect of priming the animals with BCG vaccine and the use of aluminium hydroxide as adjuvant for the anti-peptide antibody response was studied. The group of BCG-primed mice immunized with adsorbed peptide conjugates showed the highest anti-peptide conjugate antibody response. Based on this finding, groups of BCG-primed mice were immunized four times with either adsorbed peptide L-GLUT, peptide L-SMCC/SPDP or peptide K-SMCC/SPDP conjugates and the fine peptide specificity as well as the PT and S1 cross-reactivity was investigated in ELISA. Mice immunized with peptide L-GLUT showed a significant antibody response to the homologous conjugate, only, whereas the group injected with the peptide L-SMCC/SPDP conjugate gave a significant response to both peptide K and L conjugated by the SMCC-SPDP method. Likewise, mice immunized with the peptide K-SMCC/SPDP conjugate reacted with the homologous and peptide L-SMCC/SPDP conjugate, although only the response to the former conjugate was significantly greater than the response to PPD. All groups showed a strong anti-PPD response. The anti-PT/S1 cross-reactivity of the antisera varied considerably within each group but was found to be highest in the peptide L-GLUT-immunized animals. The results of the present study not only stress the importance of BCG priming and use of aluminium hydroxide adjuvants for the immunogenicity of the peptides in question but also point to the specificity of the conjugation methods employed as low cross-reactivity between the anti-peptide L-GLUT and L-SMCC/SPDP antisera was noted. Moreover, it appeared that the choice of conjugation method may have an effect on the ability of the peptide conjugates to induce an antibody response cross-reacting with the native protein.     

CART肽抑制缺血再灌注小鼠脑组织水通道蛋白4表达并减轻脑水肿

目的:研究可卡因及苯丙胺调节转录物(CART)肽对小鼠脑缺血再灌注急性期脑水肿的作用,并探讨其作用机制。方法:清洁级雄性ICR小鼠随机分为假手术(sham)组、大脑中动脉栓塞(MCAO)组和CART组,复制小鼠MCAO模型以模拟局灶性脑缺血再灌注损伤病理过程,TTC染色法计算脑梗死体积及脑水肿体积,干湿重法测定脑组织中水含量,通过检测伊文思蓝含量判断血脑屏障(BBB)的完整程度,免疫荧光和Western blot观察脑组织水通道蛋白4(AQP-4)的表达变化。结果:小鼠MCAO后24 h,CART肽处理组小鼠脑梗死体积和脑水肿体积均明显小于MCAO组(P0.01),脑组织水含量亦明显低于MCAO组(P0.01)。伊文思蓝测定表明,CART肽能够有效维持血脑屏障的完整性。免疫荧光和Western blot结果显示,MCAO小鼠脑组织中AQP-4表达明显升高,而CART处理明显抑制脑缺血再灌注诱导的AQP-4表达(P0.05)。结论:CART肽可减轻脑缺血再灌注损伤小鼠急性期脑水肿,维持血脑屏障完整性,其作用机制可能与抑制脑组织AQP-4表达水平密切相关。