电镜样品取材的意义与应用

电子显微镜(简称电镜)在现代生物医学研究中起着越来越重要的作用,电镜技术是医学超微结构研究的重要手段[1].生物医学研究的对象多种多样,有组织、细胞、微生物及生物大分子等.而生物样品制备的特殊性使得制样过程耗时长而复杂,对取材、固定、脱水、包埋、切片等一系列程序提出了严格的要求,每一步都要特别认真、细致,一环紧扣一环,其中任何一个环节失误都会造成制样失败.取材、固定是电镜标本制作的第一步,而且需要送样者(大多不是电镜专业人员)亲自操作,出现问题最多,如果做不好,后续程序将是徒劳.为提高超微结构研究的质量,现就送样中存在的一些问题及我室的体会总结如下,供有关研究者参考.     

实验大鼠视网膜光镜电镜样品取材与制备方法的改进

成年健康Wistar大鼠由山东大学实验动物中心提供，体重约200g，雌雄兼用。麻醉剂为1％戊巴比妥，冲洗液为0．9％NaCl，每200ml加0．1g肝素，缓冲液为pH7．4、0．1％mol/L的磷酸缓冲液，固定液为4％戊二醛，以及透射电镜半薄切片及超微切片常规试剂系列。Wiatar大鼠全麻后，开胸暴露心脏，将0．9％NaCl冲洗液用输液器针头穿刺入左心室，剪破右心房放血，冲     

透射电镜样品取材应注意的问题

医学超微结构是一个不断被刷新的形态学领域,透射式电子显微镜技术被广泛地应用于生物医学的研究中。生物医学的研究对象很多,有组织、细胞、微生物及生物大分子等等,在做这些电镜样品超薄切片前的制样过程时间长而复杂,尤其对取材有严格的要求。标本的质量好坏,直接影响到观察和超微病理诊断的正确性,值得格外重视,因此对标本制备的每一个步骤都要重视。而标本的收集则为制备工作的第一步,它的好坏直接影响到标本制备的后续步骤与最后结果。在实际工作中有些十分珍贵的样品,由于固定原因,样品大小不符和规定或部位不准确,造成超薄切片的定…     

福尔马林固定肾穿刺标本的电镜制备方法

肾穿刺话检电镜样品制备近几年已在我国展开，它有助于临床医生准确诊断各种类型的肾脏疾病。已往肾穿标本都采用3％戊二醛磷酸缓冲固定液(PH7．4)固定，这种固定液是制各电镜样品专用固定液，它配制方法要求甚严，保存期很短且费用较高，一般医院都不具备此固定试剂。而福尔马林固定液各医院都配备，为了配合临床电镜对肾穿刺疾病的诊断，方便医生快速取材固定，更     

电镜制样过程中取材时间对超微结构保存的影响

The ultrastructural change of rat liver, which was not immediately fixed after separation from the animal, was observed under electron microscope. The results showed that the ultrastructure of hepatocytes still satisfied the needs for diagnostic electron microscopy if the isolated livers were soaked in normal saline for 30 minutes, at room temperature, or placed in 4 degrees C refrigerator for 60 minutes, then they were fixed. After the isolated samples were put at room temperature for over 30 minutes, ultrastructure of hepatocytes were damaged so severely as to lose value for observation under electron microscope.     

女性淋病检验取材方法探讨

为了探讨女性淋病的检验取材方法,自2002年1月~2006年1月在对部分女性淋病患者的检验取材中,随机选择部分患者进行宫颈取材的同时,也进行尿道取材送检,并将其结果进行对照,现报告如下:1临床资料所选的38例患者均为女性,来自本院性病科门诊,为随机抽取。患者年龄18~58岁,平均38岁;病程10天~10个月,平均2周。所选患者均有不洁性生活史,具有程度不等的临床症状,主要表现为外阴瘙痒、白带异常及尿道内的不适、发痒、刺痛或烧灼感;外阴部位轻度红肿,伴有少量稀薄浆液性或黏液脓性分泌物。2取材方法2.1子宫颈取材采标本时嘱患者取截石位,将窥阴器…     

电镜常规样品制备技术的改进

常规透射电镜制样(超薄切片术)是电镜术中最繁重而又重要的工作,是电镜细胞化学等特殊制样技术的基础,制样效果将直接影响超微结构研究结果的可靠性和重复性。因此,我室近年来更注意在现有条件下改进和提高常规技术,现总结如下。 1.前固定     

浅表真菌取材的探讨

真菌是指具有真正细胞核和细胞器，不含叶绿素，以寄生或腐生方式吸取养料，能进行有性和（或）无性繁殖，具有纤维素（或其他葡萄糖）或几丁质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。真菌侵犯人体常继发予其他疾患，如恶性肿瘤、TB、糖尿病等慢性消耗性疾病。大剂量X线照射、免疫抑制剂等导致免疫功能和抵抗力低下；大量应用肾上腺皮质激素的患者。其炎症反应多受抑制，也容易感染真菌。另外器官移植、导管插管、放疗等应用引起局部组织损伤，为真菌的入侵提供了条件。近年来由于免疫缺陷病毒感染者的不断出现，使原来不致病的真菌转为致病菌，因此，真菌感染已经成为一个日益严峻的问题。真菌分为浅表部和深部真菌，浅表真菌主要指侵犯机体皮肤，寄生和腐生于表皮，     

原位生理压灌注固定技术及应用

应用自制全封闭式压力表指示的生理压灌注固定装置,对800余只实验动物进行原位生理压灌注固定,标本通过扫描和透射电镜观察,效果良好,完整地保存生物活体状态下的细胞及组织微细结构。该装置的优点是:固定液注入完全封闭式的装置内,减少了对人体毒害作用。装置简单,操作方便,既能有效地控制压力恒定,又能控制流体的流速和流量。从而能在保持“生理血压”的状态下,将全身各部的不同组织成份迅速均匀地固定在生体血循环尚未停止时。     

梯级取材对肺结核的诊断意义

目的研讨梯级取材对肺结核的诊断意义。方法对326例肺结核患者直接痰涂片→集菌法→经纤支镜(纤维支气管镜,下同)刷检和钳检梯级取材方法检出菌阳率(抗酸杆菌的阳性率,下同)。结果痰涂片菌阳率为31.3%,痰涂片+集菌法+刷检+钳检的菌阳性率提高至72.1%。结论梯级取材可提高肺结核的菌阳率,对指导肺结核的诊断、治疗、病人规范化管理有至关重要的意义,且可减轻患者负担及避免医疗资源浪费。     

浅谈透射电镜生物样品取材实验课的体会

透射电镜生物样品的取材是电镜样品制备过程中的关键步骤之一,并由实验者亲自动手操作完成。作者根据多年电镜实验课的教学经验,就指导学生取材的正确方法及培养学生的动手能力,谈谈实验教学中的一些方法和体会。     

用单宁酸块染增加长时间醛类固定的电镜样品的反差

用单宁酸块染能明显增加经醛类固定液较长时间固定的电镜样品反差,使超薄切片的组织结构细节可见度明显提高。     

网状纤维的银染色电镜技术

本文采用银染色组织化学技术，对组织内的网状纤维进行电镜下定位技术的探讨，结果看到网状纤维上有呈高电子密度，均匀一致的阳性银染蛋白颗粒分布，同时看到网状纤维周围的组织细胞超微结构保存良好。     

一种改良的免疫电镜倒扣包埋技术

一种改良的免疫电镜倒扣包埋技术高美钦福建医科大学病理解剖学教研室（福州３５０００４）关键词包埋技术；免疫电镜在生物医学电镜技术中，按需要采取各种方式的包埋方法，如胶囊常规包埋法、定向包埋法和倒扣包埋法等等。在包埋前免疫电镜技术中，需应用倒扣包埋法，但...     

标志酶的电镜细胞化学技术探讨

目的 探讨电镜标志酶细胞化学的技术关键及标准化操作.方法 用相同的操作步骤和方法,对新西兰兔肝组织及血液样品进行12种标志酶的超微细胞化学实验,于透射电镜下观察酶的活性定位和变化.结果 建立了一套统一和实用的酶细胞化学操作程序和方法,12种标志酶的活性反应产物准确定位于相应的细胞超微结构.结论 固定和孵育是关键性步骤,其中固定剂的浓度和固定时间以及孵育液的配制质量尤为重要.操作标准化有利于提高多种酶检测的成功率和实验结果的可重复性.     

胶体金免疫电镜技术及其应用

免疫胶体金技术是继三大标记技术后对免疫标记技术的又一大贡献，近年来发展迅速，应用范围较广。胶体金免疫电镜技术是研究细菌、病毒、肿瘤和自身免疫疾病的主要方法之一。本文综述了胶体金免疫电镜技术的原理、特点、应用及研究进展。