2,4—二硝基氟苯柱前衍生化反相快速HPLC测定核糖霉素

本文选用２，４－二硝基氟苯柱前衍生化，二极管阵列紫外检测器检测，建立了核糖霉素及杂质新霉胺的反相快速ＨＰＬＣ测定方法，按ＵＳＰ（ＸＸⅡ）版附录分析方法评价的要求，对本方法的重现性，灵敏度、准确度、线性范围等指标作考察。结果满意。因采用高效细颗粒短进行分离，整个分析时间于５ｍｉｎ内，实现了高效快速测定。运用所建立的分离测定方法，对硫酸核糖霉素原料药及注射液中核糖霉素及霉胺的含量分别进行了测定。     

反相快速HPLC测定核糖霉素方法的研究

本文选用３，５－二硝基苯甲酰氯作衍生化试剂，柱前衍生，采用二极管阵列紫外检测器检测，研究并建立了核糖霉素及杂质新霉胺的反相快速ＨＰＬＣ测定方法。采用高效细颗粒短柱进行分离，整个分析时间少于５ｍｉｎ，实现了高效快速测定。     

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定硫酸新霉素的含量

目的建立测定硫酸新霉素含量的柱前衍生化反相高效液相色谱法。方法采用SHIMADZU VP-ODS(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱,以甲醇-水(40∶60)(含0.2 mol/L醋酸和0.013 mol/L庚烷磺酸钠)为流动相,检测波长为380 nm。结果新霉素在10.00~65.97μg/mL范围内线性关系良好(r=0.998 9),方法精密度RSD=1.1%。结论此法简便、快速,可作为硫酸新霉素质量控制方法。     

HPLC柱前衍生法测定妥布霉素

方法 对妥布霉素HPLC测定方法进行了研究。目 的 选用2,4- 二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生化,以Agilent Hypersil ODS为色谱柱,0.25%三羟甲基氨基甲烷溶液-乙腈-0.5mol·L-1硫酸溶液(40∶59∶1)为流动相,流速为1.2ml·min -1,检测波长365nm。结果 在10～100μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,r＝0.9999。平均回收率为100.9%,RSD为1.5%。结论 本方法简便准确,重 现性好,可用于妥布霉素的质量控制。     

柱前衍生化HPLC测定大鼠血浆中的盐酸美金刚胺

目的 建立测定大鼠血浆中盐酸美金刚胺浓度的方法.方法 采用柱前衍生化HPLC-UV法,色谱柱为Luna C_(18)柱(150 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-三乙胺(70:30:0.5,磷酸调pH7),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为225nm;以盐酸金刚烷胺为内标,采用液-液萃取法,经衍生化后进样测定.结果 大鼠血浆中的内源性成分对美金刚胺的测定无干扰;美金刚胺0.14～9.20μg·mL~(-1)与峰面积线性关系良好(r=0.9950),低、中、高浓度样品的平均提取同收率分别为83.46%、80.34%、82.77%,平均方法回收率分别为112.01%、99.96%、99.10%,日内RSD分别为10.24%、8.97%、6.94%,日间RSD分别为12.10%、8.77%、4.60%.结论 所建方法灵敏、准确,可为盐酸美金刚胺的体内研究提供参考.     

柱前衍生化HPLC法测定人纤维蛋白原中精氨酸的含量

目的：建立人纤维蛋白原中精氨酸的含量测定方法。方法：以丙氨酸为内标，2，4-二硝基氟苯（DN—FB）为柱前衍生刺，50％乙腈-0．05mol／L醋酸盐缓冲液（35：65）为流动相，紫外362nm处检测。结果：精氨酸在0.16～0．80mg／mL浓度范围内线性关系良好（r=0．9998），平均空白加样回收率为102．4％，RSD为1.4％。结论：方法准确、简便，费用低，可用于人纤维蛋白原中精氨酸含量的控制。     

柱前衍生化HPLC测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量

目的:建立HPLC法测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量.方法:采用Shim-pack CLC-ODS色谱柱,柱前衍生化,流动相A为50%乙腈,流动相B为醋酸盐缓冲液;检测波长362 nm;用外标法检测.结果:本色谱条件下2种氨基酸衍生物能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰.平均回收率:盐酸精氨酸为102.8%,RSD为0.83%;亮氨酸为103.8%,RSD为0.92%.结论:本方法准确,方便,费用低,可用于人纤维蛋白粘合剂中2种氨基酸含量的控制.     

柱前衍生化-HPLC测定田参氨基酸胶囊中10种氨基酸的含量

目的　建立田参氨基酸胶囊中1 0种氨基酸的含量测定方法。方法　以2 ,4 -二硝基氟苯(FDNB)为衍生化试剂,将胶囊中的氨基酸定量衍生化,用RP -HPLC测定其含量。衍生化条件为在碱性溶液中6 0℃反应1h。色谱条件为ODS柱,甲醇-醋酸盐缓冲液梯度洗脱,36 0nm处检测。结果　5 0min内氨基酸均可较好地分离。衍生化产物性质稳定;1 0种氨基酸在各自浓度范围内线性关系良好(r≥0 . 9998) ,平均空白加样回收率均为1 0 0 .1 %～1 0 1 . 1 %,RSD =0 . 70 %～1 . 0 8%;日内及日间精密度均小于1 .9%。结论　方法准确,简便,费用低,可用于田参氨基酸胶囊的质量控制。     

反相高效液相色谱-柱前衍生化法测定大青叶中氨基酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定大青叶中精氨酸和脯氨酸含量的方法。方法:采用2,4—二硝基氟苯柱前衍生化,将氨基酸在碱性条件下衍生后直接进样测定;色谱柱为KromasilC18,流动相为醋酸钠缓冲溶液(pH=6.4)-乙腈(850∶150),检测波长为360nm,外标法计算含量。结果:精氨酸和脯氨酸进样量分别在0.627μg～5.016μg(r=0.9996)、0.874μg～7.000μg(r=0.9995)范围内线性关系良好;平均回收率均为98.2%(RSD=2.3%、2.2%)。结论:本法简便、准确、可靠,适用于大青叶中氨基酸的含量测定。     

柱前衍生化HPLC测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量星

目的：建立HPLC法测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量。方法：采用Shim—pack CLC—ODS色谱柱,柱前衍生化,流动相A为50％乙腈,流动相B为醋酸盐缓冲液;检测波长362nm;用外标法检测。结果：本色谱条件下2种氨基酸衍生物能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰。平均回收率：盐酸精氨酸为102．8％,RSD为0．83％;亮氨酸为103．8％,RSD为0．92％。结论：本方法准确,方便,费用低,可用于人纤维蛋白粘合剂中2种氨基酸含量的控制。     

柱前衍生化HPLC法测定积雪草及三金片中积雪草苷的含量

目的　建立积雪草中积雪草苷的柱前衍生化高效液相色谱测定法,并用该法测定积雪草和三金片中积雪草苷的含量。方法　以吡啶—苯甲酰氯为衍生化试剂,对积雪草苷分子中的羟基进行苯甲酰化后,采用RP-HPLC法测定。色谱柱：Spherisorb ODS C₁₈柱;流动相：甲醇—四氢呋喃—水(90∶4∶6,0.1%三乙胺);柱温：25℃;流速：0.8 ml.min^-1;检测波长：235 nm;内标物：V_D3。结果　积雪草苷0.396～3.960 μg与峰面积比呈线性关系,相关系数为0.9985。用此法对不同产地的积雪草和三金片中积雪草苷进行测定,结果积雪草中积雪草苷的平均回收率为99.6%,RSD为2.3%(n=6);三金片中积雪草苷的平均回收率为99.2%,RSD为2.7%(n=6)。结论　此法准确、灵敏度高、重现性好,为中药积雪草和中成药三金片的质量评价提供了科学依据。     

国产卡莫氟在犬体内的药动学及片剂绝对生物利用度研究

按随机交叉实验设计法,用反相高效液相色谱法测定血清药物浓度。对5只犬po和iv卡莫氟(10mg/kg)的药动学及其片剂绝对生物利用度进行了研究。结果表明,静注给药的药时曲线符合二室开放模型,T_(1/2α)=1.67min,T_(1/2β)=34.55min,Vc=0.2525 L/kg,Cl=0.3205 L/kg·h~(-1),AUC_(iv)=1.9375 mmol·min/L;口服卡莫氟片的药时曲线符合一室开放模型,T_(1/2ka)=12.13min,T_(1/2ke)=38.51min,T_(mix)=28.46min,C_(max)=8.1396×10~(-3)mmol/L,AUC_(po)=1.5856 mmol·min/L;由AUC_(iv)和AUC_(po)算得绝对生物利用度F=82.14%。     

高效液相色谱法研究国内外制霉菌素的组成

本文用高效液相色谱法分析了国内外12批制霉菌素,其中包括中国和国际标准品。固定相为10 μm ODS,流动相为甲醇—水(68∶32),流速1.3 ml/min,紫外检测波长为304 nm。制霉菌素可分得8～10个色谱峰。分析结果表明中国制霉菌素的主要组分及其相对含量与外国制霉菌素不同。以HPLC法进行分离制备,收集后的单一组分按中国药典一九七七年版进行初步的效价测定,其中一个主要组分的效价比中国制霉菌素标准品高一倍多。     

(2S,4S)─1,2,4,5─戊四醇的合成

以D-（＋）-木糖为手性源有效地合成光学活性的（2S，4S）－1，2，4，5-戊四醇（1）。     

三氧化铬——硫酸氧化法制备1,3—二氯丙酮

以三氧化铬-硫酸为氧化剂,将1,3-二氯-2-丙醇(2)转化为1,3-二氯丙酮(1),产率83.6％。     

1—（1H—1，2，4—三唑—1—基）—2—（2，4—二氟苯基）—3—取代—2—丙醇的合成及抗真菌活性研究（Ⅱ）

基于计算机辅助药物设计系统及靶酶模建的需要。根据氮唑类抗真菌药物的构效关系和作用机理。设计合成了15个1-（1H-1,2,4-三唑-1-基）-2-（2,4-二氟苯基）-3-取代-2-丙醇类化合物,均为首次报道。运用微量注偌倍比稀释法对8种常见致病真菌进行外抑菌试验。化合物Ⅳg具有较强的体外抗真菌活性。     

SPECTROPHOTOMETRIC ASSAY FOR ACETANILIDE 4-HYDROXYLASE,AN ESTIMATE OF CYP1A2 ENZYME ACTIVITY

Measurement of cell proliferation in the liver is usually performedby evaluating randomly distributed measurement fields(RADI).This ignores the fact that liver lobules consist of different cell populations and increases the risk of overlooking biologically relevant effects. Therefore,the lobule-dependent zonal measurement (LZM) method was developed to guarantee the independent evaluation of the hepatic zones in lobules of comparable size. To prove this concept, routinely performed studies on cell proliferation were examined in parallel for both methods. Phenobarbital (PB), butylated hydroxytoluene (BHT), and four agrochemicals (AChI–IV)were given for 1, 6, and 13 weeks to 8–12-week-old Wistarrats via the diet. According to the high dose and dosing regimen employed in the life span bioassay, the animals received the test substance at a maximum tolerated dose. Hepatocellular proliferation studies were performed by subcutaneously implanting osmotic minipumps to continuously deliver 5-bromo-2-deoxiuridine for 7 d. Inanadditional study, phenacetin(PH) was fed for 4 weeks to gain information about the optimal Bromodeoxyuridine (BrdU) application time (2 h, 3 d, and 7 d) for liver. For BHT and AChII, bothmethods described nearly the same proliferation pattern. In the cases of AChIII and IV, the RADI evaluation evokes the impression of a transient increase of proliferation after 1 week of application. In contrast, the zonal-based measurement additionally showed a strong sustained effect in zone 3 (perivenous) even after 13 weeks, an effect which can be clearly correlated to the development of tumors. For PB, ACh I, and PH, a significantly higher number of misleading outliers was observed by using RADI, compared to LZM. The data show that the risk of overlooking effects increases with a decrease in positively labeled cells. The lobule-dependent measurement strategy lowers the sensitivity to outliers and leads, by providing additional information on target zones, to a better correlation with tumor data. Both aspects imply a strong impact on retrospective and predictive evaluations of cell proliferationin the liver.     

衍生化法分离（2R，4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯酒石酸盐手性异构体

目的 建立衍生化法分离（2R,4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯酒石酸盐（MPFET）3种手性异构体。方法 以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（GITC）为柱前衍生化试剂,对MPFET手性异构体进行分离,并对衍生化条件进行优化。采用Venusil AQ C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱作为固定相进行分离、监测和定量。以0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH至3.6）-乙腈（60∶40）为流动相,体积流量1.5 mL/min进行等度洗脱,采用紫外检测器,检测波长266 nm;柱温30℃;进样量20 μL。结果 MPFET与2S,4S-异构体分离度为1.76。2S,4R-异构体的线性范围为1.500～8.999 μg/mL,2R,4S-异构体的线性范围为0.255 2～1.531 0 μg/mL,2S,4S-异构体的线性范围为0.250 1～75.000 0 μg/mL,MPFET的线性范围为0.250 1～600.100 0 μg/mL,回收率均在90%～108%内,RSD均不大于3.0%。结论 柱前衍生化法分离MPFET中3种手性异构体,专属性强、准确度高、灵敏度高、重复性好,可用于MPFET手性异构体的分离和质量控制。     

A Flexible Automated Dissolution Testing System for Use with Either USP Apparatus 1 or USP Apparatus 2

Pharmaceutical Research -     

喹诺酮类C－2位构效关系的分子力学和量子化学研究

利用ＣＮＤＯ／２（全略微分重叠半经验分子轨道法）和ＭＭＰＩ（适于含π体系计算的分子力学法）对喹诺酮类化合物Ｃ－２位构效关系进行了研究。结果表明：羧基与酮基的共平面性对生物活性有重要影响；羧基与酮基上氧和Ｎ１位氮上的电荷密度与生物活性有一致性关系。