三氧化二砷联合氟尿嘧啶抗人结肠癌Lovo细胞作用及其机制的研究

目的：探讨三氧化二砷(As2O3)与氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠腺癌细胞株Lovo的影响及其作用机制。方法：经不同浓度的As2O3和(或)5-FU处理Lovo细胞后，采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应；AO／EB荧光染色、DNA电泳、电镜和流式细胞术观察细胞凋亡和形态学及细胞周期变化；免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-Fu联合应用可显著增强人结肠癌细胞增殖抑制作用和诱导结肠癌细胞凋亡作用，联合用药后细胞周期分布发生改变，S期和G2／M期细胞比例下降，G0／G1。期细胞比例上升，癌细胞bcl-2基因表达明显下降，bax和Fas基因表达显著增强。结论：As2O3与5-FU联合应用具有显著协同抗大肠癌作用．其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

三氧化二砷联合5-氟尿嘧啶抗裸鼠人结肠癌移植瘤的作用及其机制的研究

目的探讨三氧化二砷（As2O3）联合5-氟尿嘧啶（5-FU）对裸鼠人结肠癌移植瘤的抗肿瘤作用、作用机制以及药物毒性.方法建立裸鼠人结肠癌模型,随机分为生理盐水组、As2O3组、5-FU组和As2O3联合5-FU组,腹腔分别注射生理盐水、As2O3、5-FU和As2O3 ＋5-FU,观察各组抑瘤作用和裸鼠一般状态的变化,并对体内标本行光镜、电镜、原位末端标记（TUNEL）、免疫组化和血常规检测.结果与单药作用相比,As2O3联合5-FU可显著抑制结肠癌移植瘤的增长,CDI值〈1,并显著增强诱导瘤细胞凋亡作用、调控凋亡相关基因（Bcl-2、Bax、Fas和FasL）表达.联合用药并未增加裸鼠肝、肾和造血系统的毒性.结论 As2O3与5-FU联合应用对结肠癌移植瘤有协同抗肿瘤作用,其机制可能与增强诱导癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因表达有关;同时联合用药对于荷瘤裸鼠的肝、肾和造血系统无明显毒性.     

三氧化二砷联合5-氟尿嘧啶抗人大肠癌细胞的实验研究

 目的 探讨三氧化二砷（As2O3）与5-氟尿嘧啶（5-Fu）联合应用对人大肠癌细胞株CoLo-320的影响及其作用机制。方法 经不同浓度的As2O3和／或5-Fu处理CoLo-320细胞后，采用MTT法测定细胞的增生抑制效应；AO／EB荧光染色、DNA电泳、电镜、流式细胞术观察细胞凋亡、形态学和细胞周期变化；免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果 与As2O3或5-Fu单药作用相比，As2O3与5-Fu联合应用可显著增强抑制CoLo-320细胞增生和诱导细胞凋亡作用，联合用药后细胞S期比例均较各单药使用时下降，癌细胞bcl-2基因表达明显下降，Bax和Fas基因表达显著增强。结论 As2O3与5-Fu联合应用具有显著协同抗大肠癌作用，其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

三氧化二砷联合热疗抗人大肠癌细胞的实验研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）注射液联合热疗对人大肠癌细胞LoVo生长的影响及其作用机制。方法：经As2O3注射液联合热疗处理LoVo细胞后采用MTY法测定细胞的增殖抑制效应;应用透射电镜、AO／EB荧光染色法、流式细胞术观察细胞凋亡和细胞周期变化。结果：与As2O3单药或单用热疗相比,As2O3与热疗联合应用后可显著增强抑制LoVo细胞增殖和诱导细胞凋亡作用,并使细胞S期比例明显降低,G0／G1期明显升高。结论：As2O3联合热疗具有协同抗大肠癌作用,其机制可能与联合应用后增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性治疗与细胞周期调控剂联合增效有关。     

三氧化二砷联合5-FU体外抗人胃癌细胞SGC-7901作用及机制的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）与5-氟尿嘧啶（5-FU）联合应用体外抗人胃癌细胞株SGC-7901的作用及其机制。方法：用不同浓度的As2O3（终浓度依次为0．1，0．5，1．0μmol／L）和（或）5-FU（终浓度50mg／L）处理SGC-7901细胞后．采用流式细胞术观察细胞凋亡和细胞周期变化：免疫细胞化学法（PV法）观察凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-FU联合应用可显著提高诱导胃癌细胞凋亡率（q=63．9608，166．1758，51．3343，P〈0．01），与空白组相比，联合用药后S期细胞所占比例下降（q=16．0743，10．8805，12．1482，P〈0．01），G0／G1期细胞比例上升（q=8．7188，9．3309，9．8534，P〈0．01），癌细胞Bcl-2基因表达明显下降（q=10.2801，17．8456，19．0086，P〈0．01）。结论：As2O3与5-FU联合应用具有协同抗胃癌作用，其机制可能与细胞周期阻滞、增强诱导胃癌细胞凋亡以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶体外对人类大肠癌细胞生长及端粒酶活性的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)注射液与氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人类大肠癌细胞的生长及其端粒酶活性的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察As2O3注射液和/或5-FU对人类大肠癌细胞株LoVo和CoLo-320生长的影响;应用端粒重复序列扩增法(TRAP)—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法检测As2O3注射液和/或5-FU处理前后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果:与As2O3或5-FU单药作用相比,As2O3与5-FU联合应用可显著增强抑制人结肠癌细胞增殖作用,并对细胞端粒酶活性具有增强抑制作用。结论:与各单药相比较,As2O3注射液联合5-FU能够明显增强抗大肠癌作用,其机制可能与增强抑制癌细胞的端粒酶活性有关。     

As2O3联合L-OHP对HepG2肝癌细胞株的体外抑制作用

目的探讨As2O3联合L-OHP对HepG2肝癌细胞株的体外抑制作用。方法采用MTT法（四唑盐比色法）动态观察As2O3联合L-OHP对HepG2肝癌细胞的生长抑制作用,并采用两药相互作用系数（CDI）来评价两药相互作用的性质;应用流式细胞术（FCM）检测凋亡率和细胞周期分布。结果 As2O3与L-OHP联合应用,对HepG2肝癌细胞株的生长抑制、诱导凋亡作用均较相应的单药增强。流式细胞直方图上可见明显的＂凋亡峰＂,且As2O3使肝癌细胞周期阻滞于G2/M期,L-OHP使细胞周期阻滞于S期和G2/M期,两药合用使细胞周期阻滞于S期和G2/M期。结论中低浓度As2O3与L-OHP联合作用具有显著的协同效益,其主要机制可能是As2O3联合L-OHP诱导肝癌细胞凋亡作用及增强细胞周期阻滞作用。     

三氧化二砷对人肝癌细胞作用的研究

目的 :应用体外培养的肝癌细胞株 (SMMC 772 1)观察砷剂 (As2 O3)的凋亡诱导作用。方法 :采用MTT法检测As2 O3对肝癌细胞增殖的影响 ,DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2 O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响。结果 :As2 O3抑制肝癌细胞的增殖并具有剂量 -时效关系 ;As2 O3可使肝癌细胞周期改变 ,与浓度有关 ,与作用时间未见明显关系 ;As2 O3诱导肝癌细胞发生凋亡 ,并与浓度、时间有关。结论 :As2 O3能抑制肝癌细胞增殖 ,改变肝癌细胞周期 ,诱导肝癌细胞凋亡     

氧化砷诱导结肠癌细胞凋亡及其分子机制

 目的　观察不同浓度As2O3对结肠癌Lovo、LS-174T细胞株生长的影响。方法　0.125～2μ mo1/L的As2O3与结肠癌细胞株Lovo、LS-174T共同孵育,观察不同浓度As2O3作用不同时间对结肠癌细胞的生长抑制作用、细胞形态学改变、DNA的变化。结果　1～2μ mol/L As2O3作用的结肠癌细胞呈凋亡特征性改变：细胞膜不发生破裂,细胞核出现核浓缩、核碎裂和凋亡小体形成;流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞DNA抽提琼脂糖凝胶电泳呈凋亡特征性条带。结论　1～2μ mol/L As2O3可诱导结肠癌细胞凋亡,肿瘤细胞凋亡与Fas、Fas-L表达有关。     

干扰素及三氧化二砷诱导淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

目的 :分析梯度浓度的干扰素 (IFN α)及三氧化二砷 (As2 O3 )对EB病毒感染的Burkitt淋巴瘤Raji细胞株和EB病毒阴性Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株直接作用。方法 :以MTT法测定梯度浓度的IFN α/As2 O3 对淋巴瘤细胞株增殖作用的影响 ,以膜联蛋白V(Annexin V)法、DNA末端标记法、流式细胞术 ,电镜观察测定IFN α对Raji、Daudi细胞株增殖周期的影响及凋亡诱导作用。结果 :低浓度IFN α对Raji、Daudi细胞增殖无明显抑制作用 ,高浓度IFN α(10 0 0 0U/mL)可显著抑制 2种细胞增殖 ,且有时间相关性。IFN α作用细胞 2 4～ 4 8h ,G0 /G1期细胞显著增多 ,S期细胞减少 ,72～ 96h细胞凋亡细胞明显增多 ,IFN α和As2 O3 有显著协同作用 ,EB病毒感染的Raji细胞对IFN α/As2 O3 的敏感性强于Daudi细胞。结论 :IFN α/As2 O3 可抑制淋巴瘤细胞增殖 ,使细胞阻滞在G0 /G1期 ,进一步诱导凋亡坏死 ,IFN α/As2 O3 作用有显著时间 ,剂量依赖性 ,对EB病毒感染的Raji细胞作用强于Daudi细胞。     

PCNA表达与肺癌细胞株凋亡的关系

 目的　探讨肺癌细胞株增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达与肺癌细胞株凋亡的关系。方法　用三氧化二砷 (As2 O3 )诱导肺癌细胞株GLC 82凋亡。运用细胞培养、MTT、流式细胞技术 (FCM )检测及逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)检测PCNA表达在细胞凋亡过程中的变化及相互关系。结果　三氧化二砷可明显抑制GLC 82细胞增殖 ,使细胞周期阻滞于G2 /M并随后凋亡 ,PCNA表达受到抑制。结论三氧化二砷诱导GLC 82凋亡过程中 ,PCNA表达受到明显抑制。对于耐药性肿瘤 ,PCNA活性的抑制可能代表一种新的化疗策略。     

靛玉红甲肟对奈达铂抗人食管癌EC-1细胞的化疗增效作用

 目的 探讨靛玉红甲肟(Indirubin-3′-monoxime,IRO)与奈达铂联合应用对人食管癌细胞株EC-1的影响及其作用机制。方法 经不同浓度的IRO和(或)奈达铂处理EC-1细胞后,用MTT法测定细胞增殖抑制效应;流式细胞术观察细胞周期变化;免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达变化。结果与IRO或奈达铂单药作用相比,IRO与奈达铂联合应用可显著增强人食管癌细胞增殖抑制作用,联合用药后细胞周期分布发生改变,G₀/G₁期细胞比例下降,G₂/M期细胞比例上升,癌细胞Bcl-2基因表达下降,Bax表达增强。结论 IRO与奈达铂联合应用具有协同抗食管癌作用,其机制可能与细胞周期调控及凋亡相关基因表达调控有关。     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的细胞分化和凋亡的研究(英文)

目的探讨三氧化二砷(As_2O_3)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在 BALB/C 裸鼠体内生长的抑制作用并探讨其机制,重点观察其对鼻咽癌细胞的分化诱导作用。方法 CSNE-1鼻咽癌细胞株接种于裸鼠体内构建移植瘤模型。腹腔注入 As_2O_3(5 mg/kg)。光镜及电镜观察移植瘤的形态学变化,TUNEL 染色计算凋亡率,应用免疫组化法检测 PCNA,p53,Bcl-2和 bax 基因的表达。结果腹腔注射 As_2O_3后,鼻咽癌 BALB/C 裸鼠移植瘤生长抑制,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。TUNEL 检查提示凋亡细胞增多;用药后野生型 p53及 bax 高表达,PCNA 低表达,Bcl-2无变化。结论 As_2O_3能诱导人低分化鼻咽裸鼠移植瘤分化和凋亡,可能与 p53及 bax 高表达相关,与 Bcl-2无关。     

As_2O_3对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素耐药性逆转作用

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素(ADM)耐药性的逆转作用和对Pgp、GSTπ表达的影响。方法以胃癌多药耐药细胞株SGC7901/ADR为靶细胞,用MTT法检测SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内药物浓度及免疫组织化学法检测细胞Pgp、GSTπ表达。结果0.4～0.8μmol/LAs2O3对耐药细胞SGC7901/ADR无明显毒性(P>0.05)。As2O3可下调Pgp、GSTπ表达,提高SGC7901/ADR细胞内ADM浓度,增加SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性。结论As2O3能够抑制SGC7901/ADR细胞Pgp、GSTπ表达,增加细胞内ADM药物浓度而部分逆转其对ADM的耐药性。     

三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)注射液对人类大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响。方法采用活细胞观察法、台盘兰拒染法和四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法,严密观察As2O3注射液对人大肠癌细胞株LoVo和CoLo-320生长的影响;应用端粒重复序列扩增法(TRAP)—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染法检测As2O3注射液处理前、后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果As2O3注射液能够显著地抑制LoVo和CoLo-320细胞株的生长,并对癌细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用,该作用呈现出一定的浓度和时间依赖性。结论As2O3注射液的确对于人大肠癌细胞株的生长具有显著的抑制作用,该作用可能与As2O3注射液能够抑制癌细胞的端粒酶活性密切相关。     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的实验研究

 MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞仪分析法观察As₂O₃对人肝癌细胞林SMMC-7721的作用.结果发现:As₂O₃可显著抑制SMMC-7721细胞的生长;经药物作用后,AO/EB染色时,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;在流式细胞仪上可见亚G_l峰;凋亡呈剂量,时间依赖性特点;As₂O₃使细胞周期阻止于G₂/M期.以上表明:As₂O₃可诱导人肝癌细胞株凋亡,可望为临床应用砷剂治疗肝癌提供实验依据.     

托瑞米芬协同顺铂对人肺癌细胞株A549的影响

目的：研究托瑞米芬（TOR）对人肺腺癌细胞系A549的毒性作用及其与顺铂（DDP）联用的协同效应,探讨肺癌综合治疗的方向。方法：用MTT显色法检测TOR及与DDP联用后对A549细胞的毒性作用,测定其吸光度（A）值。用流式细胞仪检测细胞DNA含量,Western blot法检测p21蛋白表达。结果：TOR能直接抑制A549细胞的生长,≥5μmol/L的TOR可明显增强DDP的细胞毒性作用。TOR可加强DDP对S期、G2期及M期细胞的作用,且DDP＋TOR后p21蛋白表达增加。结论：≥5μmol/L的TOR与DDP联用对A549细胞具有显著的协同抗肿瘤效应。