多重PCR扩增HBVDNA，HCVRNA和HDVRNA方法的建立

多重ＰＣＲ扩增ＨＢＶＤＮＡ，ＨＣＶＲＮＡ和ＨＤＶＲＮＡ方法的建立阎小君，肖乐义，李陕区，苏成芝，郭晏海（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；丁型肝炎病毒中图号Ｑ５２３乙型肝炎病毒（ＮＢＶ）和丙型...     

肝细胞癌和癌旁肝组织中HCVRNA正,负链的检测

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正，负链，结果显示，肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正，负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％，ＨＣＶＲＮＡ的正链和负链在肝癌和癌旁肝组织中，同时阳性的患者分别占４５．２％和３１．０％，血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性埂肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的检出率仍有５１．３％，肝组织ＨＣＶＲＮＡ与乙型肝炎     

多重PCR快速扩增血清中HBVDNA和HCVRNA

多重ＰＣＲ快速扩增血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ阎小君，肖乐义，李陕区，郭宴海，苏成芝，侯瑜，刘君，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒中图号Ｑ５２３多重ＰＣＲ是在同一ＰＣＲ体系内用多对...     

一步PCR快速扩增血清中HCVRNA

一步ＰＣＲ快速扩增血清中ＨＣＶＲＮＡ阎小君，肖乐义，李陕区，郭晏海，苏成芝，刘君，候瑜，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；丙型肝炎病毒；核糖核酸中图号Ｑ５２３．３反转录巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测丙型肝炎病毒（...     

多重PCR扩增HAVRNA，HBVDNA和HCVRNA方法的建立

多重ＰＣＲ扩增ＨＡＶＲＮＡ，ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ方法的建立阎小君，肖乐义，李陕区，苏成芝，郭宴海，刘君，侯瑜，陈远鑫（西安全军基因诊断技术应用研究所７１００３３）关键词聚合酶链反应，甲型肝炎病毒，乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒中图号Ｑ５２３．３ＨＡ...     

原发性肝癌78例血清HCVRNA和抗HCV的观察

用逆转录－聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测了７８例原发性肝癌患者清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ、抗ＨＣＶ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）免疫学标物。     

双温套式PCR法检测血清中HCVRNA

采用双温套式ＰＣＲ法检测血清ＨＣＶＲＮＡ，由通常的三温度循环改为二温度循环，节省时间，并可用２个恒温水浴锅聚代ＰＣＲ扩增仪，结果与经典法测定无差异。     

应用巢式PCR检测原发性肝癌患者血清中HCV—RNA

为了探讨原发性肝癌的发生是否与丙型肝炎病毒有关,应用巢式PCR技术和ELISA检测40例原发性肝癌患者及50例除外肝病患者血清中HCV—RNA及抗HCV抗体和乙肝二对半。结果:原发性肝癌组中,乙肝二对半阳性37例(92.5％),抗HCV阳性8例(20％),HCV—RNA阳性13例(32.5％),HCV总感染率为35.0％(14例);对照组分别为16例(40.0％),2例(4.0％)及3例(6.0％)。在3例HBV—M阴性PHC患者中,HCV—RNA阳性2例。结论:在我国PHC的发生不仅与乙肝病毒感染有关,还与丙型肝炎病毒有关。     

PCR技术在传染病病原诊断中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，最初由Mullis等于1985年首先建立，是一种在体外模拟自然DNA复制过程，用聚合酶催化物扩增核酸分子的新技术。PCR技术以其快速、简便、敏感度高、特异性强等优点，而广泛应用于分子生物学、医学、农业和法医等领域。     

湖南地区丙型肝炎病毒基因型在肝细胞癌组织中的分布

采用型特异性引物ＰＣＲ分型法对５０例肝细胞癌组织中感染的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）进行基因分型。结果显示：单独ＨＣＶⅡ型感染为６０％（３０／５０）；单独Ⅲ型感染６％（３／５０）；感染为Ⅱ＋Ⅲ型１０％（５／５０），Ⅱ＋Ⅳ型为１６％（８／５０），Ⅱ＋Ⅰ＋Ⅲ型为４％（２／５０）；Ⅰ￣Ⅳ型均阴性的病例４％（２／５０）。表明湖南地区肝细胞癌患者的ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主，并存在Ⅱ型与其它型的混合感染；少数病例可能系     

聚合酶链反应技术在丙型肝炎病毒检测中的应用

探讨聚合酶链反应技术在丙型肝炎病毒检测中的应用。对ＨＣＶ抗体阳性的献血员８８例同时检测ＰＣＲ与ＡＴＬ。结果；ＡＬＴ增高组ＰＣＲ９０％阳性，而ＡＬＴ正常组ＰＣＲ仅５１．７％阳性。说明肝细胞损伤与ＨＣＶ基因在体内存在有密切关系，ＰＣＲ的检测有助于对病情与疗铲的了解及献血员的筛选。     

应用RT—PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５’端非编码（５’ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶ ＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测定－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），和ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶ ＲＮＡ，更早地确诊丙型肝     

用高度保守区引物和套式PCR扩增丙型肝炎病毒

采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，以具有高度保守性的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ５＇端非编码区引物对，扩增１０例输血后肝炎血清，８例（８０％）阳性。并将逆转录与第一轮ＰＣＲ结合连续进行，使操作简便有效。间接证明了ＨＣＶ上海株与世界若干地区ＨＣＶ株５＇端非编码区核酸序列具有高度同源性和保守性。     

用套式RT—PCR法检测肝细胞癌中丙型肝炎病毒基因型

检测人肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ法常规检测ＨＣＣ组织和部分患者因清ＨＣＶ,再以巢工地ＨＣＶ阳性标本中５种ＨＣＶ基因型进行鉴别。地多数标本中ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ也进行了免疫互助 化和原位杂交检测。结果 ＨＣＶ组织中ＨＣＶ阳性率为５０％,与ＨＢＶ者,差异无显著性意义,两者重叠感染率３４％。在１０例血清ＨＣＶ一ＨＣＣ患者中,３例ＨＣＣ冰冻组织检出ＨＣＶ     

荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用

目的　观察荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus ,HCV )感染检测中的临床应用情况。方法　用FQ PCR检测 3 15份怀疑HCV感染的临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测抗HCV ,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平 ,了解样本中HCV RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果　 3 15份标本中有 2 2 5份HCV RNA含量高于 80拷贝·ml-1,2 5 0份抗HCV阳性 ,14 5例ALT异常 ,HCV RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性 (r =0 .682 ,P =0 .0 0 2 ) ;HCV RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性 (r =0 .92 3 ,P =0 .0 3 2 )。结论　FQ PCR技术检测HCV RNA特异性强 ,灵敏度高 ,具有良好的临床应用价值。     

丙型肝炎病毒5‘非编码区PCR产物单链构象多态性分析及序…

研究慢性肝炎病人血清，肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒５‘非编码区变异情况。方法：收集１０例慢性肝炎病人及４例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织，检测抗ＨＣＶ抗体阳性，进行ＨＣＶ５’非编码区ＲＮＡ的逆转录ＰＣＲ扩增，ＰＣＲ产物进行单链构象多态性分析，并对部分病例序列进行测定。     

肝癌和癌旁组织中HCV—RNA及其负链的研究

该研究采用ELISA法,对肝癌患者的血清检测HCV—Ab,用Nested-PCR法对患者的血清、肝癌组织和癌旁组织检测HCV-RNA和HCV-RNA负链,探讨肝细胞癌中是否存在HCV-RNA及其复制状态。对照组血清检测HCV-Ab、HCV-RNA1/17阳性。肝癌组16/31 HCV-RNA阳性;癌旁组织15例测到HCV-RNA负链,癌组织只有6例测到负链。结论:血清中抗HCV检测不能完全反映肝内是否曾有HCV感染情况。癌组织和癌旁组织均能检出HCV-RNA,说明肝癌组织中感染着丙型肝炎病毒。肝癌组织中确实存在HCV-RNA负链,说明HCV-RNA能在肝组织内不断地自我复制。     

肝癌患者肝组织中丙型肝炎病毒的基因分型

用逆转录－聚合酶链反应检测了４２例肝细胞癌患者肝组织中的丙型肝炎病毒ＲＮＡ，对１８例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用ＨＣＶ非结构区－５（ＮＳ５区）型特异性引物进一步做了ＰＣＲ分型。     

原位PCR检测肝外胆管癌组织内HCV RNA及其意义

1　材料和方法1 1　材料　 5 1例肝外胆管癌来自解放军总医院 ,常规石蜡包埋。引物位于 5′端非编码区。外引物 :上游引物 ,5′ＧＧＣ ＧＡＣＡＣＴＣＣＡＣＣＡＴＡＧＡＴＣ3′ ,下游引物 ,5′ＧＧＴＧＣＡＣＧ ＧＴＣＴＡＣＧＡＧＡＣＣＴ3′。内引物 :上游引物 ,5′ＣＴＧＴＧＡＧ ＧＡＡＣＴＡＣＴＧＴＣＴＴＣ3′ ,下游引物 ,5′ＣＣＣＴＡＴＣＡＧＧＣＡＧＴＡＣＣＡＣＡＡ 3′。探针 :5′ＡＣＡＣＣＧＧＡＡＴＴＧＣＣＡＧＧＡＣＧＡＣＣＧＧＧＴＣＣＴＴＴＣＴＴＧ3′,生物素标记。原位ＰＣＲ基因扩增仪为ＡｍｐＧｅｎｅＳｙｓｔｅ…