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相似文献
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1.
目的:探讨GnRH-A主动免疫对垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-基因表达和生物信息学特性的影响,进而研究GnRH-A的作用机理。方法:30只日本大耳白兔(Oryctolagus cuniculus)随机均分为三组,在EG-Ⅰ和EG-Ⅱ皮下注射1.0 ml(100μg/ml)GnRH-A抗原,EG-Ⅱ于20天以相同剂量加强免疫一次,对照组不做任何处理。70天颈动脉放血致死实验兔,无菌采集垂体。从兔垂体中提取总RNA,GnRHR,FSHβ-和LHβ-mRNA基因扩增、克隆和测序,实时荧光定量PCR分析mRNA基因的表达。用DNAMAN、Tmpred、SignalP、TargetP、Expasy等生物信息学分析软件和在线工具,对GnRHR序列和蛋白的理化特性、跨膜结构、信号肽及二级结构等进行分析和预测。结果:EG-Ⅰ和EG-Ⅱ的GnRHR mRNA低于对照组(P<0.01),EG-Ⅱ又低于EG-Ⅰ(P<0.05);EG-Ⅰ和EG-ⅡFSHβ-mRNA和LHβ-mRNA极显著低于对照组(P<0.01),EG-Ⅰ与EG-Ⅱ间也具有显著差异(P<0.05)。GnRHR核苷酸为1 179 bp,与NM-001082738的同源性达96%,核苷酸中含A 28.7%,C 24.9%,G 19.0%,T 27.5%。Gn-RHR的线粒体转运肽、信号肽及转运肽长度发生了明显改变。与NM-001082738的比较显示,GnRHR mRNA的核苷酸、氨基酸、分子量、脂肪指数和平均疏水性均变小,而不稳定指数、α螺旋和β折叠数均增加。结论:GnRH-A免疫可明显降低雄兔垂体GnRHR、FSHβ-和LHβ-mRNA基因的表达,而且对GnRHR的生物信息学特性具有一定的影响,加强免疫作用更明显;GnRHR是一种含有信号肽的不稳定的疏水性跨膜蛋白。  相似文献   

2.
GnRH激动剂主动免疫母羊对生殖激素分泌的作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨GnRH激动剂(GnRHa)主动免疫对绵羊生殖激素合成与分泌的作用,并深入研究GnRH-A免疫调节动物生殖功能的机理。方法:42只5~6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n=7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别于0和14天皮下注射阿拉瑞林抗原200、300和400μg;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200、300、0、7、14和21天各一次,共4次;对照组在0和14天皮下注射抗原溶媒(除不用阿拉瑞林外,其余成分和制备方法与阿拉瑞林抗原相同)2.0 ml。无菌采集不同时段的血液,分离血清。以ELISA测定血清GnRH抗体浓度,用激素检测试剂盒(ELISA)分别测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。结果:①阿拉瑞林首次免疫7天后,各实验组的抗体浓度逐渐升高,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别在28、28和35天达到峰值(P<0.05),EG-IV和EG-V则在在45天达到峰值(P<0.01),至60天时仍明显高于对照组(P<0.05)。14~60天间EG-IV和EG-V抗体浓度均高于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ(P<0.05)。②EG-Ⅰ、EG-Ⅱ的GnRH在21和28天抵谷值(P<0.05),EG-Ⅲ、EG-Ⅳ和EG-Ⅴ则在45天抵谷值(P<0.01),且以EG-Ⅴ为最低。谷值之后逐渐上升趋势,70天时达到免疫注射前水平。③实验组血清FSH浓度始终高于对照组(P<0.05)。EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ于28、28和35天达到峰值(P<0.05),而EG-IV和EG-V在60天达到高峰值(P<0.01)。④实验组绵羊血清LH呈下降趋势,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别在21、21和28天达到谷值(P<0.01),EG-Ⅳ和EG-Ⅴ在35天达到谷值(P<0.01)。35天时EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。⑤各组的血清E2含量无显著差异。结论:GnRH激动剂(阿拉瑞林)抗原主动免疫可促进GnRH抗体的生成,抑制母羊GnRH和LH的合成与分泌,增强FSH的合成与分泌,且随着注射剂量和注射次数的增加,这种作用更加明显,而对血清E2无明显影响。  相似文献   

3.
目的探讨GnRH激动剂主动免疫对绵羊腺垂体与子宫GnRHR表达及分布的影响,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 28只5~6月龄健康母绵羊(Ovis aries)随机分为4组(n=7),实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、实验Ⅱ组(EG-Ⅱ)和实验Ⅲ组(EG-Ⅲ)于0 d和14 d分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg(0 d和14 d各1次);对照组(CG)皮下注射2.0 ml药物的溶媒(0 d和14 d各1次)。各组于70 d无菌切取腺垂体和子宫。提取腺垂体总RNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测GnRHR mRNA表达的变化,Western blotting分析子宫GnRHR蛋白表达,免疫组织化学SP法染色检测GnRHR表达的变化。结果 EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ腺垂体GnRHR mRNA表达量均低于对照组,以EG-Ⅲ最小(P<0.01)。与CG相比,EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ子宫GnRHR蛋白表达水平分别减少3.46%、4.90%和24.78%(P<0.05)。子宫组织中有GnRHR分布主要见于子宫内膜细胞和子宫腺上皮细胞的胞质和胞核,EG-Ⅲ灰度值显著低于CG(P<0.05)。结论 GnRH激动剂主动免疫可以剂量依赖性地抑制垂体GnRHR mRNA和子宫组织中GnRHR蛋白的表达。GnRHR主要分布在子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞的胞核和胞质,GnRHR激动剂免疫对子宫中GnRHR的分布具有抑制作用。  相似文献   

4.
 目的 探讨GnRHago主动免疫对绵羊腺垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及生殖激素合成与释放作用,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 42只5-6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n =7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg,0d和14d各1次,共2次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg,0d、7d、14d和21d各1次,共4次;对照组皮下注射药物的溶媒,0d和14d各1次,共2次。于70d在颈动脉放血处死绵羊,无菌切取腺垂体、子宫及卵巢。用ELISA测定血清GnRH抗体浓度,以激素检测试剂盒分别测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。提取腺垂体总RNA,PCR扩增与反转录,实时荧光定量PCR(FQ-PCR),分析GnRHR、FSHR和LHR mRNA的表达。 结果 绵羊腺垂体中有丰富的RNA。特异性条带扩分别为2150 bp,1100bp和180bp左右。实验组GnRHR、FSHR和LHR mRNA值均低于对照组,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ的mRNA值低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ。实验组血清GnRH浓度逐渐降低值谷值,之后上升,70d 时达到免疫注射前水平。实验组血清FSH浓度始终高于对照组(P<0.05)。35d时EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。实验组和对照组血清E2含量无显著差异。结论 阿拉瑞林主动免疫可抑制垂体GnRHR mRNA、FSHR mRNA和LHR mRNA的表达,促进垂体合成与释放FSH,增加血清FSH含量,降低GnRH和LH浓度,对E2浓度无明显影响。增加阿拉瑞林抗原的免疫剂量和注射次数,作用更加明显。  相似文献   

5.
目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)主动免疫对幼鼠子宫发育的作用。方法 60只昆明雌鼠随机均分为四组,分别颈部皮下注射不同剂量阿拉瑞林抗原,各组均连续注射7 d。在0 d、7 d、14 d和21 d测定体重,于21 d处理小鼠,显微镜观察子宫的组织结构变化,并用Motic imagles软件测定分析图像数据。结果阿拉瑞林能明显抑制子宫的发育,且剂量越大作用越明显。EG-Ⅲ的UWT明显缩小(P<0.05);实验组EET均小于对照组(P<0.05)。EG-Ⅰ子宫腔轻度缩小;EG-Ⅱ子宫腔和腺体管腔缩小,子宫管壁明显变薄;内膜皱襞减少,上皮变薄;EG-Ⅲ子宫壁变薄,子宫腺减少,内膜细胞胞核变小,上皮变薄,胞质明显减少。结论阿拉瑞林主动免疫能显著抑制幼鼠的子宫发育,且连续重复免疫对小鼠具有毒性作用,剂量越大,作用越明显。  相似文献   

6.
研究卵泡刺激素受体与促性腺激素释放激素受体在胃癌组织中的定位、分布及共存性。方法 选取我院胃肠外科经手术和病理证实的48例胃癌患者的病理组织石蜡包块标本,采用免疫荧光双标记定位方法检测胃癌标本中FSHR及GnRHR的定位及分布。结果 FSHR和GnRHR在胃癌组织细胞胞浆中均有分布,免疫荧光反应阳性物质分布于细胞质,细胞核呈阴性反应,二者分布模式相同。结论 FSHR与GnRHR在胃癌组织中分布具有共存性,提示其可能对胃癌的病理发生机制具有重要的影响。  相似文献   

7.
目的:探讨重组GnRH六聚体-麦芽糖结合蛋白(MBP-GnRH-6)主动免疫的去势效果和对垂体GnRH受体、FSHβ和LHβ mRNA的影响.方法:7头公猪在9周龄时用重组GnRH主动免疫,放免法测血清睾酮浓度,ELISA法测抗体效价,实时荧光定量PCR分析垂体中GnRH受体、FSHβ和LHβ mRNA的变化.结果:重组MBP-GnRH-6主动免疫公猪后,血清GnRH抗体效价显著上升,且降低了外周血清睾酮浓度(P<0.05),睾丸重量也明显下降((P<0.01),组织切片显示,曲细精管仅有少数退化的精原细胞.免疫组公猪垂体中FSHβ mRNA和LHβ mRNA显著下降(P<0.05),GnRH受体mRNA与阉割公猪相比差异显著(P<0.05),但是与未阉割公猪相比差异不显著(P>0.05).结论:公猪接种重组MBP-GnRH-6能诱发免疫反应,中和内源GnRH的生物活性,降低了垂体GnRH受体、FSHβ和LHβ基因表达,且抑制睾酮的合成,从而导致性器官发育受阻.  相似文献   

8.
三种方法治疗未破裂卵泡黄素化综合征的疗效分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 比较3种方法治疗未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)疗效。方法 将34个病例56个治疗周期随机分成3个治疗组:A组(HCG组),B组(单次GnRH—a组),C组(GnRH—a+HCG组),观察3组患者的妊娠率,排卵率,并分别于HCG/达必佳注射日及排卵后7日抽取外周血测LH,P,观察各组有无差异。结果 3种治疗方法的排卵率有统计学差异(P〈0.05),C组的排卵率显著高于B组,A组。而3组的妊娠率则无明显差异(P〉0.05)。HCG/达必佳注射日3组血LH有统计学差异(P〈0.05),C组低于A组与B组,而血P值则3组之间无统计学差异(P〉0.05)。排卵后7日血P值3组之间亦有统计学差异(P〈0.05),A组高于C组,C组高于B组。结论 GnRH—a+HMG方案能有效的降低HCG注射日LH值。提高LUFS患者的排卵率,但妊娠率无明显改善。  相似文献   

9.
大鼠胃卵泡刺激素和促性腺激素释放激素受体的共定位   总被引:1,自引:0,他引:1  
我们先前的研究已经研究,大鼠消化系统广泛分布有促性腺激素释放激素(GnRH)免疫反应性上皮细胞,而且证实这些细胞同样存在GnRH mRNA的杂交信号,说明胃、肠、胰腺能自身合成GnRH。随后我们又证实大鼠下颌下腺、胰腺和胃含有GnRH的受体,说明它们又是GnRH的靶器官。  相似文献   

10.
目的 :观察脑室注射L -谷氨酸 (L -Glu)对成年雄性Wistar大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量的影响。方法 :摘取下丘脑组织 ,匀浆化 ,用RIA法检测匀浆上清液中GnRH的含量。结果 :脑室分别注射 0 0 1176、0 1176、1 176 0 μg/ 2 0 μl-1 -1L -Glu后 40分钟 ,下丘脑GnRH含量依次为 1 5 9± 0 41、0 88± 0 34、0 70± 0 42ng/ 10mg湿重 ,均显著低于盐水对照组 (P <0 .0 1) ;脑室注射 0 1176 μg/ 2 0 μl-1·-1L -Glu后 2 0、40、12 0分钟 ,下丘脑GnRH含量依次为 0 99± 0 37、0 88± 0 34、1 2 6± 0 39ng/ 10mg湿重 ,亦均显著低于盐水对照组 (P <0 .0 1)。脑室注射L -Glu对下丘脑GnRH含量的降低作用呈现剂量与时间依从关系。而脑室注射3H -Glu 2 μCi/ 2 0 μl-1·-1后 40分钟发现 ,大脑、小脑、垂体、下丘脑内侧基底部 (MBH)和视前区 (POA) 5个不同部位脑组织中以MBH对3H -Glu的摄取量最大 (10 6 9 82± 490 33cpm/ 10mg湿重 )。结论 :L -Glu可能参与了大鼠下丘脑GnRH神经元功能活动的调节。  相似文献   

11.
目的 观察促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合腹腔镜手术治疗子宫内膜异位症(EMT)疗效及对TRPV1、NGF、BK/BKB1R、PGF2α水平的影响.方法 120例EMT患者随机分为对照组和观察组,每组60例.两组均行腹腔镜保守性手术,对照组术后不给予GnRH-a治疗,观察组术后给予GnRH-a治疗.分别于治疗前后检测血清NGF、BK、PGF2α表达水平,并以视觉模拟评分法(VAS)评价痛经、盆腔痛、性交痛严重程度;比较两组缓解率、复发率.结果 治疗后,观察组较对照组血清NGF、BK、PGF2α水平均明显降低(P<0.05);治疗后,观察组较对照组痛经、盆腔痛、性交痛VAS评分明显降低(P<0.05);观察组较对照组术后完全缓解率均明显升高,复发率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GnRH-a联合腹腔镜治疗EMT,可能通过降低NGF、BK 、PGF2α表达水平而明显缓解患者疼痛症状,并可有效提高术后缓解率,降低复发率.  相似文献   

12.
GnRHa长方案促超排卵对胞饮突发育的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的研究Decapty1/HMG/HCG促超排卵对胞饮突发育的影响,探讨该方案高获卵率而低妊娠率的原因,为临床改善促排卵方案,提高IVF-ET的妊娠率提供理论依据。方法将雌性昆明小白鼠分为NC组和COH组,用扫描电镜(SEM)观察两组小白鼠pd1-pd6胞饮突的发育。结果两组鼠胞饮突发展模式均为发育中、完全发育和退化。NC组胞饮突在pd4评分最高(P(0.01),COH组胞饮突评分在pd3最高(P(0.01)。结论Decapty1/HMG/HCG促超排卵使种植窗提前开放,与胚胎着床不同步,这可能是影响IVF-ET妊娠率的原因。  相似文献   

13.
GnRH-A促进雌兔FSH与LH分泌及卵巢发育的作用   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的探讨GnRH类似物(GnRH-A)对FSH与LH分泌及卵巢发育的影响,及GnRH-A调节生育的机制。方法 24只雌兔均分为实验Ⅰ组(EG-Ⅰ)、Ⅱ组(EG-Ⅱ)、Ⅲ组(EG-Ⅲ)和对照组(CG)(n=6),实验组分别于颈背侧皮下注射0.1、0.1和0.05 g/L GnRH-A抗原1.0 mL,EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组于20 d加强注射1次。ELISA法测定血清FSH和LH含量。于70 d无菌切取卵巢,光镜和电镜观察。结果 40 d时EG-Ⅱ和EG-Ⅲ组血清FSH和LH浓度均达到峰值,明显高于EG-Ⅰ和CG组的FSH和LH(P<0.01),且EG-Ⅱ组高于EG-Ⅲ组(P<0.05)。EG-Ⅱ组和EG-Ⅲ组卵巢皮质变厚,卵泡纵径和横径均增大,且与剂量相关。实验组卵巢卵泡数增加,生长加快。细胞核、线粒体和线粒体嵴变大,细胞质中的皮质颗粒和分泌物增多,透明带和微绒毛变大。结论 GnRH-A能促进FSH和LH的合成及卵巢与卵泡的发育,加强注射效果更明显。  相似文献   

14.
目的探讨GnRH与其受体(GnRHR)在卵巢和子宫组织中的分布,研究GnRH-A(激动剂Alarelin)主动免疫对GnRH和GnRHR分布的影响。方法 24只日本大耳白雌兔(Oryctolagus cuniculus)随机分为4组(n=6),实验组和对照组。其中实验1组(EG-1)、实验2组(EG-2)和实验3组(EG-3)分别在兔颈背侧皮下注射1.0m(l100μg/ml、100μg/ml和50μg/ml)GnRH-A抗原,EG-2和EG-3于20d以原剂量加强注射1次,102d无菌采集垂体、卵巢和子宫。用SP法染色,图像分析技术进行定位与分析。结果卵巢和子宫均有GnRH和GnRHR阳性细胞分布,主要见于卵母细胞、卵泡细胞、子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞;GnRH-A的剂量不同,GnRH和GnRH阳性细胞的染色强度也不同,即GnRHR和GnRH的表达量不同。GnRH-A能增加GnRH和GnRH的分布与表达,EG-2的作用更为明显。结论卵巢和子宫中均有GnRH和GnRHR细胞分布,GnRH-A免疫能增强GnRH和GnRHR的表达。  相似文献   

15.
于辉 《解剖科学进展》2011,17(6):582-585,589
目的 研究卵泡刺激素受体( FSHR)和雌激素α受体(ERα)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体( GnRHR)共存.方法采用免疫组织化学定位和邻片免疫组织化学共定位方法.结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及各级导管的上皮细胞均呈FSHR和ERα免疫反应阳性;在下颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞中观察到了F...  相似文献   

16.
17.
垂体降调节天数对PCOS患者体外受精胚胎移植结局的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨多囊卵巢综合征患者IVF-ET中促性腺激素(Gn)用药前最佳降调节天数。方法将2006年3月~2008年8月在本中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)的多囊卵巢综合征患者146例,按照Gn用药前垂体降调节天数的不同分为3组:A组≤10d,B组11~14d,C组≥15d。回顾性分析比较不同垂体降调节天数对获卵数、优质胚胎率、临床妊娠率、OHSS发生率的影响。结果3组患者年龄、基础内分泌水平(E2、FSH、LH、P)、hCG注射日E2、LH、P水平及内膜厚度没有明显差异(P〉0.05);C组Gn用药天数、剂量明显高于A组、B组,(P〈0.05);3组获卵数、OHSS发生率没有明显差异(P〉0.05);受精率、优质胚胎率、A组与C组、B组与C组之间之间没有明显差异(P〉0.05),但B组与A组差异明显(P〈0.05)。临床妊娠率B组高于C组,C组高于A组但三者没有统计学意义。结论Gn用药前垂体降调节天数对妊娠结局有一定的影响,降调节天数≥15d时需增大Gn用量及天数,降调节天数11~14d时可得到较高的受精率和优质胚胎率。  相似文献   

18.
目的研究卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)在大鼠下颌下腺中的定位、分布及与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)共定位的关系。方法采用邻片免疫组织化学共定位方法。结果大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管及颗粒曲管上皮细胞均呈FSH和LH免疫反应阳性,阳性颗粒分布在细胞质内,细胞核阴性。邻片共定位结果显示颌下腺GnRHR免疫反应阳性细胞同样呈FSH免疫反应阳性,大部分的GnRHR免疫反应阳性细胞呈LH免疫反应阳性,小部分呈免疫反应阴性。两种免疫反应阳性物质均分布在细胞质内,细胞核阴性。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞、分泌管、排泄管和颗粒曲管上皮细胞可能以自分泌或旁分泌的GnRH调节自身合成与分泌FSH和LH。  相似文献   

19.
目的研究Decapty1/HMG/HCG长方案促超排卵对子宫内膜ICAM-1表达的影响,分析ICAM-1变化与血清E2、P水平之间的相关性,探讨该方案高获卵率而低妊娠率的原因,为临床改善促排卵方案,提高IVF-ET的妊娠率提供理论依据。方法将小白鼠分为NC组和COH组,用免疫组化SP法观察两组小鼠pd1~pd6子宫内膜ICAM-1蛋白的表达。用罗氏电化学发光法检测两组小鼠pd1~pd6血清E2、P的水平。结果NC组中ICAM-1于pd4表达最明显(P(0.01),COH组中ICAM-1于pd3表达最明显(P(0.01)。ICAM-1蛋白的表达高峰和血清高峰点P/E2呈正相关关系(r=0.756,P(0.01)。结论Decapty1/HMG/HCG可能通过改变血清E2、P水平,使子宫内膜种植窗开放异常,导致子宫内膜发育与胚胎发育不同步,降低子宫内膜接受性,这可能是影响IVF-ET妊娠率的重要原因。  相似文献   

20.
目的 分析促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)联合孕三烯酮对子宫内膜异位症患者泌乳素(PRL)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)及对妊娠结局的影响。方法 选取在我院2018年1月至2020年10月期间治疗子宫内膜异位症的患者110例,随机分为对照组和观察组,每组各55例。对照组治疗使用孕三烯酮胶囊进行治疗,观察组在服用孕三烯酮胶囊的同时进行GnRHa治疗。对比两组患者治疗前后黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)水平,纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)、可溶性人类白细胞抗原-G(sHLA-G)、巨噬细胞移动抑制因子(MMIF)水平、白细胞介素(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α),妊娠结局,临床疗效等。结果 治疗后两组LH、PRL、E2水平降低,且观察组LH、PRL、E2水平低于对照组,具有统计学差异(P<0.05),治疗后两组PAI-1、sHLA-G、MMIF水平降低,且观察组PAI-1、sHLA-G、MMIF水平低于对照组,具有统计学差异(P<0.05),治疗后两组IL-1β、TNF-α水平降低,且观察组IL-1β、TNF-α水平低于对...  相似文献   

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