补肾壮骨方对去卵巢骨质疏松大鼠IL-6骨表达的影响

目的 :观察补肾壮骨方对实验性骨质疏松大鼠骨密度 (BMD)、白细胞介素 6 (IL 6 )骨表达的影响 ,进一步探讨补肾壮骨方抗骨质疏松的作用机理。方法 :使用补肾壮骨方对切除卵巢的雌性成年Wistar大鼠进行不同剂量的药物治疗 ,并与正常对照组、模型组和尼尔雌醇治疗组的大鼠进行了对比 ,采用免疫组化的方法 ,检测并比较各组骨组织IL 6骨表达。结果 :补肾壮骨方各剂量组和尼尔雌醇组可使骨质疏松大鼠的股骨、腰椎和全身的骨密度明显增加 ,且骨组织中IL \|6的阳性表达明显弱于模型组 ,有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :补肾壮骨方抗骨质疏松的作用可能是通过减弱骨组织中的IL 6表达 ,增加骨密度来发挥作用的。     

补肾、健脾和补肾健脾方对尾部悬吊大鼠腰椎骨丢失的作用研究

目的:观察补肾、健脾和补肾健脾三方对模拟失重大鼠腰椎骨的影响,比较其防治作用的异同。方法:大鼠随机分为正常组、悬吊组、补肾组、健脾组和补肾健脾组共5组。除正常对照组外,余组大鼠头低位-30°尾部悬吊连续21 d,补肾、健脾和补肾健脾组大鼠从实验第1天开始依次给予补肾方、健脾方和补肾健脾方灌胃,其余各组大鼠灌服等容积的生理盐水。实验第21天处杀各组大鼠,双能X线骨密度仪测L4椎体骨密度,L4椎体丽春红三色染色观察骨形态计量学静态参数。结果:与正常组相比,悬吊组大鼠L4椎体骨密度、骨小梁面积百分率、骨小梁厚度、骨小梁数量显著降低(P<0.01),骨小梁分离度明显增高(P<0.01);与悬吊组相比,补肾组、健脾组和补肾健脾组大鼠L4椎体骨密度、骨小梁面积百分率、骨小梁厚度、骨小梁数量显著升高(P<0.01,P<0.05),骨小梁分离度明显降低(P<0.01,P<0.05);较之补肾健脾组,补肾组大鼠L4椎体骨密度降低、骨小梁厚度降低升高(P<0.05),健脾组大鼠L4椎体骨密度和骨小梁厚度均明显降低(P<0.01),补肾组和健脾组大鼠L4椎体骨小梁面积百分率降低(P<0.05)、骨小梁分离度升高(P<0.05)。结论:补肾、健脾和补肾健脾三方均对模拟失重引起的骨丢失具有防护作用,以补肾健脾方作用为优。     

补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨转换主要生化指标的影响

目的：观察补肾健脾活血方对绝经后骨质疏松症患骨转换主要生化标志物的影响。方法：选用6月龄SD雌性大鼠84只，随机分成正常组，假手术组，模型组，中药对照组，西药对照组，补肾健脾活血方大，小剂量组共7组，用卵巢切除的方法进行物造模，给药90天后检测血清E2、BGP和尿DPD等指标进行观察，结果：补肾健脾活血方能明显增加血清E2，BGP的含量，降低尿DPD含量（P＜0．01），其作用优越于西药雌激素治疗，且与剂量呈正相关。结论：补肾健脾活血方能促进骨形成，降低骨吸收。     

补肾健脾活血方对大鼠悬尾试验性骨质疏松和肌萎缩影响的实验研究

目的:探讨补肾活血健脾方对悬尾大鼠骨密度和肌萎缩的影响。方法:采用SPF级健康SD大鼠48只,随机平均分为健脾活血方高剂量组,低剂量组,造模组和空白对照组,每组12只。除空白对照组外,其余各组均选用大鼠悬尾实验作为废用性骨质疏松和肌萎缩模型的建立动物模型造模共计28 d,造模期间,补肾健脾活血方高剂量组给予补肾健脾活血方提取物2.50 g/(kg·d)灌胃,补肾健脾活血方低剂量组给予补肾健脾活血方提取物1.25 g/(kg·d)灌胃,造模组和空白对照组给予等剂量饮用水灌胃,每天1次。28 d后,全部大鼠腹腔采血后处死,取右侧股骨以及L1~4椎骨和完整分离左右侧比目鱼肌。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清成骨标记物血清骨形成蛋白2(BMP-2)、骨钙素(OCN)及破骨标记物抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)进行测定,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠股骨成骨相关基因OCN,Runx-2的表达,双能X线检测各组椎体和股骨骨密度的表达,并测量比目鱼肌湿重与横截面积测量。结果:与造模组相比,健脾活血方高剂量组大鼠右侧股骨和椎体BMD显著性增高(P<0.05);健脾活血方高剂量和低剂量组血清TRAP呈显著性降低(P<0.01,P<0.05);健脾活血方高剂量和低剂量组大鼠股骨OCN和Runx-2 mRNA的表达显著性增高(P<0.05);健脾活血方高剂量组和低剂量组左侧和右侧比目鱼肌平均湿重显著性增高(P<0.05);健脾活血方高剂量组左侧和右侧比目鱼肌I型和II型纤维横截面积显著性增高(P<0.05),健脾活血方低剂量组左侧和右侧比目鱼肌I型纤维横截面积相比造模组呈显著性增高(P<0.05)。结论:补肾活血健脾方可以防止失重引起的骨密度降低和肌萎缩,为临床用于治疗废用性骨质疏松和肌萎缩奠定了理论基础。     

尼尔雌醇对去卵巢大鼠骨组织中Ⅰ型胶原代谢及组织蛋白酶K表达的影响

目的观察尼尔雌醇对去卵巢大鼠骨组织中Ⅰ型胶原蛋白代谢及组织蛋白酶K表达的影响。方法27只雌性SD大鼠随机分成三组：假手术组为阴性对照组，模型组为阳性对照组，尼尔雌醇组给予尼尔雌醇（每日0．1mg／kg）治疗12周。测定大鼠全身骨密度和尿Ⅰ型胶原氨基束端交联肽／肌酐（NTx／Cr）比值，采用免疫组织化学法测定Ⅰ型胶原蛋白和组织蛋白酶K的含量。结果12周后，尼尔雌醇可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度（P〈0．05），且使Ⅰ型胶原的表达升高。组织蛋白酶K的表达及尿中NTx／Cr水平明显下降。结论尼尔雌醇可能通过促进大鼠骨组织中Ⅰ型胶原蛋白的合成、抑制其水解吸收．从而提高大鼠骨密度、改善骨质量。     

尼尔雌醇对去卵巢大鼠骨组织中I型胶原代谢及组织蛋白酶K表达的影响

目的观察尼尔雌醇对去卵巢大鼠骨组织中I型胶原蛋白代谢及组织蛋白酶K表达的影响。方法27只雌性SD大鼠随机分成三组:假手术组为阴性对照组,模型组为阳性对照组,尼尔雌醇组给予尼尔雌醇(每日0.1mg/kg)治疗12周。测定大鼠全身骨密度和尿I型胶原氨基末端交联肽/肌酐(NTx/Cr)比值,采用免疫组织化学法测定I型胶原蛋白和组织蛋白酶K的含量。结果12周后,尼尔雌醇可以增加去卵巢大鼠的全身骨密度(P<0.05),且使I型胶原的表达升高,组织蛋白酶K的表达及尿中NTx/Cr水平明显下降。结论尼尔雌醇可能通过促进大鼠骨组织中I型胶原蛋白的合成、抑制其水解吸收,从而提高大鼠骨密度、改善骨质量。     

补肾健脾方药对卵巢切除大鼠骨密度、骨矿含量影响的实验研究

为探讨补肾健脾方药对卵巢切除大鼠骨密度、骨矿含量的影响,取10月龄SD雌性大鼠40只,随机分为模型组、正常对照组、E3阳性对照组、中药组,每组10只,正常对照组行假手术,其余3组行完整双侧卵巢除术。术后第3天开始灌胃给药,连续用药满12周后处死,分离L3腰椎体及左侧股骨,进行骨矿密度、骨矿含量、表观骨密度测定。结果显示补肾健脾方药能明显维持切除卵巢大鼠椎体及股骨的骨矿密度、骨矿含量和表观密度。     

尼尔雌醇对长期应用吗啡雌性大鼠骨组织作用的研究

目的　了解长期应用吗啡雌性大鼠骨组织对雌激素治疗的反应。方法　选用 4 0只 3月龄SD雌性大鼠 ,随机分为 3组 :对照组 ,吗啡组 ,尼尔雌醇组。吗啡组大鼠按剂量递增的原则皮下注射盐酸吗啡 12周。三组大鼠于 12周末经股动脉放血处死。分别对各组大鼠子宫湿重、骨密度进行测定 ,对骨组织切片进行形态计量分析 ,并采用RT PCR方法检测骨组织中雌激素受体 (ER)mRNA的变化。结果　吗啡组大鼠子宫湿重、股骨远侧干骺端和胫骨近侧干骺端骨密度以及骨组织中ERmRNA表达 ,均较对照组显著下降 (P <0 .0 5 ) ;与吗啡组比较 ,尼尔雌醇治疗 3月可显著增加长期应用吗啡雌性大鼠子宫湿重、干骺端骨密度及干骺端ERmRNA表达量 (P <0 .0 5 )。组织切片观察显示 ,对照组和尼尔雌醇组骨小梁粗壮、饱满、形态结构完整 ,骨髓腔相对较小 ;吗啡组骨小梁纤细、断裂、形态结构完整性差 ,骨髓腔大小不一。计量分析显示对照组和尼尔雌醇组骨小梁面积明显大于吗啡组 (P <0 .0 5 )。结论　尼尔雌醇能够提高长期应用吗啡雌性大鼠的骨密度 ,其机制不仅与其雌激素样作用有关 ,而且与其提高ER在骨组织中的表达有关     

温阳补肾方对去卵巢大鼠骨密度及骨标志物的影响

目的探讨温阳补肾方对去卵巢大鼠骨密度及骨标志物的影响。方法取3月龄健康雌性SD大鼠40只,随机分为正常组、对照组、模型组和治疗组,每组10只。正常组大鼠行假手术,其余3组大鼠行双侧卵巢摘除术,术后30 d开始治疗,治疗组大鼠灌胃给予温阳补肾方,对照组大鼠给予戊酸雌二醇,治疗组及对照组大鼠各自按1 mL·100 g-1体质量灌胃;正常组和模型组大鼠每日按体质量给予同等剂量的生理盐水。于给药治疗12周后测定血清中骨原交联水平及Ⅰ型胶原N端前肽(PINP)、碱性磷酸酶(AKP)、钙和磷的水平;骨密度测量仪测骨密度。结果与正常组比较,模型组大鼠PINP水平明显升高,骨原交联水平下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠骨原交联水平升高,PINP水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠血清AKP水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,治疗组大鼠血清AKP水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组和正常组比较,模型组大鼠骨密度明显下降(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠骨密度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温阳补肾方能提高血清中AKP的水平,增加骨密度,抑制骨吸收,促进骨形成,具有防治骨质疏松症的作用。     

补肾健脾活血汤治疗绝经后骨质疏松症33例

目的：观察自拟补肾健脾活血汤治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效。方法：将66例绝经后骨质疏松症患者随机分为治疗组与对照组,每组33例。治疗组予补肾健脾活血汤口服,每日1剂,水煎服;对照组予复方氨基酸螯合钙胶囊（乐力）口服,每天1粒。两组疗程均为6个月。比较两组治疗前后桡骨远端1／3骨密度与临床疗效。结果：治疗组临床疗效和止痛效果明显优于对照组（P〈0．05）。两组治疗后骨密度均显著提高,治疗组骨密度提高程度优于对照组（P〈0．05）。结论：补肾健脾活血汤对绝经后骨质疏松症具有较好的止痛效果,并能有效提高骨密度。     

补肾健脾活血法对肝硬化失代偿期患者腹水再发的影响

目的观察补肾健脾活血法对肝硬化失代偿期患者腹水再发的预防效果。方法60例肝硬化失代偿期患者均是经内科治疗腹水消退后的门诊患者,随机分为补肾健脾活血组、补肾活血组、健脾活血组、对照组各15例,四组均要求低盐高蛋白清淡饮食,常规保肝治疗,补肾健脾活血组加用加味养肝五物汤合四君子汤,健脾活血组加用加味四君子汤口服,补肾活血组予以加味养肝五物汤,对照组常规保肝治疗,采用治疗后组间对照研究,比较四组腹水再发情况。疗程4W。结果补肾健脾活血组腹水再发3例,有效率80％;健脾活血组腹水再发6例,有效率60％;补肾活血组腹水再发5例,有效率66．67％,对照组腹水再发8例,有效率46．67％。结论补肾健脾活血法对肝硬化失代偿期患者腹水再发有较好地预防作用。     

补肾健脾固冲方对未成年雌性大鼠子宫内膜微环境的影响

目的:探讨补肾健脾固冲方对未成年雌性大鼠子宫内膜微环境的影响。方法:选用未成年雌性Wistar大鼠75只,随机分为空白对照组、已烯雌酚组、补肾健脾固冲高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组15只,空白对照组给予等体积去离子水,己烯雌酚组给予已烯雌酚0.067 mg·kg~(-1),补肾健脾固冲高、中、低剂量组给药剂量分别为30 g·kg~(-1)、15 g·kg~(-1)、7.5 g·kg~(-1)(以生药量计)。各组每日灌胃给药1次,均连续给药4周。末次给药后,测定血清及子宫内膜组织前列腺素E2含量、子宫内膜微血管密度以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。结果:与空白对照组比较,己烯雌酚组、补肾健脾固冲高剂量组、中剂量组血清及子宫内膜组织中前列腺素E2表达均较低,差异有统计意义(P0.05);空白对照组子宫内膜微血管密度显著低于己烯雌酚组及补肾健脾固冲高、中、低剂量组,差异均有统计学意义(P0.01),补肾健脾固冲高、低剂量组与己烯雌酚组比较,差异有统计学意义(P0.05);空白对照组子宫内膜功能层腺上皮细胞和间质细胞VEGF蛋白表达程度显著低于己烯雌酚组及补肾健脾固冲高、中、低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾健脾固冲方可以降低大鼠血清和组织中的前列腺素E2含量,增加子宫内膜微血管密度,提高VEGF蛋白表达,从而调节子宫内膜微环境。     

健脾补肾活血方及其拆方对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞凋亡的影响

目的:采用细胞培养方法,从细胞凋亡角度探讨健脾补肾活血方对再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)模型小鼠的疗效及其促进骨髓造血的作用机制。方法:复制AA小鼠模型并制备AA小鼠血清,以健脾补肾活血方及其拆方灌胃大鼠制备含中药血清,共同培养正常小鼠骨髓造血细胞,24 h后采用流式细胞仪和透射电镜观察细胞的凋亡情况。结果:AA小鼠血清能诱导正常小鼠骨髓造血细胞发生凋亡,经健脾补肾活血方及其拆方的药物血清作用后,各组小鼠骨髓造血细胞的凋亡率均下降,其中,补肾方的疗效优于健脾方和活血方,健脾补肾活血方(全方)的效果最好。电镜观察造血细胞超微结构的结果亦表明补肾方的作用较好,但以全方作用最佳。结论:健脾补肾活血方及其拆方均可不同程度地降低骨髓细胞凋亡率,可促进骨髓恢复造血功能。     

健脾补肾汤生髓健脾生血的药理作用研究

观察健脾补肾汤时正常和血虚大鼠脾淋巴细胞产生集落刺激因子(CSFs)的影响.用小鼠骨髓细胞测定正常和血虚大鼠脾条件培养液(SCM)和混合SCM中.CSFs水平.结果显示健脾补肾汤能显著促进和提升正常和血虚大鼠脾淋巴细胞产生CSFs的水平(P<0.01).结论:健脾补肾汤具有补肾生髓化血、健脾益气生血的药理作用.     

补肾活血方对激素性股骨头坏死大鼠BMSCs分化影响的研究

目的 探讨补肾活血方含药血清对激素性股骨头坏死大鼠股骨近端骨髓间充质细胞体外分化的影响.方法 建立激素性股骨头坏死大鼠模型后,提取股骨近端骨髓单个核细胞,随机分为4组培养,空白血清对照组(A组)、补肾活血方含药血清低(B组)、中(C组)、高(D组)浓度组,分别加入重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导下的骨髓间充质细胞的培养体系,观察各组的细胞形态学、细胞内ALP含量及TGF-β基因表达.结果 补肾活血方含药血清能增强rhBMP-2的活性,促进股骨近端骨髓体外成骨细胞的分化增殖(P＜0.01),促进分化中的骨髓间充质细胞表达TGF-β1 mRNA(P＜0.01).结论 补肾活血方通过增强rhBMP-2活性及TGF-β1 mRNA的表达在骨坏死的修复中起关键作用.     

补肾壮骨颗粒对原发性骨质疏松症大鼠生化指标和骨密度的影响

目的:探讨补肾壮骨类中药补肾壮骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症的预防作用.方法:用切除卵巢的方法复制大鼠骨质疏松症模型,检测灌服高、中、低3种剂量的补肾壮骨颗粒后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨密度指标的变化,并与模型组、假手术对照组和阳性对照组进行比较.结果:与模型组比较,3个剂量组的血清雌二醇(E2)和骨钙素(BGP)水平增高,尿钙/肌酐(Ca/Cr)、脱氧吡啶酚(DPD)和血清甲状旁腺素(PTH)水平降低,股骨钙(Ca)、磷(P)和骨密度亦增加.结论:补肾壮骨颗粒对去卵巢造成的大鼠骨质疏松症有明显的防治作用.     

“补肾健脾方”对早孕先兆流产患者内分泌的影响

目的：观察补肾健脾方治疗早孕先兆流产的疗效,探讨其临床内分泌作用机制。方法：75例早孕先兆流产患者作为病例组,分为3组,中药治疗组30例运用补肾健脾方治疗;中西医结合治疗组30例运用补肾健脾方、黄体酮和绒毛膜促性腺激素（HCG）治疗;西药治疗组15例运用黄体酮和HCG治疗;疗程2周,观察疗效。15例正常早孕妇女作为对照组。运用化学发光法检测病例组治疗前、后和对照组的孕酮（P）、B。HCG水平。结果：中药治疗组、中西医结合治疗组有效率均为90．0％,西药治疗组有效率为66．7％（P〈0．05）;中药治疗组、中西医结合治疗组、西药治疗组治疗前血清P、p—HCG水平明显低于对照组（P〈0．05）,治疗后各组均较治疗前明显升高（P〈0．05）,中药治疗组、西药治疗组血清P水平仍明显低于对照组（P〈0．05）,西药治疗组B—HCG水平仍明显低于对照组（P〈0．05）。结论：补肾健脾方治疗早孕先兆流产疗效显著,其机制与促进早孕期胎盘分泌HCG并使其分泌稳步上升,提高孕激素水平,改善黄体功能有关。     

益气补肾活血方对失用性骨质疏松模型大鼠BMD、BGP、BAP的影响

目的观察益气补肾活血方对失用性骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、大鼠骨钙素(BGP)、大鼠骨特异性碱性磷酸酶(BAP)等指标的影响。方法将假手术大鼠作为空白对照组,大鼠右侧股骨骨折后石膏固定的方法建立废用性骨质疏松模型,分为益气补肾活血方组、钙尔奇组、模型对照组。灌胃给药60 d后,骨密度仪检测BMD、骨矿盐(BMC),ELISA法检测血清中BGP、BAP的含量。结果益气补肾活血方组与钙尔奇组全身及股骨BMD及BMC均显著高于模型对照组(P0.05),两组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);模型对照组血清BGP最低,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05);益气补肾活血方组与钙尔奇组均能降低血清中BAP含量,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气补肾活血方能够有效防止失用性骨质疏松模型大鼠的骨量丢失,并能有效抑制骨吸收的发生,促进骨形成。     

补肾安胎方及其拆方对着床障碍小鼠胚泡着床疗效观察

目的:观察补肾安胎方及其构方中补肾组分、益气活血组分对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床位点数的影响。方法:将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组、补肾安胎组、补肾组及益气活血组。妊娠第3、4天,正常组小鼠每天2次皮下注射麻油0.12ml,其余四组皮下注射吲哚美辛油剂0.12ml,造成小鼠胚泡着床障碍的动物模型。分别收集妊娠第5、6、8天小鼠子宫,计数着床位点个数并比较其大小形态。结果:补肾安胎组小鼠着床位点数与模型组比较显著提高(P<0.05),补肾组和益气活血组小鼠着床位点数较模型组多,但无统计学意义;补肾组和益气活血组小鼠着床位点数较补肾安胎组少,但无统计学意义。第5、6天着床位点胚泡,正常组和补肾安胎组左右两侧子宫分布均匀,胚泡大;模型组胚泡分布明显不均,且比正常组及补肾安胎组小;补肾组和益气活血组胚泡分布尚均匀,比正常组及补肾安胎组稍小。妊娠第8天正常组和补肾安胎组胚泡大而且各胚泡大小均等,形状规则,胚泡间界限清楚,无相互融合现象;模型组胚泡大小形状不一,各胚泡之间发生融合;补肾组和益气活血组胚泡大小较均匀,但有融合现象。结论:集补肾和益气活血为一体的补肾安胎方可以明显提高小鼠着床位点数,改善胚泡的形态和宫内的分布。