长链非编码 RNA脑源性神经营养因子反义 RNA靶向微小 RNA-495-3p调控脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡和炎症反应

目的探讨长链非编码 RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子反义 RNA(BDNF-AS)对脂多糖( LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法该研究起止时间为 2018年 12月至 2019年 12月。用 1 mg/L的 LPS处理大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383细胞作为 LPS组;正常培养的细胞作为 Con组。将 BDNF-AS小分子干扰 RNA(si-BDNF-AS)及其阴性对照( si-NC)、微小 RNA(miR)-495-3p及其阴性对照( miR-NC)转染至 NR8383细胞中再用 1 mg/L的 LPS处理,记为 LPS+siBDNF-AS组、 LPS+si-NC组、 LPS+miR-495-3p组、 LPS+miR-NC组;将 si-BDNF-AS分别与 anti-miR-NC、anti-miR-495-3p共转染至 NR8383细胞中再用 1 mg/L的 LPS处理,记为 LPS+si-BDNF-AS+anti-miR-NC组、 LPS+si-BDNF-AS+anti-miR-495-3p组。实时荧光定量 PCR检测 lncRNA BDNF-AS和 miR-495-3p的表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素 -1β(IL-1β)肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白( Bax)表、达;荧光素酶报告实验检测 BDNF-AS对 miR-495-3p的靶向关系。结果 LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞中 BDNF-AS高表达［( 1.00±0.06)比( 3.41±0.31)］,miR-495-3p低表达［( 1.02±0.07)比( 0.47±0.04)］IL-1β［( 22.14±2.25)ng/L比( 513.20±41.22)ng/ L］、 TNF-α［(184.33±18.65)ng/L比(1 125.65±110.36)ng/L］水平升高,细胞凋亡率［(,8.11±0.81)%比( 36.22±3.21)%］升高, Bax表达水平升高, Bcl-2表达水平降低( P<0.05)。抑制 BDNF-AS表达或过表达 miR-495-3p后, IL-1β［( 526.14±46.87)ng/L比     

下调微小 RNA-425-5p靶向第 10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白调控宫颈癌细胞侵袭和迁移的分子机制

目的研究下调微小 RNA(miR)-425-5p靶向第 10号染色体同源缺失性磷酸酶 -张力蛋白( PTEN)调控宫颈癌 Caski细胞侵袭和迁移的分子机制。方法本研究起止时间为 2018年 12月至 2019年 11月。以宫颈癌 Caski细胞为探讨对象,转染 miR-425-5p抑制剂( inhibitor),PTEN siRNA和 miR-425-5p inhibitor共转染到宫颈癌 Caski细胞; MTT法测定细胞增殖, Transwell小室测定细胞侵袭和迁移;在线靶基因预测软件发现 PTEN与 miR-425-5p可能互为靶向关系,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系;蛋白质印迹法( Western blotting)测定上皮钙黏素( E-cadherin)、神经钙黏素( N-cadherin)蛋白表达。结果转染 miR-425-5p inhibitor后的宫颈癌 Caski细胞 miR-425-5p表达量降低［( 0.96±0.15)比( 0.32±0.04)］,增殖［( 0.47±0.05)比( 0.23±0.04)］、侵袭［( 95.32±7.86)比( 63.17±5.22)］及迁移［( 140.88±13.94)比( 89.64±9.57)］能力降低, E-cadherin表达上调［( 0.29±0.05)比( 0.65±     

微小RNA-146a 靶向调控Krüppel 样转录因子7对强直性脊柱炎T 细胞炎症反应及自噬的影响

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)是否通过靶向调控Krüppel样转录因子7(KLF7)的表达而影响强直性脊柱炎病人T细胞炎症反应及自噬。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测强直性脊柱炎病人T细胞与健康人T细胞中miR-146a的表达量;分别将anti-miR-NC、anti-miR-146a、pcDNA3.1、pcDNA3.1-KLF7转染至强直性脊柱炎病人T细胞;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)的水平;双荧光素酶报告实验验证miR-146a与KLF7的靶向结合关系;蛋白质印迹法(Western blotting)检测KLF7、自噬相关基因5(ATG5)、Beclin-1的表达量。结果与健康人T细胞比较,强直性脊柱炎病人T细胞中miR-146a的表达量升高［(1.00±0.08)比(2.74±0.13),t=53.54,P<0.05］;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-146a组IL-6［(823.17±14.10)ng/L比(372.31±11.03)ng/L］、IL-17［(901.00±16.29)ng/L比(428.39±12.34)ng/L、IL-23［(886.38±15.11)ng/L 比(401.61±11.75)ng/L］的水平降低(t=43.62,40.06,43.87,P<0.05),ATG5［(0.33±0.03)比(0.79±0.07)］、Beclin-1［(0.42±0.04)比(0.91±0.08)］蛋白水平升高(t=10.46,9.49,P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-146a可靶向结合KLF7;转染pcDNA3.1-KLF7可明显降低IL-6［(823.17±14.10)ng/L比(477.37±12.01)ng/L］、IL-17［(901.00±16.29)ng/L比(558.67±13.16)ng/L］、IL-23［(886.38±15.11)ng/L比(531.69±12.75)ng/L］的水平(t=32.34,28.31,31.07,P<0.05),提高ATG5［(0.32±0.03)比(0.60±0.06)］、Beclin-1［(0.44±0.04)比(0.78±0.07)］的表达水平(t=7.23,7.30,P=0.002)。结论抑制miR-146a表达可通过靶向KLF7而抑制强直性脊柱炎病人T细胞炎症反应及促进细胞自噬。     

微小 RNA-520a-5p通过靶向调控鼠双微体基因影响胶质瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的探讨微小 RNA-520a-5p(miR-520a-5p)在胶质瘤发生发展中的作用和机制。方法选取 2016年 5月至 2018年 11月在宝鸡高新人民医院治疗的胶质瘤病人肿瘤组织作 56例为研究对象。实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测 56例胶质瘤组织和 56例正常脑组织中 miR-520a-5p表达水平。体外培养胶质瘤 U251细胞,转染 miR模拟对照序列( miR-NC)、 miR-520a-5p9模拟物( miR-520a-5p mimics)至 U251细胞,分别采用四甲基噻唑蓝染色法( MTT)、流式细胞仪、 Transwell和蛋白质印迹法检测过表达 miR-520a-5p对 U251细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及细胞中鼠双微体基因( MDM2)、细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、 P21、B淋巴细胞瘤 -2相关蛋白( Bax)、 B淋巴细胞瘤 -2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶 2(MMP-2)和 E-钙黏蛋白( E-cadherin)蛋白表达的影响。双萤光素酶报告基因实验验证 miR-520a-5p与 MDM2靶向关系,蛋白质印迹法检测转染 miR-520a-5p mimics、miR-520a-5p抑制剂( anti-miR-520a-5p)对 U251细胞中 MDM2蛋白表达的影响。共转染 miR-520a-5p mimics和 MDM2过表达载体( pcD. NA3.1-MDM2)至 U251细胞,上述相同方法观察过表达 MDM2能否逆转过表达 miR-520a-5p对 U251细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白表达的影响。结果与正常脑组织相比,胶质瘤组织中 miR-520a-5p表达降低( P<0.05)。与转染 miR-NC的 U251细胞比较,转染 miR-520a-5p mimics的 U251细胞 24 h、48 h和 72 h的 OD值［(0.36±0.04)比( 0.50±0.05)、(0.49±0.05)比( 0.95±0.09)、(0.71±0.07)比( 1.36±0.13)］、迁移细胞数［(67±6.26)比( 144±13.38)］、侵袭细胞数［(59±5.47)比( 135±13.12)］均降低( P<0.05),凋亡率［( 21.17±2.06)%比( 7.82±0.77)%］升高( P<0.05)细胞中 cyclin D1、Bcl-2和 MMP-2的蛋白表达水平均降低( P<0.05)而 P21、Bax和 E-cadherin的蛋白表达水平均升高( P<0.05miR-520a-5p可与 MDM2的 3’UTR靶向结合,mimics的 U251细胞中 MDM2蛋白水平显著低于转染 miR-NC的细胞,而转染 anti-miR-520a-5p的 U251细胞中 MDM2的蛋白水平显著高于转染 anti-miR-NC的细胞。与共转染 miR-520a-5p mimics与 pcDNA3.1的 U251细胞比较,共转染 miR-520a-5p mim. ics与 pcDNA3.1-MDM2的 U251细胞 24 h、48 h和 72 h的 OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数均升高( P<0.05)凋亡率降低( P< 0.05)。,同时转染miR-520a-5p,细胞中 cyclin D1、Bcl-2和 MMP-2的蛋白表达水平均升高( P<0.05),而 P21、Bax和 E-cadherin的蛋白表达水平均降低( P<0.05)。结论 miR-520a-5p在胶质瘤组织中表达降低,过表达 miR-520a-5p可能通过靶向负调控 MDM2抑制胶质瘤 U251细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡。     

miR-146a靶向TRAF6继而抑制AR42J细胞的增殖及凋亡

目的 探究miR-146a对胰腺腺泡细胞AR42J增殖及凋亡的影响。方法 通过雨蛙素诱导AR42J细胞构建急性胰腺炎模型,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测细胞上清液中淀粉酶、TNF-α、IL-6含量验证模型构建,qRT-PCR与Western blot分别检测各组中miR-146a和TRAF6表达量的改变。转染敲低AR42J细胞中miR-146a表达量,采用Edu检测细胞敲低后增殖改变,流式细胞术检测凋亡能力改变。结果 与未处理组相比,雨蛙素组细胞miR-146a表达量显著降低（P <0.05）,TRAF6表达量明显升高（P <0.05）,并且敲低miR-146a后AR42J细胞增殖能力明显降低,凋亡能力明显升高。结论 miR-146a可能通过抑制TRAF6表达从而降低AR42J细胞凋亡并促进细胞增殖能力。     

长链非编码 RNA变异性浆细胞瘤异位 1通过调控微小 RNA-214-3p/人凋亡抑制蛋白 X轴影响皮肤黑色素瘤细胞的顺铂耐药性

目的探讨长链非编码 RNA(lncRNA)变异性浆细胞瘤异位 1(PVT1)调控微小 RNA(miR)-214-3p/人凋亡抑制蛋白 X(XIAP)对皮肤黑色素瘤( CMM)细胞的顺铂( DDP)耐药性的影响。方法该研究起止时间为 2020年 3—9月。体外培养人皮肤黑色素瘤 SK-MEL-1/DDP细胞,将细胞分为空白对照组( NG组,不做处理)、阴性转染组( NC组,转染 PVT1-inhibitor阴性对照)、抑制 PVT1表达组( PVT1-inhibitor组,转染 PVT1-inhibitor)、共转染组( PVT1-inhibitor-miR-214-3p-inhibitor组,转染 PVT1inhibitor同时转染 miR-214-3p-inhibitor)。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测 SK-MEL-1/DDP细胞 PVT1、 miR-214-3p水平; MTT法检测四组 SK-MEL-1/DDP细胞增殖能力及对 DDP的耐药性;流式细胞仪检测四组 SK-MEL-1/DDP细胞凋亡率;蛋白质印迹法( Western blotting)检测四组 SK-MEL-1/DDP细胞 XIAP、细胞增殖相关核抗原 Ki-67、凋亡相关蛋白 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白( Bax)表达水平。应用 TargetScan数据库预测 PVT1与 miR-214-3p的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验验证。结果与 NG组、 NC组比较, PVT1-inhibitor组 SK-MEL-1/DDP细胞增殖抑制率［( 22.87±3.43)%比( 0.00± 0.00)%、(0.08±0.01)%］、凋亡率［( 40.05±6.06)%比( 15.69±2.35)%、(17.01±2.55)%］、 miR-214-3p及 Bax表达均显著升高( P< 0.05)PVT1、药物半数抑制浓度( IC50)值［( 15.13±0.45)μg/L比( 45.03±1.35)μg/L、(47.81±1.33)μg/L］、 Ki-67、Bcl-2蛋白、 XIAP mRNA及,其蛋白表达水平均显著降低( P<0.05);与 PVT1-inhibitor组比较, PVT1-inhibitor+miR-214-3p-inhibitor组 SK-MEL-1/ DDP细胞增殖抑制率［(15.12±2.27)%比( 22.87±3.43)%］、凋亡率［(27.88±4.19)%比( 40.05±6.06)%］、 miR-214-3p及 Bax表达均显著降低( P<0.05)IC50［(23.98±0.72)μg/L比(15.13±0.45)μg/L］Ki-67、Bcl-2蛋白、 XIAP mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。TargetScan,数据值库预测显示 miR-214-3p是 PVT1的潜在靶、基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系。     

微小RNA-150 靶向c-Myb 表达对T 淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖的影响

目的探讨微小RNA-150(miR-150)靶向c-Myb表达对人T淋巴细胞白血病(T-LL)Jurkat细胞增殖的影响。方法体外培养人Jurkat细胞,分为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染negative control-miR-150)和miR-150过表达组(转染hsamiR-150 mimic)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Jurkat细胞中miR-150 及c-Myb 表达;人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法检测Jurkat细胞增殖;流式细胞仪检测各组Jurkat细胞凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验检测miR-150和c-Myb的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Jurkat细胞中c-Myb、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果空白对照组与阴性对照组Jurkat细胞中miR-150表达水平、c-Myb mRNA及蛋白表达水平、OD值、细胞凋亡率、及PCNA、Bax蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,miR-150过表达组Jurkat细胞中miR-150表达水平［(1.42±0.14)比(1.03±0.09)］、凋亡率［(20.79±1.15)%比(8.76±0.74)%］、Bax蛋白表达水平［(0.65±0.18)比(0.42±0.13)］显著升高(P<0.05),c-Myb mRNA［(0.66±0.14)比(0.98±0.09)］及蛋白表达水平［(0.37±0.06)比(0.64±0.12)］、OD值［(0.25±0.06)比(0.46±0.09)］、PCNA蛋白表达水平［(0.33±0.07)比(0.56±0.11)］显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,c-Myb是miR-150的靶基因。结论miR-150靶向c-Myb表达抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡。     

微小 RNA-525-5p通过靶向 RECQ样蛋白 5调控乳腺癌放射敏感性

目的探讨微小 RNA-525-5p(miR-525-5p)对乳腺癌细胞辐射照射敏感性的影响及机制。方法该研究起止时间为 2019年 6月至 2020年 6月,人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MCF-7、BT474、非恶性乳腺上皮细胞 MCF-10A均购自美国菌种保藏中心。运用 qRT-PCR法检测人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MCF-7、BT474、非恶性乳腺上皮细胞 MCF-10A中 miR-525-5p的 mRNA的表达;将 miR-525-5p模拟物( miR-525-5p mimics)阴性对照( miR-NC)组(转染 miR-NC)、 miR-525-5p组(转染 miR-525-5p mim. ics)、 RECQL5小干扰 RNA阴性对照( si-NC)组(转染 si-NC)、 RECQL5小干扰 RNA(si-RECQL5)组(转染 si-RECQL5)、 miR-525-5p+RECQL5过表达空载体( pcDNA)组(共转染 miR-525-5p mimics和 pcDNA)、 miR-525-5p+RECQL5过表达载体( pcDNA-REC. QL5)组(共转染 miR-525-5p mimics和 pcDNA-RECQL5),均用脂质体法转染至 MDA-MB-231细胞; Western blotting检测细胞中 RECQ样蛋白 5(RECQL5)的蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;克隆形成实验检测细胞的存活分数。结果与非恶性乳腺上皮细胞 MCF-10A相比,人乳腺癌细胞 MDA-MB-231、MCF-7、BT474中 miR-525-5p表达［ 0.28±0.02,0.33±0.02,0.42±0.03比 1.01±0.08］显著降低, RECQL5 mRNA和蛋白表达［ 1.68±0.15,1.58±0.12,     

长链非编码 RNA LINC00346调控微小 RNA-138-5p对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的研究长链非编码 RNA(lncRNA)LINC00346影响宫颈癌细胞增殖和凋亡的分子机制。方法选取 2018年 1—12月于南阳市中心医院手术治疗的 28例宫颈癌病人的宫颈癌组织(实验组)及癌旁正常组织(对照组)为研究对象。根据细胞转染情况分为 si-NC组、 si-LINC00346组、 miR-NC组、 miR-138-5p组、 si-LINC00346+anti-miR-NC及 si-LINC00346+anti-miR-138-5p组;利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测宫颈癌组织和宫颈癌海拉细胞中 LINC00346和微小 RNA(miR)138-5p的表达水平,蛋白质印迹法检测海拉细胞中周期素依赖激酶抑制剂 p21(P21)和胱天蛋白酶 -3(caspase-3)的蛋白含量, MTT法和流式细胞术测定细胞存活率和凋亡率,双荧光素酶报告系统验证 LINC00346和 miR-138-5p的靶向关系。结果与正常癌旁组织相比,宫颈癌组织中 LINC00346含量显著升高［( 2.51±0.08)比( 0.99±0.05)］(P<0.001);转染 si-LINC00346(LINC00346干扰物)后,与 si-NC(阴性对照组)相比, si-LINC00346组宫颈癌海拉细胞中的 LINC00346含量显著下降［( 0.33± 0.03)比( 1.00±0.05)］P21和 caspase-3蛋白含量升高［(0.63±0.04)比( 0.22±0.02);(0.79±0.05)比( 0.30±0.03)］,海拉细胞存活率降低［(52.84±4.39)比(,100.00±6.13)］,凋亡率升高［( 23.39±1.64)比( 8.19±1.00)］,均差异有统计学意义( P<0.001),敲除 LINC00346可降低细胞存活率,提高细胞凋亡率及 P21和 caspase-3蛋白含量;转染野生型 WT-LINC00346的海拉细胞,与 miR-NC对照组相比, miR-138-5p组野生型 WT-LINC00346的萤火虫荧光素酶相对活性显著下降［( 0.24±0.03)比( 0.97±0.05)］。敲除 LINC00346可显著上调 miR-138-5p含量［(2.43±0.07)比( 1.01±0.05)］(P<0.001)。结论 LINC00346通过靶向 miR-138-5p调控宫颈癌海拉细胞增殖和凋亡。     

微小RNA-152-3p 对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-152-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法2019年2月至2020年4月,将结肠癌SW480细胞分为miR-152-3p模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-152-3p模拟物(miR-152-3p)组、抑制物(anti-miRNC)组、miR-152-3p抑制物(anti-miR-152-3p)组、阴性对照(si-NC)组、沉默转移相关蛋白2(si-MTA2)组、miR-152-3p模拟物+空载体(miR-152-3p+pcDNA3.1)组、miR-152-3p模拟物+过表达MTA2(miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2)组,均用脂质体法转染至结直肠癌SW480细胞中,另取未转染结直肠癌SW480细胞记为Control组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-152-3p和MTA2 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法测定蛋白的表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结肠癌HCT116、SW480及LoVo细胞中miR-152-3p表达分别为0.72±0.04、0.29±0.02、0.49±0.01,人正常结肠上皮细胞NCM460中miR-152-3p表达为1.06±0.12,与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞HCT116、LoVo、SW480中MTA2 mRNA和蛋白较高,miR-152-3p较低(P<0.05);Control组、miR-NC组、miR-152-3p组、si-NC组及si-MTA2组结肠癌SW480细胞吸光度分别为0.92±0.22、0.96±0.17、0.31±0.07、0.99±0.17及0.32±0.09,细胞迁移数分别为(172.00±23.52)个、(169.00±20.66)个、(53.67±12.22)个、(155.67±16.8)个及(54.33±8.74)个,细胞侵袭数分别为(124.67±10.02)个、(122.33±9.45)个、(26.00±5.00)个、(108.33±10.02)个及(42.00±4.00)个,与miR-NC 组相比,miR-152-3p 组SW480细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)及上皮钙黏素(E-cadherin)较高(P<0.05);与si-NC组相比,si-MTA2组SW480细胞中cyclin D1、MMP-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,P21及E-cadherin较高(P<0.05)。转染miR-152-3p和MTA2野生型表达载体的结肠癌SW480细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。相比miR-152-3p+pcDNA3.1组,miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2组SW480细胞中P21、E-cadherin的表达较低,MTA2、cyclin D1、MMP-2蛋白的表达较高,SW480细胞活性、迁移、侵袭数量较高(P<0.05)。结论miR-152-3p可能通过下调MTA2抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

心肌挫伤后心肌细胞凋亡的实验研究

目的探讨心肌挫伤对家兔心肌细胞凋亡及B细胞淋巴瘤(Bcl-2)和白血病-2相关X基因(Bax)蛋白表达的影响。方法健康家兔40只,随机分为3组,参考组(n=20)、对照组(n=10)、心肌挫伤组(n=10)。利用BIM-Ⅱ型生物撞击机制备心肌挫伤模型,应用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测定心肌肌钙蛋白I(cTnI),应用原位末端标记法(TUNEL)法并结合流式细胞术观察心肌细胞凋亡发生的情况,应用免疫组化SABC法观察Bcl-2和Bax蛋白的表达。对照组除不撞击胸部外,余处理均同MC组。结果参考组与MC组在伤后4h血清cTnI含量均高于各自伤前及对照组相应时相点(P<0.05);对照组未见TUNEL阳性细胞,凋亡率也为零,MC组心肌细胞凋亡指数(AI)和凋亡率(AR)分别为(15.6860±0.6887)%和(6.9320±0.6380)%,与对照组比较,均显著增高(P<0.05);与对照组比较,MC组的Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达光密度值均明显增高(P<0.05)。结论心肌挫伤可诱导家兔心肌细胞的凋亡,且与Bcl-2和Bax这一对凋亡调控基因的表达变化有着某种联系。     

溃疡性结肠炎异位表达PS2蛋白的检测及意义

目的　探讨 PS2 蛋白在溃疡性结肠炎组织中异位表达的意义。方法　用免疫组织化学法检测了30例溃疡性结肠炎和 2 8名正常人结肠组织中 PS2 和 CEA的表达。结果　显示 30例溃疡性结肠炎 PS2 蛋白阳性的 7例 ,阳性率 2 3.3% ,PS2 只在伴有不典型增生的溃疡性结肠炎中表达 ;而 CEA阳性的 2 2例 ,阳性率 73.3%。2 8名正常人结肠组织中 PS2 阳性的 1例 ,CEA阳性的 2例。结论　 PS2 蛋白在溃疡性结肠炎组织中的异位表达可作为溃疡性结肠炎的病情观察指标     

内源性糖皮质激素对酒精性股骨头缺血坏死骨细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的 探讨内源性糖皮质激素(EGC)与酒精性股骨头缺血坏死骨细胞凋亡以及相关蛋白p53和Bcl-2的关系。方法 家兔90只,随机分为三组,灌胃法建模,实验组予含50％乙醇的烈性白酒8ml·kg-1·d-1,干预组给予氨鲁米特25mg·kg-1·d-1,对照组只给等量生理盐水。1~6个月分批处死,检测血清中EGC浓度、骨细胞凋亡、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果 实验组血清EGC浓度高于干预纽和对熙组(P<0.01)。2个月时起实验组骨细胞凋亡数明显高于干预组和对照组,但干预组与对照组之间差异无显著性(P>0.05);3、6个月时,凋亡细胞逐渐增多,三组间差异均有显著性(P<0.05)。第2个月时骨细胞Bcl-2和p53蛋白阳性细胞数,实验组与对照组之间差异有显著性(P<0.05),干预组与实验室和对照组之间差异无显著性;3、6个月时,三组间差异均有显著性(P<0.05)。结论 过量饮酒后所致的EGC浓度增加使p53蛋白上调和Bcl-2蛋白下调是引起股骨头骨细胞凋亡的重要原因。     

依那普利干预对缺血-再灌注大鼠模型心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响

目的探讨依那普利干预对缺血再灌注大鼠模型心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响。方法雄性Wistar大鼠45只,随机分成3组:①缺血-再灌注(I/R)组15只,结扎左冠状动脉45min,松解4h,结扎前15min以及再灌注1h分别静脉注射生理盐水2ml/kg。②依那普利组(L)组15只:结扎左冠状45min,松解4h,结扎前15min以及再灌注1h分别静脉注射依那普利10mg/kg(依那普利以5mg/kg溶于生理盐水)。③假手术(C)组15只,冠状动脉下穿线不结扎,持续4.75h股静脉注射生理盐水2ml/kg。于实验结束时,取出心脏于4%多聚甲醛固定、石蜡包埋切片,按TUNEL法检测凋亡细胞,以S-P免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因蛋白表达。结果①I/R组和L组标本中分别有13例和11例心肌细胞发生凋亡,L组凋亡细胞百分数较I/R组明显减少,差异具有高度显著性(P<0.05)。C组15例样本中12例均未检测到TUNEL阳性细胞。②L组Bcl-2表达较I/R组和C组均增强,L组Bax阳性心肌细胞较I/R组明显减少(P<0.05)。结论缺血-再灌注心肌细胞存在明显的凋亡现象,且受Bax蛋白与Bcl-2基因蛋白下调影响,Bax蛋白与Bcl-2蛋白共同调节心肌细胞凋亡,依那普利干预可诱导心肌细胞表达Bcl-2,减少心肌细胞凋亡。     

C-erbB-2，nm23，bcl-2在子宫内膜癌中的表达与临床病理的关系

目的研究C-erbB-2、nm23、bcl-2在子宫内膜癌中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测30例子宫内膜癌中C-erbB-2、nm23、bcl-2的表达情况,并以15例癌旁正常内膜组织作对照。结果C-erbB-2、nm23、bcl-2在子宫内膜癌均有过度表达,nm23阳性表达率随临床分期及病理分级的增高而减低,即在有浸润、转移和低分化癌中无表达。bcl-2与病理分级有关,即在高分化癌中有较高的表达92.7%。结论nm23基因可能在抑制子宫内膜癌发生转移中发挥了重要的作用,bcl-2基因的激活和失控可能在子宫内膜癌发生中具有重要的作用,bcl-2蛋白的检测有助于子宫内膜癌的诊断。     

消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞凋亡的研究

目的:研究中成药消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析其作用后MCF-7细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法:采用细胞培养技术,用1、10、100、1000μg·mL-1的消瘤1号处理MCF-7细胞24h,PI染细胞,流式细胞仪测定细胞周期的变化,Western Blot法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果:流式细胞仪检测结果表明细胞阻滞在G0/G1期;Weston Blot法测定结果表明消瘤1号能够增加细胞中Bax蛋白表达,减少Bcl-2蛋白表达,且该2种蛋白的表达依赖于消瘤1号的浓度。结论:消瘤1号可通过调节Bax/Bcl-2蛋白表达的变化诱导MCF-7细胞凋亡。     

灯盏花提取物对心脏移植异基因大鼠蛋白激酶C的作用

目的:利用异基因大鼠心脏移植模型研究中药灯盏花提取物对蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)的抑制作用。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为灯盏花提取物低剂量组(5mg·kg-·1d-1)、中剂量组(10mg·kg-·1d-1)、高剂量组(15mg·kg-·1d-1)和对照组。移植术后各实验组受体腹腔注射药物至移植心停跳。用底物磷酸化激酶测定法检测受体外周血淋巴细胞PKC的活性并用Westernblot印迹法鉴定;用酶联免疫吸附法检测受体外周血液中白细胞介素-2(IL-2)的水平。结果:各实验组受体外周血淋巴细胞PKC活性及表达和IL-2的水平明显较对照组低。结论:在异基因大鼠心脏移植中灯盏花提取物可对PKC的活性产生抑制作用。     

灯盏花提取物对大鼠心脏移植排斥反应的作用

目的:研究中药灯盏花提取物对大鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,分为灯盏花提取物低剂量组(5mg·kg-1·d-1,E1)、高剂量组(10mg·kg-1·d-1,E2)、环孢素A(CsA)组和对照组(C组)。移植术后各实验组受体腹腔注射药物至移植心停跳。观察移植心存活时间、病理变化及受体外周血液中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平。结果:E1组、E2组和CsA组受体大鼠外周血IL-2的水平明显较C组低,同时移植心脏的存活时间较C组延长,排斥反应减弱。结论:灯盏花提取物预处理可明显减轻大鼠移植心脏的排斥反应,并延长移植心脏的存活时间。     

阿托伐他汀治疗2型糖尿病的疗效及对C反应蛋白的影响

目的探讨阿托伐他汀治疗2型糖尿病的疗效及对c反应蛋白（C—reactiveprotein,CRP）的影响。方法选择我科2009年2月至2012年3月确诊的2型糖尿病患者作为研究对象,根据治疗方法不同分为治疗组（阿托伐他汀联合胰岛素治疗）及对照组（单纯胰岛素治疗）各36例,观察并记录两组患者治疗前及治疗4、8、16周后的空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2hPBG）的变化情况,两组患者治疗16周后的总有效率,及两组患者治疗前后的CRP变化情况、不良反应等。结果治疗组与对照组患者治疗前的FBG、2hPBG组间比较未见明显异常（P〉0．05）,治疗4、8、16周后,两组的FBG、2hPBG均较治疗前及前一时间段明显降低,且治疗组FBG、2hPBG分别较对照组降低更明显,差异具有统计学意义（P〈0．05）。治疗16周后治疗组的总有效率（94．44％）明显高于对照组（75．00％）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。治疗组与对照组患者治疗前的CRP组间比较未见明显异常,治疗16周后,两组的CRP均较治疗前明显降低,且治疗组较对照组降低更明显,差异具有统计学意义（t=2．698,P〈0．05）。结论阿托伐他汀治疗2型糖尿病疗效确切,控制血糖效果好,其作用机制考虑可能与降低CRP的水平有关,仍需进一步深入的研究。