长链非编码 RNA FOXD2相邻相反链 RNA 1靶向调控微小 RNA-760对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨 FOXD2相邻相反链 RNA 1(FOXD2-AS1)对前列腺癌细胞的增殖和凋亡的影响以及作用机制。方法验于 2019年 1—11月进行,根据 DU145细胞转染情况分为空载体质粒( pcDNA)组、 FOXD2-AS1过表达质粒( pcDNA-FOXD2实AS1)组、小干扰 RNA阴性对照( si-NC)组、 FOXD2-AS1小干扰 RNA(si-FOXD2-AS1)组、微小 RNA(miR)-760组、 miR-760阴性对照( miR-NC)组及 si-FOXD2-AS1+抗 miR-760阴性对照( anti-miR-NC)组、 si-FOXD2-AS1+抗 miR-760(anti-miR-760)组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测 miR-760和 FOXD2-AS1表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测荧光活性;蛋白质印迹法检测蛋白表达; MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与正常前列腺上皮细胞 RWPE-1相比,前列腺癌细胞 DU145、LNCaP、22Rv1中 miR-760表达水平显著降低［( 0.34±0.03)、(0.56±0.05)、(0.42±0.04)比( 1.01±0.08)］(P<     

肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1(TPT1-AS1)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和作用机制。方法收集于 2017年1月至 2018年12月在信阳市中心医院心胸外科行手术治疗的 46例肺癌组织和对应的癌旁组织,实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测组织中 TPT1-AS1和微小 RNA-671-5p(miR-671-5p)表达, Pearson相关性分析肺癌组织中 TPT1-AS1和miR671-5p表达的相关性。同时,于2019年5月至 2020年4月期间,通过体外培养肺癌细胞 A549,双荧光素酶报告基因实验验证了细胞中 TPT1-AS1和 miR-671-5p调控关系。另将 A549细胞分为对照组、小干扰 RNA阴性序列(si-NC)组、 TPT1-AS1小干扰 RNA(si-TPT1AS1)组、 si-TPT1-AS1+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组和 si-TPT1-AS1+miR-671-5p抑制剂(anti-miR-671-5p)组,甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹实验检测细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)基质金属蛋白酶(MMP)-2和 MMP-9蛋白表达。结果肺癌组织中 TPT1-AS1表达量较癌旁组织显著升高［(1.88±0.12)(1.01±0.08)、P<0.05］,miR-671-5p表达量较癌旁组织显著降低［(0.45±0.04)(1.01±0.06)P<0.05］。Pearson相关性分析显示,肺癌组比织中TPT1-A,S1和 miR-671-5p呈负相(r= 0.63,P<0.05)。TPT1-AS1在A5比49细胞中负调,控 miR-671-5p表达。 si-TPT1-AS1组 A549细胞存活率、迁移数和侵袭数分别为(关53.24±2.81)%、(63.11±6.51)个和( 33.78±3.23)个,均低于 si-NC组［分别为( 98.78±2.57)%、(147.44±11.08)个和(101.67±9.95)个,均P<0.05］。CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白在 si-TPT1-AS1组的表达量分别为(0.43±0.05)(0.21±0.03)(0.43±0.04),较si-NC组均降低［分别为(0.86±0.04)(0.55±0.05)(0.48±0.07)均P<0.05］。si-TPT1-AS1+anti-miR-671-、5p组A549细、胞存活率、迁移数和侵袭数及 CyclinD1、MMP-2和M、MP-9蛋白表、达分别为(8,5.43±2.94)%、(125.78±10.59)个、(88.78±7.19)个、(0.75±0.03)、(0.48±0.03)、(0.43±0.04),较 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组均升高［分别为(54.36±2.95)%、(63.78±6.48)个、(33.56±3.54)个、(0.41±0.03)、(0.22±0.03)、(0.21±0.04),均P<0.05］。对照组与 si-NC组、 si-TPT1-AS1组与 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组各检测指标比较均差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌组织中 TPT1-AS1表达升高, miR-671-5p表达降低,且两者呈负相关。 TPT1-AS1可能通过靶向下调 miR-671-5p的表达促进肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

LncRNA CBR3-AS1调节miR-409-3p/hnRNPA2B1轴对肝细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨长链RNA CBR3-AS1(LncRNA CBR3-AS1)靶向微小RNA-409-3p(miR-409-3p)/核不均一核糖核蛋白A2B1(hnRNPA2B1)轴对肝细胞癌(HCC)细胞恶性生物学行为的影响。方法 qRT-PCR法分析肝癌组织中LncRNA CBR3-AS1和miR-409-3p表达水平。双荧光素酶检测LncRNA CBR3-AS1和miR-409-3p及hnRNPA2B1和miR-409-3p的靶向关系。将Hep G2细胞分为si-NC组、si-CBR3-AS1组、si-CBR3-AS1+anti-miR-NC组、si-CBR3-AS1+anti-miR-409-3p组、miR-NC组、miR-409-3p mimics组、miR-409-3p mimics+pcDNA组、miR-409-3p mimics+hnRNPA2B1组。平板克隆检测细胞增殖；Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡；划痕实验检测细胞迁移；Transwell实验检测细胞侵袭；Western blot分析法检测细胞核增殖抗原标记物(Ki67)、细胞周期负调控因子(P21)、...     

微小RNA-152-3p 对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-152-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法2019年2月至2020年4月,将结肠癌SW480细胞分为miR-152-3p模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-152-3p模拟物(miR-152-3p)组、抑制物(anti-miRNC)组、miR-152-3p抑制物(anti-miR-152-3p)组、阴性对照(si-NC)组、沉默转移相关蛋白2(si-MTA2)组、miR-152-3p模拟物+空载体(miR-152-3p+pcDNA3.1)组、miR-152-3p模拟物+过表达MTA2(miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2)组,均用脂质体法转染至结直肠癌SW480细胞中,另取未转染结直肠癌SW480细胞记为Control组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-152-3p和MTA2 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法测定蛋白的表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结肠癌HCT116、SW480及LoVo细胞中miR-152-3p表达分别为0.72±0.04、0.29±0.02、0.49±0.01,人正常结肠上皮细胞NCM460中miR-152-3p表达为1.06±0.12,与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞HCT116、LoVo、SW480中MTA2 mRNA和蛋白较高,miR-152-3p较低(P<0.05);Control组、miR-NC组、miR-152-3p组、si-NC组及si-MTA2组结肠癌SW480细胞吸光度分别为0.92±0.22、0.96±0.17、0.31±0.07、0.99±0.17及0.32±0.09,细胞迁移数分别为(172.00±23.52)个、(169.00±20.66)个、(53.67±12.22)个、(155.67±16.8)个及(54.33±8.74)个,细胞侵袭数分别为(124.67±10.02)个、(122.33±9.45)个、(26.00±5.00)个、(108.33±10.02)个及(42.00±4.00)个,与miR-NC 组相比,miR-152-3p 组SW480细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)及上皮钙黏素(E-cadherin)较高(P<0.05);与si-NC组相比,si-MTA2组SW480细胞中cyclin D1、MMP-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,P21及E-cadherin较高(P<0.05)。转染miR-152-3p和MTA2野生型表达载体的结肠癌SW480细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。相比miR-152-3p+pcDNA3.1组,miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2组SW480细胞中P21、E-cadherin的表达较低,MTA2、cyclin D1、MMP-2蛋白的表达较高,SW480细胞活性、迁移、侵袭数量较高(P<0.05)。结论miR-152-3p可能通过下调MTA2抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

长链非编码 RNA脑源性神经营养因子反义 RNA靶向微小 RNA-495-3p调控脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡和炎症反应

目的探讨长链非编码 RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子反义 RNA(BDNF-AS)对脂多糖( LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法该研究起止时间为 2018年 12月至 2019年 12月。用 1 mg/L的 LPS处理大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383细胞作为 LPS组;正常培养的细胞作为 Con组。将 BDNF-AS小分子干扰 RNA(si-BDNF-AS)及其阴性对照( si-NC)、微小 RNA(miR)-495-3p及其阴性对照( miR-NC)转染至 NR8383细胞中再用 1 mg/L的 LPS处理,记为 LPS+siBDNF-AS组、 LPS+si-NC组、 LPS+miR-495-3p组、 LPS+miR-NC组;将 si-BDNF-AS分别与 anti-miR-NC、anti-miR-495-3p共转染至 NR8383细胞中再用 1 mg/L的 LPS处理,记为 LPS+si-BDNF-AS+anti-miR-NC组、 LPS+si-BDNF-AS+anti-miR-495-3p组。实时荧光定量 PCR检测 lncRNA BDNF-AS和 miR-495-3p的表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素 -1β(IL-1β)肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白( Bax)表、达;荧光素酶报告实验检测 BDNF-AS对 miR-495-3p的靶向关系。结果 LPS诱导的大鼠肺泡巨噬细胞中 BDNF-AS高表达［( 1.00±0.06)比( 3.41±0.31)］,miR-495-3p低表达［( 1.02±0.07)比( 0.47±0.04)］IL-1β［( 22.14±2.25)ng/L比( 513.20±41.22)ng/ L］、 TNF-α［(184.33±18.65)ng/L比(1 125.65±110.36)ng/L］水平升高,细胞凋亡率［(,8.11±0.81)%比( 36.22±3.21)%］升高, Bax表达水平升高, Bcl-2表达水平降低( P<0.05)。抑制 BDNF-AS表达或过表达 miR-495-3p后, IL-1β［( 526.14±46.87)ng/L比     

微小 RNA-92a靶向 Kru.ppel样因子 2基因促进卵巢癌细胞侵袭的作用

目的研究微小 RNA-92a(miR-92a)靶向 Kruppel.样因子 2(KLF2)基因促进卵巢癌细胞侵袭的作用及机制。方法 2019年 1月至 2020年 3月进行本研究。培养卵巢癌细胞系 A2780、SKOV3、OVCAR-3及卵巢上皮细胞系 HOSEpiC,检测 miR-92a的表达水平; SKOV3细胞分为阴性对照( NC)组、 miR-92a抑制物组、 miR-92a组、 pcDNA组、 pcDNA+miR-92a组、 pcDNA-KLF2+miR-92a组,分别转染 NC序列、 miR-92a、miR-92a抑制物、空白 pcDNA质粒、过表达 KLF2的 pcDNA重组质粒,检测细胞侵袭数目、 KLF2表达水平,双荧光素酶报告基因验证 miR-92a靶向 KLF2基因。结果 A2780、SKOV3、OVCAR-3细胞中 miR-92a的表达水平分别为( 0.92±0.15)、(1.62±0.19)、(1.21±0.13),均高于 HOSEpiC的( 0.62±0.09)(P<0.05);与 NC组( 75.38±     

微 RNA-106b-5p通过靶向 α-烯醇化酶调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、炎症的研究

目的观察微 RNA-106b-5p、α-烯醇化酶( ENO1)对类风湿关节炎( RA)滑膜成纤维细胞( MH7A)增殖、炎症的影响，并探究二者之间的联系。方法 2018年 1月至 2021年 12月长安医院接诊手术的 8例 RA病人获得了滑膜组织， 4例意外事故引起关节损伤的无 RA、骨关节炎史健康病人作为对照。运用 RT-qPCR实验检测 RA滑膜、正常滑膜及对照组(正常 MH7A)、白细胞介素( IL)-1β组细胞( 10 μg/L IL-1β处理)中 miR-106b-5p、ENO1的表达；脂质体法将 mimic-NC组(转染 mimic)、 miR-106b-5p mimic组(转染 miR-106b-5p mimic)、 inhibitor-NC组(转染 inhibitor)、 miR-106b-5p inhibitor组(转染 miR-106b-5p inhibitor)、 pcDNA组(转染 pcDNA)、 pcDNA-ENO1组(转染 pcDNA-ENO1)、 si-NC组(转染 si-NC)、 si-ENO1组(转染 si-ENO1)、 miR-106b-5p mimic+pcDNA组(共转染 miR-106b-5p mimic+pcDNA)、 miR-106b-5p mimic+pcDNA-ENO1组(共转染 miR-106b-5p mimic+pcDNA-ENO1)、 miR-106b-5p inhibitor+si-NC组(共转染 miR-106b-5p inhibitor+si-NC)、 miR-106b-5p inhibitor+si-ENO1组(共转染 miR-106b-5p inhibitor+si-ENO1)转染至 MH7A，再 IL-1β处理。细胞计数试剂盒( CCK8)检测细胞活性；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞 IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶 -3(MMP-3)的含量。双萤光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性；蛋白质印迹法实验检测细胞 ENO1蛋白。结果与对照组( 0.52±0.05、147.32±12.54、0.45±0.03、1.55±0.12)相比， IL-1β组细胞活性(1.13±0.06)、 IL-6(433.21±37.84)、 IL-8(1.38±0.10)、 MMP-3(2.78±0.22)均升高( P<0.05)。与 mimic-NC组( 1.12±0.06、435.15±39.67、1.39±0.12、2.77±0.25)相比， miR-106b-5p mimic组细胞活性( 1.98±0.11)、 IL-6(164.12±15.74)、 IL-8(0.65±0.05)、 MMP-3(1.94±0.17)均降低(P<0.05)且抑制 miR-106b-5p具有相反的作用。双萤光素酶报告实验显示， miR-106b-5p靶向负调控 ENO1，且二者在 RA组织中的表达呈负相关。与 pcDNA组( 1.14±0.06、434.93±37.89、1.37±0.11、2.79±0.22)相比， pcDNA-ENO1组细胞活性(1.96±0.08)、 IL-6(867.83±71.84)、 IL-8(2.83±0.23)、 MMP-3(4.93±0.34)升高( P<0.05)；与 si-NC组相比， si-ENO1组细胞活性、 IL6、IL-8、MMP-3降低( P<0.05)。过表达 ENO1减弱 miR-106b-5p对 IL-1β处理细胞增殖、炎性因子的促进作用，敲减 ENO1减弱抑制 miR-106b-5p对 IL-1β处理细胞增殖、炎性因子的抑制作用。结论 miR-106b-5p能够抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖和炎症反应，产生这种调控作用的潜在机制与靶向 ENO1有关。     

微小RNA-146a 靶向调控Krüppel 样转录因子7对强直性脊柱炎T 细胞炎症反应及自噬的影响

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)是否通过靶向调控Krüppel样转录因子7(KLF7)的表达而影响强直性脊柱炎病人T细胞炎症反应及自噬。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测强直性脊柱炎病人T细胞与健康人T细胞中miR-146a的表达量;分别将anti-miR-NC、anti-miR-146a、pcDNA3.1、pcDNA3.1-KLF7转染至强直性脊柱炎病人T细胞;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)的水平;双荧光素酶报告实验验证miR-146a与KLF7的靶向结合关系;蛋白质印迹法(Western blotting)检测KLF7、自噬相关基因5(ATG5)、Beclin-1的表达量。结果与健康人T细胞比较,强直性脊柱炎病人T细胞中miR-146a的表达量升高［(1.00±0.08)比(2.74±0.13),t=53.54,P<0.05］;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-146a组IL-6［(823.17±14.10)ng/L比(372.31±11.03)ng/L］、IL-17［(901.00±16.29)ng/L比(428.39±12.34)ng/L、IL-23［(886.38±15.11)ng/L 比(401.61±11.75)ng/L］的水平降低(t=43.62,40.06,43.87,P<0.05),ATG5［(0.33±0.03)比(0.79±0.07)］、Beclin-1［(0.42±0.04)比(0.91±0.08)］蛋白水平升高(t=10.46,9.49,P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-146a可靶向结合KLF7;转染pcDNA3.1-KLF7可明显降低IL-6［(823.17±14.10)ng/L比(477.37±12.01)ng/L］、IL-17［(901.00±16.29)ng/L比(558.67±13.16)ng/L］、IL-23［(886.38±15.11)ng/L比(531.69±12.75)ng/L］的水平(t=32.34,28.31,31.07,P<0.05),提高ATG5［(0.32±0.03)比(0.60±0.06)］、Beclin-1［(0.44±0.04)比(0.78±0.07)］的表达水平(t=7.23,7.30,P=0.002)。结论抑制miR-146a表达可通过靶向KLF7而抑制强直性脊柱炎病人T细胞炎症反应及促进细胞自噬。     

FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探究FOXD3-AS1与miR-135a-5p的相互作用及对肾细胞癌(RCC)ACHN细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 选取本院2017年1月—2019年12月RCC手术切除癌组织和癌旁组织60份,RT-qPCR检测组织和细胞中FOXD3-AS1和miR-135a-5p表达水平;ACHN细胞分别或联合转染si-NC、si-FOXD3-AS1-1、si-FOXD3-AS1-2、miR-NC、miR-135a-5p mimic、pcDNA3.1-FOXD3-AS1和miR-135a-5p inhibitor;行Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;行划痕闭合实验检测各组细胞迁移能力;行双荧光素酶实验检测靶向关系。建立裸鼠RCC移植瘤模型,分为si-FOXD3-AS1组和si-NC组,每组6只,建模后30 d处死测定移植瘤质量,采用免疫组织化学法检测Ki-67和E-cadherin阳性表达率。结果 与癌旁组织比较,癌组织中FOXD3-AS1表达显著上升,miR-135a-5p表达显著下降(P<0.01)。FOXD3-AS1干扰显著降低细胞活力、侵袭数目和划痕闭合率(P<...     

微 RNA-125、信号转导与转录活化因子 3对卵巢癌细胞的影响及靶向关系验证

目的检测微 RNA(miR)-125a、信号转导与转录活化因子 3(STAT3)在卵巢癌细胞中的表达水平，分析其对卵巢癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响，并验证两者的靶向关系。方法 2020年 1月至 2021年 12月，采用 qRT-PCR检测卵巢癌细胞和正常人卵巢上皮细胞中 miR-125a、STAT3 mRNA水平。利用转染技术将 SKOV3细胞分为 miR-NC(miR-125a阴性对照组质粒)组、 miR-125a(miR-125a过表达质粒)组、 si-NC(沉默 STAT3阴性对照质粒)组、 si-STAT3(沉默 STAT3质粒)组、 miR-125a+si-NC和 miR-125a+si-STAT3组。 MTT实验、 Transwell实验和凋亡实验分别检测不同组间细胞的 OD值、穿膜细胞数和凋亡率。萤光素酶报告基因分析 SKOV3细胞中 miR-125a与 STAT3的靶向关系，蛋白质印迹法检测不同组间 STAT3蛋白表达情况。结果与 HOSEpiC细胞 miR-125a和 STAT3 mRNA水平( 1.00±0.15、0.54±0.08)相比， SKOV3、CAOV3和 PEO1细胞中 miR-125a水平(0.41±0.07、0.56±0.08、0.58±0.10)降低， STAT3 mRNA水平( 1.87±0.22、1.54±0.07、1.54±0.08)增加；选用 SKOV3细胞进行后续实验。与 miR-NC组相比， miR-125a组细胞增殖能力减弱、穿膜细胞数降低、凋亡率增加。与 si-NC组相比， si-STAT3组细胞增殖能力减弱、穿膜细胞数降低、凋亡率增加。与 miR-125a+si-NC组相比， miR-125a+si-STAT3组细胞增殖能力减弱、穿膜细胞数降低、凋亡率增加。 STAT3+miR-125a mimic组与 STAT3 WT组相比， STAT3蛋白表达较弱，且 miR-125a与 STAT存在靶向结合位点。结论卵巢癌细胞中 miR-125a的过表达可靶向 STAT3抑制 SKOV3细胞的增殖和侵袭并诱导细胞凋亡，发挥抗肿瘤活性。     

微小 RNA-218-5p靶向 Jagged 1调控人牙周膜干细胞的活性和骨向分化

目的 研究微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)活性和骨向分化的影响并探讨其机制,为牙周炎的治疗提供研究基础.方法 将anti-miR-218-5p组(转染anti-miR-218-5p)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-JAG1组(转染pcDNA-JAG1)、anti-miR-218-5p+si-NC组(共转染anti-miR-218-5p和si-NC)、anti-miR-218-5p+si-JAG1组(共转染anti-miR-218-5p和si-JAG1),用脂质体法转染至hPDLSCs细胞;运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-218-5p、Ⅰ型胶原蛋白(Col-1)、骨钙素、Runt相关转录因子2(Runx2)的表达;蛋白质印迹法(Westrn blotting)检测细胞中Jagged 1(JAG1)的蛋白表达;MTT法检测细胞活性;茜素红染色实验检测细胞的矿化结节;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 与anti-miR-NC组相比,anti-miR-218-5p组hPDLSCs细胞培养48、72 h时,细胞活性升高[48 h:(0.44±0.04)比(0.62±0.06);72 h:(0.53±0.05)比(0.83±0.08);P<0.001],细胞的矿化结节明显升高,Col-1[(0.26±0.03)比(0.74±0.07)]、骨钙素[(0.21±0.02)比(0.54±0.05)]、Runx-2[(0.29±0.03)比(0.61±0.06)]蛋白相对表达量均显著升高(均P<0.001).与pcDNA组相比,pcDNA-JAG1组hPDLSCs细胞培养48、72 h时,细胞活性显著升高[48 h:(0.42±0.04)比(0.59±0.05);72 h:(0.55±0.05)比(0.81±0.08);P<0.001],Col-1[(0.34±0.03)比(0.71±0.07)]、骨钙素[(0.23±0.02)比(0.48±0.04)]、Runx-2[(0.25±0.03)比(0.56±0.05)]蛋白表达量均显著升高(均P<0.001).miR-218-5p可靶向调控JAG1的表达.抑制JAG1可逆转抑制miR-218-5p对hPDLSCs的活性和骨向分化作用.结论 抑制miR-218-5p可促进人牙周膜干细胞活性和骨向分化,其机制与靶向JAG1有关.     

黄秋葵多糖调控p73反义RNA 1T对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨黄秋葵多糖调控p73反义RNA 1T(TP73-AS1)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响,及其作用机制.方法 实验分为对照组(正常DMEM培养基),低、中、高剂量实验组(分别用含0.6,1.2,1.8 mg·mL-1黄秋葵多糖的DMEM培养基)、si-NC组(转染TP73-AS1阴性对照质粒)、si-TP73-A...     

微RNA-132-3p靶向第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物调控葡萄膜黑色素瘤细胞增殖与凋亡

目的 研究微RNA(miR)-132-3p在葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡中的作用及其作用机制。方法 该研究起止时间为2018年2月至2019年7月。定量聚合酶链反应（qPCR）检测正常葡萄膜上皮细胞ARPE-19和葡萄膜黑色素瘤细胞SP6.5、M23中miR-132-3p表达。SP6.5细胞中转染miR-132-3p干扰质粒（anti-miR-132-3p）、第10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）过表达质粒（pcDNA3.1-PTEN）或共转染anti-miR-132-3p和PTEN干扰质粒（si-PTEN）,MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,蛋白质印迹法检测PTEN、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达,生物信息学预测结合双萤光素酶报告实验分析miR-132-3p与PTEN的靶向关系。结果 与ARPE-19细胞相比,SP6.5、M23细胞中miR-132-3p表达量（0.26±0.02比0.94±0.09、0.81±0.08）明显升高（P<...     

微小 RNA-301b-3p靶向第 10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-301b-3p(miR-301b-3p)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 本研究起止时间为2019年3—9月.人成骨细胞(hFOB)和骨肉瘤细胞U2OS、MG63购自美国菌种保藏中心.U2OS细胞分为miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)组、miR-301b-3p抑制物(anti-miR-301b-3p)组、anti-miR-301b-3p+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、anti-miR-301b-3p+第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)小干扰RNA(si-PTEN)组;实时荧光定量PCR(RT-qP-CR)检测miR-301b-3p表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测miR-301b-3p和PTEN的靶向关系.结果 与hFOB细胞相比,U2OS、MG63中miR-301b-3p表达水平[(0.89±0.09),(0.70±0.07)比(0.20±0.02)]显著升高.与anti-miR-NC组比较,anti-miR-301b-3p组U2OS细胞活性[(0.59±0.06)比(1.33±0.13)]显著降低,而凋亡率[(22.06±2.31)％比(7.48±0.78)％]、PTEN蛋白表达[(0.69±0.07)比(0.35±0.03)]显著升高.PTEN是miR-301b-3p的直接靶基因.与anti-miR-301b-3p+si-NC组比较,anti-miR-301b-3p+si-PTEN组U2OS细胞活性[(1.16±0.12)比(0.56±0.06)]显著升高,而凋亡率[(10.28±1.16)比(22.12±2.34)]显著降低.结论 抑制miR-301b-3p表达可通过调控PTEN抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡.     

长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5反向转录序列1靶向调控微RNA-128-3p对结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移的影响

目的 探究长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5反向转录序列1(lncRNA OIP5-AS1)在结直肠癌中的表达情况及靶向调控微RNA-128-3p(miR-128-3p)对结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)定量分析2017年1月至2018年12月在郑州大学人民医院住院并进行手术治疗的38例结直肠癌病人癌组织及相应癌旁组织、结直肠癌细胞系（SW480、SW620、HT-29和LoVo）及人正常结直肠黏膜细胞FHC中lncRNA OIP5-AS1和miR-128-3p的表达。将SW620细胞设为si-OIP5-AS1组、si-NC组、miR-128-3p mimic组、mimic-NC组、miR-128-3p inhibitor+si-OIP5-AS1组和inhibitor-NC+siOIP5-AS1组,采用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用划痕实验和transwell实验检测细胞侵袭与迁移能力,采用蛋白质印迹法检测E2F1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N...     

微小 RNA-335-3p靶向小鼠双微体基因调控骨髓瘤细胞的增殖和凋亡

目的 探讨微小RNA(miR)-335-3p对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 2018年5月至2019年1月,培养正常骨髓细胞MNC和骨髓瘤细胞KM3和U266,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-335-3p表达水平.将KM3细胞分为miR-NC组(转染模拟对照序列)、miR-335-3p组[转染miR-335-3p模拟物(miR-335-3p mimics)]、pcDNA3.1+miR-335-3p组(共转染空载体和miR-335-3p mimics)和pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组[共转染小鼠双微体基因(MDM2)过表达载体和miR-335-3p mimics],MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证KM3细胞中miR-335-3p与MDM2调控关系.结果 骨髓瘤细胞KM3和U266中miR-335-3p表达水平分别为0.24±0.01、0.38±0.02,显著低于正常骨髓细胞MNC中的miR-335-3p表达水平0.77±0.03(均P<0.05).与miR-NC组比较,miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.60±0.03)比(0.99±0.06);72 h:(0.82±0.05)比(1.67±0.07)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均降低(均P<0.05),细胞凋亡率[(24.31±0.99)％比(8.13±0.83)％]、细胞中P21和Bax蛋白表达均升高(均P<0.05).miR-335-3p在KM3细胞中负调控MDM2表达.与pcDNA3.1+miR-335-3p组比较,pcDNA3.1-MDM2+miR-335-3p组KM3细胞吸光度[48 h:(0.80±0.05)比(0.63±0.04);72 h:(1.28±0.06)比(0.88±0.05)]、细胞中cyclin D1和Bcl-2蛋白表达均升高(均P<0.05),凋亡率[(15.34±0.66)％比(23.98±1.41)％]、细胞中P21、Bax蛋白表达均降低(均P<0.05).结论 miR-335-3p可能通过下调MDM2表达抑制骨髓瘤细胞的增殖,并诱导细胞凋亡.