白花蛇舌草对宫颈癌细胞增殖、凋亡及Ki-67表达的影响

目的探讨白花蛇舌草对Hela细胞增殖、凋亡及Ki-67表达的影响。方法运用动物血清学方法制备白花蛇舌草药物血清,MTT检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞的存活率,并计算药物的抑制率。原位末端标记法(TUNEL)检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞的凋亡率,进一步验证白花蛇舌草抑制宫颈癌细胞增殖是否与促进细胞凋亡有关。RT-PCR检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞中Ki-67 mRNA水平。免疫组化检测白花蛇舌草血清浓度为10%、20%、40%,作用时间为24、48、72 h后的Hela细胞中抗原Ki-67的表达情况。结果白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞与对照组相比细胞生长增殖明显受到抑制,随着药物作用浓度和药物作用时间的增加,Hela细胞抑制率也明显增加。TUNEL检测结果显示,白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞凋亡率比对照组增多,药物作用浓度越高,凋亡率也越高;药物作用时间越长,凋亡率越高。RT-PCR结果显示,与对照组相比,白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞中Ki-67 mRNA的表达量随着作用时间和作用浓度的增加而减小。免疫组化结果显示,白花蛇舌草药物血清作用后的Hela细胞中抗原Ki-67的表达量与对照组相比明显降低。白花蛇舌草药物血清可以明显降低Hela细胞中Ki-67的表达。结论白花蛇舌草对宫颈癌细胞Hela的增殖具有抑制作用,可以促进细胞凋亡,抑制Ki-67基因表达。     

白花蛇舌草对膀胱癌EJ细胞株的增殖抑制作用及其机制

目的 研究白花蛇舌草的提取物体外抑制膀胱癌EJ细胞株增殖的作用及其机制.方法 体外培养膀胱癌EJ细胞株,不同浓度的白花蛇舌草提取物作用12～72 h,通过MTT法检测细胞生长的抑制作用,采用荧光标记的方法检测端粒酶含量.结果 随着实验组白花蛇舌草提取物浓度的增加和作用时间的延长EJ细胞的生长抑制率也逐渐增加,且在一定的剂量范围内呈浓度、时间依赖性.流式细胞仪分析表明,在培养72 h后和对照组相比,实验组端粒酶的数目随着药物浓度的增高而明显减少并且呈现浓度依赖性.结论 白花蛇舌草对膀胱癌EJ细胞的增殖有显著的抑制作用,且在一定的剂量范围内呈浓度、时间依赖性.端粒酶在药物作用后数量的变化很可能成为白花蛇舌草抑制膀胱癌EJ细胞生长的机制.     

白花蛇舌草、半枝莲治疗慢性胃炎87例

笔者用中草药白花蛇舌草、半枝莲配合其他中药治疗慢性胃炎87例,并以常规西药治疗作对照观察,疗效较满意,现报告如下。1　资料与方法1.1　临床资料:慢性胃炎患者133例,随机分为两组:中药组87例,男33例,女54例;年龄18～68岁;病程0.5～3年;农民68人(占78.1%)。对照组46例,男20例,     

黄芪白花蛇舌草汤对原发性肾病综合征患者基础免疫状态的影响

目的观察黄芪白花蛇舌草汤治疗原发性肾病综合征（PNS）的疗效,并探讨其对PNS患者基础免疫状态的影响。方法将65例PNS患者随机分为两组,对照组给予激素、抗凝等常规治疗,治疗组在此基础上加用黄芪白花蛇舌草汤内服,疗程4周。观察两组总体疗效、治疗前后24h尿蛋白定量（24h Upro）、血清总蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）及基础免疫学指标的变化。结果治疗组总有效率和完全缓解率分别为87．88％和45．45％,显著高于对照组的75．00％和25．00％（P均〈0．05）;治疗组治疗后24h Upm显著降低,血清TP、ALB明显升高,与对照组比较有统计学差异（P均〈0．05）;治疗组治疗后基础免疫力提高,与对照组比较有统计学差异（P〈0．05）。结论黄芪白花蛇舌草汤能显著降低PNS患者的尿蛋白,升高血清ALB,增强患者的基础免疫力,疗效满意。     

白花蛇舌草对H22肝癌细胞荷瘤组织bcl-2和bax蛋白表达的影响

[目的]观察H22肝癌细胞荷瘤组织bcl-2、bax蛋白的表达,探讨白花蛇舌草诱导热休克蛋白70（HSP70）表达及促进肝癌细胞凋亡的机制。[方法]将白花蛇舌草处理后的小鼠活体腹水H22肝癌细胞免疫小鼠,同时设党参对照,以HSP70单抗封闭后分为白花蛇舌草未封闭、封闭,党参未封闭、封闭及空白对照5组,然后以培养的H22肝癌细胞攻击小鼠形成荷瘤;免疫组化检测凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白的表达。[结果]荷瘤组织bcl-2、bax表达定位于胞质。白花蛇舌草、党参未封闭和封闭组bcl-2、bax表达分别显著低于和高于空白对照组;白花蛇舌草、党参未封闭组bcl-2及bax表达也分别较封闭组下调和增高,但之间差异无统计学意义。与党参未封闭及封闭组比较,白花蛇舌草组bax表达增高,而bcl-2表达差异无统计学意义。[结论]白花蛇舌草促进H22肝癌细胞荷瘤组织细胞凋亡可能与上调bax蛋白表达相关。     

白花蛇舌草的传说与应用

一、从名医吟诗追溯白花蛇舌草的传说从前,有位名医对白花蛇舌草有感而吟诗"白花蛇舌草纤纤,伏地盘桓农舍边,自古好心多善报,灵虫感德流传。"这诗是名医对白花蛇舌草的赞美,从而说明蛇舌草具有极高的药用价值,且至今流传着以下的传说:从前,有位名医,出诊为一重病人治病,病人胸背憋痛,低热羁缠,咳吐秽脓,众医无效。名医诊病阅方,一时找不到恰当的治疗方法。疲     

白花蛇舌草乙醇提取物调控DDR1对大鼠肝癌细胞增殖的影响

目的 探讨白花蛇舌草乙醇提取物对大鼠肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 选取Wistar大鼠82只,采用小剂量二乙基亚硝铵(DEN)构建大鼠肝癌模型,在动物造模成功后随机分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,各20只.造模成功后1 d,模型组给予乙醇提取物溶剂1 mL/(100 g·d)灌胃处理8周,后三组分别给予...     

白花蛇舌草诱导白血病CEM细胞凋亡的分子机制

目的探讨白花蛇舌草通过调控细胞凋亡信号通络-死亡受体途径相关信号分子的表达诱导白血病CEM细胞凋亡的研究。方法分光光度法测定CEM细胞内凋亡酶半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(caspase)3、caspase8、caspase9的活性;免疫印迹实验测定caspase3、caspase8凋亡酶蛋白的表达。结果白花蛇舌草水提物浓度为6.64、33.20、166.0μg/ml分别作用于CEM细胞12、24、36 h,细胞内凋亡酶caspase3、8的活性表达高于对照组(P0.05),细胞内凋亡酶caspase9的活性表达与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。白花蛇舌草水提物不同浓度(6.64、 33.20、 166.00μg/ml)分别作用于CEM细胞不同时间(6、12、24 h),凋亡酶蛋白caspase3、8的表达随白花蛇舌草作用浓度的增加和时间的延长呈上升趋势,且与对照组比较差异有显著意义(P0.05)。结论白花蛇舌草水提物可通过上调细胞凋亡信号通路-死亡受体途径信号分子中caspase3、8的表达而达到诱导白血病CEM细胞凋亡。     

白花蛇舌草总黄酮抑制人肝癌细胞的靶基因调控

目的:研究白花蛇舌草总黄酮(flavonoids fromHedyotis diffusa willd.,FHD)中制人肝癌细胞SMMC-7721的靶基因调控.方法:分别提取人正常肝细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和FHD作用后的SMMC-7721细胞的总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与人HO4基因表达谱芯片杂交,扫描杂交芯片图像,利用软件获得FHD抗肝癌的靶基因,对靶基因进行生物信息学分析.结果:共找到20条FHD抑制肝癌细胞的有效靶基因,即给予FHD后,通过上调或下调,这些显著异常表达的基因被恢复至正常水平.其中,癌基因pim-1(Hs.81170)、rel(Hs.858)、ras(Hs.204354)、fos(Hs.25647)、myc(Hs.79070)、met(Hs.285754)以及编码Bcl-2相关蛋白的基因(Hs.227817)被显著下调;成纤维细胞生长因子(Hs.284244)、胰岛素样生长因子1受体(Hs.239176)、胰岛素样生长因子结合蛋白(Hs.1516)、G蛋白偶联受体(Hs.23016)、酪氨酸蛋白磷酸化酶(Hs.227777)、转录因子12(Hs.21704)、转录因子CP2(Hs.54970)等与细胞生长相关的信号转导分子被显著下调;细胞因子IL-1(Hs.1722)被显著下调;丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路成员MAP2K6(Hs.118825)和MAP3K12(Hs.21601)被显著上调;抑癌基因NF-2(Hs.902)被显著上调;编码T细胞活化共刺激信号分子的TNFSF9(Hs.1524)、TNFSF7(Hs.99899)基因被显著上调.这些基因均与肝癌的发生、发展密切相关.结论:FHD抑制SMMC-7721细胞的作用由多条靶基因协同,并通过胞内、胞外信号转导途径协调完成.     

呼吸道合胞病毒对致敏小鼠T辅助细胞相关细胞因子表达的作用

目的　探讨经卵白蛋白 (OVA)雾化致敏的小鼠受呼吸道合胞病毒 (RSV)感染后肺内炎症发展的特点及与T辅助细胞有关的细胞因子的反应。方法　 40只小鼠随机分成 4组 ,每组 1 0只。对照组 :磷酸盐缓冲液 (PBS)雾化 1 0天 ,HEP 2细胞液滴鼻 ;RSV组 :PBS液雾化 ,RSV滴鼻 ;OVA组 :OVA致敏 ,HEP 2细胞液滴鼻 ;OVA +RSV组 :OVA致敏 ,RSV滴鼻。第 1 6天 ,每组各 6只小鼠支气管肺泡灌洗作细胞计数及分类 ,酶链免疫吸附试验 (ELISA)测定白细胞介素 4(IL 4)、γ干扰素 (IFN γ)的含量 ;余 4只取肺组织用于病理分析和提取总RNA ,经逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测IL 4、IL 5、IFN γ的mRNA表达量。结果　 (1 )支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞总数 :单纯RSV组为 (1 4 5±5 4)× 1 0 6 /ml、OVA +RSV组为 (1 6 8± 4 9)× 1 0 6 /ml,与对照组 [(7 7± 2 4)× 1 0 6 /ml]比较差异有显著性 (P <0 0 5) ;淋巴细胞RSV组为 0 63± 0 0 5、OVA +RSV组为 0 77± 0 0 9,与OVA组 (0 36± 0 0 3)、对照组 (0 2 8± 0 0 5)比较差异有显著性 (P <0 0 5) ;嗜酸细胞 :OVA +RSV组 (0 0 690± 0 0 1 0 0 )与其它三组 (0 0 0 30± 0 0 0 1 0、0 0 0 90± 0 0 0 50、0 0 1 0 0± 0 0 0 4 0 )比较差异也有显著性 (P均 <0     

特异性p38蛋白激酶抑制剂SB203580对小鼠感染肺炎衣原体后细胞因子变化的影响

目的 探讨特异性p38蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580对小鼠感染肺炎衣原体后细胞因子变化.方法 使用TLR4基因缺失(C3H/HeJ)小鼠90只,随机分为正常组、感染组和SB203580组,每组再分别按0、1、4、7、14 d分成5小组.正常组鼻内接种二磷酸蔗糖缓冲液,感染组鼻内接种肺炎衣原体约4.0×106 IFU/ml,SB203580组在感染肺炎衣原体后腹腔注射SB203580(100 mg/kg).分别在接种后第0天,第1天、第4天、第7天、第14天预定的时间处死小鼠,取肺组织分别采用Western blot法测p38 MAPK蛋白的表达,用酶联免疫吸附法检测肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1(IL-1)的表达,同时观察各组小鼠肺组织病理变化.结果 感染组肺组织中TNF-α、IL-1的表达水平在各时间点均高于正常组(P＜0.05或P＜0.01),并在第4天出现高峰,14天以后开始下降.SB203580组肺组织中细胞因子TNF-α、IL-1的表达水平在各时间点均低于感染组(P＜0.05或P＜0.01).同时,SB203580组p38 MAPK蛋白表达强度弱于感染组.结论 p38 MAPK参与小鼠感染肺炎衣原体的炎症反应,特异性p38 MAPK抑制剂SB203580能抑制小鼠感染肺炎衣原体后的细胞因子表达,减轻炎症反应.     

PCP大鼠肺泡巨噬细胞C/EBPε、IL-6、TNFαmRNA表达的研究

目的　研究脂多糖 (LPS)刺激PCP大鼠肺泡巨噬细胞后C/EBPε、IL - 1、IL - 6、TNFα的mRNA表达和相互调变关系及其对PCP大鼠肺泡巨噬细胞的免疫调节作用。方法　取PCP大鼠的肺泡巨噬细胞 ,加入LPS培养 ,分别于 1h、4h、8h及2 4h取贴壁细胞 ,提取总RNA ,用半定量RT -PCR检测C/EBPε、IL - 6、TNFα的mRNA表达。结果　我们发现 ,PCP大鼠肺泡巨噬细胞在LPS的诱导下 ,TNFα和IL - 6的表达在 1～ 2 4h内表达均明显增强 (p <0 0 5 ) ,C/EBPε的表达呈逐渐上升趋势 ,8h后可见高表达 (p <0 0 5 ) ,C/EBPε达到高峰的时间较TNFα和IL - 6晚。 结论　PCP大鼠肺泡巨噬细胞在LPS的诱导下 ,产生具有免疫活性的细胞因子 (如IL - 6、TNFα等 )明显增加 ,这些细胞因子作为生物信息正反馈回上游基因 ,进一步引起C/EBPε表达增强。     

白花蛇舌草注射液诱导人肺癌细胞株SPC-A-1凋亡及其分子机制的研究

目的探讨白花蛇舌草注射液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及其分子机制。方法采用MTT法检测癌细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化检测野生型P53、Bcl-2和NF-κB(P65)蛋白表达。结果白花蛇舌草注射液能抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈剂量依赖性;DNA直方图上呈现凋亡细胞所特有的亚二倍体峰(sub-G1),5和50ml/L白花蛇舌草注射液组细胞凋亡显著升高,P53蛋白表达显著上升,Bcl-2和NF-κB蛋白表达显著下降。结论白花蛇舌草注射液能诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与上调P53蛋白表达以及下调Bcl-2和NF-κB蛋白表达有关。     

壳聚糖胶囊对小鼠免疫功能的影响

目的研究壳聚糖胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法采用133mg/(kg·bw)、267mg/(kg·bw)、800mg/(kg·bw)剂量的壳聚糖胶囊给小鼠经口灌胃30天,进行免疫器官脏器/体重比值测定、血清溶血素测定、抗体生成细胞检测、碳廓清试验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性测定、脾淋巴细胞转化试验。结果壳聚糖胶囊能增强小鼠碳廓清的能力,提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数,促进小鼠脾细胞溶血空斑及血清溶血素的形成,能增强脾淋巴细胞的增殖能力,提高NK细胞的活性。结论壳聚糖胶囊具有增强免疫力的功能。     

Malaria infection induces virus expression in human immunodeficiency virus transgenic mice by CD4 T cell-dependent immune activation

To test the capacity of malaria parasites to trigger virus expression in vivo, human immunodeficiency virus (HIV) transgenic mice were infected with Plasmodium chabaudi chabaudi clone AS. Splenocytes recovered during peak parasitemia showed a dramatic elevation in viral p24 production that returned to baseline by day 15 and failed to rebound at recrudescence or after reinfection. The major sources of virus expression were antigen-presenting cells (APCs) rather than T lymphocytes. Nevertheless, T cells from infected mice stimulated with plasmodial antigen triggered 5-10-fold increases in p24 production from dendritic cells in vitro, which suggests that viral induction stems from interaction of malaria-specific T lymphocytes with HIV-expressing APCs. Indeed, depletion of CD4 T cells resulted in a 70% reduction in the p24 response stimulated by malaria in vivo. These findings demonstrate the ability of Plasmodium species to immunologically activate latently integrated HIV in vivo but suggest that this process may be restricted to acute infection.     

Effects of urotensin-Ⅱ on cytokines in early acute liver failure in mice

AIM:To investigate urotensin-Ⅱ(UⅡ) and its effects on tumor necrosis factor(TNF)-α and interleukin(IL)-1β in early acute liver failure(ALF).METHODS:We investigated the time-dependent alteration in UⅡ levels and its effects on TNF-αand IL-1β in liver and blood in the early stage of lipopolysaccharide/D-galactosamine-induced ALF.RESULTS:After lipopolysaccharide/D-galactosamine challenge,UⅡ rose very rapidly and reached a maximal level 0.5 h,and the level remained significantly elevated after 2 h(P 0.05).Six hours after challenge,UⅡ began to degrade,but remained higher than at 0 h(P 0.05).Pretreatment with urantide,an inhibitor of the UⅡ receptor,suppressed the degree of UⅡ increase in liver and blood at 6 h after challenge(P 0.05 vs paired controls).In addition,liver and blood TNF-α increased from 1 to 6 h,and reached a peak at 1 and 2 h,respectively; however,IL-1β did not rise until 6 h after challenge.Urantide pretreatment inhibited the degree of TNF-α and IL-1β increase following downregulation of UⅡ post-challenge(all P 0.05).CONCLUSION:UⅡ plays a role in the pathogenesis and priming of ALF by triggering an inflammatory cascade and driving the early release of cytokines in mice.     

老年肺炎患者免疫状态初探

目的 观察老年社区获得性肺炎（CAP）患者免疫功能的改变.方法 以58例老年社区获得性肺炎患者为研究对象,以60例无肺炎体检老年人作为对照组,检测外周血淋巴细胞计数及各淋巴细胞亚群计数,放射免疫法测定外周血肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、外周血白细胞介素-2（Interleukin-2,IL-2）等指标,观察老年肺炎患者机体免疫功能变化.结果 肺炎组老年患者与无肺炎组老年人比较,外周血淋巴细胞计数、T淋巴细胞计数（CD＋3）、CD4T淋巴细胞计数（CD＋3CD＋4）、CD＋4/CD＋8比值均明显低（P≤0.001）,NK细胞计数（CD＋16CD＋56）也偏低（P＜0.05）,而CD8T淋巴细胞细胞（CD＋3CD＋8）、B细胞计数（CD＋19）无明显差别（P＞0.05）.肺炎组老年患者与无肺炎组老年人比较外周血TNF-α明显升高（P〈0.001）,外周血IL-2明显偏低（P〈0.001）.结论 老年人免疫功能的减退改变与老年人CAP有着密切的关系.