红景天苷糖碳苷类似物的合成及心肌保护活性研究

目的 设计合成具有心肌保护作用的糖碳苷化合物。方法 针对红景天苷可被糖苷水解酶水解的缺点,将其改造为糖碳苷并改变苯环上的取代基进行新药设计,获得红景天苷的糖碳苷类似物。通过体外心肌细胞的缺氧－复氧损伤模型评价其心肌保护活性。结果与结论 合成了10个糖碳苷类新化合物。初步药理评价表明,大多数化合物对缺氧－复氧损伤心肌具有明显的保护作用,其中5个化合物的活性强于红景天苷,并呈剂量依赖关系。     

4-芳氨基-6-溴喹唑啉类化合物的合成及抗肿瘤活性的初步研究

目的 设计合成新的4-芳氨基-6-溴喹唑啉类化合物,并评价其抗肿瘤活性。 方法 以4-氯-6-溴喹唑啉和含有不同取代基的(E)-氨基二苯乙烯或4-[2-（2-呋喃基）]乙烯基苯胺为原料,经过亲核取代反应合成了5种目标化合物。采用MTT法,以人低分化胃癌细胞（BGC-823）和人肺癌细胞（A549）为受试细胞株对目标化合物进行体外抗肿瘤活性评价。 结果与结论 所得化合物的结构利用IR、1HNMR、13CNMR和元素分析进行了确认。5种化合物对BGC-823和A549两种细胞模型的体外抗肿瘤活性测试结果表明,大部分化合物具有较好的抗肿瘤活性。     

β-榄香烯胺类衍生物的合成及抗癌活性研究

目的 合成β-榄香烯胺类衍生物,并对其体外抗癌活性进行初步的评价。方法 β-榄香烯经氯代、胺化制备目标化合物。以SRB法测试目标化合物对HL-60、HeLa、SGC-7901细胞的增殖抑制活性。结果与结论 合成的12个新化合物经IR、MS和1H-NMR确证结构。初步药理结果显示大部分目标化合物的体外抗癌活性明显强于β-榄香烯。     

3-取代苯甲酰基-4H-色烯-4-酮的合成及其抗快速增殖分枝杆菌活性研究

目的 设计合成3-苯甲酰基-4H-色烯-4-酮类化合物,并测定其体外抗快速增殖分枝杆菌活性。 方法 以焦性没食子酸和取代苯甲酸为原料,经Friedel-Crafts酰基化、Baker-Venkataraman重排等反应合成目标化合物,初步测定了目标化合物的抗快速增殖分枝杆菌活性。结果 共合成8个3-苯甲酰基-4H-色烯-4-酮类化合物,其结构经核磁共振氢谱和质谱确证。化合物2a、2e呈现边缘抗快速增殖分枝杆菌活性。结论 在具有抗快速增殖分枝杆菌活性的天然产物(S)-3-(4-甲氧苄基)-7,8-亚甲二氧基二氢高异黄酮的2,3-位引入双键、7,8-位更换为甲氧基以及9位以羰基替代亚甲基均会导致抗快速增殖分枝杆菌活性的大幅降低。     

黄酮类化合物的合成及其血管舒张作用

目的寻找具有较好血管舒张活性的黄酮类化合物。方法以槲皮素为原料，经保护后分别与1-溴代-2，3，4，6-四乙酰基-D-吡喃葡糖等4种溴代糖缩合、脱保护合成了4个槲皮素苷类化合物(1a～d)；以间三酚为原料，按常规方法合成了6个黄酮类化合物(2a～f)；利用IR，¹H NMR，¹³C NMR和MS对合成的化合物进行结构确证。观察了合成的10个槲皮素衍生物及类似物与4个天然黄酮类化合物对大鼠离体胸主动脉环的作用；并用HPLC法测定了这些化合物的相对油水分配系数(logP值)。结果受试的14个黄酮类化合物可以浓度依赖性地舒张PE预收缩的内皮完整的大鼠胸主动脉环，且其血管舒张活性随着其油水分配系数logP值的增加而增大。结论3-溴-5,7二羟基黄酮(2d)的血管舒张作用最强，黄酮类化合物的血管舒张活性与其油水分配系数(logP)具有正相关性。初步的构效关系为开发更有效的具有血管舒张作用的黄酮类化合物提供了一定的实验依据。     

南酸枣的黄烷类成分及其体外抗肿瘤与抗缺氧活性

目的 阐明南酸枣Choerospondias axillaries (Roxb.) Burtt. et Hill.树皮中黄烷类成分及其体外抗肿瘤、抗缺氧、抗菌活性。方法 利用各种色谱技术分离化学成分,根据理化性质和波谱数据鉴定结构,利用MTT法测评抗肿瘤及抗缺氧活性,采用纸片法测定抗菌活性。结果 从南酸枣树皮中分离鉴定了3个黄烷类化合物 (+)-儿茶素（1）、(+)-儿茶素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）和 (+)-儿茶素-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）。化合物1、2 对K562细胞呈一定的抗肿瘤活性,在100.mL^-1质量浓度下的抑制率分别为16.0%和27.3%。在ECV304细胞缺氧损伤保护实验中,化合物1在无细胞毒作用的50 μg.mL^-1质量浓度下呈较强的抗缺氧活性,化合物3未表现出抗肿瘤与抗缺氧活性。化合物1~3在测试浓度下对受试白色念珠菌和金黄色葡萄球菌无抗菌活性。结论 化合物1为南酸枣抗缺氧活性成分的首例报道,其抗缺氧活性也属首次报道。化合物2和3为首次从该属植物中分离得到。     

水溶性大黄素衍生物的合成及抗白血病的初步研究

目的 改善大黄素衍生物的水溶性问题,以期得到一些抗白血病活性较好的大黄素衍生物。方法 以大黄素为原料,经过羟基保护、N-溴代丁二酰亚胺(NBS)参与的溴代反应、与叔胺成盐反应制得目标化合物。结果与讨论 合成了11个未见文献报道的大黄素衍生物,其结构经IR、¹H-NMR谱和元素分析确证。化合物 3h 、3i 和 3j 对白血病细胞 K562 和 Jurkat 细胞株有较好的活性。     

N-取代-2, 6-哌啶二酮类氨肽酶 N (APN/CD13) 抑制剂的 合成及生物活性

目的 寻找具有较高 APN 酶抑制活性的新型化合物。方法 以光学纯的 L-谷氨酰胺为原料,经 Boc 保护、环合、取代、脱 Boc 保护、缩合、催化氢化、缩合、脱 Boc 保护成盐等反应合成目标化合物。并对目标化合物进行了初步的体外抑酶活性试验。结果 合成了 1 个未见文献报道的 N-取代-2, 6-哌啶二酮类氨肽酶 N(APN/CD13)抑制剂：(R)-2-氨基-N-((S)-1-(2-(2-(二甲胺基)乙氨基)-2-氧乙基)-2,6-二氧哌啶-3-基)-3-苯丙酰胺,其结构经核磁共振氢谱和电喷雾质谱确证。结论 目标化合物对 APN 表现出一定的抑制活性,其 IC₅₀ 值为56.4 μmol•L^-1,但低于阳性对照药 Bestatin （IC₅₀ 值为 3.6 μmol•L^-1）。通过进一步的结构修饰,有望找到活性更好的化合物。     

升陷汤及单味药材水提物对缺氧/复氧致心肌损伤的保护作用

目的 通过观察升陷汤及单味药材水提物对离体培养的大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法 培养H9C2大鼠心肌细胞,共分成8组：空白对照组,缺氧/复氧组（模型组）,缺氧复氧损伤后药物干预组（升陷汤全方及5个单味药材水提物组）。分别对心肌细胞凋亡率、心肌细胞的活力、细胞内活性氧（ROS）活性、细胞内钙离子浓度（Ca²⁺）等指标进行检测。结果 升陷汤全方及黄芪、知母等药材干预能明显降低细胞凋亡率、细胞内ROS活性和Ca²⁺浓度（P<0.05）,其中,全方的作用最强。与缺氧/复氧组细胞内ROS活性和Ca²⁺浓度增加至空白对照组的2.49倍及1.71倍相比,全方能使细胞内ROS活性和Ca²⁺浓度增加率降至缺氧/复氧组的41.37%和15.20%。结论 升陷汤及单味药材对缺氧/复氧致心肌损伤具有保护作用,该作用的机制可能通过抑制细胞凋亡、降低细胞内ROS以及Ca²⁺的浓度所致。     

(S)-1-(N-烯丙氧羰基)亚胺乙基-3-巯基吡咯烷的合成

目的 合成帕尼培南关键中间体 (S)-1-( N-烯丙氧羰基)亚胺乙基-3-巯基吡咯烷。方法 以氯甲酸烯丙酯为酰化剂,与盐酸乙脒进行 N-酰化反应得到 1-亚胺乙基氨基甲酸烯丙酯,该化合物与 3-R-羟基吡咯烷进行缩合,再经甲磺酰化、S_N2 取代、水解共 5 步反应得到目标化合物。结果与结论 该合成路线中使用新型保护基烯丙氧羰基替代传统的保护基—对硝基苄氧羰基,目标化合物的结构经 ¹H-NMR、MS 谱确证,总收率为 41.6%,各步反应操作简便,条件温和,有利于工业化生产。     

中华眼镜蛇毒组分F/H对大鼠心肌细胞缺氧-再给氧损伤的作用探讨

以Laarse方法建立大鼠心肌细胞缺氧-再给氧模型．缺氧缺糖60min．再给氧1h．探讨组份F和H对实验性心肌细胞缺血再灌注的保护作用。实验结果显示,缺氧后心肌细胞成活率显著减少,心肌释放LDH含量显著增加．细胞膜流动性下降,缺氧再给氧后上述各指标改变加剧。组份F和H能明显提高心肌细胞成活率,减少LDH的释放．增加细胞膜流动性．减少心肌细胞膜的损伤,实验结论,组份F和H有明显抗心肌细胞缺氧-再给氧损伤的作用,尤以组份F作用更显著。     

龙牙楤木总皂苷对缺氧/再给氧心肌细胞损伤的保护作用

目的探讨龙牙楤木总皂苷(As)对培养心肌细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用及其机制。方法取体外培养的乳大鼠心肌细胞建立缺氧/再给氧心肌细胞损伤模型,实验分为5组空白对照组;模型组(A/R组),缺氧6h再给氧3h;3个As给药组,缺氧6h再给氧3h,并于缺氧及再给氧开始时分别加入终浓度为1.25、2.5、5.0mg.L-1的As,观察As对细胞上清液中缺氧及再给氧后LDH、CK漏出量、MDA含量、SOD活性的影响。用MTT法检测As对缺氧再给氧损伤心肌细胞线粒体的保护作用。结果As可抑制缺氧及再给氧后LDH、CK漏出量,降低MDA含量,提高SOD活性,升高OD570吸光度值。结论As对培养心肌细胞的缺氧再给氧损伤具有保护作用,提示其作用机制与增强细胞抗氧化作用,减少自由基及脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关。     

阿魏酸钠对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制

目的研究阿魏酸钠(SF)预适应对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法采用1～3 d新生SD大鼠,常规方法培养心肌细胞,给予模拟缺氧(缺血)液、模拟复氧(再灌注)液以及药理性预适应药物阿魏酸钠以分析K⁺_ATP通道、NO及PKC的影响。结果与对照组比,单纯缺氧/复氧使LDH,CK,MDA及LD水平显著升高,细胞搏动频率、细胞存活率和SOD,GSH-Px活力显著下降。SF预适应后明显减轻上述变化。Glib,L-NAME和Ploy B均部分取消SF预适应的减轻作用。结论SF预适应对心肌细胞缺氧/复氧损伤有显著的保护作用;此保护心肌过程是多种因素综合作用的结果。     

黄芪多糖对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨黄芪多糖(APS)对乳大鼠培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法取体外培养的乳大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧心肌细胞损伤模型,实验分为5组:空白对照组;模型组(A/R组);3个APS给药组,于缺氧及复氧开始时分别加入终浓度为10、30、100mg·mL-1的APS,观察APS对细胞上清液中缺氧/复氧后LDH、CK、AST漏出量、MDA含量、SOD活性。用MTT法检测APS对缺氧/复氧损伤心肌细胞存活率的影响。用流式细胞仪测定APS对缺氧/复氧损伤心肌细胞凋亡的影响。结果 APS可明显减少缺氧/复氧后LDH、CK、AST漏出量(P<0.05或P<0.01);降低MDA含量,提高SOD活性(P<0.05或P<0.01);明显提高缺氧/复氧损伤心肌细胞的存活率,并能明显抑制缺氧/复氧损伤心肌细胞凋亡。结论 APS对培养心肌细胞的缺氧/复氧损伤具有保护作用,作用机制与其增强细胞抗氧化作用,减少自由基及脂质过氧化物导致的细胞膜损伤和抑制细胞凋亡有关。     

Synthesis and Protective Effects of Novel Salidroside Analogues on Glucose and Serum Depletion Induced Apoptosis in PC12 Cells

Salidroside is a natural product isolated from Rhodiola rosea L. which possesses a wide range of biological activities, especially neuroprotective effects in the treatment of ischemic stroke. In an attempt to improve its neuroprotective effects, a series of novel salidroside analogues were synthesized and their neuroprotective activities were evaluated against the glucose and serum depletion‐induced cell death in differentiated PC12 cells. Most target compounds displayed protective effects on the cell viability, especially for compound 6 , which had a great potency superior to salidroside. MTT assay and Hoechst 33342 staining collectively showed that pretreatment with 6 attenuated cell viability loss and reduced apoptotic death in cultured PC12 cells with glucose and serum depletion. And its neuroprotective effects might be associated with the increase of the apoptosis‐related protein Bcl‐2/Bax expression ratio, and also with the inhibition of caspase‐3 activation. Therefore, our new findings may provide potentially important information for further development of salidroside analogues and lay the basis for further studies on the cerebral ischemic stroke and neurodegenerative diseases for human clinical treatment.     

去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa对缺氧复氧心肌细胞损伤的保护作用

目的研究去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa(DCⅣa)是否为龙牙木匆心木总皂苷抗心肌缺血的有效成分之一。方法取体外培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧6 h复氧3 h心肌细胞损伤模型,并于缺氧及复氧开始时分别加入终浓度为2.5,1.0和0.1 mg.L-1的DCⅣa。检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)漏出量,丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。MTT法检测心肌细胞存活率。结果DCⅣa(2.5,1.0 mg.L-1)显著减少缺氧及复氧后LDH和CK漏出量,降低MDA含量,提高SOD活性,提高心肌细胞存活率。结论DCⅣa为龙牙木匆心木总皂苷抗心肌缺血的有效成分之一,可减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞具有直接的保护作用。     

牛磺酸抗脂质过氧化作用与调节Ca~（2＋）作用

在培养心肌细胞缺氧－再给氧模型上，发现牛磺酸（２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１，终浓度）能显著降低细胞内脂质过氧化物（ＬＰＯ）荧光强度；剂量依赖性地提高心肌细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性；以荧光比率法（荧光探针为Ｉｎｄｏ－１－ＡＭ）在粘附式细胞仪（ＡＣＡＳ５７０）上测定细胞内游离Ｃａ２＋荧光比率，结果显示缺氧及再给氧后细胞内Ｃａ２＋荧光比率明显升高，２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１牛磺酸能显著减少Ｃａ２＋荧光比率；分别以２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１、０．４ｍｍｏｌ·Ｌ－１Ｃａ２＋及０．１ｍｍｏｌ·Ｌ－１维拉帕米处理细胞，牛磺酸能降低高Ｃａ２＋引起的细胞搏动加快；而提高低Ｃａ２＋及维拉帕米处理后的细胞搏动。提示牛磺酸对培养心肌细胞再给氧损伤有保护作用，其机理与其提高心肌细胞ＳＯＤ活性、降低细胞内游离Ｃａ２＋浓度及对细胞Ｃａ２＋双向调节作用有关。     

Heptanol预处理对细胞膜及线粒体Cx43参与的大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用研究

目的通过对细胞膜及线粒体Cx43表达变化的研究,探讨不同浓度庚醇(Heptanol)预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤作用。方法将SD乳鼠培养的心肌细胞随机分为5组:正常对照组(control组),缺氧/复氧组(AR组),溶酶组(DMSO组),0.1mmol/L庚醇预处理组(0.1HT组),0.5mmol/L庚醇预处理组(0.5HT组),1.0mmol/L庚醇预处理组(1.0HT组),2.0mmol/L庚醇预处理组(2.0HT组)。除Control组外,H/R组,DMSO组以及各浓度heptonal预处理组均进行缺氧/复氧处理。检测Cx43mRNA水平,并提取心肌细胞线粒体蛋白,应用Western blot检测其含量。结果 AR组、0.1HT组和0.5HT组较control组的Cx43mRNA表达水平及线粒体Cx43含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。1.0 HT组和2.0HT组与AR组相比较,Cx43mRNA表达水平及线粒体Cx43含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 heptanol预处理可以逆转I/R导致的细胞膜及线粒体Cx43的减少,但作用效果与浓度有关。线粒体Cx43可能参与了heptanol预处理的心肌保护作用。     

1－（2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐对培养心肌细胞缺氧后再给氧损伤的影响

采用离体培养大鼠乳鼠心肌细胞，研究了１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对培养心肌细胞缺氧后再给氧损伤的影响。ＤＤＰＨ１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１可使缺氧后再给氧心肌细胞搏动能基本维持正常，乳酸脱氨酶释放有所减少，细胞成活率提高，减少心肌细胞膜损伤。其作用与Ｖｅｒａｐａｍｉｌ具有相似之处。表明ＤＤＰＨ对缺氧与再给氧心肌细胞具有保护作用。