高效液相色谱法测定小八角莲中鬼臼毒素含量

目的:建立小八角莲药材中鬼臼毒素高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法。方法:以C18为固定相,甲醇:0.1%磷酸水(60:40)为流动相,检测波长为292nm,进样量10μl。结果:鬼臼毒素进样量在0.20~2.00μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999,n=5),平均加样回收率为100.57%,RSD为1.92%(n=6)。结论:该方法简便、快速、准确,能有效测定小八角莲药材中鬼臼毒素含量。     

高效液相色谱法测定疣克酊中鬼臼毒素的含量

 目的：建立疣克酊中鬼臼毒素含量的高效液相色谱测定方法。方法：以Discovery C₁₈(4.6 mm × 250 mm,5μm)为分析柱，以甲醇-水(50:50)为流动相，检测波长285 nm，流速为0.8 mL·min^-1。结果：当鬼臼毒素的浓度在24.8?99.2 mg·L^-1范围内时，面积与浓度间呈良好的线性关系（r =0.9999，n =6),方法的平均回收率为98.5%，日内和日间精密度分别为3.8% 和4.1%。3批疣克酊剂中鬼臼毒素的百分含量分别为102.00% ,101.46%, 100.39%。结论：本方法具有准确，简便，灵敏且 重现性好的特点，可适用于复方制剂中鬼臼毒素含量的测定。     

高效液相色谱法测定鬼臼毒素搽剂的含量

目的建立鬼臼毒素搽剂的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,流动相:甲醇:水=63:37;检测波长:292 nm;流速:1.0 mL min-1;进样量:20μL。结果鬼臼毒素在浓度为10.0~100.0μg mL-1范围内呈良好的线性关系。回归方程为Y=12.737X-6.580 4,r=0.999 9。平均回收率为101.07%(RSD为1.45%,n=9)。结论本方法操作简便,准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

八角莲中鬼臼毒素分离纯化与含量测定

目的:探讨八角莲根茎中鬼臼毒素分离纯化工艺.方法:采用综合提取法用95%乙醇依次超声、浸渍、回流提取,滤液用氯仿萃取,用苯-乙醇混合液(1∶ 1)重结晶得到鬼臼毒素单体;采用HPLC法,以鬼臼毒素为指标追踪考察各工艺提取效果.色谱条件:流动相为甲醇-0.1 moL/L磷酸二氢钾水溶液(50∶ 50),检测波长:290 nm,柱温:30℃,流速:1.0 mL/min.结果:自制鬼臼毒素纯度为95.8%,产率为0.86%.结论:本方法工艺简单,适于工业化生产推广.     

高效液相色谱法检测红花如意丸中鬼臼毒素的含量

目的:检测红花如意丸中鬼臼毒素的含量,确保用药安全。方法:应用高效液相色谱法测定红花如意丸中鬼臼毒素。结果:提供的15批样品中鬼臼毒素含量限度均未超过0.012 mg/g。结论:该分析方法适合于红花如意丸中鬼臼毒素的限量检测要求。     

液体振荡培养八角莲愈伤组织及其鬼臼毒素的含量测定

目的研究培养八角莲的愈伤组织。方法与结果在MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA3.0 mg/L的液体培养基中,愈伤组织20 d平均增加重量达53.4 g。添加0.2g/L苯丙氨酸的培养基中,鬼臼毒素的含量可达0.5%。     

高效液相色谱法测定胆红素含量

本文采用高效液相色谱法测定胆红素含量。实验结果,r=0.9999,CV=3.01％,回收率为98.95±1.7％,并表明操作简便、快速、灵敏。从而为胆红素含量测定提供了一种新方法。     

高效液相色谱法测定糖浆剂中苯甲酸的含量

用ＨＰＬＣ法测定糖浆剂中苯甲酸的含量。６个批号的糖浆剂测定结果表明，本法快速、准确、灵敏度高，回收率达到９８％以上。     

高效液相色谱法测定侧柏叶中槲皮素含量

采用高效液相色谱法测定侧柏叶中槲皮素的含量。方法简便、专属性强、重现性好,可作为侧柏叶的质量控制方法。     

八角莲丛生芽分化及试管苗移栽技术研究

目的探讨了八角莲的组织培养和快速繁殖技术。方法以八角莲的叶片作为外植体,接种在不同的培养基上,观察八角莲愈伤组织丛生芽的诱导率。结果以NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/L的激素配比最有利于新芽生根;苔藓+腐殖土的栽培基质中,八角莲试管苗的生长状况最好。结论通过合理筛选激素配比,可促进八角莲愈伤组织产生丛生芽并生根形成幼苗,为快速繁殖八角莲提供依据。     

八角莲愈伤组织诱导及分化研究

目的 探讨了八角莲的愈伤组织诱导及分化技术.方法 采用八角莲成熟种子为材料,经过种子消毒诱导出芽,成功培育出无菌幼苗,再用幼叶、叶柄进行试管繁殖.结果 种子外植体以70%酒精消毒45 s+3%次氯酸钠消毒5 min组合进行灭菌效果最佳,污染率为0.00%,出芽率为1.9%;种子在MS+6-BA 2.0 mg/L + GA3 0.5 mg/L激素配比上容易萌芽,出芽率为15.6%;在取材部位筛选中,以幼叶为外植体对诱导出芽效果最佳,最佳诱导愈伤组织激素组合为MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.3 mg/L,愈伤组织诱导率为85.7%;结论筛选适合的外植体和激素组合,对八角莲愈伤组织诱导和丛生芽分化具有良好的促进作用.     

八角莲的化学成分研究

目的研究八角莲Dysosma versipellis根茎的化学成分。方法运用硅胶、凝胶及RP-HPLC等多种色谱技术对八角莲根茎的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从八角莲根茎95%乙醇提取物的醋酸乙酯和正丁醇萃取部位分离并鉴定了14个化合物,其中木脂素类化合物10个,分别为4′,5′-二去甲基鬼臼毒素(4′,5′-didemethylpodophyllotoxin,1)、鬼臼毒素(podophyllotoxin,2)、4′-去甲基鬼臼毒素(4′-demethylpodophyllotoxin,3)、山荷叶素(diphyllin,4)、鬼臼毒酮(podophyllotoxone,5)、苦鬼臼毒素葡萄糖苷(picropodophyllotoxin-4-O-β-D-glucoside,6)、4′-去甲基鬼臼毒素葡萄糖苷(4′-demethylpodophyllotoxin-4-O-β-D-glucoside,7)、山荷叶素葡萄糖苷(diphyllin-4-O-β-D-glucoside,8)、鬼臼毒素葡萄糖苷(podophyllotoxin-4-O-β-D-glucoside,9)、八角莲醇(dysosmarol,10);黄酮类化合物3个,分别为山柰酚(kaempferol,11)、槲皮素(quercetin,12)、山柰黄素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucoside,13);甾醇类化合物1个,为β-谷甾醇(β-sitosterol,14)。结论化合物1为新天然产物,化合物7和8为首次从该属植物中分离得到。     

侗药八角莲药用民族植物学研究

采用药用民族植物学研究方法,对侗药八角莲主产地广西的三江、湖南的通道、新晃、贵州的天柱、凯里等地进行了实地考察,收集了不同少数民族药用经验,明确了其独特的药用价值。介绍了侗药八角莲的文献记载、植物学形态、分布及品种、民间应用方法,以及当前对侗药八角莲的化学成分、药理作用、植物资源等方面的研究状况,通过对资料的收集整理,有助于充分开发和利用这一丰富的药用民族植物资源。     

“量-权-证”网络毒理学的提出与应用:以八角莲醇提液致肝毒性为例

该研究首次提出"量-权-证"网络毒理学的研究方法,通过将毒性成分含量及成分作用靶点的频次赋予靶点权重,将传统定性网络转为定量网络,不断提高获取数据的信度,为系统性评价中药安全性及毒理学研究提供研究思路。首先,给予大鼠灌胃八角莲50%醇提物,基于血清药物化学辨识其中成分。随后从SwissTargetPrediction、PharmMapper等数据库获取成分靶点,以成分相对含量和钓靶频次赋予靶点权重,Comparative Toxicogenomics Database(CTD)、GeneCards等数据库预测肝毒性靶点,通过STRING数据库进行蛋白质互作分析及通路富集分析。最后,构建"毒性成分-加权靶点-效应通路"定量网络。八角莲体内外成分分析共筛选得到鬼臼毒素、鬼臼毒酮、去氧鬼臼毒素、6-甲氧基鬼臼毒素等11个潜在毒性物质,涉及肝毒性作用靶点106个,加权靶点涉及Cdk2、Egfr、Cyp2c9等65个。京都基因与基因组百科全书数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析表明其可能通过作用于PI3K-AKT、MAPK、Ras等信号通路呈现炎症反应、氧化应激、细胞凋亡、介导细胞色素P450(CYP450)酶系发挥肝毒性作用,然传统方法显示AKT1、Alb、Stat3等51个靶点可能通过介导炎症作用、细胞增殖等导致肝损伤,可知从不同层面获取的毒性机制有较大差异。综上,该研究提出并系统性应用"量-权-证网络毒理学"于八角莲致大鼠肝毒性机制研究,证实其广泛应用于中药毒理学评价的可行性,进一步完善中药安全性系统评价的思路。     

三种八角莲的性状与显微鉴别

本文报道了三种资源八角莲的生药性状、组织构造及粉末显微特征。     

八角莲及其近缘植物中木脂素的分析

用二次展开薄层层析法定性分析了鬼臼毒素类木脂素在八角莲及其近缘植物中的存在,并用变色酸比色法分析了其总木脂素的含量,为八角莲及其近缘植物的资源利用提供科学依据。结果表明八角莲及其近缘植物的根茎、根、茎叶中皆含有多种鬼臼毒素类木脂素成分,其总木脂素含量可高达2％～7％。不同种间存在较大差异。商品八角莲总木脂素含量则与产地有较大关系。     

六角莲化学成分的研究

目的研究六角莲Dysosmapleiantha的化学成分。方法用1%盐酸沉淀出酸性树脂后再采用反复硅胶柱色谱分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。结果从六角莲的酸性树脂中分离鉴定了10个化合物,其中5个四氢萘类木脂素化合物:鬼臼酮(Ⅰ)、脱氢鬼臼毒素(Ⅱ)、鬼臼毒素(Ⅲ)、4′-去甲基鬼臼毒素(Ⅳ)、4′-去甲基脱氢鬼臼毒素(Ⅴ);两个黄酮类化合物:山柰酚(Ⅵ)、槲皮素(Ⅶ);以及正十六烷酸(Ⅷ)、β-谷甾醇(Ⅸ)和胡萝卜苷(Ⅹ)。结论化合物是新化合物,化合物β为首次从该属植物中分离得到,其他化合物均为首次从该植物中分离得到。     

八角莲致濒原因及其野生资源保护

本文对珍稀濒危药用植物八角莲的生物学特性及其野生资源现状进行了简述,分析了八角莲濒危的原因,主要有:八角莲自身的生长、繁殖特性及其特殊生境的限制和人为的破坏等方面,并在此基础上提出了八角莲野生资源的保护措施。