TLR4在肾移植急性排斥反应中的预测作用

目的:研究血液中Toll样受体4(TLR4)的含量在大鼠肾移植后发生急性排斥反应中的预测作用。方法:建立大鼠原位肾移植模型。利用流式细胞技术动态监测大鼠血液及移植肾组织中TLR4的含量,以酶联免疫法检测大鼠血液中IL-2的含量。以组织病理学作为急性排斥反应的诊断标准,研究其表达与急性排斥反应的关系。对检测结果进行统计分析。结果:在术后1 d、2 d、3 d、5 d、7 d异基因移植组大鼠移植肾均有急性排斥反应发生,异基因移植组血液中IL-2和TLR4水平明显高于同基因移植组及健康对照组大鼠体内相应指标的水平。在造模后1 d大鼠血液中TLR4含量即开始升高。同时异基因移植组大鼠移植肾组织中的TLR4含量也明显高于同基因移植组及健康对照组。结论:TLR4参与了肾移植术后急性排斥反应的发生,可作为肾移植术后预测急性排斥反应发生的一个敏感指标。     

白细胞介素12在大鼠颈部心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的探讨白细胞介素12(IL-12)在心脏移植排斥反应中的表达及其与排斥反应的关系。方法采用大鼠颈部心脏移植模型,随机分为2组:同基因移植组,供、受体均为SD大鼠;异基因移植组,供、受体分别为W istar、SD大鼠。以β-Actin作内参照,分别于术后第1,3,5,7天取移植心脏,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察IL-12的表达情况。结果随着术后天数的增加,异基因移植组IL-12表达逐渐升高,第7天达高峰(与对照组相比,P<0.01)。结论IL-12的表达与心脏移植急性排斥反应的发生发展密切相关,可作为心脏移植急性排斥反应的监测指标,对急性排斥反应的早期诊断和移植物的预后估计具有重要的临床意义。     

肝移植大鼠肝细胞凋亡调控基因表达变化

目的 研究肝移植大鼠移植肝再灌注后肝细胞凋亡情况及凋亡调控基因Bcl-2,FasL的表达变化.方法 将72只SD大鼠随机分为肝移植组和假手术组,肝移植组建立异体原位肝移植模型,对供肝灌注并冷保存4 h后置入受体,于移植后1,6,24 h处死大鼠取样,检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平,移植肝细胞凋亡情况,凋亡相关基因Bcl-2,FasL蛋白表达.结果 再灌注后肝移植组AST、ALT明显高于假手术组;与假手术组比较,肝移植组1,6,24 h肝细胞凋亡指数(34.66±5.04,42.52±6.13,27.66±5.03)明显升高,肝组织中Bcl-2表达量(18.36±2.83,12.59±1.84,21.93±2.28)减少,FasL表达量(22.62±1.88,26.93±1.77,24.19±2.10)增加(P<0.01),以再灌注后6 h变化最为明显.结论 移植术后移植肝细胞凋亡加重,于再灌注早期达到高峰,与抗凋亡基因Bcl-2表达减少、促凋亡基因FasL表达增加有关.     

Fas／FasL参与热诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的调控

目的：探讨睾丸局部加热致大鼠睾丸生精细胞凋亡及Fas/FasL信号通路在生精细胞凋亡调控中的作用。方法16只成年SD雄性大鼠随机均分为加热组和对照组。加热组进行大鼠睾丸43℃水浴15 min;对照组行大鼠睾丸22℃水浴15 min。24 h后进行灌流和内固定,取睾丸。制作5μm的组织切片,采用睾丸原位末端标记法（TUNEL）和免疫组化分析,检测生精细胞凋亡及 Fas 和 FasL 表达。化学发光法检测大鼠血清睾酮水平。结果加热组睾丸生精细胞凋亡率（15.8％±1.6％）较对照组（2.2％±0.5％）显著增加;加热后Fas和FasL在生精细胞和支持细胞表达水平也明显升高;对照组和加热组血清睾酮（T）水平无差异。结论睾丸局部加热诱导生精细胞凋亡,Fas和FasL系统为该凋亡过程的信号通路之一。     

IL-17在大鼠肝移植急性排斥反应模型中的表达及作用研究

目的:探讨IL-17在大鼠肝移植急性排斥反应模型中的表达及作用。方法:选取32对健康状况相同的大鼠,随机分组后建立大鼠肝移植急性排斥反应动物模型。肝移植手术后取受体鼠的血浆标本和肝组织标本,对比两组受体大鼠的急性排斥反应,并测定两组大鼠的IL-17水平。结果:相较于异基因移植组受体大鼠而言,同基因移植组受体大鼠ALT和TBIL的平均含量更接近正常水平,急性排斥反应较弱。同时,同基因移植组受体大鼠术后IL-17水平明显高于异基因移植组,组间比较具有明显差异,P<0.05。结论:IL-17参与到大鼠肝移植急性排斥反应的发生过程,临床上可将IL-17水平作为急性排斥反应的衡量指标,以便及时发现移植受体的急性排斥反应,并及早作出有效应对。     

Fas/FasL系统介导的细胞凋亡与卵泡闭锁及稽留流产的关系

Fas/FasL是细胞表面的两种跨膜蛋白。目前研究认为FasL是死亡因子,Fas则是其受体。当一个细胞的FasL与另一个细胞的Fas结合时,可以导致表达Fas的细胞凋亡。Fas又称Apo-1,即CD95分子。人Fas基因定位于10号染色体q23,基因长度约25Kb。人FasL基因定位于1号染色体q23,基因长度约8Kb。Fas/FasL系统与卵泡闭锁生理过程、自身免疫疾病、肿瘤发生、移植物耐受等均有密切关系。近年来细胞凋亡因素导致稽留流产的发生受到人们的关注,而其中Fas/FasL系统在促进绒毛组织细胞凋亡方面占据重要的地位。     

心脏移植受者急性排斥反应与降钙素基因相关肽的关系

目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)与心脏移植受者急性排斥反应间的关系。方法 选择28例近交系Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,采用大鼠颈部心脏移植模型,在移植后第3天至排斥终末处死受体大鼠取血样。32只SD大鼠作为对照组。结果 实验组移植心脏的平均存活时间为(7.21 ±2.36)d,其体积明显增大并伴有充血水肿。实验组和正常对照组大鼠血浆中CGRP含量分别为(180.18±69.77)ng/L和(277.4±179.02)ng/L,差异有显著性(P <0.05)。结论 移植心脏受者急性排斥反应时血浆CGRP明显降低,说明移植心脏急性排斥反应与血浆CGRP浓度存在密切关系。     

妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血淋巴细胞凋亡的对比研究

目的:比较妊娠晚期母体外周血与胎儿脐血间淋巴细胞凋亡及其调控基因的表达,探讨妊娠期母体与胎儿在免疫功能方面的差异。方法:采用流式细胞技术分析ICP及正常妊娠妇女外周血及脐血间淋巴细胞凋亡率;以免疫细胞化学染色技术检测两组孕妇外周血及脐血间淋巴细胞上Fas、FasL、Bcl-2的蛋白表达。结果:正常妊娠组脐血淋巴细胞凋亡率显著高于外周血(P<0.05),脐血淋巴细胞上Fas、FasL的表达显著低于母体外周血淋巴细胞(P<0.05),而Bcl-2在两者间无显著性差异;ICP组脐血淋巴细胞凋亡率亦明显高于外周血(P<0.05),脐血淋巴细胞上Fas、Bcl-2的表达显著低于母体外周血淋巴细胞(P<0.05),FasL在两者间无显著性差异。结论:妊娠晚期外周血与脐血间淋巴细胞的凋亡及其调控基因的表达存在差异,而这种差异可能在维持妊娠期免疫耐受的稳定性及移植物抗宿主的排斥反应方面有重要的作用。     

n-3多不饱和脂肪酸对大鼠小肠移植慢性排斥肠黏膜细胞凋亡的抑制作用

目的: 探讨大鼠小肠移植后移植肠发生慢性排斥时,口服n-3多不饱和脂肪酸对移植肠黏膜细胞凋亡、颗粒酶B和穿孔素表达的调控作用. 方法: 将大鼠分为三组:①Lewis- Lewis组,口服玉米油;②F344-Lewis组,口服玉米油;③F344-Lewis组,口服鱼油.所有受鼠在移植术后16周取材检测.用流式细胞法检测肠黏膜细胞凋亡,RT-PCR法检测穿孔素和颗粒酶的表达. 结果: 慢性排斥发生后,移植肠黏膜细胞凋亡率、颗粒酶B和穿孔素的表达明显增加.口服鱼油可抑制移植肠黏膜细胞的凋亡、颗粒酶B和穿孔素的表达. 讨论: 口服n-3多不饱和脂肪酸能抑制慢性排斥期移植肠的排斥反应,提高受鼠和移植物的存活率,延缓移植物的慢性失功.     

大鼠模型动脉硬化形成中多种周期蛋白和周期蛋白依赖性激酶表达

目的 通过大鼠胸主动脉腹腔移植模型，进一步探讨移植物动脉硬化形成过程中平滑肌细胞增殖的机理。方法 健康纯系Wisatar大白鼠为供，SD大鼠为受，均为雄性，体重120－350g，共分为3组。A组：急性排斥组，共90只，分别于术后2，4，8周处死。每小组各30只。B组：慢性排斥组，共72只，分别于术后4，8，12周处死。每小组各24只。C组：同系对照组，供受均为Wistar大白鼠，共72例。建立同种异体大鼠胸主动脉腹腔移植模型。采用HE染色观察血管排斥程度；Masson三色染色法判断动脉硬化程度；免疫组化染色观察α-actin表达的阳性细胞数，以及这些阳性细胞表达PCNA、cdk1/cyclinB1,cdk2/cyclinE,cdk4/cyclinD1的表达程度。结果 A组整个血管壁均有明显的炎性细胞浸润，外膜病变比内膜更重。外膜α-actin阳性细胞数随着时间推移、病程进展明显增多。这些α-actin阳性细胞高度表达PCNA、cdk1/cyclinB1,cdk2/cyclinE和cdk4/cyclinD1，并随病变进展其表达程度增高。B组造成外膜炎性细胞浸润也比对照组明显，纤维化程度也高，也明显表达cdk's/cyclins；内、外膜增生程度大致相当，动脉硬化的发生较急性排斥晚，进展缓慢。滋养血管在A、B两组早期表达cdk's和cyclins，而且炎性浸润愈重，其表达愈早且明显，过快地发生增生、管腔狭窄或阻塞。结论 急、慢性排斥均可导致移植物动脉硬化。前首先出现外膜大量炎性细胞浸润及VSMC的增殖、纤维化、并大量表达cdk's和cyclins,整个管壁纤维化严重且发生较早。慢性排斥导致内、外膜增生程度相当，进展期主要表现为内、外膜VSMC增生和大量表达cdk's/cyclins。     

热休克蛋白70和Fas在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和Fas在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与临床病理特征的关系,以及HSP70和Fas在NSCLC组织中表达的相互关系。方法采用免疫组织化学SP法对46例NSCLC组织、10例正常肺组织进行免疫组织化学研究。结果NSCLC组织中HSP70的阳性表达率为80.43%(37/46)、正常肺组织中无阳性表达;Fas在NSCLC组织中的阳性表达率为65.22%(30/46),正常肺组织中阳性表达率为100.00%。HSP70阳性表达在NSCLC的病理类型、TNM分期、细胞分化程度之间的差异均无统计学意义(P均>0.05),在淋巴结有无转移之间的差异有统计学意义(P<0.05)。Fas阳性表达在NSCLC的病理类型之间的差异无统计学意义(P>0.05),在TNM分期、细胞分化程度、淋巴结转移之间的差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。HSP70与Fas在NSCLC组织中表达呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论在NSCLC组织中HSP70的高表达和Fas的低表达与肿瘤发生转移有关,HSP70和Fas可能是调控肿瘤细胞增殖及凋亡的重要基因,可以作为NSCLC的辅助诊断及判断预后的参考指标。联合检测这二项指标对肺癌的生物学行为、预后的判断有重要意义。     

妊娠期高血压疾病患者母血中可溶性FAS表达的临床研究

目的:探讨晚期妊娠母体血清中可溶性Fas水平与妊娠期高血压疾病的关系。方法:采用ELISA测定方法测定63例晚期妊娠母体血清可溶性Fas水平,其中正常晚孕组18例,轻度子痫前期组21例,重度子痫前期组24例;同时测定15例育龄期健康非孕妇女血清作为对照组。结果:孕妇组的血清游离Fas水平比较,轻度子痫前期组血清游离Fas水平高于正常晚孕组(P<0.05),重度子痫前期组也高于正常晚孕组(P<0.01),两者差异均有统计学意义,健康未孕组妇女血清游离Fas水平明显低于正常晚孕组(P<0.01)。结论:子痫前期患者外周血清中高水平的sFas可结合激活的淋巴细胞及胎盘滋养细胞中的FasL,抑制Fas/FasL系统介导激活淋巴细胞的AICD,破坏母胎界面的免疫豁免机制,导致母体对胎儿的免疫排斥作用增加,这可能是妊娠期高血压疾病发病的又一重要原因。     

Fas系统介导的细胞凋亡与肝纤维化

Fas系统介导的肝细胞凋亡是由肝细胞表面Fas与其配体结合而启动的。不同肝脏疾病的病理损伤过程因肝细胞凋亡而不同。在肝纤维化发生发展过程中,肝细胞和肝星形细胞的凋亡发挥着重要的作用。     

外周血CD4~+T细胞凋亡率对妊娠期高血压疾病眼底病变的影响

目的:探讨妊娠期高血压疾病(PIH)患者外周血CD4+T细胞凋亡率对眼底病变的影响。方法:采用流式细胞技术检测40例住院PIH患者(轻、中、重组)和20例正常妊娠待产产妇产前和产后静脉血中凋亡的CD4+T细胞率及表面表达Fas(CD95)的CD4+T细胞率,对比分析4组率的差别、相关性及对眼底病变影响。结果:产前4组之间凋亡的和表达Fas的CD4+T细胞率差异有统计学意义,分别为P0.05和P0.01,正常组、中度组和重度组各与轻度组差异有统计学意义;产后4组凋亡的CD4+T细胞率差异无统计学意义;产前和产后4组凋亡的和表达Fas的CD4+T细胞率相关性没有统计学意义。产前和产后眼底病变0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级4组之间及眼底正常组和病变组两组之间凋亡的CD4+T细胞率差异无统计学意义;眼底病变分级与妊娠高血压程度之间有明显相关性(P0.01)。结论:PIH患者眼底改变有随临床病情加重而加重趋势,产后PIH患者眼底病变情况比产前普遍好转;外周血CD4+T细胞凋亡对PIH的发生发展有一定的预警意义,虽然Fas/FasL途径参与了这个过程,但是此时它不是凋亡的主要途径,还有其它凋亡途径的参与;尚不能肯定外周血CD4+T细胞凋亡在PIH视网膜病变发生发展过程中的作用。     

富马毒素诱导肝癌细胞凋亡时Fas表达的变化

富马毒素（Fumonisins）是一组主要由串珠镰刀菌（Fusariummoniliforme）产生的真菌毒素。富马毒素B1（Fumonisin B1，FB1）是该毒素产生毒性作用的主要组分。FB1广泛存在于人、动物的粮食、饲料中，在动物体内可导致马脑白质软化症、猪肺水肿、大鼠的肝肾损伤。     

Fas及FasL在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义

目的 探讨Fas及FasL在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义.方法 应用免疫组化方法分别检测Fas及FasL蛋白在正常滋养细胞(40例)、完全性葡萄胎(36例)、侵蚀性葡萄胎(15例)、绒毛膜癌(11例)中的表达.结果 Fas在正常滋养细胞组、完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌的阳性表达率分别为95.0%、88.9%、46.7%和36.4%.Fas随着妊娠滋养细胞疾病的进展阳性率逐渐降低.正常滋养细胞组分别与侵蚀性葡萄胎组及绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=14.036,P=0.000;χ2=16.575,P=0.000),完全性葡萄胎组与侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=8.275,P=0.004;χ2=10.202,P=0.001),而正常滋养细胞组与完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎与绒毛膜癌组比较无显著性差异(χ2=0.314,P=0.575;χ2=0.015,P=0.902).FasL在正常滋养细胞组、完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌组的阳性表达率分别为17.5%、44.4%、53.3%和81.8%.FasL随着妊娠滋养细胞疾病的进展阳性率逐渐增高.正常滋养细胞组分别与完全性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组及绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=6.518,P=0.035;χ2=5.371,P=0.005;χ2=13.724,P=0.000),完全性葡萄胎组与绒毛膜癌组比较有显著性差异(χ2=4.727,P=0.030),完全性葡萄胎组与侵蚀性葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎与绒毛膜癌组比较无显著性差异(χ2=0.336,P=0.562;χ2=1.191,P=0.275).Fas与FasL表达在各组之间均呈负相关.结论 Fas的低表达和FasL的高表达降低了妊娠滋养细胞凋亡,可能是妊娠滋养细胞疾病的发病机制之一.Fas和FasL的表达在各组之间均呈负相关提示二者在妊娠滋养细胞疾病进展中可能相互影响,共同作用.     

Fas/Fas L与Survivin在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌作为一种激素依赖性实体瘤,它的发生与肿瘤细胞凋亡受阻有关。Fas/Fas L在乳腺癌细胞凋亡中起重要作用,它们在乳腺癌的诊断、治疗及预后方面有很高的临床应用价值。生存素Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis proteins,IAPs)家族的新成员,参与调控细胞的增殖和凋亡,在人类多种恶性肿瘤中,Survivin高表达并提示预后不良。奉研究对Fas/Fas L和Survivin与乳腺癌的关系研究进展加以综述。     

大豆皂甙对矽肺纤维化大鼠肺组织细胞Fas/FasL系统表达的影响

[目的]探讨大豆的皂甙(soyasaponin,SS)对实验性大鼠矽肺纤维化模型中肺组织细胞Fas/FasL表达的影响. [方法]通过复制大鼠矽肺纤维化模型,观察各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、肺组织丙二醛(MDA)在染尘及SS干预后的含量变化.采用免疫组化法观察各组大鼠肺组织细胞Fas和FasL表达的改变. [结果]给予SS后,与对模型组相比血清SOD升高、MDA显著降低(P<0.05).SiO2组Fas蛋白表达为相应对照组的4.51和5.05倍.其阳性信号主要集中于支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞. [结论]Fas/FasL系统可能参与矽肺纤维化的发病过程,一定剂量的大豆皂甙可能通过降低氧化应激,从而缓解矽肺纤维化的进展.     

Fas/FasL系统与妊娠免疫耐受

随着免疫学的飞速发展 ,妊娠免疫耐受机制的研究不断深入。在对Fas和FasL相互作用介导的细胞凋亡在免疫特赦部位及外周免疫耐受中所起的重要作用充分认识后 ,Fas FasL系统在妊娠免疫耐受中是否发挥作用日益引起学者的兴趣。研究表明 ,妊娠期 ,FasL在胎盘中高度表达 ,且体外实验证实滋养层细胞可诱导表达Fas的淋巴细胞发生凋亡 ,为妊娠免疫耐受现象的最终阐明提供了另一可能机制。     

扇贝多肽对紫外线A诱导HaCaT细胞Fas、c-fos表达的影响

目的观察扇贝多肽(PCF)对紫外线A(UVA)照射后HaCaT角质形成细胞Fas、c-fos表达的影响,以探讨PCF保护UVA致HaCaT细胞损伤的分子机制。方法体外培养的HaCaT角质形成细胞分为5组:对照组、UVA模型组、5.69mmol/LPCF组、2.84mmol/LPCF组、1.42mmol/LPCF组。蛋白质印迹法检测Fas、c-fos蛋白表达;RT-PCR检测FasmRNA表达;荧光定量PCR检测c-fosmRNA表达。结果 UVA照射后模型组Fas、c-fos表达均显著增加(P0.01),1.42～5.69mmol/L剂量范围内的PCF可抑制UVA引起的HaCaT细胞Fas、c-fosmRNA及蛋白表达(P0.05),且有剂量依赖性。结论 PCF可通过抑制Fas、c-fos表达而抑制UVA诱导的HaCaT细胞损伤。