5种中药体外抗白色念珠菌的实验研究

[目的]探索黄连、黄芩、黄柏、知母、甘草等5种中草药单独或两两配伍情况下对白色念珠菌的体外抑菌作用。[方法]采用水提醇沉法提取5种单味药及两两配伍药物的提取液,按倍比稀释法将药物提取液进行稀释,体外测定黄连等5种中草药单独及等比例两两配伍情况下对白色念珠菌的最低抑菌浓度（MIC）。[结果]黄连、黄柏和黄芩单药提取液对白色念珠菌有较强的抑菌效果,其MIC分别为6.25 mg/ml、50 mg/ml和100 mg/ml。在配伍药物组中,黄连配伍其它药物的药物组均显示出了一定的抑菌效果。其中以黄连＋知母（MIC为6.25 mg/ml）和黄连＋黄柏（MIC为12.5 mg/ml）两个药物组抑菌效果最强。[结论]黄连、黄芩和黄柏三种中草药具有直接的抗白色念珠菌作用,其中尤以黄连的抑菌作用最为显著;而知母和甘草对白色念珠菌不具备明显的抑制作用。在两两配伍的中药提取液中以黄连配知母的药效最好。     

6种常用抗菌中药对3株常见病原性细菌的抑菌作用检测

目的：建立抗菌中药对临床常见病原性细菌抑菌作用的检测方法。方法：选择6种常用抗菌中药（黄连、苦参、连翘、大黄、生地、知母）,分别采用水提法制备至质量浓度1mg/L。应用液体稀释法测定上述中药对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果：建立了中药抑菌作用的检测方法。黄连、大黄与连翘抑制细菌的作用较强,MIC值均≤0.05mg/L,其中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强（MIC值为0.00625mg/L）。结论：应用本方法可以进行中药抑菌作用的检测。抗菌中药对所试验菌种表现不同的抑菌作用。     

黄连、黄柏对耐万古霉素肠球菌抑菌活性的研究

目的：检测中药黄连、黄柏对耐万古霉素肠球菌体外抑菌活性。方法：用水煮沸法提取中药黄连、黄柏;采用美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）推荐的琼脂稀释法测定黄连、黄柏水提取液及其不同配伍液对耐万古霉素肠球菌的最小抑菌浓度（MIC）。结果：中药黄连提取液的MIC50为7．00mg／mL,MIC90为56．00mg／mL;黄柏MIC50为16．00mg／mL,MIC90为128．00mg／mL;黄连：黄柏（1：1）MIC50为1．93mg／mL,MAC如为15．38mg／mL;黄连：黄柏（1：2）MIC50为3．95mg／mL,MIC90为31．50mg／mL;黄连：黄柏（2：1）MIC如为0．91mg／mL,MIC50为7．25mg／mL。结论：黄连、黄柏提取液对耐万古霉素肠球菌均有较好的抑菌作用,其中黄连抑菌效果比黄柏为好;黄连、黄柏配伍液中,以2：1的配伍抑菌效果最好。     

苦参化学成分及其生物碱抑菌活性研究

目的 :研究苦参(Sophora flavescenes Ait)总生物碱及其主要生物碱的抑菌效果,探究苦参开发消洗剂的可行性。方法 :采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱等技术手段对苦参干燥根进行分离纯化并通过波谱数据对化合物进行结构鉴定。采用药物二倍稀释法与菌落计数相结合法考察苦参总生物碱及其主要生物碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希杆菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血型链球菌和白色念珠菌的抑菌作用,并测定各成分用药时的抑菌浓度范围。结果 :从苦参中分离了16个单体化合物,包括9个生物碱类成分和7个黄酮类成分。药敏结果显示,5个样品对所选菌株均具有一定抑菌活性;苦参总生物碱抑菌作用强于各单体生物碱;各单体对金葡球菌的抑菌效果强于其他4种菌;苦参碱和槐果碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用均强于自身氧化物。结论 :苦参中总生物碱及其主要生物碱成分存在明显的抑菌作用,各单体间抑菌活性各有不同,且对各菌种的抑菌作用也不甚相同,可为苦参开发消洗剂的可行性奠定基础。     

蒙药三子洗剂抑菌作用的研究

目的：通过进行抑菌实验,探讨蒙药三子洗剂对真菌和细菌的抑制作用。方法：采用沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基应用药物稀释法和管碟法分别进行真菌、细菌的药敏试验。结果：①抑制真菌实验结果显示：三子洗剂对实验菌株均有抑制作用,对羊毛状小孢子菌、石膏样小孢子菌与采乐洗剂组抑菌作用相当（P〉0.05）;对红色毛癣菌、青霉菌和白色念珠菌抑菌作用优于采乐洗剂组（P〈0.05）;三子洗剂高浓度组与低浓度组差异无统计学意义（P〉0.05）,表明其抑菌作用无浓度差异。②抑制细菌实验结果显示：三子洗剂对实验菌株均有抑制作用,对于革兰氏阴性杆菌（大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌）抑菌作用优于氯霉素组（P〈0.05）;对于革兰氏阳性球菌（金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌）青霉素组抑菌作用优于三子洗剂（P〈0.05）;三子洗剂高剂量组与中、低剂量组差异有统计学意义（P〈0.05）,表明三子洗剂抑菌作用呈良好的量效关系。结论：三子洗剂对临床常见的真菌和细菌具有良好的抑制作用,对临床应用具有重大的指导意义。     

6种抗菌中药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用

目的观察几种常用抗菌中药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的抑菌活性。方法选择6种（黄连、苦参、连翘、大黄、生地、知母）常用抗菌中药,采用水提法提取浓度至1g／ml。以稀释法测定上述中药对100株临床分离株的最低抑菌浓度（MIC）。结果大黄、黄连、连翅对MRSA有较强抑菌作用,其中以黄连对MRSA的作用最强,MIC值≤0．025g／ml。同一种中药对MRSA的不同菌株表现出相近的抑菌活性。结论常用抗菌中药对MRSA有一定的抑菌作用,在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的防治中抗菌中药可以发挥一定作用。     

多种中药对泛耐药肺炎克雷伯菌体外抗菌活性筛选

目的筛选对泛耐药肺炎克雷伯菌有抗菌活性的中药,并初步探究其体外抑菌机制。方法从60种中药颗粒剂中,筛选对28株泛耐药菌有体外抗菌活性的中药。调整有抗菌活性药液pH至中性,比较调整pH前后抑菌效果差异。检测有抑菌活性中药的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）、联合抑菌效果以及对细菌细胞外碱性磷酸酶（ALP）活性改变。结果筛选出黄芩、黄连、麻黄和鸡血藤等4种对泛耐药菌均有抑菌作用的中药,其MIC依次为:64、64（82.1%黄连菌株）、128（19.9%）、128、256 mg/mL;MBC依次为:128、64（28.6%黄连菌株）、128（71.4%）、256、512 mg/mL。4种中药调整pH前后抑菌效果均无差异（P>0.05）。黄连和黄芩联合应用时的FIC值均>2。随着4种药物浓度的增加,ALP的浓度均升高,其中黄芩和黄连作用后的ALP浓度升高更为明显。结论黄芩、黄连、麻黄和鸡血藤具有良好的体外抗菌效果,其中黄芩和黄连的抗菌机制可能与增加细胞膜的通透性有关;但黄芩和黄连联合用药有拮抗作用。     

不同炮制方法对黄连主成分含量及抗菌活性的影响

目的：研究黄连不同炮制品水煎剂中主成分含量的变化,探讨不同炮制方法对黄连抗菌活性的影响。方法：以小檗碱为黄连的代表成分,运用HPLC法测定4种不同黄连炮制品水煎剂中代表成分的含量。将黄连不同炮制品水煎液置于培养基中与细菌同时温育,观察药物对细菌生长繁殖的影响,以此判断药物抑菌作用的强弱。结果：黄连不同炮制品中小檗碱的含量明显不同,以药物最低抑菌浓度（MIC）显示黄连不同炮制品均有抑菌作用,但作用强弱不同。结论：不同炮制法不仅改变黄连药材的组分和含量,还可能通过影响其抗菌活性,使其药性及功能主治发生变化。     

黄连不同炮制品的体外抑菌实验观察

目的 用实验研究黄连不同炮制品的体外抑菌效果。方法 采用平皿法即将黄连不同炮制品水煎液置于培养基中与细菌同时温育，观察药物对细菌生长繁殖的影响，以此判断药物抑菌作用的强弱。结果 以药物最低抑菌浓度（MIC）显示黄连不同炮制品均有抑菌作用，但作用强弱不同。结论 黄连不同炮制品与生黄连一样均有不同程度的抑菌作用，但作用菌群有变化。     

研究艾油、枸杞浸出液单独与联合体外抗菌作用

目的:研究艾油、枸杞浸出液单独与联合在体外的抗菌作用。方法:通过制备不同浓度的艾油、枸杞浸出液,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌进行抑菌实验。结果:60%~100%浓度的艾油为有效抑菌浓度,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌+金黄色葡萄球菌混合菌的抑菌作用较强,对白色念珠菌的抑菌作用较弱。80%~100%浓度的枸杞浸出液为有效抑菌浓度,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌作用较弱。枸杞浸出液∶艾油=1∶4~1∶7为有效抑菌配比,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌作用较弱,对大肠杆菌+金黄色葡萄球菌混合菌、大肠杆菌+金黄色葡萄球菌+白色念珠菌混合菌的抑菌作用较强。枸杞浸出液+艾油联合对大肠杆菌+金黄色葡萄球菌+白色念珠菌混合菌的抑菌作用强于枸杞浸出液、艾油分别单独对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌作用。枸杞浸出液∶艾油为有效抑菌配比时,对大肠杆菌的抑菌圈直径为8.6 mm,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径是8.7 mm,对白色念珠菌的抑菌圈直径是7.6 mm,对大肠杆菌+金黄色葡萄球菌+白色念珠菌混合菌的抑菌圈直径是10.0 mm。结论:枸杞浸出液、艾油两种抑菌剂联合的抑菌效果比单一抑菌剂的抑菌效果明显,即枸杞浸出液和艾油联合抑菌作用强于单独抑菌作用。     

溶菌酶与EDTA二钠的协同抑菌作用

目的：研究溶菌酶与乙二胺四乙酸二钠（ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt,EDTA二钠）对粪肠球菌和牙髓卟啉单胞菌的协同抑菌作用。方法：分别培养粪肠球菌和牙髓卟啉单胞菌,并调整菌液浓度至108菌落形成单位（colony-forming unit,CFU）/mL;配制终浓度为0.3、0.5、1、2、5、10、50、100、150和300 g/L的单纯溶菌酶抑菌液,以及添加浓度为0.5、1.0、2.0 g/L的EDTA二钠的混合抑菌液。将菌液与抑菌液作用15 min,加入水溶性四唑盐（water-soluble tetrazolium,WST）工作液染色,酶标仪测定光密度值,计算细菌活性。结果：单纯溶菌酶抑菌液（浓度0.5~150 g/L）对两种细菌的抑菌作用随溶菌酶浓度的升高而增强,且对粪肠球菌的抑菌作用更显著。EDTA二钠与溶菌酶有协同抑菌作用,与溶菌酶浓度相关。溶菌酶浓度为0.5~50 g/L时,EDTA二钠协同溶菌酶作用于粪肠球菌（P<0.05）,可使其抑菌作用提高约1.2~3.7倍;溶菌酶浓度为0.5~10 g/L时, EDTA二钠协同溶菌酶作用于牙髓卟啉单胞菌（P<0.05）,可使其抑菌作用提高约1.3~3.5倍;当溶菌酶浓度大于100 g/L时,加入EDTA二钠对细菌均没有明显的协同抑菌作用（P>0.05）。结论：对于粪肠球菌及牙髓卟啉单胞菌,在溶菌酶较低浓度时,EDTA二钠有协同抑菌作用;在溶菌酶较高浓度时,EDTA二钠无协同抑菌作用。     

双黄连对多重耐药大肠埃希菌抗菌增敏作用及机制研究

目的：探讨双黄连粉针剂对多重耐药大肠埃希菌抗菌增敏作用及其作用机制。方法：取分离于临床的多重耐药大肠埃希菌,二倍稀释法测定双黄连与头孢他啶单独使用的最低抑菌浓度（MIC）,棋盘稀释法测定双黄连和头孢他啶联合使用时部分抑菌浓度指数（FIC）,动态生长曲线法观察双黄连和头孢他啶及其联合使用时对细菌生长的影响,采用荧光分光光度法测定双黄连对柔红霉素在细菌菌体内聚集的影响。结果：双黄连粉针剂与头孢他啶联合应用时FIC指数=0.375,具有协同抑菌作用;双黄连联合头孢他啶能够明显抑制细菌生长;亚抑菌浓度双黄连分别预处理4、6、8 h后,大肠埃希菌菌体内柔红霉素蓄积程度较空白对照增强（P〈0.05）,其中6~8 h时较为明显。结论：双黄连与头孢他啶联合应用具有协同作用,其作用机制可能与增加药物在菌体内蓄积水平有关。     

黄连不同炮制品的体外抑菌实验研究

[目的]研究黄连不同炮制品的体外抑菌效果。[方法]将黄连不同炮制品水煎液置于培养基中与细菌同时温育,观察药物对细菌生长繁殖的影响,以此判断药物抑菌作用的强弱。[结果]以药物最低抑菌浓度（MIC）显示黄连不同炮制品均有抑菌作用,但作用强弱不同。[结论]黄连不同炮制品与生黄连一样均有不同程度的抑菌作用,但作用菌群有变化。     

曲焕章牙膏样品对口腔常见致病菌的抑菌试验研究

目的：研究曲焕章牙膏对口腔常见致病菌抑菌作用。方法采用试管液体稀释法试验,测定曲焕章牙膏对金黄色葡萄球菌、A群链球菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度（MIC）。结果曲焕章牙膏对铜绿假单胞菌无抑制作用;对金黄色葡萄球菌、A群链球菌MIC均为0.0019 g/mL;对白色念珠菌的MIC为0.0313 g/mL。结论曲焕章牙膏对铜绿假单胞菌无抑菌作用,对金黄色葡萄球菌、A群链球菌抑菌作用较对白色念珠菌和铜绿假单胞菌好。曲焕章牙膏不同剂量细菌抑菌作用无差异。     

家蝇幼虫淋巴液的抑菌作用及其SDS-PAGE分析

目的 观察针刺诱导家蝇幼虫血淋巴抗菌物质抑菌作用与抗菌分子.方法 室内饲养的家蝇三龄幼虫,经针刺体壁处理后48 h,提取其血淋巴,观察单独使用血淋巴和血淋巴与氨苄青霉素混合对9种应试细菌的抑菌效果,血淋巴与抗真菌药氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果,应用SDS-PAGE分析血淋巴抗菌分子表达.结果 针刺家蝇幼虫后48 h的血淋巴,作用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、黄色小球菌,结果显示:针刺家蝇幼虫后48 h的血淋巴对试验9个标准株细菌,均产生明显抑菌环,经单因素方差分析,显示各抑菌试验组的抑菌效果,皆有显著差异(P＜0.001).其中对黄色小球菌抑菌活力最强.1 μ1氨苄青酶素与7 μ1针刺诱导家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用.针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显协同增强作用.SDS-PAGE分析结果显示:针刺幼虫后发育的成蝇和针刺幼虫血淋巴的电泳条带与未针刺者相比,针刺幼虫后发育的成蝇,在24000～97000范围内表达尤为增强,在12000附近有一条特异性条带.针刺家蝇3龄幼虫血淋巴SDS-PAGE分析显示,在24 000、35000、40 000～96000范围内表达明显增强,其中35 000、12 000条带较为特异.结论 本研究进一步验证了家蝇血淋巴的抑菌活性,发现针刺诱导家蝇幼虫血淋巴对黄色小球菌抑菌活力最强,氨苄青霉素与家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用,针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显增强作用,上述发现在国内外报道较少,本研究结果,为进一步开发这类抗菌物质,提供了实验资料.     

苦参泡腾片体外抗菌作用的实验观察

目的：检测苦参泡腾片对常见病原菌的体外抗菌作用。方法：用试管法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌进行抑菌试验。用试管法和平皿划线培养法进行杀菌试验。结果：苦参总碱对上述病原菌的抑菌浓度／杀菌浓度分别为：3．12／6．25（g／L）,3．12／12．5（g／L）,1．56／6．25（g／L）,6．25／12．5（g／L）,3．12／6．25（g／L）。结论：苦参总碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌都具有抗菌作用。     

赤丹丸与其组方药材的体外抑菌试验

目的：研究赤丹丸及其组方药材的体外抑菌作用。方法：采用液体培养基2倍稀释法测定赤丹丸及其组方药材的水提取物和乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌的体外最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：赤丹丸及其组方药材的水提取物和醇提取物对白色念珠菌的抑菌作用明显弱于对其它3种菌的作用（P〈0．05），其中药材的水提取物体外抑制白色念珠菌作用相对较强（P〈0．05）；各种提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的抑菌作用也各有差异。药材水提取物对铜绿假单胞菌、白色念珠菌的抑菌作用最强（P〈0．05）；赤丹丸醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌作用最强（P〈0．05）。结论：赤丹丸及其组方药材的水提取物与醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均具有体外抑菌作用。     

七种清热解毒类中药对四种标准菌株的作用

目的为清热解毒类方药抗菌效价的生物检定法确立目标药材和目标菌株;方法观察七种清热解毒类中药对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、藤黄微球菌的抑制作用;结果连翘对四种细菌均有较好抑制作用;板兰根、丹皮对四种菌均没有出现抑制作用;苦参对四种细菌均有一定抑制作用;金银花有一定抑菌作用;鱼腥草有一定的抑菌作用;穿心莲对四种细菌均有较好抑制作用。结论不同清热解毒类方药有不同的抗菌谱。     

黄芩、黄连、五味子对5种多重耐药菌抑菌作用的实验研究

目的:探讨黄芩、黄连、五味子三种中药对多重耐药菌株的抑菌作用。方法:制备黄芩、黄连、五味子药液,采用试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,分别测定它们对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、屎肠球菌及大肠埃希菌五种多重耐药细菌的最低抑菌浓度。结果:黄芩、黄连、五味子对不同的耐药菌有不同程度的抑菌作用,五味子的抑菌作用显著高于黄芩、黄连。结论:五味子对多重耐药菌均有一定的抑菌作用,可尝试用于临床多重耐药菌的治疗。     

龙血竭、苦参、蜘蛛香的体外抑菌作用研究

目的：研究龙血竭、苦参、蜘蛛香的体外抑菌活性.方法：以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌和白念珠菌为实验菌株,采用固体培养基连续稀释法观察龙血竭、苦参、蜘蛛香体外抑菌活性.结果：龙血竭和苦参对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和白念珠菌均有不同程度的抑菌作用,对大肠埃希菌的抑菌作用较差;蜘蛛香对这3种细菌及白念珠菌均有较好的抑菌作用.结论：龙血竭、苦参和蜘蛛香对细菌和真菌在体外有一定的抑菌活性,有一定的开发前景.