盐酸小檗碱对 H2O2 诱导的 H9C2 心肌细胞损伤的保护机制研究

目的:探讨盐酸小檗碱对H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护作用和机制。方法:将H9C2心肌细胞随机分成对照组、模型组(200μmol/L H_2O_2处理)、盐酸小檗碱+H_2O_2组(10μmol/L盐酸小檗碱预处理+200μmol/L H2O)2和盐酸小檗碱+Tatbeclin1+H_2O_2组(10μmol/L盐酸小檗碱预处理+1μmol/L Tat-beclin1和200μmol/L H2O)2。采用MTT法测定细胞活力、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)法测定细胞损伤、免疫荧光实验分析细胞自噬情况、Western Blot检测细胞beclin1表达。结果:与对照组比较,模型组H9C2细胞存活率显著降低、LDH释放显著增加、LC3绿色荧光增多、beclin1蛋白表达显著增加(P 0.05);与模型组比较,盐酸小檗碱+H_2O_2组H9C2细胞存活率提高,LDH释放减少、LC3绿色荧光减少、beclin1蛋白表达降低(P 0.05);与盐酸小檗碱+H_2O_2组比较,盐酸小檗碱+Tat-beclin1+H_2O_2组H9C2细胞存活率降低、LDH释放增加、LC3绿色荧光增多(P 0.05)。结论:盐酸小檗碱能有效减轻H_2O_2诱导的H9C2心肌细胞损伤和细胞自噬,其机制可能与抑制beclin1表达有关,为临床上应用盐酸小檗碱防治心肌细胞损伤提供实验基础和理论依据。     

姜黄素诱导食管癌Eca-109细胞凋亡机制的研究

目的 观察姜黄素诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,并初步探讨其作用机制.方法 通过CCK-8法检测姜黄素不同浓度、不同时间点作用于Eca-109细胞的增殖抑制率.应用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性.流式细胞技术检测细胞早期凋亡.免疫细胞化学法检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达情况.结果 随浓度增加时间延长各组细胞生长抑制率有明显增高,且呈剂量浓度依赖性,组间差异有显著性(P＜0.01).Caspase-3活性检测发现:姜黄素20μmol·L-1、40μmol·L-1作用24 h后OD值与对照组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术检测到姜黄素作用后,细胞凋亡率明显升高.免疫细胞化学染色显示,随着姜黄素浓度的增高和作用时间的增长,Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达增强.结论 姜黄素可能是通过诱导caspase-3表达活性增高,上调促凋亡基因Bax及下调抗凋亡基因Bcl-2的表达,诱导Eca-109发生凋亡.     

黄芪桂枝五物汤对H2O2诱导人脐静脉细胞损伤的保护作用及机制

目的 探讨黄芪桂枝五物汤对H2O2诱导人脐静脉细胞(HUVECs)损伤的保护作用及机制.方法 HUVECs分为正常组,模型组,阳性药组(卡维地洛),黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组,各组水提醇沉液培养24 h后加入H2O2溶液使终浓度达到400 μmol/L).MTT法检测细胞存活率;检测细胞上清LDH(乳酸脱氢酶)活性...     

小鼠艾灸血清诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

运用艾灸血清和小鼠胸腺细胞瘤 (EL 4)进行细胞培养 ,观察艾灸血清在体外对肿瘤细胞形态、细胞周期及DNA断点的影响。结果发现艾灸血清能诱导肿瘤细胞凋亡 ,引起肿瘤细胞在形态上发生较典型的凋亡改变 ,影响肿瘤细胞由S期向G2 M期的转变过程 ,提高肿瘤细胞DNA断点标记阳性率。说明艾灸血清中可能含有某些已知或未知的能对肿瘤细胞生长产生抑制的成份     

没食子酸丙酯对H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响及其作用机制

目的 探讨没食子酸丙酯（propyl gallate,PG,赤芍801）对H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）氧化损伤的影响及其作用机制。方法 将SH-SY5Y细胞均分为对照组、H2O2模型组、PG1组、PG2组和PG3组,对照组常规加入DMEM/F12培养液培养;H2O2模型组加入H2O2 200 μmol·L-1;PG1组加入PG 20 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1;PG2组加入PG 40 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1;PG3组加入PG 80 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1。比较5组SH-SY5Y细胞的增殖活性,细胞培养物上清中8-OHdG,细胞内ROS、LDH释放量,Hoechst 33258染色结果、细胞周期变化情况及Caspase-3酶活性。结果 H2O2模型组细胞存活率显著低于对照组,细胞培养物上清中8-OHdG水平显著高于对照组,ROS水平显著高于对照组,LDH释放量显著高于对照组,具有非常显著性差异（P＜0.01）;PG1组、PG2组和PG3组细胞存活率均显著高于H2O2模型组,细胞培养物上清中8-OHdG水平均显著低于H2O2模型组,ROS水平均显著低于H2O2模型组,LDH释放量均显著低于H2O2模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PG可显著改善SH-SY5Y细胞凋亡情况,且具有剂量依赖关系;H2O2模型组G0/G1期百分率显著高于对照组,S期、G2/M期和PI均显著低于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PG2组、PG3组G0/G1期百分率显著低于H2O2模型组,S期、G2/M期和PI均显著高于H2O2模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;H2O2模型组Caspase-3酶活性显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;PG2组和PG3组Caspase-3酶活性显著低于H2O2模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PG在一定剂量范围内对H2O2诱导的SH-SYSY神经细胞损伤具有明显的保护作用,其保护效应可能与清除ROS,减轻DNA氧化损伤,抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。     

艾灸血清体外对小鼠EL-4淋巴瘤细胞作用的实验研究

艾灸血清在很大程度上能客观地反映艾灸后宿主全身的免疫状态，本研究中我们以艾灸血清作为研究对象。在体外实验中观察艾灸血清对小鼠EL-4淋巴瘤细胞的作用。目的：观察艾灸血清体外对小鼠EL-4淋巴瘤细胞增殖分化的影响。方法：采用艾灸血清培养小鼠EL-4淋巴瘤细胞，观察细胞增殖实验、生长曲线、软琼脂集落形成实验、细胞内cAMP、cGMP水平的变化。结果：艾灸血清能够抑制小鼠EL-4细胞增殖，使其生长速度明显减慢。降低其在软琼脂中的集落形成率，增加EL-4细胞内出御含量、使出cAMP／cGMP比值增加。结论:提示艾灸血清具有抑制小鼠EL-4淋巴瘤细胞增殖、诱导其分化的作用。     

熊果酸通过促进自噬保护H2O2 诱导的H9C2 大鼠心肌细胞氧化应激损伤

目的研究熊果酸（Ursoic acid,UA）对过氧化氢（H2O2）诱导的H9C2 大鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护 作用及对细胞自噬的调节作用。方法以200 μmol·L-1 H2O2 诱导24 h 建立H9C2 心肌细胞氧化应激损伤模 型。将H9C2 细胞随机分为6 组：正常组、溶剂组、模型组及熊果酸高、中、低剂量（10、5、2.5 μmol·L-1） 组。采用CCK-8 法检测细胞存活率;EdU 法检测细胞增殖能力;TBA 法检测丙二醛（MDA）脂质氧化水平; WST-8 法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性;Western Blot 法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及p62 的表达水 平。结果与正常组比较,模型组细胞的存活率及EdU 阳性细胞（红色荧光）百分比均明显降低（P＜0.05）;细 胞内MDA 脂质氧化水平明显升高（P＜0.05）,SOD 活性明显降低（P＜0.05）;LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比值明显上调 （P＜0.05）,p62 蛋白表达明显下调（P＜0.05）。与模型组比较,熊果酸高、中、低剂量均能明显提高H9C2 的 细胞存活率及EdU 阳性细胞百分比（P＜0.05）;降低MDA 水平（P＜0.05）,提高SOD 活性（P＜0.05）;上调 LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比值（P＜0.05）,下调p62 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论熊果酸对H2O2 诱导的H9C2 大 鼠心肌细胞氧化应激损伤具有明显保护作用,可能与其促进细胞自噬有关。     

地黄多糖对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的:研究地黄多糖(rehmannia polysaccharide)对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究。方法:无菌环境下分离并培养SD大鼠乳鼠心肌细胞72h后随机分为:空白对照组、H_2O_2干预组、地黄多糖(10、20和40μg/ml)+H_2O_2干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)+H_2O_2干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。各组细胞经药物干预6h后,通过光学纤维镜观察细胞形态并采用MTT法检测细胞存活率;检测培养液中心肌酶:谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定细胞中抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫(ELISA)法测定培养液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;通过Flow Cytometry检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中AKT mRNA、bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:较H_2O_2干预组,地黄多糖(20、40μg/ml)+H_2O_2干预组乳鼠心肌细胞形态明显好转,细胞存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低,细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量显著降低,细胞凋亡状况明显改善、凋亡率显著降低,bcl-2 mRNA表达显著上调且Bax mRNA表达显著下调、bcl-2/Bax表达比值显著升高,其中地黄多糖40μg/ml+H_2O_2干预组AKT mRNA表达显著上调。结论:地黄多糖能够有效改善H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞生存状态、提高细胞存活率、降低细胞凋亡率,提示地黄多糖对H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞具有保护作用;其作用机制可能与地黄多糖能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,调节凋亡相关基因表达,抑制炎症反应相关。     

野蔷薇根总黄酮对H2O2 诱导损伤的HUVEC 线粒体功能及凋亡通路的影响

目的探讨野蔷薇根总黄酮（TF-RM）对H2O2 诱导损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）线粒体功能及凋亡 通路的影响。方法将SD 雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C 组（0.08 g·kg-1）、TF-RM 组（2.5 g·kg-1）, 每组10 只。灌胃给药,每天1 次,连续7 d,制备含药血清。采用H2O2（950 μmol·L-1）诱导HUVEC 损伤,并 分别与维生素C 及TF-RM 低、中、高剂量（5%、10%、15%）含药血清共培养24 h。采用DCFH-DA 荧光定量 法检测HUVEC 中活性氧（ROS）的含量;JC-1 染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;Fluo-4 染色法检测细胞内 Ca2+浓度;Western Blot 法检测B 淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋 白酶（Caspase）-9、Caspase-3 蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC 内的ROS 水平、线 粒体膜电位下降率、Ca2+浓度以及Bax 蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义（P < 0.01）。与模型组比 较,TF-RM 各剂量组细胞内的ROS 水平、Ca2+浓度及Bax 蛋白表达量均明显降低（P < 0.05,P < 0.01）,Bcl-2 蛋白表达量升高（P < 0.05）;TF-RM 高剂量组的线粒体膜电位下降率明显降低（P < 0.05）;TF-RM 中剂量组的 Caspase 9 蛋白表达量明显降低（P < 0.05）。结论TF-RM 能够改善H2O2 诱导的HUVEC 线粒体功能损伤,发 挥对细胞凋亡的保护作用。     

艾灸血清体外对小鼠EL-4淋巴瘤细胞作用的实验研究

艾灸血清在很大程度上能客观地反映艾灸后宿主全身的免疫状态 ,本研究中我们以艾灸血清作为研究对象 ,在体外实验中观察艾灸血清对小鼠EL - 4淋巴瘤细胞的作用。目的 :观察艾灸血清体外对小鼠EL - 4淋巴瘤细胞增殖分化的影响。方法 :采用艾灸血清培养小鼠EL - 4淋巴瘤细胞 ,观察细胞增殖实验、生长曲线、软琼脂集落形成实验、细胞内cAMP、cGMP水平的变化。结果 :艾灸血清能够抑制小鼠EL - 4细胞增殖 ,使其生长速度明显减慢 ,降低其在软琼脂中的集落形成率 ,增加EL - 4细胞内cAMP含量、使cAMP/cGMP比值增加。结论 :提示艾灸血清具有抑制小鼠EL - 4淋巴瘤细胞增殖、诱导其分化的作用。     

参麦饮含药血清对H_2O_2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用

目的:通过观察参麦饮含药血清对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响,探讨参麦饮含药血清对损伤的HUVEC的保护作用及其机制。方法:15只SD大鼠随机分为3组:正常对照组及参麦饮1.1、5.4 g/kg组,每日3次灌胃给药,连续3 d。末次给药1 h后,腹主动脉取血,制备含药血清。使用不同浓度的H_2O_2诱导HUVEC细胞0.5 h,进行氧化应激损伤模型的建立,通过CCK-8法检测,明确H_2O_2的浓度为800μmo1/L时为最适的造模浓度;利用CCK-8试剂探讨含药血清作用不同时间对HUVEC细胞存活率的影响;利用CCK-8试剂进行含药血清对HUVEC细胞及H_2O_2损伤的HUVEC细胞存活率的影响;采用荧光染色法观察活性氧(ROS);利用试剂盒检测丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活力;采用Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中PI3K、AKT、BAX、BCL-2、Caspase3的蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞存活率显著降低(P<0.01),ROS生成量、MDA含量、LDH活力显著升高(P<0.01),SOD活力、NO含量显著降低(P<0.01),细胞凋亡率升高,PI3K、AKT、BCL-2蛋白表达及BCL-2/BAX的比值显著降低(P<0.01),BAX、Caspase3蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,参麦饮1.1 g/kg 15%含药血清使细胞活力显著升高(P<0.01),ROS生成量、MDA含量、LDH活力明显降低(P<0.05或P<0.01),SOD活力、NO含量明显降低(P<0.05或P<0.01);细胞凋亡率明显降低;PI3K、AKT、BCL-2蛋白表达及BCL-2/BAX的比值明显升高(P<0.05或P<0.01),BAX、Caspase3蛋白表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:参麦饮含药血清对H_2O_2诱导损伤的血管内皮具有明显保护作用。     

红参对H_2O_2诱导H9c2大鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨红参有效成分对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法过氧化氢(H_2O_2)诱导H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌细胞氧化应激损伤模型;MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞因子LDH释放、SOD活性和MDA含量;流式细胞术检测ROS、细胞凋亡;Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果与模型组相比,红参有效成分预处理后,心肌细胞存活率显著提高,LDH水平下降,SOD活性显著提高,MDA水平受到抑制,ROS水平显著降低,细胞凋亡率显著降低。同时红参干预后心肌损伤细胞促凋亡蛋白Bax下调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,Bcl-2/Bax比值升高。结论红参通过降低ROS水平和细胞凋亡保护心肌细胞氧化应激损伤。     

人参皂苷Rg1通过激活Nrf2/HO-1信号通路抑制H2O2-N2a细胞氧化应激损伤的研究

目的 探究人参皂苷Rg1对H2O2诱导的N2a细胞的保护作用及机制.方法 实验分为对照组、模型组、给药组,通过500μmol/LH2O2孵育5h构建体外细胞损伤模型,给药组给予50 μmol/L Rg1.采用CCK-8法检测细胞存活率,运用Hoechst 33258染色法及免疫荧光化学法检测细胞凋亡率,选用试剂盒检测各...     

石斛合剂减轻H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞氧化应激的研究

目的:观察石斛合剂含药血清对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞氧化应激的影响及可能的机制。方法:体外培养的SH-SY5Y细胞预先予以石斛合剂含药血清(10%)孵育24 h,加入终浓度为400μmol·L-1的H_2O_2培养1 h,采用MTT法测细胞存活率、酶法测细胞内SOD活力、MDA和GSH含量、流式细胞术测细胞凋亡情况等,以观察石斛合剂含药血清对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的影响。结果:与模型组比较,石斛合剂含药血清能明显提高受H_2O_2刺激的SH-SY5Y细胞的存活率(P0.05),降低MDA水平和提高SOD和GSH活力(P0.01),并减少因H_2O_2引起的神经细胞凋亡。结论:石斛合剂可保护H_2O_2引起的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤并抑制其凋亡。     

白藜芦醇对人胎盘滋养细胞氧化应激损伤的影响及机制研究

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的抗氧化应激损伤作用.方法:应用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导建立人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo氧化应激模型,此模型加入不同浓度RES(10、50、100、200μmol/L),作用8 h.观察...     

银杏内酯B对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞氧化应激损伤的影响

目的研究银杏内酯B(Ginkgolide B,GB)对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞氧化应激损伤的影响。方法将对数生长期的H9c2心肌细胞随机分为5组:空白对照组、H_2O_2干预组、GB(50、100和200μmol/L)干预组。检测细胞存活率、培养液中心肌酶(AST、CPK、LDH)含量、细胞中氧自由基(ROS)含量和抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量;检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,检测NF-k B蛋白表达并进行半定量分析。结果与H_2O_2干预组比较,GB(100、200μmol/L)干预组细胞存活率显著升高;培养液中AST、CPK、LDH含量和细胞中ROS、MDA含量显著降低,SOD、CAT活性显著升高,细胞凋亡状况明显改善、凋亡率显著降低,NF-k B蛋白表达显著下调;其中GB(200μmol/L)干预组GSH-Px活性显著降低。结论 GB能够有效提高细胞存活率,改善抗氧化酶活性、降低ROS含量、降低氧化应激损伤,下调NF-k B蛋白表达、降低细胞凋亡率,提示GB对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞氧化应激具有抑制作用。     

丹酚酸B抗氧化应激损伤机制的研究进展

丹参始载于《神农本草经》,丹参具有活血祛瘀、凉血消痈的功效,近代药理学研究发现丹参具有强心、改善微循环、抗血栓等作用。临床当中常用丹参的水煎剂,丹参的水煎剂的溶解成分主要为丹酚酸类物质,其中丹酚酸类物质当中的丹酚酸B是丹参水溶性成分之一,具有很强的生理学活性,丹酚酸B是丹酚酸类物质当中抗氧化作用最强的。丹酚酸B在体内具有调节烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶,脱偶联型内皮一氧化氮合酶（eNOS）,并通过调节Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3/血管内皮生长因子（JAK2/STAT3/VEGF）和肿瘤阻抑蛋白（p53）,B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）抗凋亡通路,抑制细胞外信号调节激酶/有丝分裂原活化蛋白激酶（ERK/MAPK）,c-Jun氨基末端激酶/有丝分裂原活化蛋白激酶（JNK/MAPK）,丝裂原活化蛋白激酶p38（p38 MAPK）和雌激素受体α/磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/核转录因子-κB （ERα/PI3K/Akt/NF-κB）抗炎通路,沉默信息调节因子2相关酶1/核因子E2相关因子2/Kelch样ECH联合蛋白1-抗氧化反应元件（SIRT1/Nrf2/Keap1-ARE）和NAD依赖性脱乙酰酶sirtuin-3/β细胞上的叉头转录因子1/超氧化物歧化酶（SIRT3/FOXO1/SOD2）抗氧化通路和促自噬通路抑制氧化应激,保护组织器官免受氧化损伤。本文从丹酚酸B抗氧化应激损伤的通路研究出发,综述近五年发表在国内外期刊的相关研究,为扩大丹酚酸B临床应用范围提供新的思路。     

龙胆苦苷与黄芩素对hiPS诱导的肝样细胞过氧化氢造成的氧化损伤的保护作用

目的:建立H_2O_2致人诱导多能干细胞(i PSC)诱导的肝样细胞损伤模型并探讨龙胆苦苷与黄芩素对H_2O_2致肝样细胞损伤的保护作用。方法:采用四步诱导法,将人i PSC诱导为肝样细胞,将其分为正常组、模型组、中药单体干预组。除正常组外,其他组均以H_2O_2造模,建立肝样细胞氧化损伤模型,龙胆苦苷(gentiopicroside,GPS)做预防作用研究,在干预组中先加药,后造模。黄芩素(Baicalein,BAI)做保护作用研究,在干预组中先造模,后加药;通过收集细胞及细胞培养上清液,按照试剂盒的方法测定上清液中天冬氨酸转氨酶(ALT)、丙氨酸转氨酶(AST),细胞中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与正常组相比,模型组上清中ALT、AST升高,细胞中MDA含量显著升高,SOD活性显著降低,差异均具有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,黄芩素及龙胆苦苷干预组均可显著降低上清液中ALT和AST活性及肝样细胞中MDA含量,显著升高肝样细胞中SOD活性,差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:基于人i PSC诱导的肝样细胞成功建立H_2O_2氧化损伤模型,相较于其他肝损伤模型,此次造模的细胞是人源诱导而来,更贴近于人的病理,对肝损伤疾病具有临床指导意义。龙胆苦苷对H_2O_2致人诱导多能干细胞诱导的肝样细胞损伤有显著的预防作用。黄芩素对H_2O_2致人诱导多能干细胞诱导的肝样细胞损伤有显著保护作用。     

壮医药线点灸联合针挑疗法对血管氧化应激损伤的影响

目的:探讨壮医药线点灸联合针挑疗法对血管氧化应激损伤的影响。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、联合组,每组20只。采用坐骨神经慢性压迫损伤法复制血管氧化损伤模型。联合组取双侧"足三里"进行药线点灸,取左侧"阳陵泉""环跳"进行针挑,点灸和针挑均7d为1个疗程,共进行3个疗程的治疗。采用放射免疫分析法检测血浆6-酮-前列环素F 1α(6-keto-PGF 1α)、血栓素B 2(TXB 2)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的水平,免疫组化法观察股动脉环氧合酶2(COX-2)表达及血管形态学改变。结果:和对照组比较,模型组6-keto-PGF 1α、NO水平下降(P0.05),而TXB 2、ET水平显著上升(P0.01)。和模型组比较,联合组6-keto-PGF 1α、NO水平上升(P0.05),而TXB 2、ET水平显著下降(P0.01)。模型组COX-2表达较对照组增多,联合组COX-2表达较模型组显著减少(P0.01)。模型组血管内膜增生,管壁增厚;联合组血管内膜增生,管壁增厚现象减轻。结论:壮医药线点灸联合针挑疗法可以下调COX-2表达,进而调节前列环素2/血栓素A 2及NO/ET平衡,抑制血管内膜增生和血管重构,可能是其抗血管氧化损伤的作用机制之一。     

调脂一号含药血清对H_2O_2诱导HUVECs炎症因子表达的影响

目的:探讨调脂一号(TZYH)含药血清对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎性因子表达的影响。方法:采用100μmol·L-1H2O2复制HUVECs损伤模型,TZYH含药血清倍比稀释后分为3个剂量干预组(体积分数10%),运用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,酶联免疫吸附实验检测细胞分泌白细胞介素1β和肿瘤坏死因子的变化,进一步通过RT-PCR方法检测炎症因子相关基因白细胞介素1β和肿瘤坏死因子的表达。结果:TZYH含药血清能明显提升H2O2损伤后的HUVECs存活率,流式细胞技术结果显示TZYHF含药血清抑制血管内皮细胞凋亡;ELISA和RT-PCR结果提示TZYHF抑制H2O2所致的血管内皮细胞凋亡可能是通过降低IL-1β、TNF-αmRNA和蛋白的表达实现的。结论:TZYH含药血清可以抑制H2O2诱导的内皮细胞凋亡,对血管内皮细胞损伤具有一定的保护作用。