几种生物活性物质体外抗氧化能力评价技术的研究

目的研究生物活性物质体外抗氧化能力评价方法,应用体外理化环境下建立起来的评价方法对受试物进行初步抗氧化能力评估。方法联合应用2,2’-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法与铁离子还原/抗氧化能力测定法(FRAP)法用于生物活性物质体外抗氧化能力研究,在ABTS法中,使用紫外可见分光光度计734nm波长下测定以槲皮素、姜黄素、DL-α-生育酚和原花青素等为代表的生物活性物质;在FRAP法中,运用酶标仪,595nm波长处测定同样受试物的抗氧化能力。结果ABTS法:槲皮素和姜黄素的抗氧化活性TEAC值分别约为2.02和0.50;而1gDL-α-生育酚、原花青素清除自由基的能力相当于2.06mmol、2.897mmol的Trolox清除自由基的能力;FRAP法:抗氧化活性以1.0mmol/L FeSO4为参考标准,槲皮素、姜黄素和Trolox摩尔当量约为5.73、1.18和2.09;而DL-α-生育酚和原花青素抗氧化活性分别是207.7mg、156.36mg。结论ABTS法与FRAP法联合应用,操作简便、结果可靠,尤其适宜作为生物活性物质体外抗氧化能力的评价方法。     

两种不同产地龟板抗氧化活性研究

[目的]研究两种不同产地龟科动物乌龟Chinemys reeresii(Gray)腹甲提取物的抗氧化活性。[方法]采用DPPH法分别测定两种不同产地龟板的石油醚、乙酸乙酯、95%乙醇等不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。[结果]不同产地龟板95%乙醇提取物抗氧化活性均最强;海南产龟板抗氧化活性比湖北汉阳产龟板强,差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]不同产地的龟板所含抗氧化成分存在一定的差异。     

新疆树莓果实营养成分及其提取物抗氧化性研究

目的分析新疆野生树莓果实营养成分,并对其提取物进行抗氧化活性测定。方法进行营养保健成分含量分析,并对果实95%乙醇提取物经石油醚脱脂后,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,观察不同萃取部位对DPPH·和·OH的清除能力。结果树莓鲜果中必需氨基酸含量高达320mg%,非必需氨基酸中谷氨酸含量较高(180mg%);富含维生素C(28.04mg%)和钾(147.32mg%);有机酸含量高达1.72%,以柠檬酸为主;其它如总酚、总黄酮、鞣化酸、单宁含量分别为498、125、2.2和290mg%,SOD活性高达606.93U/ml。树莓不同提取物均显示了较好的抗氧化活性,以乙酸乙酯部分最高,与清除DPPH自由基相比,清除羟自由基能力强。结论新疆野生红树莓果富含多种营养保健成分和抗氧化活性,有很好的开发价值。     

新疆红树莓果实不同有效部位提取及其抗氧化活性测定

目的测定树莓果实不同提取部位总酚含量并比较不同提取部位抗氧化活性。方法树莓果实95%乙醇提取物经石油醚脱脂后,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,对得到的各提取部位浸膏,①以没食子酸为标准品进行总酚含量测定,同时用相对标准偏差(RSD)表示稳定性;②采用1,1-二苯-2-苦肼基和羟自由基清除能力实验测定抗氧化活性。结果①Folin-Ciocalteu比色法具有精密度高、稳定性和重现性好等优点;②各提取部位物总酚含量从GAE10.56mg/g到96.76mg/g,其中以乙酸乙酯部位总酚含量最高(GAE96.76mg/g);③抗氧化实验中,树莓不同提取物均显示了较好的抗氧化活性,其中以乙酸乙酯部位抗氧化活性最高。结论树莓是良好的天然抗氧化剂。     

红花籽粕提取物对糖尿病大鼠的降脂作用

目的研究红花籽粕提取物对糖尿病大鼠血脂水平的影响,为临床治疗Ⅱ型糖尿病提供依据。方法采用SD大鼠建立糖尿病大鼠模型,用红花籽粕提取物高、中、低3个剂量灌胃,连续4周,采集大鼠血清,用全自动生化仪测量总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,并计算动脉粥样硬化指数。结果与模型组比较,各给药组可以显著降低TC、TG、LDL-C的含量,显著升高HDL-C含量;各给药组的动脉粥样硬化指数均降低,且有显著性差异。结论红花籽粕提取物具有显著降低糖尿病大鼠血脂的作用。     

川产粗壮女贞水提物体外抗氧化能力的比对研究

目的 比对研究川产粗壮女贞苦丁茶水提物抗氧化能力。方法 热水浸提法分别制备川产粗壮女贞老叶和嫩叶、绿茶以及云南普洱茶提取物,并用去离子水配制提取物(1g /mL)。采用8种化学法测定不同提取物对5种自由基的抑制/吸收能力和对金属离子还原/螯合能力,通过比较不同提取物抗氧化能力的差异,综合评估川产粗壮女贞苦丁茶水提物的抗氧化能力。结果 测定对自由基抑制/吸收能力的五种化学法显示:在清除ABTS+(2,2′-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)自由基、超氧阴离子自由基、吸收氧自由基方面,粗壮女贞苦丁茶能力显著高于绿茶及普洱茶;在清除DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)自由基和羟自由基方面,粗壮女贞苦丁茶能力与普洱茶相当,但高于绿茶。测定对金属离子还原/螯合能力的三种化学法显示:在还原铜离子能力方面,粗壮女贞苦丁茶显著高于绿茶及普洱茶;在还原铁离子能力方面,粗壮女贞苦丁茶与普洱茶相当但高于绿茶。在螯合铁离子能力方面,粗壮女贞低于普洱茶和绿茶。结论 川产粗壮女贞苦丁茶的抗氧化能力在不少方面优于绿茶和普洱茶。     

腐乳萃取物的抗氧化和抑制血管紧张素转化酶(ACE)的功能

用清除1,1-二苯基-2-苦基苯阱(DPPH)自由基能力表示腐乳提取物的抗氧化能力,中国市售15种腐乳的水提取物的抗氧化活性为11.72%-100.80%,ACE的抑制活性为0.71-1.94mg/mL。     

石榴籽提取物体外抗氧化活性研究

目的研究石榴籽提取物的体外抗氧化作用。方法采用普鲁士蓝法、邻二氮菲-Fe2+氧化法和邻苯三酚自氧化法分别测定石榴籽提取物的总抗氧化能力、石榴籽提取物对羟自由基(.OH)和超氧阴离子(.O2-)的清除作用,并与维生素C抗氧化活性相比较。结果石榴籽提取物对.OH和.O2-具有很强的清除作用,其IC50分别为0.157和0.027mg/ml,与维生素C抗氧化作用相似。结论石榴籽提取物具有较强的清除自由基能力,是一种天然有效的抗氧化剂。     

北京早园竹叶提取物的抗氧化活性研究

目的 初步研究北京早园竹叶提取物的抗氧化能力.方法 采用超声辅助法提取竹叶提取物,NaNO3-Al(NO3)3-NaOH显色法检测总黄酮浓度,并通过二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除法和CuSO4-Phen-Vc-H2O2-DNA体系化学发光法对其进行抗氧化能力测定.结果 提取物清除DPPH自由基的IC50为7.02 mg/L;竹叶提取物可延迟DNA损伤峰的出峰时间(R<0.01),浓度大于400 mg/L的竹叶提取物可防止DNA氧化损伤.结论 竹叶提取物具有一定的DPPH自由基清除能力,浓度大于400 mg/L的竹叶提取物可显著抑制DNA损伤.     

红景天多糖羧甲基化修饰及其抗氧化活性

目的比较红景天多糖羧甲基化修饰前后抗氧化活性的变化。方法采用水提醇沉法提取红景天多糖,正交实验优选红景天多糖羧甲基化修饰条件,通过对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基和超氧阴离子自由基清除能力的测定,比较修饰前后红景天多糖抗氧化活性的变化。结果红景天多糖羧甲基化修饰的最佳工艺条件为反应温度60℃、氯乙酸15 mg、反应时间3.5 h,得到羧甲基化的取代度为10.73。当浓度为5 mg/m L时,羧甲基化红景天多糖清除超氧阴离子自由基、ABTS自由基的能力分别为53.16%与45.64%,与红景天多糖比较,清除自由基能力明显提高。结论与修饰前比较,羧甲基化修饰后红景天多糖具有较强的抗氧化活性。     

无患子皂苷抗氧化活性研究

目的:评价无患子总皂苷的抗氧化活性。方法:利用有机试剂溶解法提取无患子皂苷,测定无患子皂苷对超氧阴离子(O_2·)、羟自由基(·OH)、H_2O_2、DPPH·活性等四项指标的清除能力,对无患子皂苷的抗氧化作用进行综合评价。结果:无患子总皂苷对DPPH·、超氧阴离子(O_2·)、羟自由基(·OH)、H_2O_2等指标均具有较强的清除效果。结论:无患子皂苷具有较强的抗氧化活性。     

鲜切洋葱贮藏期间多酚成分及抗氧化活性的变化

目的以鲜切洋葱为对象,研究其低温贮藏期间多酚成分和抗氧化活性的变化以及二者之间的相关性。方法采用HPLC法检测鲜切洋葱多酚组分含量,通过铁还原能力、ABTS自由基和DPPH自由基清除能力三种方法评价鲜切洋葱的抗氧化活性。结果鲜切洋葱中单体酚含量较多的为槲皮素、绿原酸和香豆酸,随着贮藏时间的延长,鲜切洋葱的总酚、槲皮素、香草酸和阿魏酸的含量呈先上升后下降的趋势,香豆酸含量则先下降后上升,咖啡酸的含量呈波浪式变化,而绿原酸无显著变化(P0.05)。贮藏期间鲜切洋葱的铁还原能力呈现先升高后降低的变化趋势,ABTS自由基和DPPH自由基清除能力在最初1 d内显著升高(P0.05),贮藏至第7 d时有小幅下降,随后呈现先上升又下降的变化。相关性分析表明香草酸、槲皮素和咖啡酸为主要活性单体酚。结论鲜切洋葱低温贮藏期间具有较高的抗氧化活性,其抗氧化活性与多酚含量呈正相关。     

冬虫夏草菌丝体水提物抗氧化和保护氧化损伤活性研究

[目的]研究冬虫夏草(Cordyceps sinesis)菌丝体热水提物(CS-HWE)抗氧化活性及体外氧化损伤保护作用。[方法]采用铁离子还原法(FRAP)和H2O2氧化损伤的PC12细胞模型对CS-HWE抗氧化活性及对氧化损伤保护活性分别进行了测定。[结果]样品抗氧化活性为(158.03±5.39)μmolFe2 ·g-1,相当于天然虫草提取物活性的75%。CS-HWE在50￣100mg·L-1时可明显提高PC12细胞对H2O2氧化损伤的保护作用,活性与天然虫草提取物相当。[结论]虫草菌丝体热水提物具有一定的抗氧化作用,可作为开发天然抗氧化药物的潜在资源。     

丹酚酸抗氧化活性及其对DNA损伤保护作用

目的探讨丹酚酸抗氧化活性及其对DNA氧化损伤的保护作用机制。方法运用自由基反应模型观察丹酚酸对二苯代苦味酰肼自由基（DPPH）和羟自由基的淬灭效应,使用邻菲罗啉（Phen）-CuSO4-VC-H2O2-DNA化学发光体系测定丹酚酸对DNA损伤的抑制作用。高效液相色谱（HPLC）测定丹酚酸的组成。结果丹酚酸水提物（AE）、乙酸乙酯萃取物（EE）、大孔吸附树脂纯化物（RE）和对照维生素（VC）、二丁基羟基甲苯（BHT）对DPPH自由基的半数清除浓度（IC50）分别为141.2,15.3,14.6,15.8和71.5μg/ml。化学发光体系中,丹酚酸的加入能明显抑制并延迟DNA损伤。AE、EE、RE抑制发光50%浓度（IC50）值分别为1 293.6,62.0,49.2μg/ml。丹酚酸清除DPPH自由基能力和对羟自由基攻击的DNA损伤保护作用受丹酚酸组成和丹酚酸B含量的影响。结论丹酚酸属于预防型和断链型抗氧化剂,并可有效清除DPPH和羟自由基,对DNA损伤有明显保护作用。丹酚酸的抗氧化活性及对DNA损伤的保护作用与丹酚酸B含量有关。     

三七多糖抗氧化活性研究

目的:探讨三七多糖的体外抗氧化活性。方法:三七粗多糖经Sevage法纯化后用苯酚—硫酸法测定其含量,并采用还原/抗氧化能力、清除DPPH自由基、OH自由基和ABTS+自由基能力考察三七多糖的抗氧化能力。结果:三七多糖含量为80.49 mg/g;与对照品BHA和茶多酚相比较,还原/抗氧化能力和清除DPPH自由基能力(FRAP=11586.3μmol/g、IC50=0.055 mg/ml)都比茶多酚(FRAP=6507.5μmol/g、IC50=0.143mg/ml)强,但都比BHA(FRAP=1536.5μmol/g、IC50=0.030 mg/ml)弱;清除羟基自由基能力比BHA(IC50=0.028 mg/ml)及茶多酚(IC50=0.002 mg/m L)都强;清除ABTS+自由基能力(IC50=0.018 mg/ml)比BHA(IC50=0.175 mg/ml)强,但比茶多酚(IC50=0.002 mg/ml)弱。结论:三七多糖具有较强的抗氧化能力,为其生物活性的深入研究提供了参考依据。     

花色苷抗氧化及改善胰岛素抗性的体外研究

目的研究花色苷(Anth)体外抗氧化及改善胰岛素抗性(IR)的效应,并分析构效关系。方法以自然界最为常见的6种Anth作为受试物,测定其对二苯代苦味酰肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH?)自由基的清除能力,及其对H2O2诱导的IR3T3-L1脂肪细胞胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和葡萄糖摄取能力的影响。结果6种Anth均具有较强的DPPH自由基清除能力,效应和B环上酚羟基数目有关;6种Anth中,具有邻苯二酚结构的2种能更好的清除H2O2诱导IR脂肪细胞胞内的ROS,同时显著提高胰岛素刺激后脂肪细胞对葡萄糖的摄取能力,呈剂量-效应依赖型。结论花色苷可预防和改善氧化应激引起的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抗性,此效应与B环上的邻苯二酚结构有关。     

甲醇提取柑橘皮总黄酮及其体外抗氧化活性研究

目的:以柑橘皮为原料,利用甲醇为溶剂,采用浸提法从柑橘皮提取生物活性物质总黄酮,通过体外实验评价柑橘皮总黄酮的抗氧化活性,以提高柑橘资源的开发利用效率。方法:通过单因素实验和正交实验确定柑橘皮总黄酮的最佳提取工艺条件。以芦丁为对照,体外测定柑橘皮总黄酮提取物对超氧阴离子自由基(O-2.)、羟自由基(.OH)及二苯代苦味酰基苯肼(DPPH.)自由基的清除率。结果:以甲醇为溶剂提取柑橘皮总黄酮的最佳提取工艺条件为:料液比1:30、溶剂浓度70%、温度60℃、浸提时间4 h的提取条件下,总黄酮产量为4.96%。体外抗氧化活性研究结果表明,柑橘皮总黄酮具有较高的自由基清除能力,其清除效果随提取物浓度的增加而增强。柑橘皮总黄酮对O-2.和DPPH.自由基的清除率高于芦丁,而对于.OH自由基的清除率比芦丁稍低。结论:柑橘皮总黄酮具有明显的抗氧化能力,为综合开发利用柑橘资源提供了科学依据。     

小麦胚芽蛋白组分酶解物降血压和抗氧化作用

目的探讨小麦胚芽中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的碱性蛋白酶alcalase酶解物的体外降血压和抗氧化作用。方法采用抑制血管紧张素转化酶(ACE)的方法评价降血压活性;对其抗氧化性能的评价采用化学模拟体系测定其清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基以及还原力。结果小麦胚芽中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白酶解物对ACE的半抑制率(IC50)分别为:3.98、2.64、5.53和3.62mg/ml。球蛋白酶解物的降血压活性显著高于另外3种蛋白酶解物(P0.05)。在抗氧化试验中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白酶解物清除DPPH自由基的IC50值分别为1.85、2.82、2.46和2.04mg/ml;清除羟自由基的IC50值分别为:0.14、0.22、0.17和0.18mg/ml;它们的还原力与浓度呈显著的正相关性(P0.05),且清蛋白酶解物的还原力最高。结论小麦胚芽中,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白的alcalase酶解物均具有体外降血压和抗氧化活性;球蛋白酶解物的降血压活性最高,而醇溶蛋白的最低;清蛋白酶解物的抗氧化活性最强,而球蛋白的最弱。     

粗壮女贞不同萃取部位抑菌活性成分研究

目的 研究粗壮女贞不同萃取部位总黄酮和粗多糖含量差异,分析该差异与其抑菌活性差异的关系,为研究粗壮女贞的主要抑菌成分提供依据。方法 不同极性溶剂对粗壮女贞水提物进行萃取,分光光度法分别测定不同萃取物的总黄酮和粗多糖的含量,通过微量肉汤稀释法测定提取物对不同细菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果 粗壮女贞水提物正丁醇萃取层对副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌及拟杆菌的抑菌效果较好,最小抑菌浓度分别为:6.15g/L、13.2g/L、13.2g/L,剩余水层对副溶血性弧菌、嗜水气单胞菌及产气荚膜梭菌抑菌效果较好,最小抑菌浓度依次为:4.49g/L、10.7g/L和15.6g/L,三氯甲烷萃取层和乙酸乙酯萃取层对常见革兰阳性菌和革兰阴性菌几乎不抑制;正丁醇萃取层中的总黄酮含量最多,约占总水提物的85.6%,剩余水层中粗多糖的含量最多,约占总水提物的47.1%。结论 粗壮女贞水提物对实验选择的几种致病菌有较好的抑制作用,对两种益生菌没有抑菌作用,抑菌活性物质可能主要为极性较大的物质,正丁醇萃取层和剩余水层的黄酮含量和粗多糖含量较高可能与其抑菌活性有关。     

光皮木瓜多酚类的提取和清除DPPH的抗氧化活性

目的:从光皮木瓜中提取多酚类物质,分析其成分含量并测定其多酚的抗氧化活性。方法:将光皮木瓜分为水提物和醇提物两部分,采用纤维素酶解方法处理原料,进行对比实验。在实验中以分光光度法测定其总多酚、单宁和黄酮类含量;薄层色谱定性分析其单体成分;DPPH自由基清除实验测定其抗氧化性能。结果:光皮木瓜提取物中的总多酚为1801mg/100gFW,其中单宁935mg/100gFW,黄酮类294mg/100gFW,酶解有助于多酚含量的提高(P<0.05);薄层色谱的定性分析显示含有儿茶素单体和绿原酸;DPPH自由基清除效应实验结果指出水提物清除自由基的活性较醇提物强,而且酶解后各部分的活性均增强。结论:光皮木瓜提取物中的多酚类物质含量较高并有较强的抗氧化活性。