亮氨酸脑啡肽、胆囊收缩素在海洛因戒断、复吸大鼠脑VTA、NAc区神经元的表达

目的:观察海洛因戒断、复吸大鼠脑VTA、NAc内亮氨酸脑啡肽(leucine-enkephalin,Leu-Enk)和胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)的变化,探讨CCK和内源性阿片肽在海洛因戒断、脱毒和复吸过程中的作用及其相互关系。方法:正常雄性SD大鼠63只,随机分为实验组、盐水对照组和正常对照组。实验组大鼠又分海洛因戒断组、美沙酮脱毒组和海洛因复吸组。取实验各组及对照组大鼠脑组织,定位VTA和NAc,用免疫组化SABC法显示VTA,NAc区Leu-Enk,CCK阳性细胞并用图像分析法测定平均光密度值。结果:(1)Leu-Enk在实验各组大鼠VTA和NAc内的表达与对照组比较均显著降低(P<0.05)。(2)与对照组比较,海洛因戒断、复吸组大鼠VTA和NAc中CCK阳性细胞免疫反应增强,差异有显著性(P<0.05);经美沙酮脱毒后恢复正常。结论:海洛因戒断造成的机体应激及阿片类药物均抑制了VTA和NAc中Leu-Enk的分泌;CCK分泌增加,参与了对脑神经的保护。     

海洛因依赖大鼠VTA区NMDA受体介导的多巴胺神经元膜电流的变化

目的:探讨海洛因依赖大鼠中脑腹侧被盖区(vental tegmental area,VTA)NMDA受体介导的多巴胺(DA)神经元膜电流的变化。方法:20只SD雄性大鼠随机分成对照组、海洛因依赖组(以下称依赖组)。按剂量递增原则皮下注射给予海洛因,纳络酮催促戒断,确定海洛因依赖模型的建立。免疫组织化学方法标记VTA区DA神经元酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH),脑片膜片钳技术记录其NMDA受体特异性激动剂N-methyl-D-aspartate(NMDA)介导的膜电流。结果:建立的海洛因依赖模型组大鼠催促戒断症状的评分符合成瘾模型评分标准;海洛因依赖组VTA区DA神经元TH表达上调(P<0.05);海洛因依赖组VTA区NMDA受体介导的DA神经元膜电流减小(P<0.05)。结论:海洛因依赖组VTA区DA神经元TH反应增强,神经元的兴奋性受到抑制。     

海洛因戒断及复吸对大鼠肾上腺髓质细胞β-内啡肽和促肾上腺皮质激素表达及血清皮质醇的影响

目的 探讨海洛因戒断、脱毒及复吸对大鼠肾上腺髓质细胞β-内啡肽（β-EP）和促肾上腺皮质激素（ACTH）表达及血清皮质醇（COR）的影响。方法 成年雄性SD大鼠63只,随机分为实验组（21只）、盐水对照组（21只）和正常对照组（21只）,实验组又分为戒断组、脱毒组和复吸组,采用免疫组织化学、图像分析法及放射免疫测定法进行研究。结果 与正常及盐水对照组比较,海洛因戒断组β-EP免疫反应（β-EP-IR）细胞染色变浅,平均灰度值升高（P <0.05）;经美沙酮脱毒治疗,β-EP-IR细胞染色较正常及盐水对照组加深,平均灰度值降低（ P <0.05）;海洛因复吸组β-EP-IR细胞表达再次减弱,但与正常及盐水组比较,平均灰度值差异无显著性。与正常及盐水对照组比较,实验各组大鼠肾上腺髓质ACTH免疫反应（ACTH-IR）细胞染色均变浅,平均灰度值增高,有显著差异（P <0.05）。放射免疫测定结果表明,实验各组大鼠血清COR均显著高于正常对照组（P <0.05）。结论 海洛因戒断、脱毒、复吸影响了大鼠肾上腺髓质细胞表达β-EP、ACTH以及血清COR的分泌。     

海洛因戒断、复吸对大鼠十二指肠5-羟色胺、胃泌素、生长抑素免疫反应细胞表达的影响

目的 研究海洛因戒断、复吸期间5-羟色胺（5-HT）、胃泌素(Gas)、生长抑素（SS）在大鼠十二指肠表达的变化,探讨十二指肠5-HT、Gas、SS在海洛因戒断和复吸期间的可能作用。 方法 正常雄性SD大鼠35只,随机分为实验组15只、生理盐水对照组15只和正常对照组5只,实验组大鼠又分戒断组（HAG）、脱毒治疗组（MDG）、复吸组(HRG)。取正常对照组、生理盐水对照组及实验各组大鼠的十二指肠组织,采用免疫组织化学SABC法、细胞计数及图像分析方法进行研究。 结果 与正常对照组及生理盐水对照组比较,戒断及复吸组大鼠十二指肠内的5-HT、Gas、SS免疫反应细胞数量均增加（P<0.05）,图像分析测得5-HT、Gas、SS免疫反应细胞的平均灰度值均低于正常及生理盐水对照组（P<0.05）。脱毒治疗组与正常及生理盐水对照组比较,3种免疫反应细胞的计数及图像分析变化差异均无统计学意义（P﹥0.05）。 结论 在海洛因戒断、复吸期间,5-HT、Gas、SS在十二指肠表达增强,3种免疫反应细胞合成和分泌5-HT、Gas、SS增多,提示机体十二指肠内3种生物活性物质均参与机体对海洛因损伤的调节;用美沙酮脱毒治疗后5-HT、Gas、SS的表达接近正常,提示经美沙酮治疗,海洛因依赖大鼠十二指肠的5-HT、Gas、SS含量变化是可逆的。     

海洛因戒断与复吸对大鼠结肠5-羟色胺和 P物质表达的影响

目的 探讨海洛因戒断、脱毒和复吸期间5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)在大鼠结肠表达的变化.方法 将正常雄性SD大鼠35只,随机分为实验组15只、盐水对照组15只和正常对照组5只,实验组大鼠又分戒断组(HWG)、脱毒治疗组(MDG)和复吸组(HRG).取正常对照组、盐水对照组及实验组大鼠的结肠组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究.结果 戒断组和复吸组大鼠结肠内的5-HT-、SP-免疫反应(IR)细胞的平均灰度值低于正常及盐水对照组,免疫反应细胞计数增多,差异有统计学意义(P<0.05).脱毒治疗组与正常及盐水对照组比较,大鼠结肠内的5-HT-、SP-IR细胞的平均灰度值及细胞计数差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在海洛因戒断、复吸期间,结肠分泌5-HT、SP增多;美沙酮脱毒治疗后,5-HT、SP的表达与正常组差异无显著性,提示结肠分泌的5-HT、SP参与了海洛因戒断、脱毒和复吸期间机体的调节.     

胰岛淀粉样多肽、葡萄糖转运蛋白2在海洛因戒断、脱毒和复吸大鼠胰岛β细胞中的表达

目的探讨在大鼠海洛因戒断、脱毒治疗和复吸期间,胰岛淀粉样多肽(IAPP)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)在胰岛β细胞内表达的变化。方法正常雄性SD大鼠32只,随机分为实验组(n=24)和正常对照组(n=8),实验组又分为海洛因依赖戒断组、美沙酮脱毒治疗组和海洛因复吸组。各组大鼠取胰腺组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究。结果海洛因戒断时IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色较正常对照组变深,平均灰度值均低于正常组(P0.05),IAPP面数密度增大(P0.05);美沙酮脱毒期间,IAPP和GLUT2免疫阳性细胞染色变浅,平均灰度值较戒断时升高,与正常组差异无统计学意义,IAPP面数密度于正常组比较差异不显著(P0.05);海洛因复吸期间,IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色又加深,平均灰度值降低(P0.05),IAPP面数密度再次增大(P0.05)。结论在海洛因戒断和复吸期间,表达于大鼠胰岛β细胞的IAPP和GLUT2合成增加,美沙酮脱毒期间合成减少,两者变化规律一致,提示在海洛因戒断,脱毒和复吸过程中,两者的合成同步,可能参与调节海洛因戒断,美沙酮脱毒治疗及复吸大鼠机体能量代谢过程,与调节大鼠摄食、体重及保护胰岛细胞功能有关。     

海洛因戒断复吸对大鼠睾丸表皮生长因子、嗜铬粒素A表达及血清卵泡刺激素与黄体生成素的影响

目的 探讨海洛因戒断、复吸对大鼠睾丸表皮生长因子(EGF)、嗜铬粒素A(CgA)免疫反应（IR）细胞、血清卵泡刺激素（FSH）与黄体生成素（LH）的影响。方法 正常雄性SD大鼠63只,随机分为实验组21只、盐水对照组21只和正常对照组21只,实验组大鼠又分戒断组、脱毒组和复吸组。取正常对照组、盐水对照组及实验各组大鼠的睾丸组织和血清,采用免疫组织化学SABC法、图像分析法及放射免疫法进行研究。 结果 戒断组中EGF-IR细胞染色加深,免疫反应强度增强,平均灰度值降低（ EM>P /EM><0.05）;脱毒组EGF-IR细胞免疫反应强度有所下降,但仍强于正常及盐水对照组（ EM>P /EM><0.05）;复吸组EGF-IR细胞免疫反应强度减弱,平均灰度值升高（ EM>P /EM><0.05）。戒断组CgA-IR细胞免疫反应强度减弱     

海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区和伏隔核内DβH和CCK表达的影响

目的:探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)和伏隔核(NAc)神经元,DβH(dopamine-beta-hydroxylase)和CCK(cholecystokinin)表达的影响,旨在探讨大脑在海洛因依赖过程中的自我调节多巴胺的释放和保护机制。方法:成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组(NCG)5只,实验性海洛因依赖组(HDG)及生理盐水对照组(SCG)各25只。建立海洛因依赖模型,并分别于第10、17、24、31、38 d取脑组织,用免疫组织化学SABC法检测VTA、NAc区内表达DβH和CCK的阳性细胞,并用图像分析法测定其平均光密度值。结果:VTA、NAc区内DβH和CCK阳性细胞免疫反应产物呈棕黄色颗粒状,定位于胞质内。与NCG组和SCG组比较,HDG组在不同时间点VTA、NAc区内的DβH阳性细胞免疫反应强度减弱,染色变浅,而CCK阳性细胞免疫反应强度明显增强,染色变深。结论:在海洛因依赖期间,CCK表达增强、DβH的活性被抑制可能是VTA、NAc区多巴胺升高的原因之一,同时CCK的分泌增加可能是脑的自我保护机制。     

海洛因依赖大鼠中脑腹侧被盖区和伏隔核内L-ENK和生长抑素表达的变化

目的:探讨海洛因依赖大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)和伏隔核(NAc)内亮氨酸脑啡肽(L-ENK)和生长抑素(SS)表达的变化及其可能的机制。方法:成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38 d取脑组织,应用免疫组织化学SABC法、图像分析法检测VTA和NAc内L-ENK和SS的表达。结果:海洛因依赖组大鼠VTA和NAc中L-ENK和SS阳性细胞免疫反应明显减弱,与正常及盐水对照组比较有显著性差异(P<0.05);图像分析显示海洛因依赖组L-ENK和SS阳性细胞的平均灰度值增高(P<0.05)。结论:在海洛因依赖期间,大鼠VTA和NAc内L-ENK和SS免疫阳性物质的表达均明显减少,提示海洛因依赖对神经元的神经内分泌功能造成了损伤。     

帕金森病模型大鼠中脑腹侧被盖区多巴胺能神经元改变的实验研究

目的：探讨帕金森病（Parkinson’s disease，PD）大鼠模型中脑腹侧被盖区（ventral tegmentalarea，VTA）多巴胺能神经元的改变。方法：应用6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）注射右侧黑质致密区（substantia nigra compacta，SNc）制作PD大鼠模型，进行阿朴吗啡（apomorphine，APO）诱发行为学观察、电镜、尼氏染色观察中脑VTA神经元的改变、酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）免疫组织化学ABC观察其DA能神经元的改变并进行图像分析。结果：APO诱发PD大鼠模型异常旋转行为，尼氏染色见PD大鼠中脑VTA有神经细胞肿胀、坏死等变化，VTA TH阳性神经元数量减少，形态学改变。结论：中脑VTA DA能神经参与PD模型大鼠的改变；APO能诱导6-OHDAPD模型大鼠的旋转行为，其强弱可能与TH^＋神经元数量直接相关。     

胰岛淀粉样多肽、葡萄糖转运蛋白2在海洛因戒断、脱毒和复吸大鼠胰岛β细胞中的表达

Objective To investigate the expression changes of islet amyloid polypeptiole(IAPP) and glucose transporter 2(GLUT2) in islet β cells during heroin withdrawal induced by naloxone, methadone detoxification treatment, and heroin relapse. Methods Male SD rats (n=32) were randomly divided into a normal control group (NCG, n=8) and an experiment group (EG, n=24). The EG was further divided into heroin withdrawal group (HWG), methadone detoxication group (MDG), and heroin relapse group (HRG). Pancreas was drawn from each group. Immunohistochemistry and image analysis were used to detect the expression of IAPP and GLUT2. Results As compared with the normal control, the immunostainning of IAPP and GLUT2 was stronger in β cells of islets from heroin withdrawal and relapse rats than that in controls; the numerical density on area of IAPP also increased; the mean gray values decreased in these two groups. No difference was found in the immunostainning, the mean gray values and the numerical density on area during detoxification treatment compared to controls. Conclusion During heroin withdrawal and relapse, the synthesis of IAPP and GLUT2 increased, while they became decreased in methadone detoxification. The changes of IAPP and GLUT2 were consistent and had same rhythm in three stages. IAPP and GLUT2 took part in energy metabolic process, which may be related to food intake and body weight, or protective function toβcells.     

P>海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区、伏隔核神经元P物质和神经肽Y表达的影响 /P>

目的 探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区（VTA）、伏隔核（NAc）神经元P物质（SP）、神经肽Y（NPY）表达的影响,为进一步揭示海洛因依赖的中枢机制提供重要的原位形态学资料。 方法 成年雄性SD大鼠55只,随机分为海洛因依赖组、生理盐水对照组及正常对照组。建立海洛因依赖模型,并分别于第10、17、24、31、38天取脑组织,免疫组织化学SABC法显示VTA、NAc区神经元SP、NPY免疫反应细胞并用图像分析法测定平均灰度值。结果 海洛因依赖组VTA、 NAc区的SP、NPY免疫反应细胞与生理盐水及正常对照组比较,免疫反应强度明显减弱、染色变浅。平均灰度值测定,海洛因依赖组各时间点大鼠VTA、NAc区 的SP、NPY免疫反应细胞平均灰度值均高于正常对照组及生理盐水对照组,差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论 实验结果提示,海洛因依赖使VTA、NAc区SP、NPY的分泌受到抑制,可能导致内源性阿片肽的分泌受影响,SP、NPY可能是药物依赖形成机制中的关键信号分子。     

海洛因依赖大鼠空、回肠嗜银细胞定位和表达

目的探讨海洛因依赖对大鼠空、回肠嗜银细胞的影响。方法成年SD大鼠66只,按配对原则随机分为空白组,盐水组和海洛因组,建立海洛因依赖动物模型。分别于10、17、24、31、38 d取空、回肠组织,应用镀银染色法及图像分析法观察空、回肠嗜银细胞的数量及染色强度变化。结果与空白组及盐水组比较,海洛因组大鼠空、回肠嗜银细胞的数量增加,染色明显加深。图像分析结果表明海洛因组大鼠空、回肠嗜银细胞平均灰度值显著降低(P<0.01);空肠各时间点、回肠第17天和第24天时间点嗜银细胞数量明显增多(P<0.05)。结论海洛因依赖期间,大鼠空、回肠嗜银细胞数量和表达明显增加。