低温灌洗UW液和Euro-Collins液保存离体鼠肺效果的组织形态学比较研究

目的　比较UW液和Euro Collins液的肺保存效果。方法　选用 2 1只Wistar大鼠 ,应用 10℃的UW液和Euro Collins液同时分别进行左、右肺动脉内灌洗 ,灌洗前主肺动脉内快速推注PGE1。灌洗结束后于肺充气状态下切取左、右肺 ,并迅速分别置于 10℃的UW液及Euro Collins液中保存。分别于 0 ,2 ,4,6h取材 ,在光镜及电镜下观察肺组织形态学变化 ,并互相比较 ,以判定组织活力 ,确定肺保存效果。结果　低温灌洗 10℃的UW液肺保存效果优于低温灌洗Euro Collins液。 6h后 ,组织损伤表现为不可逆性。结论　在肺保存不超过 6h时 ,UW液比Euro Collins液更有效     

肝移植术的供肝切取和低温贮存

供肝质量是直接影响肝移植成败的一个重要因素。作者等对4例供肝的切取和低温贮存进行了讨论。为了缩短取肝时间,采用大“ ”字切口快速进腹的方法。取得的供肝用冷灌洗液作短暂的冲洗,然后将脏器保存于2～4℃状态下,直至移植,此法称为简易低温贮存、根据作     

低温灌洗Euro—Collins液保存兔肺的组织形态学实验研究

选用大耳白家兔7只,应用自制的4℃和10℃Euro-Collins液分别同时于左右肺动脉内灌洗,灌洗前主肺动脉内快速推注PGE_1。灌洗结束后于肺充气状态下分别切取左右肺,并迅速置于4℃和10℃Euro-Collins液中保存。分别于0,2,4,6小时取材,根据光镜和电镜检查判定组织活力,确定肺保存效果。结果衣明:低温灌洗Euro-Collins液保存兔肺的效果10℃优于4℃;低温灌洗Euro-Collins液保存兔肺的有效时限为4小时。     

Euro-Collins液对大白鼠肝脏冷灌洗效应的电子显微镜观察

为了寻找一种较为理想的灌洗液,以保证供肝在低温灌洗和保存过程中尽量少受损害,最大限度地保持活力,我们最近选用Euro-Colins液对大鼠肝脏进行了实验灌洗,分别于灌洗前、灌洗完毕时、灌洗后2小时及灌洗后6小时进行取材,电镜标本常规处理、观察,并与过去用各种灌洗液的灌洗效果进行对比,取得了较为满意的结果。 Eurc-Colins液灌洗的肝脏,其肝细胞超微结构直至洗后6小时仍保持正常,与灌洗前的肝细胞相比并无值得注意的差异。粗面内质网及游离核蛋白粒丰富而密集,线粒体数目正     

犬肝不灌洗低温保存的实验研究：Ⅰ.肝糖原组织化学动态观察

本文是对犬肝进行不灌洗低温保存(25℃、15℃)的系列研究之一。采用临床少用的组织化学方法对反映肝脏物质代谢功能的肝糖原进行动态观察,发现25℃离体保存不灌洗犬肝3小时变化轻微、功能良好;而15℃保存可延长到4小时,证明适当的低温能够使保存效果更好。     

用不灌洗法保存犬肝的电镜观察

本实验证明,用不灌洗法在25℃、15℃保存犬肝的有效时限分别是3小时和4小时,用Sacks液低温灌洗在4℃保存犬肝的有效时限至少是6小时。这表明用不灌洗法进行立即肝移植是可行的。     

问题解答

问:经低温灌洗保存的供肝,放入受者腹腔内进行移植手术的时候,是否有进入第二次热缺血的危险? 答:业已降温的供肝,一旦离开低温环境而被放进腹腔后,温度是必然要回升的。问题的关键是升温的速度,究竟要经过多长的时间就会出现第二次热缺血的危险。我室曾做供肝自然复温的实验。将经常规低温灌洗完毕的供移植用狗肝,其中心温度已降低     

低温机器灌注保存供肝新方法探索

目的：通过建立低温机器灌注保存供肝8h的实验模型，探讨灌注过程中自制含氟碳肝脏保存液对供肝的保护作用。方法：雄性Wistar大鼠60只，随机分成3组，单纯冷藏组、HC—A液组、含氟碳液组。经实验处理后，通过比较三组肝脏保存再灌注后灌注流出液中ALT、TNF-α的含量及HA摄取量。结果：单纯冷藏组与HC—A液组各指标比较有明显差异（P〈0．05），HC—A液组与含氟碳液组比较有明显差异（P〈0．05）。结论：在低温机器灌注保存供肝8h条件下，自制含氟碳液对供肝具有比单纯冷藏和单纯HC—A液灌注保存更好的效果。     

自制MA-F液低温保存犬肾的加时研究(附5例光镜与电镜观察)

用自制MA—F肾保存液与HC—A肾保存液对5条犬10个肾脏分组进行低温灌洗保存,经光镜和电镜于保存24、60、64、72及100小时(以灌洗毕为零时)观察,结果证明MA—F液明显优于HC—A液。     

增加大鼠肝细胞内糖原含量的实验研究

以ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠是肝脏的为研究对象，经门静脉以５种不同液体（柠檬酸盐为基础的液体，即Ｃｏｌｌｉｎ液；乳糖盐为基础的液体即ＵＷ液；ＵＷ液加入葡萄糖甙／和胰岛素）分别行活体肝脏原位灌洗并用同样液分别保存在０～２℃的条件下２４小时，观察不同时间的糖原变化情况，结果表明，只有在同时含有葡萄糖及胰岛素的灌洗液时，可阻止肝细胞内糖原分解或增加糖原的含量。对此作用机制及对供肝灌洗保存液的改进，进     

自制供肝保存液对大鼠肝分泌细胞间黏附分子-1和一氧化氮影响的比较研究

目的通过与UW液及HC-A液比较,检验自制供肝保存液保存肝脏效果,探讨自制保存液对大鼠肝分泌细胞间黏附分子(ICAM)-1及一氧化氮(NO)的影响。方法无菌条件配制自制供肝保存液;建立大鼠肝脏非循环离体灌注模型(IPRL);根据保存液的不同将大鼠随机分组,检测不同时间点肝灌注流出液中转氨酶含量及肝组织中ICAM-1和NO含量,观察肝组织形态学变化。结果对于丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),自制液组与UW液组相近,但明显低于HC-A液组(P<0.05);对于ICAM-1和NO,自制液组与UW液组同步升高,两者差异无统计学意义(P>0.05),但与HC-A液比较差异有统计学意义(P<0.05)。同时间点比较自制液组ICAM-1含量较UW液组为高,NO则较低。形态学变化自制液组稍重于UW液组,轻于HC-A组。结论从生化指标和肝脏形态学变化反映出,自制供肝保存液已与世界先进的UW液保存效果相当,明显优于HC-A液。ICAM-1仅在肝细胞损伤时才有表达,其变化程度与酶学指标改变相平行。NO在自制液组较低,反映了自制供肝保存液在维持细胞膜稳定和抑制自由基产生方面具有优势。ICAM-1和NO变化反应肝组织损伤程度,可以做为评价保存液优劣的指标。     

冷冻处理不当所致组织结构损伤

酶组织化学技术中,应采用骤冷处理组织,以保存良好的组织结构和酶的活性。但由于条件限制或对骤冷处理的必要性认识不足,当前国内不少单位仍用普通冰箱、恒冷箱或半导体冷冻切片机冻头冷冻组织。为进一步论证低温骤冷处理(液氮,-196℃)是保存良好组织结构的必要技术,从而为样品处理方面的质量控制提供科学依据。作者取SD纯系大鼠肾、肝     

自制含氟碳液在机器灌注保存供肝中的应用

目的 探讨机器灌注保存供肝过程中,自制含氟碳肝脏保存液对供肝的保护作用. 方法 雄性Wistar大鼠60只,随机分成3组:A组(n=20)单纯冷藏保存组,B组(n=20)离体肾脏保存液(HCA)灌注保存组,C组(n=20)自制含氟碳液灌注保存组.通过建立低温机器灌注保存供肝的实验模型,灌注12 h后,比较A、B、C三组肝脏保存再灌注后灌注流出液中丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量及透明质酸(HA)摄取量的变化. 结果 与A组比较,B组和C组各指标均降低.与B组比较,C组指标降低更为显著.ALT、TNF-α含量与HA摄取量在各组之间比较差异有统计学意义(均P<0.05). 结论 自制含氟碳肝脏保存液对供肝具有比单纯冷藏和单纯HCA液灌注保存更好的效果.     

供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化

目的 探讨供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化。方法 实验动物分为对照组（非缺血保存组）和实验组（缺血保存组）,对保存和再灌注期间的肺组织和支气管肺泡灌洗液中的肺表面活性物质磷脂进行了分析。结果 与对照组相比,实验组保存后肺组织总磷脂（ＴＰＬ）和卵磷脂（ＰＣ）含量明显降低,卵磷脂占总磷脂的比例（ＰＣ／ＴＰＬ）降低,卵磷脂与鞘磷脂比（Ｌ／Ｓ）降低。实验组再灌注后肺组织和支气管肺泡灌洗液中的ＴＰＬ     

自制MA—F肾保存液应用效果的观察

用HC—A肾保存液和MA—F肾保存液,对五条犬的10个肾脏进行低温灌洗保存实验。经72小时和96小时保存以后检测肾脏的ATP酶活性,作为肾保存效果指标。实验结果证明.自制MA—F肾保存液灌洗72和96小时后,ATP酶平均值分别为227和224μg分子磷/毫克湿重/小时。应用HC—A液灌洗72和96小时后肾脏ATP酶活性分别为217和204μg分子磷/毫克湿重/小时,证明本文所提出的MA一F液对肾脏保存有较好的效果。     

高氧保存液对供肝保护作用的实验研究

目的研究高氧保存液对大鼠供肝的保护作用。方法采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型，分别以乳酸钠林格氏液和高氧乳酸钠林格氏液对大鼠肝脏低温保存0、1、3、6h，随后进行常温灌注30min，测定灌注流出液氧自由基代谢产物丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的含量、肝细胞内Ca^2＋浓度；观察肝脏组织形态学变化。结果在同一时段，高氧乳酸钠林格氏液组大鼠肝脏细胞内Ca^2浓度及流出液MDA含量较乳酸钠林格氏组低，而SOD含量较高。光镜、电镜观察两组肝脏组织形态学变化也有一定的差别。结论高氧乳酸钠林格氏液对大鼠供肝保护作用优于乳酸钠林格氏液，即高氧保存液对供肝有更好的保存作用。     

保存24～48小时的狗肾自体移植后影响狗存活因素的初步分析

为了探讨供移植用脏器的保存方法,我室于1978年12月～1980年6月以狗肾自体移植作为实验模型,相继用Collins C_2号液、Ross液、Sacks Ⅱ号液、Euro-Collins液作低温灌洗保存狗肾24～48小时的实验共38次。其中14条狗肾功能完全恢复,长期存活。其余24条狗因不同原因在短期内死亡。现将死因初步分析如下。     

供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化

目的　探讨供肺保存和再灌注期间的肺表面活性物质变化。方法　实验动物分为对照组 (非缺血保存组 )和实验组 (缺血保存组 ) ,对保存和再灌注期间的肺组织和支气管肺泡灌洗液中的肺表面活性物质磷脂进行了分析。结果　与对照组相比 ,实验组保存后肺组织总磷脂 (TPL)和卵磷脂 (PC)含量明显降低 ,卵磷脂占总磷脂的比例 (PC/TPL)降低 ,卵磷脂与鞘磷脂比 (L/S)降低。实验组再灌注后肺组织和支气管肺泡灌洗液中的TPL、PC、PC/TPL、L/S均明显低于对照组。结论　肺表面活性物质 (SAM)改变是肺缺血和再灌注损伤的敏感指标 ,热缺血、冷保存和再灌注对SAM磷脂的含量、构成及功能都有损害。     

上海多器官保存液保存离体大鼠肝脏的实验研究

目的:观察上海多器官保存液(Shanghai-mutil-organ solution,SMO液)对离体大鼠肝脏的保存效果,探讨应用SMO液保存离体供肝的可行性.方法:SD大鼠随机分为SMO液、UW液和HTK液保存组,建立离体肝脏单纯低温保存模型,保存液保存8、16、24、36 h分析肝脏组织能量代谢情况,观察肝组织形态学改变和肝脏细胞凋亡情况.结果:保存16、24、36 h,SMO液组肝组织三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷总量(TAN)及Atkinson能荷(AEC)均明显高于同时点HTK液组 (P＜0.05),与同时点UW液组无显著差异;形态学检查见SMO液组组织损伤较同时点HTK液组轻,除细胞肿胀较同时间点UW液组明显外,其余表现基本一致.保存24、36 h,SMO液组凋亡指数明显低于HTK液组(P＜0.05),而与UW液组无明显差异.结论:SMO液对大鼠离体肝脏的保存效果总体上与UW液相当,优于HTK液,仅在防止细胞水肿方面较UW液稍差.     

供肺保护研究进展

迄今为止，供肺保护仍是一大难题。许多学者对供肺保护方法进行了大量研究，包括肺保护液、保护液中加入活性成分、肺血管灌洗方法以及供肺保存期间的膨胀状态、氧供和保存温度等，现综述如下。