卵胞浆单精子注射中异常原核受精卵的体外发育及遗传多态性

目的 比较卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗周期中异常原核受精卵的发育,并分析其遗传多态性.方法 分别收集ICSI中未见原核(nonpronuclear,0PN)成熟卵347个、单原核(monopronuclear,1PN)受精卵71个、多原核(multipronuclear,≥3PN)受精卵75个,在Vitro1ife公司G5系列胚胎培养液中分组体外培养.复合扩增7个发育为囊胚的异常原核胚胎细胞16个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因座,在ABI3100遗传分析仪上检测其遗传多态性.结果 0PN组卵裂率为25.4%,显著低于其他两组,且组间差异有统计学意义(P＜0.01);胚胎停育率0PN组为48.9%,显著高于其他两组(P＜0.05);各组囊胚形成率差异无统计学意义(P＞0.05).ABI3100遗传分析仪电泳图谱显示,0PN组和≥3PN组被检测囊胚细胞STR基因座均显示为同源染色体组成二倍体特性,且0PN组囊胚细胞囊存在Y染色体特异性STR基因座.结论 ICSI治疗周期中异常原核受精卵有继续发育的潜能,发育到囊胚的0PN受精卵和≥3PN受精卵可能为正常二倍体胚胎.     

蛋白激酶C在卵母细胞成熟、受精和早期胚胎发育过程中的作用

小鼠胚胎发育过程中,蛋白激酶C(PKC)家族在调节卵的活化、完成减数分裂和开始有丝分裂、胚胎的致密,以及囊胚形成过程中都有作用,但其多个亚型的功能还知之甚少.研究表明,已知的十种PKC亚型以及PKC锚定蛋白--活化的磷脂酶C受体(RACK)在小鼠胚胎2-细胞期至囊胚期都有表达.本文归纳了近年来对PKC亚型各自不同的动态分布模式和表达水平的研究,这些研究表明它们在早期胚胎发育的各个时期都至关重要,尤其在胚胎4-细胞期的早期,个别亚型在核内的浓度是瞬间升高的,提示我们这些PKC亚型也许控制着早期小鼠胚胎核的组建以及机能调节.本文对核移植胚胎中PKC的可能作用也进行了分析.     

家兔早期胚胎标本的制作

在胚眙学的教学中,实验标本多取材于鸡胚,因此从胚盘开始观察。至于从受精卵到胚泡的发育过程,大多是以模型代替,为使学生观察到这一系列标本,人类胚胎非常难得,最好是从哺乳类动物取得。我们在查阅资料的基础上,结合对抗早孕药的研究,取得了家兔受精卵到胚泡变化过程的标本,满足了教学需要,也为抗旱孕药的研究,提供了家兔胚泡着床的     

慢病毒载体法在制备转基因小鼠模型中的应用

目的改进慢病毒载体法制备转基因小鼠的操作技术,分别从病毒浓缩、受精卵显微注射进针点和如何提高病毒注射效率等方面探讨慢病毒显微注射技术的最佳方案。方法超速离心获得浓缩慢病毒,通过卵周隙显微注射技术感染小鼠受精卵,比较不同注射点显微注射后受精卵存活率及发育情况。结果受精卵1点和5点作为注射点的卵周隙注射组可有效避免注射针与卵膜的直接碰触,减少对受精卵的损伤,胚胎存活率较常规中轴3点作为注射点组显著提高(P<0.01)。适当的病毒滴度和注入量、操作细节、注射针口径等均可影响注射后受精卵存活率和感染率。结论卵周隙显微注射过程中选择适当的注射点以及部分操作的改进,可显著提高受精卵的存活率,为提高转基因小鼠模型的制备效率提供参考。     

探索调控人胚分化发育相关基因的时空表达

传统胚胎学研究为分子胚胎学发展奠定了基础1 人体发育从受精卵开始直至个体死亡是一个连续的动态过程。这是一个由单细胞 (合子 )转变成多细胞人体的生长和分化过程。机体发育中的绝大多数变化发生在胚胎及胎儿期 ,因此 ,从受精卵如何发育成个体的发展模式一直是发育生物学研究的中心问题。 19世纪 ,胚胎学家已利用整个胚胎所作的连续切片 ,进行重建 ,以了解整个胚胎内部的主体结构 ,并通过活标本和显微摄影 ,显示发育过程的动态变化 ,拍摄多个发育阶段的缩时电影。从 195 3年Ｗａｔｓｏｎ和Ｇｒｉｃｋ提出ＤＮＡ双螺旋的空间结构 ,195 6年…     

单精子显微注射体外受精治疗不育症40例分析

目的:探讨提高单精子显微注射技术(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)妊娠率的方法。方法:对2000年6月至2001年11月在我院生殖中心就诊的男性严重少精患者,对其妻采用常规超排卵方案,经阴道B超介导取卵,共获卵594个,采用改进的ICSI技术受精。结果:共有464个成熟卵,338个受精卵,受精率72.8%,优质胚胎率为80.8%,临床妊娠17例,妊娠率42.5%。结论:采用胚胎操作箱进行卵的操作,应用人工血清代用品代替自体血清,多精子制动分次注射,是否可以提高受精率、妊娠率,值得探讨。     

第二极体排出时间早晚与胚胎发育潜能相关性的研究

目的 探讨第二极体排出时间早晚与胚胎质量及发育潜能之间的关系.方法 以本生殖医学中心2009年6月～8月IVF-ET周期患者受精卵子为研究对象,共计1170枚卵子.以受精5 h为时间界限将受精胚胎分为第二极体正常排出组(正常组)和延迟排出组(延迟组).分别观察两组卵子正常/异常受精率(2PN率,1PN和3PN率)和优质胚胎率;同时统计阳性妊娠结局所移植胚胎中,正常组和延迟组的胚胎比例各占多少.采用卡方检验对数据进行统计学处理.结果 ①两组正常受精卵数目之间以及异常受精卵数目之间均有显著性差异(P<0.05);两组总受精卵数目之间有非常显著差异(P<0.001).②两组的优质胚胎率之间显著性差异(P<0.05).③统计阳性妊娠结局所移植的97个胚胎中,来自于正常组的胚胎有92个(94.9%),仅5个是来自于延迟组(5.1%).结论 受精5 h内排出第二极体的卵子其总受精率、正常受精率以及所发育的胚胎质量均显著高于第二极体出现晚的卵子,而且有着较高的胚胎植入率.对受精5 h的卵子进行第二极体观察有助于早期预测患者本次IVF-ET周期胚胎的发育潜能以及妊娠结局;还可以作为决定是否行早补救ICSI的判定指标之一.     

蛙胚早期发育的克隆限制

在 Xenopus(爪蛙)的早期胚胎中,我们能够从已识别的始祖细胞中追踪特定类型的神经细胞后代。在2—512个细胞期间,注入一个卵裂球的辣根过氧化酶(HRP:为一种追踪剂)可在有丝分裂中直接传给子细胞,并且能在后来分化的许多神经元种类中鉴别出其所有的后代。有标记的细胞可输送 HRP 到它们长出的轴突和树突。来自同一个有标记始祖的所有后代细胞的空间分布图已经画出。这些细胞所占居的区域称克隆区,在形态学上它有特殊的位置。在克隆区内,标记细胞是分散性地与无标记细胞混在一起。在512个细胞期(但不是在较早的发育阶段)所有的卵裂球都将它们的后代分配到中枢神经系统七个区中的一个。在512个细胞期,14—26卵裂球群分配其所有的后代在同一区,这就叫一个分隔区。每一个分隔区内的细胞可互相混合,但不能迁移到邻近的区。所以,在512个细胞期以后,发生了克隆区范围的界线,以致在克隆区内较晚发育的细胞不会越过。尽管如此,初级运动神经元和 Rohon—Beard 神经元的轴突是有选择性生长的,即它们的轴突朝向与克隆有关的(即同一始祖的)靶细胞生长,建立联系。为了研究细胞混合的克隆限制的机制,设计了一个组织培养的实验。从没有标记的1028个细胞期的胚胎的一个区中割下一小块只有10—2个细胞的组织,同样,从在2个细胞期就注入 HRP 到两个卵裂球而充分标记的同期胚胎的相同或不同区割下类似的组织小块。把两种植块进行接触培养12—24小时,然后进行组织学方法处理。结果发现:当两个植块是从同一个区取得的时,标记细胞发生混合,但是,当两个植块不是来自同一区时,就不会发生混合。     

经体外培养、移植前的兔胚发育以及胚胎移植:电子显微镜观察

<正> 与体内发育比较,哺乳类胚胎的体外培养导致发育延滞。为了研究生长延滞的逆转性潜能。作者用超微结构研究了经1天体外培养的第8天兔胚和经受体兔培养一天后移植的培养胚与非培养对照组的超微结构的形态学     

蒙古绵羊胚胎的卵裂及囊胚形成

研究蒙古绵羊胚胎发生的规律,对绵羊的繁殖育种、定向培育新品种、丰富胚胎学内容,都有重要的意义。同时近年来国内外学者对家畜受精卵的移植作了大量研究工作。因此,通过对蒙古绵羊胚胎发生的研究,不但可以阐明蒙古绵羊胚胎的卵裂及囊胚形成的胚胎学特征,而且也为蒙古绵羊受精卵的移植提供科学论据。     

Effect of embryonic development rate on the developmental capacity of in vitro fertilized embryo in goat

目的:研究山羊体外受精胚胎的发育速度与胚胎发育能力的关系,为进一步探讨哺乳动物体外胚胎发育能力的影响因素奠定基础.方法:观察比较在不同时间点逾越第1次卵裂和发育阻滞期的山羊体外受精胚胎的进一步发育能力.结果:山羊精卵共孵育后,在超过42 h才出现卵裂的2-细胞胚胎比36 h之前出现卵裂的胚胎更难越过发育阻滞期,精卵共孵育后78h以内逾越发育阻滞期的胚胎桑葚胚发育率高于84 h以后逾越发育阻滞期的胚胎.结论:受精卵逾越第1次卵裂和胚胎发育阻滞期的时间对受精卵随后的发育能力有着重要的影响.     

脊髓血管胚胎发生发育的解剖学研究

目的 :观察人胚胎脊髓血管的发生发育过程 ;分析胚胎脊髓血管的结构特征以及与成人脊髓血管结构的关系。方法 :采用胎龄 30d～ 2 8周的胚胎及胎儿、新生儿和成人尸体标本 ,进行解剖学观察。结果 :对脊髓血管胚胎各期的发育特征进行了描述。神经管未闭合时 ,周围的间充质内已出现了毛细血管网 ,逐渐向基板和翼板集中 ,并沿神经根走行 ,进出椎管 ,每一节段均有两对 ,左右对称。表面的毛细血管垂直向脊髓内发出分支 ,部分分化成各级动、静脉 ,并在髓内发出分支 ,构成毛细血管网。原基板外周的毛细血管网随脊髓的生长 ,形成了脊髓前动脉纵轴。颈髓前动脉多保持双干结构。脊髓后动脉为双干 ,在外侧方。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓血管已与成人大致相仿。结论 :脊髓前动脉在胎龄 8周时 ,胸腰段就已经融合为一条。颈髓的脊髓前动脉多为双干 ,有相互靠近的趋势。胎龄 3个月以上的胎儿脊髓表面血管形态已经与成人大致相仿。脊髓血管是神经管周围间充质中的毛细血管网随着脊髓的生长 ,通过相互融合和不均衡退化等机制 ,逐渐演化过来的     

胚胎小体在血管发育研究中的应用

胚胎干细胞 (ES)可自发地在体外分化成单层细胞或聚集生长成胚胎小体 (EB) ,EB可生成高度分化的细胞。在EB形成过程中 ,既有血管发生也有血管新生 ,因此EB系统可以在体外模拟胚胎血管形成的过程 ,可用于血管发育的研究     

携带9号染色体臂间倒位对不孕症患者IVF/ICSI新鲜取卵周期临床结局的影响

目的探讨携带9号染色体臂间倒位对体外授精和卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)新鲜取卵周期临床结局的影响。方法本研究纳入本中心2010年5月-2016年3月47例9号染色体臂间倒位患者共50个新鲜取卵周期。当天非9号染色体臂间倒位患者作为对照组。观察获卵数、正常受精卵数、胚胎数、移植胚胎数、临床妊娠率、种植率、异位妊娠率、多胎妊娠率、流产率、活产率、足月产率、新生儿男女性别比和新生儿缺陷/疾病发生率等指标。结果观察组获卵数、正常受精卵数、胚胎数、移植胚胎数、临床妊娠率、种植率、异位妊娠率、多胎妊娠率、流产率、活产率、足月产率、新生儿男女性别比和新生儿缺陷/疾病发生率等指标与对照组没有显著差异(P0.05)。结论 9号染色体臂间倒位不影响IVF/ICSI新鲜周期的临床结局。     

内毒素对去卵透明带2-细胞小鼠胚胎体外发育的影响

目的 观察不同剂量浓度内毒素对去卵透明带2—细胞小鼠胚胎体外发育的影响。方法 获取小鼠2—细胞胚胎，用胰蛋白酶法去除卵透明带后，分别置于含有0，1pg/ml，5pg/ml和10pg/ml内毒素的CZB液滴中培养，此外，用蛋白酶法去除卵透明带，在不含内毒素的CZB液滴中培养，观察胚胎体外发育情况。结果 用胰蛋白酶法去卵透明带的2—细胞小鼠胚胎，其囊胚率随着培养液中内毒素剂量的增加而降低，且5pg/ml和10pg/ml时与对照组(不含内毒素)相比差异显著(P＜0．001)。在有内毒素存在时，停滞在2—细胞或4细胞期的胚胎彼此分离排成列，不再呈球形。部分卵裂球出现空泡或碎裂。另外，用蛋白酶法去除透明带的2—细胞鼠胚的囊胚率为61．7％，显著低于胰蛋白酶法的73．8％(P＜0．001)。结论 微量内毒素即明显抑制去卵透明带2—细胞小鼠胚胎的体外发育，并表现出剂量效应；去卵透明带2—细胞小鼠胚胎试验可应用于培养液的微量内毒素检测；胰酶法去除卵透明带后胚胎的囊胚率优于蛋白酶法。     

75例常规IVF失败后补救ICSI临床结局分析

目的 对常规IVF周期受精完全失败,行补卵母细胞浆内单精子显微注射(rescue ICSI)的结局分析.方法 回顾分析2005.03-2006.06在我院生殖医学中心接受常规IVF治疗,对卵母细胞完全未受精行ICSI再授精的患者,共75例.在随后治疗中,解冻复苏补救ICSI受精卵的胚胎,共移植10个周期.结果 在75例常规未受精补救ICSI周期中,共有759个未受精卵,其中可注射MⅡ卵有626个,正常受精数332个(受精率53.03%),290个卵裂,形成可移植胚胎199个.在75例补救IcsI周期中,有70例新鲜胚胎移植周期,结果4例临床妊娠(妊娠率为5.71%),均为单胎,分娩4例健康婴儿,2男,2女.解冻复苏补救ICSI受精卵胚胎10周期,结果1例临床,为双活胎(妊娠率为10%),分娩2例健康男婴.结论 ICSI可作为常规IVF失败后所采取的补救措施.     

淫羊藿苷对猪早期胚胎体外培养一氧化氮及丙二醛水平的影响

目的 研究淫羊藿苷(ICA)单体对猪体外受精早期胚胎体外发育过程中培养液内一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)生成量的影响,探讨其与猪胚胎体外发育效果的关系. 方法 以NCSU-23培养液为对照组,以添加0.6mg/L淫羊藿苷为实验组(ICA组),通过硝酸还原酶法和硫代巴比妥酸法测定猪体外受精卵体外培养0～48h、48～120h、120～168h培养液滴中NO和MDA水平. 结果 ICA组(342枚受精卵)48h卵裂率(74.84% vs 63.32%)、120h桑囊率(45.08% vs 34.10%)、168h囊胚率(23.38% vs 18.04%)均极显著高于对照组(349枚受精卵) (P<0.01).在猪体外受精卵体外培养0～168h整个过程中,培养液内NO、MDA水平总体均呈上升趋势,但在胚胎发育3个阶段中ICA组平均每枚胚胎NO生成量高于对照组,MDA生成量则低于对照组 (P> 0.05). 结论 ICA有利于促进猪体外受精早期胚胎的体外发育,可能与其在一定程度上提高NO水平,并同时抑制MDA的生成有关.     

消息

新名词新信息设计婴儿:据报道,由于英国政府放宽了对人体胚胎(包括胚胎干细胞)研究的限制,世界上第1例“设计婴儿”将于明年3月前后诞生。这名“设计婴儿”是为了避免患先天性视网膜母细胞瘤婴儿的降生而经心营造的,部分视网膜母细胞瘤的发生是在合子(即受精卵)时期便决定了的,原因是精子或卵细胞带有一种有缺陷(或突变)的Rb基因,该基因的缺陷或突变使得成视网膜细胞无限增生,于是婴儿出生后必定罹患该疾患。为了不让这样的婴儿出生,医生要对合子进行筛查。即让精子与卵在体外受精,等它们发育为数个细胞时期,从中取单个细胞进行DNA分析,确…     

新名词新信息

设计婴儿:据报道,由于英国政府放宽了对人体胚胎(包括胚胎干细胞)研究的限制,世界上第1例“设计婴儿”将于明年3月前后诞生。这名“设计婴儿”是为了避免患先天性视网膜母细胞瘤婴儿的降生而精心营造的,部分视网膜母细胞瘤的发生是在合子(即受精卵)时期便决定了的,原因是精子或卵细胞带有一种有缺陷(或突变)的Rb基因,该基因的缺陷或突变使得成视网膜细胞无限增生,于是婴儿出生后必定罹患该疾患。为了不让这样的婴儿出生,医生要对合子进行筛查。即让精子与卵在体外受精,等它们发育为数个细胞时期,从中取单个细胞进行DNA分析,确定Rb是否正常…     

蚊体内疟原虫早期发育机制研究进展

研究蚊媒体内疟原虫的发育生物学 ,探讨疟原虫 蚊媒相互关系的分子机理 ,是发展疟疾防治新策略的前提。本文就蚊体内疟原虫卵囊前各期的发育机理、按蚊对其的免疫攻击作一综述。1　疟原虫卵囊前各时期的发育机理疟原虫卵囊前各期包括配子体、配子、合子和动合子时期。卵囊前各期的发育基本上在按蚊胃腔或胃基底膜下进行 ,所以按蚊蚊胃将为它们的发育提供必要的内环境和相关因子 ,而疟原虫卵囊前期的发育将受蚊胃相关因子的严格调节。研究调节疟原虫发育的蚊胃相关因子 ,可为体外成功培养卵囊前各期疟原虫提供理论依据 ,井可为遗传防制蚊媒提…