脉冲强磁场对H22肝癌小鼠抗肿瘤及免疫调节作用

目的探讨交变脉冲磁场（ＡＩＭＦ）对肿瘤组织杀伤作用及免疫效应的机理。方法应用ＡＩＭＦ对６０只接种Ｈ２２肝癌的昆明小鼠作杀伤实验,对组织形态学、抑瘤率及免疫学指标进行检测。结果ＡＩＭＦ对肿瘤细胞具有选择性杀伤和抑制肿瘤组织生长的作用,曝磁１５天与对照组瘤重分别为（０．７６０±０．６１３）ｇ,（１．９５１±０．８２２）ｇ;肿瘤体积为（１．６４８±０．６８３）ｃｍ３,（３．９７６±０．８４７）ｃｍ３,ｔ＝５．８５６,８．９７３,Ｐ＜０．０１,两组差异有非常显著性。对正常组织无副损伤。各免疫指标与对照组差异有显著性。结论ＡＩＭＦ具有直接杀伤癌细胞、抑制肿瘤组织生长的作用,并且对荷瘤小鼠的免疫功能有调节作用。     

梁金菇多糖对荷瘤鼠的抗肿瘤作用和免疫功能影响

目的 :研究梁金菇多糖的抗肿瘤效果及其对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法 :建立荷瘤小鼠模型 ,观察梁金菇多糖体内的抑瘤作用 ,采用MTT法检测小鼠的脾淋巴细胞转化、NK杀伤活性及LAK杀伤活性的影响。结果 :梁金菇多糖能够明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长 ,能够促进正常和荷瘤小鼠的脾淋巴细胞的转化 ,提高刺激指数 ,提高NK杀伤活性及LAK杀伤活性。结论 :梁金菇多糖提高荷瘤小鼠的免疫功能是其掏肿瘤效应的机制之一。     

脉冲强磁场对小鼠移植性实体瘤的杀伤作用

目的探讨交变脉冲强磁场对肿瘤组织杀伤作用的机理。方法应用交变脉冲强磁场对９０只接种Ｌｏｕｉｓ肺癌的昆明小鼠作杀伤实验研究。对实验组与对照组荷瘤鼠抑瘤曲线、抑瘤率进行检测。结果两组肿瘤生长曲线存在明显差异（Ｐ＜０．０５）。两组肿瘤生长体积和肿瘤重量均存在明显差异（Ｐ＜０．０１）。实验组瘤体积抑制率为５２．９４％，瘤重量抑制率为３７．２４％。结论交变脉冲强磁场对肿瘤细胞具有杀伤和抑制生长作用，提示脉冲强磁场有可能成为治疗癌症的一种新的物理疗法     

bcr-abl基因疫苗对小鼠SP2/0/bcr-abl移植瘤的影响

为了研究bcr—abl融合基因疫苗对小鼠SP2／0／bcr—abl移植瘤的影响，采用pVbcr—abl、pVbcr—abl／mIL7两种质粒分别免疫BALB／c小鼠，然后用SP2／0／bcr—abl细胞攻击免疫小鼠，观察疫苗对SP2／0／bcr—abl移植瘤生长的影响，检验其是否具有免疫保护作用。结果表明：用基因疫苗免疫的两个实验组与两个对照组（空白对照组和空载体对照组）相比，在移植肿瘤形成时间、肿瘤表面破溃时间、肿瘤体积、荷瘤生存期等指标上均存在明显差异。pVbcr—abl／mIL7免疫小鼠组的荷瘤生存时间比pVbcr—abl免疫组相对延长。常规病理学分析发现，对照组小鼠的移植瘤组织比较致密，瘤细胞体积较大，形状不规则，而两个免疫组的肿瘤组织较为疏松，肿瘤细胞体积相对较小，并有大量炎性细胞浸润。两个对照组小鼠的肝脏组织内发现有大量肿瘤转移灶，而两个免疫组小鼠则未发现。结论：接受bcr—abl基因疫苗免疫的小鼠被诱导产生较强的特异性免疫保护力，对SP2／0／bcr—abl移植瘤的体内生长有一定抑制能力。     

人SART 3基因疫苗对荷瘤小鼠的免疫杀伤作用

目的研究表达人T细胞识别的鳞状细胞癌抗原3（SART3）基因的DNA疫苗在小鼠体内对表达该基因肿瘤细胞的免疫杀伤作用。方法构建表达人SART3基因的C3H小鼠骨肉瘤细胞LM8-SART3，将其接种到C3H小鼠成瘤，比较疫苗治疗组和空载体对照组中肿瘤的生长情况，取小鼠淋巴细胞检测免疫反应活性并行病理切片镜下比较。结果荷瘤小鼠经疫苗注射后肿瘤生长延缓，免疫反应活性与淋巴细胞数量有关，镜下可见肿瘤细胞坏死并淋巴细胞浸润。结论表达人SART3基因的DNA疫苗能诱导小鼠免疫杀伤肿瘤细胞，抑制表达该基因的肿瘤细胞在小鼠体内生长。     

脉冲强磁场对小鼠Louis肺癌杀伤作用的形态学研究

目的探讨交变脉冲强磁场对肿瘤组织杀伤作用的机理。方法应用脉冲强磁场对３０只接种Ｌｏｕｉｓ肺癌的昆明小鼠作了杀伤实验研究。结果通过组织学观察发现，交变脉冲磁场对肿瘤细胞具有选择性杀伤作用。对正常器官组织没有引起损伤。结论证实交变脉冲强磁场对肿瘤组织细胞具有选择性杀伤作用和抑制肿瘤生长作用。为应用于临床治疗恶性肿瘤提供依据。     

磁场对荷瘤小鼠IL1,IL6,IL8作用的研究

画磁场激活免疫机制，抑制肿瘤的生长。方法：要用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法及ＭＴＴ法对荷瘤小鼠磁疗产后细胞因子的含量进行观测，并对其抑制瘤作用进行研究。结果：磁场作用于瘤鼠脾区具有促进ＩＬ１、ＩＬ８产生，抑制ＩＬ６及瘤细胞殖的作用。     

高强度聚焦超声制备肿瘤疫苗对小鼠抗肿瘤免疫增强作用的研究

目的 探讨高强度聚焦超声(HIFU)制备的肿瘤疫苗对小鼠抗肿瘤免疫的增强作用.方法 每组小鼠20只,分别以2种声强的HIFU瘤苗、高温瘤苗及生理盐水注射,接种H22细胞后观察小鼠肿瘤发生率及生存期;检测免疫小鼠淋巴细胞的增殖及小鼠细胞毒性淋巴细胞(CTL)对肿瘤的杀伤;观察不同声强对HIFU瘤苗效能的影响.结果 HIFU瘤苗组小鼠肿瘤发生率减低,生存期延长;淋巴细胞在同源肿瘤刺激下增殖明显,CTL对肿瘤细胞有特异性的杀伤,且比高温瘤苗组有更高的增殖率和杀伤率(P＜0.05);显著提高声强后制备的HIFU瘤苗效能降低.结论 一定参数下制备的HIFU瘤苗明显增强了小鼠抗同源肿瘤的免疫力.     

蛇毒抗高凝状态酶对种植肝癌H22小鼠肿瘤抑制作用的研究

目的探讨蛇毒抗高凝状态酶（AHCSE）对实验小鼠肿瘤的抑制作用。方法20只Balb／c小鼠随机分为治疗组和对照组，左前肢腋下接种H22肝癌瘤组织，治疗组腹腔途径注射AHCSE2mg／kg体重，对照组用生理盐水代替。结果对照组瘤结较大，显微镜下见瘤细胞生长活跃、核大、核仁明显、核分裂多见，而坏死灶少见，且瘤细胞向周围浸润扩散；治疗组瘤体较小，瘤细胞固缩、核仁不明显、核分裂少见，而坏死灶多见，瘤细胞周围有少量纤维组织增生。结论AHCSE具有显著的体内抑制肿瘤生长的作用。     

小半夏加茯苓汤对H22荷瘤小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的:探讨小半夏加茯苓汤对H22肿瘤的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:建立H22荷瘤小鼠模型,观察小半夏加茯苓汤的抑瘤作用及瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况;同时检测免疫器官指数、T淋巴细胞增殖功能和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:小半夏加茯苓汤高剂量对小鼠H22移植瘤有明显抑制作用,抑瘤率为13.7%,PCNA蛋白表达与对照组比较差异有显著性,同时脾脏指数、脾细胞刺激指数和血清中TNF-α等指标均显著高于对照组.结论:小半夏加茯苓汤可以抑制模型鼠肿瘤的生长,增强荷瘤小鼠的免疫功能.其机制可能是通过激活免疫细胞、调节机体的免疫功能达到有效控制肿瘤细胞增殖的作用.     

塞来昔布对H22肝癌组织环氧合酶2及磷脂酶A2抑制作用

目的考察塞来昔布对小鼠H22肝癌细胞移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法40只BALB/c小鼠腋下接种H22肝癌细胞,然后随机分为对照组和低、中、高剂量(100、200、400mg/kg)组,于接种后3天灌胃给药,连续用药15天后处死,计算肿瘤的体积和重量;Western blot法检测瘤组织中胞浆磷脂酶A2和环氧合酶2的表达。结果塞来昔布低、中、高剂量治疗组的小鼠平均瘤重均低于对照组,与对照组相比较有显著性差异(P0.05)。塞来昔布治疗组抑瘤率均大于30%,其中高剂量治疗组的抑瘤率大于75%,作用明显。塞来昔布能够明显抑制胞浆磷脂酶A2和环氧合酶2的表达,具有剂量依赖关系。结论塞来昔布对H22肝癌具有抑制作用,其机制可能是通过抑制胞浆磷脂酶A2及环氧合酶2的表达而发挥抗肿瘤的作用,二者在此过程中具有协同效应。     

The complete preventive effect of homologous tumor vaccines – Based on a 5-year experimental study in mice

By using a frozen-thaw method, we developed homologous and heterologous cell-based tumor vaccines, which were derived from mouse H22 hepatoma, S180 sarcoma and human A549 lung carcinoma, SK-OV-3 ovarian, and SMMC-7721 hepatoma cell lines. The prophylactic and therapeutic effects of those vaccines were evaluated in mice challenged with live H22 or S180 cells. The result demonstrated that homologous vaccines and heterologous vaccines had no therapeutic effect on tumor growth. However, homologous vaccines showed a complete prevention against live H22 and S180 cell challenge and they could stimulate cross-immune response of anti-tumor in mice. Furthermore, these tumor-free mice immunized with homologous vaccines showed full protection against the repeat challenge every 3 months for 5 years. The study also revealed that tumor-free female, not male, mice transferred anti-tumor ability to some of their offsprings. Heterologous vaccines exhibited no protective effect on tumor development. Immunological analysis discovered that activities of CTLs and NK were enhanced and the levels of IL-2, IL-12 and IFN-γ were significantly increased. Our results demonstrated that homologous tumor vaccines could elicit complete cross-protection against the lethal challenge of tumor cells through enhancing cell-mediated immune response, which lasted for 5 years in mice. These observations may provide a new vaccine strategy for tumor prevention.     

小剂量奥沙利铂抗肿瘤血管生成作用的体内实验研究

目的观察小剂量奥沙利铂（L-OHP）对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）的影响。方法建立肝癌H22小鼠模型后,将小鼠随机分组4组,5％葡萄糖20mL／kg阴性对照组、环磷酰胺20mg／kg阳性对照组、奥沙利铂0．75mg／k和1．5mg／kg组,腹腔等容积注射给药,连续10d。第11天处死小鼠,计算瘤重抑制率,用免疫组化方法测定肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达。结果1．5mg／kg奥沙利铂组的瘤重明显低于阴性对照组（P〈0．01）,而且肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达也明显低于阴性对照组（P〈0．01）。结论小剂量奥沙利铂对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用明显,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。     

小剂量奥沙利铂抗肿瘤血管生成作用的体内实验研究

目的观察小剂量奥沙利铂(L-OHP)对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)的影响。方法建立肝癌H22小鼠模型后,将小鼠随机分组4组,5%葡萄糖20 mL/kg阴性对照组、环磷酰胺20 mg/kg阳性对照组、奥沙利铂0.75 mg/kg和1.5 mg/kg组,腹腔等容积注射给药,连续10 d,第11天处死小鼠,计算瘤重抑制率,用免疫组化方法测定肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达。结果1.5 mg/kg奥沙利铂组的瘤重明显低于阴性对照组(P<0.01),而且肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达也明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论小剂量奥沙利铂对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用明显,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。     

Experimental study of specific immunotherapy induced by H22 autologous tumor as whole tumor cell vaccine

This study explores the novel H22 whole-cell vaccine of active specific immunotherapy in the treatment of hepatocellular carcinoma. H22 hepatoma tumor vaccine modified by human interleukin-2 (hIL-2) and mouse granulocyte-monocyte colony-stimulating factor (mGM-CSF) fusion gene was prepared to study its specific anti-tumor immunity. Mice were inoculated by these vaccines. Then tumor cells were injected into mouse models. The ⁵¹Cr release assay was used to examine the cytotoxicities of the splenocytes to H22 hepatoma cells in immunized mice, tumor-bearing mice and control mice. The blood was needed to test the level of IL-10 and interferon (IFN)-γ in serum. Survival time of mice was calculated. Specific cytotoxicity rate of splenocytes from the immunized mice to H22 cancer cell was 38%, significantly higher than 13.6% in the tumor-bearing group, 7.5% in the control group, and 9.1% in S180 cells (p < 0.05). Serum IFN-γ in the immunized group was significantly increased compared with other groups (p < 0.01), and serum IL-10 in the immunized group was significantly decreased compared with other groups(p < 0.01). The survival time of the transgenic vaccinated group was significantly longer.     

当归贝母苦参丸加味方对荷瘤小鼠H22肝癌肿瘤组织MMP13和bFGF表达的影响

目的研究当归贝母苦参丸加味方对H22荷瘤小鼠瘤组织基质金属蛋白酶13(MMP13)和成纤维细胞生长因子2(bFGF)表达的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将60只荷瘤小鼠随机分为模型组,顺铂阳性对照组,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量组,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组,连续灌胃给药14d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,肿瘤大体标本及HE染色后组织形态观察;RT-qPCR和免疫组织化学技术分别检测肿瘤组织中MMP13和bFGF的表达。结果大体观察剥离的肿瘤瘤体发现,模型组与中药低剂量组瘤体较大,瘤体内有溃烂,包膜基本完整;各治疗组瘤体较模型组相比较小,但包膜不完整,有不同程度溃烂,剥离易出血,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组瘤体小,包膜完整,肿瘤溃烂较少;HE染色病理形态观察发现,各治疗组结缔组织明显,细胞稀疏程度增加,坏死癌细胞数目增加。RT-qPCR检测显示,与模型组相比,各用药组中MMP13和bFGF mRNA的表达量均降低,差异有统计学意义(P0.05);免疫组化检测显示,MMP13和bFGF在当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组中蛋白着色变浅,呈弱阳性表达,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组较单独用药蛋白表达量低,差异有统计学意义(P0.05)。结论当归贝母苦参丸加味方可以在mRNA和蛋白水平下调荷瘤小鼠肿瘤组织中MMP13和bFGF的表达,进而抑制肿瘤侵袭和血管生成,发挥抑瘤减毒增效目的。     

乳酸杆菌Lactobacilluscasei．Zhang的抗肿瘤作用及机制

目的观察益生菌Lactobacilluscasei．Zhang（肋．caseiZhang）对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,初步探讨其可能的作用机制。方法以荷H22肝癌小鼠为模型,免疫组化法检测小鼠肿瘤细胞中癌基因Bcl-2和抑癌基因Bax蛋白的表达。结果Lb．caseiZhang对H22移植性肿瘤的生长有一定的抑制作用,中高剂量组的抑瘤率分别达到40．22％（P〈0．01）和41．90％（P〈0．01）。可显著提高小鼠血清中TNF,13含量,分别达到（15．19±4．90）ng／mL（P〈O．05）、（23．32±4．37）ng／mL（p〈0．01）。H22肿瘤细胞Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强。结论益生菌Lb．caseiZhang对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,其抗肿瘤机制可能是通过增强荷瘤小鼠免疫功能及同时促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤的作用。     

微波制备γ-干扰素处理的小鼠H22肝癌细胞瘤苗的抗瘤作用

目的探讨用微波方法制备γ-干扰素（IFN-γ）处理的小鼠H22肝癌细胞瘤苗（MITTV-H22）的抗肿瘤效应。方法利用MITTV-H22免疫小鼠3次,末次免疫后第7天接种H22肿瘤细胞,观察肿瘤生长情况及检测小鼠淋巴细胞刺激指数。结果实验组小鼠于H22肿瘤细胞攻击后的7d接种部位没有发现肉眼可见的包块,经解剖肿瘤接种部位未发现肿瘤组织,120d后也未发现肿瘤组织。对照组于H22肿瘤细胞接种后第5或第6天接种部位出现直径小于0.5cm的包块,成瘤率为100%。观察120d,实验组小鼠平均生存期高于对照组（t=25.55,P〈0.01）。脾淋巴细胞增殖实验检测结果显示,实验组淋巴细胞刺激指数高于对照组（t=3.526,P=0.01）。结论 MITTV-H22可以有效抑制肿瘤生长,具有明显的抗瘤效应。