整合素家族与肾小球系膜研究进展

整合素为一类位于细胞膜表面的糖蛋白分子，是细胞与细胞外基质（ＥＣＭ）相互作用的主人介导者，新近研究发现，整合素在维持肾小球组织的完整性和炎症，硬化过程中起重要作用，本文重点介绍了整合素家族与肾小系膜的关系，包括其结构特性，表达调节和信号传递机制等等。     

肾小球系膜细胞,胞外基质及细胞因子与肾小球疾病

肾小球系膜细胞及其胞外基质，细胞因子在肾小球疾病的发生发展中有重要作用。ＭＣ研究需关注种属差异，ＭＣ培养有助于研究糖尿病，脂质性肾小球肾炎的病理过程。     

基质金属蛋白酶与肾小球硬化

肾小球硬化是由细胞外基质（ＥＣＭ）过度沉积所致,ＥＣＭ合成过程增强,而降解过程被抑制是其主要机制。基质金属蛋白酶家族（ＭＭＰｓ）是ＥＣＭ降解过程中最主要的蛋白酶系统。本文综述了ＭＭＰｓ在肾小球硬化过程中的作用及其调控。     

肾小球固有细胞损伤与肾小球硬化

肾小球硬化是多种肾脏疾病发展的最终结局,是以进行性的细胞外基质(ECM)堆积和肾小球细胞减少为特征.本文就近年来肾小球固有细胞损伤与肾小球硬化的相关研究结果做一综述.     

血管紧张素Ⅱ上调人肾小球系膜细胞硬化相关基因的克隆

目的：筛选和鉴定培养的人肾小球系膜细胞（MsC)在血管紧张素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ）作用下，产生以纤连蛋白（Fibronection,FN)为代表的细胞外基质成分的过程中上调表达的基因，寻找AngⅡ致细胞外基质堆积作用的相关基因，为探讨AngⅡ在肾小球硬化发展过程的分子机制奠定基础。方法：人MsC经AngⅡ（10^-6mol/L)刺激24h后，采用抑制性消减杂交（Suppression subtrative hybridization,SSH)获得AngⅡ相关的差异表达的cDNA，经纯化克隆到pGEM-Teasy Vector并转化大肠杆菌；随机选择120个克隆，经反向Norhern筛选上调表达的基因cDNA片段，并以Northern杂交验证，然后进行120个克隆，经反向Northern筛选上调的基因cDNA片段，并以Northern杂交验证，然后进行DNA序列测定和同源性比较，采用5′和3′－RACE及长距离PCR的方法获得新基因的全长cDNA。结果：120个随机选择的克隆中，反向Northern结果表明有55个克隆表达明显上调，挑选其中20个克隆进行DNA序列测定，结果显示18个为独立的基因片段序列（有两个序列为双拷贝），其中15个为已知基因，包括细胞外基质成分：如血小板反应素I，I型胶原α2，细胞骨架及结合蛋白：如平滑肌肌动蛋白α，钙调蛋白1，γ－胞浆型肌动蛋白等；合成和代谢相关蛋白；如醛缩酶A，延长因子1－γ，arnesyl pyrophosphate synthetase等，蛋白分解相关蛋白：如组织蛋白酶，泛素蛋白连接酶等，3个克隆（克隆104，52，46）与已知序列没有明显同源性，提示为新基因，3个新基因分别命名为AngRem(AngiotensinⅡ related gene in mesangial cells)104,AngRem52,AngRem46,GenBank登录号分别为AF367870，YA040225，AY040224，结论：对已知基因的分析表明，Ang II对细胞外基质具有双重作用。即：既刺激培养的人MsC细胞外基质成分表达上调，也通过刺激PAI－I等分子的表达而制抑细胞外基质成分的降解，此外，我们还发现了目前尚未报告的与AngⅡ对MsC的生物学效应－细胞外基质堆积和增生等细胞相关的基因（包括3个新基因），为揭示AngⅡ介导的MsC在肾小球硬化进展过程的可能分子机制提供了新的线索。     

低密度脂蛋白对大鼠系膜细胞产生血管内皮生长因子的影响

高脂血症可致血管内皮损伤，增加肾小球滤过膜通透性，导致蛋白尿、肾小球局灶节段硬化等肾损伤。血管内皮生长因子(vEGF)是特异性促进血管内皮细胞有丝分裂作用的生长因子，具有增加血管通透性等功能，在一些原发性肾小球疾病及代谢性疾病等所致的肾脏病变的发生过程中起一定作用…，但VEGF是否在高脂血症造成的肾脏损害中起重     

低密度脂蛋白及氧化修饰低密度脂蛋白对人系膜细胞增殖及基质合成的影响

目的 观察不同浓度低密度脂蛋白（ＬＤＬ）及氧化修饰低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）对人系膜细胞（ＨＭＣ）增殖和细胞毒性作用,及对培养细胞上清Ⅳ型胶原的含量及表达Ⅳ型胶原α１链ｍＲＮＡ的影响。方法 采用体外ＨＭＣ培养,Ｈ＾３－ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入研究人系膜细胞增殖,ＬＤＬ释放实验研究细胞毒作用,ＥＬＩＳＡ法测定Ⅳ型胶原含量和逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法研究Ⅳ型胶原α１链ｍＲＮＡ表达。结果 Ｌ     

基质金属蛋白酶与肾小球硬化

肾小球硬化是由细胞外基质 (ECM)过度沉积所致 ,ECM合成过程增强 ,而降解过程被抑制是其主要机制。基质金属蛋白酶家族 (MMPs)是ECM降解过程中最主要的蛋白酶系统。本文综述了MMPs在肾小球硬化过程中的作用及其调控     

细胞外基质与肾小球硬化

细胞外基质(ECM)位于细胞的周围,主要由胶原蛋白、糖蛋白及蛋白多糖三大类物质聚合组成,每类物质又包括多种成分。不同器官组织的ECM中各种成分的比例及其排列不尽相同,从而适应不同的功能。ECM对细胞的生理功能起着非常重要的作用,它不仅是细胞的粘附及支持所必需     

肝素对肾小球系膜细胞和细胞外基质的影响

肝素对肾小球系膜细胞和细胞外基质的影响王宗谦周希静近年来，单纯肝素或肝素并用激素治疗肾病综合征获良好疗效。Ｐｕｒｋｅｒｓｏｎ等报道，Ｎ－Ｄｅｓｕｌｆａｔｅｄ／ＡｃｅｔｙｌａｔｅｄＨｅｐａｒｉｎ可能延缓肾衰进程，但机理尚未明。我们通过观察肝素对体外培养...     

OX-LDL诱导活化的巨噬细胞对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:采用细胞共培养方法,研究氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导活化的巨噬细胞对肾小球系膜细胞增殖的影响.方法:用OX-LDL刺激大鼠腹腔巨噬细胞,ELISA测定上清液中IL-1浓度鉴定巨噬细胞活化程度;用普通培养皿和细胞共培养皿分别将活化巨噬细胞上清液和活化巨噬细胞与大鼠肾小球系膜细胞共培养;用MTT法和流式细胞检测细胞周期测定细胞增殖.结果:OX-LDL刺激后大鼠腹腔巨噬细胞上清液中IL-1浓度明显升高;无论是活化的巨噬细胞还是其上清液均能明显促进系膜细胞增殖,但以共培养组最为显著.结论:在细胞共培养状态下由于脂质诱导活化的巨噬细胞及其上清液可能通过促进系膜细胞增殖导致肾脏损伤.     

肾小球系膜细胞、胞外基质及细胞因子与肾小球疾病

肖小球系膜细胞（ＭＣ）及其胞外基质（ＥＣＭ）、细胞因子在肾小球疾病的发生发展中有重要作用。ＭＣ研究需关注种属差异，ＭＣ培养有助于研究糖尿病、脂质性肾小球肾炎的病理过程。ＥＣＭ主要由ＭＣ等分泌。ＥＣＭ随肾内细胞增殖而增殖，多种类型肾炎发展与此有关。细胞因子ＰＤＧＦ、ＴＧＦ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦｘ及活性物质如内皮素、Ａｎｇ、植物凝集素、ＴＳＰ等对ＭＣ有重要影响，这在病理情况下更具意义。     

氧化-低密度脂蛋白诱导系膜细胞转录激活蛋白1活化的信号转导通路

目的 观察氧化—低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导系膜细胞转录激活蛋白1(AP—1)活化的作用，探讨AP—1活化的上游信号转导机制。方法 大鼠肾小球系膜细胞随机分为正常细胞组，ox-LDL处理组和ox—LDL 蛋白激酶抑制剂组。采用western blot测定丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)家族磷酸化水平，采用凝胶迁移率实验观察蛋白激酶抑制剂bisindo1ylmimideiI、H89、genistein、PD98059及SB203580对ox-LDL诱导系膜细胞AP—1活性的影响。结果 ox-LDL呈浓度和时间依赖性激活JNKl／SAPK(stress activated protein kinase)、p38MAPK磷酸化(P＜0．05)，而ox-LDL对p44/／42MAPK磷酸化无影响(P＞0．05)。bisindo1ylmaleimide I浓度为50、100、200nmol/L时均显著抑制ox-LDL诱导系膜细胞AP—1活性。H89剂量为0．5、5μmol/L时，AP—1活性显著受抑制。genistein浓度为25、50μmol/L时并不抑制ox-LDL诱导AP—1活性，浓度达100μmol/L时则显著抑制ox-LDL诱导系膜细胞AP—1活性。SB203580和PD98059均不能抑制ox-LDL诱导AP—1活性。结论PKC、PKA及PTK等多种蛋白激酶参与对ox-LDL诱导系膜细胞AP—1活性的调控。     

足细胞与肾小球损伤

随着体外培养技术的发展，已认识到肾小球足突细胞具有其特殊的结构和性质。它参加了初期及进行性肾小球损伤过程，其具有的多种表面抗原及受体结构成份亦可能涉及肾小球免疫损伤的病理过程，已获得的信息资料从根本上改变了人们对它的看法。     

ROS与肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质积聚

肾小球系膜细胞(GMC)增生及细胞外基质(ECM)积聚是导致多种肾小球疾病进展的重要因素。ROS可通过激活相关的信号转导级联反应及转录因子等多种机制介导GMC增殖及ECM的积聚。完善对ROS作用机制的认识，可能会对临床诊疗产生积极的影响。     

降糖通脉片对人肾小球系膜细胞及细胞外基质影响的实验研究

目的：探讨降糖通脉片对人肾小球系膜细胞（MC）及其细胞外基质（ECM）的影响。方法;采用血清药理学方法和体外人肾小球系膜细胞培养技术,观察具有清热化瘀,滋阴补气作用的中药降糖通脉片对MC增殖及其ECM成分的影响。结果：降糖通脉片具有抑制MC增殖及ECM成分中纤维连接蛋白（FN）,层粘连蛋白（LN）和IV型胶原（ColIV)的作用,该抑制作用具有一定的量效关系。结论：MC是降糖通脉片发挥治疗作用的 重要靶细胞,抑制MC增殖和ECM的产生可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

氧化低密度脂蛋白对大鼠肾脏系膜细胞增殖及LOX-1、TNF-α表达的影响

目的：应用MTT酶标分析法,检测在不同浓度、不同时长氧化低密度脂蛋白（ ox-LDL）干预下的大鼠肾小球系膜细胞（ RMC）的增殖情况以及不同浓度ox-LDL干预下LOX-1和TNF-α的表达,探讨其相互关系。方法：体外培养RMC,使用不同浓度ox-LDL在不同时间对RMC干预,经MTT法检测,并进行分组分析。用浓度为5μg/ml和50μg/ml的ox-LDL干预RMC 24 h,使用RT-PCR法和Western blot法检测LOX-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达量,并进行分析比较。结果：Ox-LDL干预RMC 在时间点为24 h的结果显示,在1-30μg/ml范围内呈生长促进效应,浓度大于30μg/ml后呈生长抑制效应;干预48 h组对细胞效应趋势基本与作用24 h后一致,但生长抑制效应从30μg/ml开始;而72 h组,ox-LDL在各个浓度均显示出生长抑制效应。5μg/ml及50μg/ml浓度ox-LDL干预RMC后,均可使LOX-1和TNF-α的mRNA和蛋白表达升高,且50μg/ml较5μg/ml效果明显,结果差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：Ox-LDL对RMC增殖影响具有浓度及时间依赖性。较低及较高浓度ox-LDL均能导致RMC中LOX-1和TNF-α的表达增高,且浓度较高时效果更明显。其机制可能为ox-LDL导致LOX-1表达增多,引起炎症因子的产生和趋化,发生细胞损伤,提示脂质代谢紊乱在肾脏疾病中的重要作用。     

整合素家族与肾小球系膜研究进展

整合素为一类位于细胞膜表面的糖蛋白分子，是细胞与细胞外基质（ＥＣＭ）相互作用的主要介导者。新近研究发现，整合素在维持肾小球组织的完整性和炎症、硬化过程中起重要作用。本文重点介绍整合素家族与肾小系膜的关系，包括其结构特性、表达调节和信号传递机制等等。     

OX-LDL诱导活化的巨噬细胞对肾小球系膜细胞TGF-β与Fn基因表达的影响及水蛭素的干预作用

目的：研究氧化低密度脂蛋白（OX—LDL）诱导活化的巨噬细胞对肾小球系膜细胞转化生长因子（TGF-β）、纤连蛋白（Fn）基因表达的影响以及水蛭素的干预作用，探讨炎症状态下肾硬化发生的病理机制和水蛭素的有效作用。方法：体外培养大鼠肾小球系膜细胞，将OX—LDL诱导活化的大鼠腹腔巨噬细胞转入细胞培养小室，或采集其条件培养基与肾小球系膜细胞共培养；水蛭素干预组在分层共培养系统的培养有系膜细胞的下层培养液中加入水蛭素。浓度分别为2.5U／ml、5．0U／ml、10U/ml。逆转录-聚合酶链扩增反应（RT—PCR）检测肾小球系膜细胞TGF-β、Fn的基因表达。结果：OX—LDL刺激后，大鼠腹腔巨噬细胞上清液中IL-1浓度明显升高；无论是活化的巨噬细胞还是其奈件培养基均能上调TGF-β和Fn mRNA的表达，但以分层共培养作用最为显著；水蛭素在一定浓度下可显著下调T（再一p和Fn的基因表达。结论：（1）在分层共培养条件下，OX—LDL诱导活化的巨噬细胞与系膜细胞处于一个整体系统中，巨噬细胞不仅可通过分泌细胞因子等病理产物，而且两种细胞还可能通过相互作用增强对系膜细胞增殖和TGF-β和Fn分泌等的促进作用。（2）水蛭素可能通过抑制病理条件下硬化因子和细胞外基质的基因表达起到干预肾硬化的作用。