人肝细胞癌及癌旁肝组织HBV-DNA的原位杂交检测

①目的探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ与增生结节和肝癌的关系。②方法应用原位杂交技术检测５８例肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ的表达。③结果肝细胞癌及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３７．９％（２２／５８）和４４．８％（２６／５８），差异无显著性（χ２＝０．５６，Ｐ＞０．０５）。ＨＢＶ－ＤＮＡ在癌旁组织中主要位于胞浆内，而肝癌组织中以胞核定位为主。２２例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的ＨＣＣ中，１６例ＨＣＣ及癌旁组织均阳性，６例ＨＣＣ单独阳性，两者差异有显著性（χ２＝９．０９，Ｐ＜０．０１）。６例癌旁增生结节中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性（６／２７），以胞核定位为主。④结论ＨＢＶ感染与ＨＣＣ存在密切关系。癌周组织ＨＢＶ－ＤＮＡ以复制型为主，癌组织内ＨＢＶ－ＤＮＡ以整合型为主；癌旁增生结节为ＨＣＣ的癌前病变。     

HBV-DNA检测的临床探讨

目的 :评价 HBV- DNA在诊治乙型肝炎中的临床价值。方法 :治疗前后检测 12 6例慢性乙型肝炎患者血清中 HBs Ag、HBV- DNA、AL T。结果 :12 6例慢性乙型肝炎病人经治疗 1年后 ,血清中的 AL T异常率由治疗前的 95 .2 3%下降为 30 .95 % (P<0 .0 0 1) ;HBs Ag阳性率由治疗前的 10 0 %下降为 6 9.84% (P <0 .0 0 1) ;而血清中 HBV- DNA的阳性率由治疗前的 10 0 %仅下降为 93.6 5 % (P >0 .0 5 )。结论 :通过检测乙型肝炎患者血清中的 HBV- DNA,可以使 HBV标志物的检测得到补充和完善 ,并对监测乙型肝炎病毒感染的病情发展及抗 HBV复制药物的治疗具有十分重要的意义。     

人肝细胞癌及癌旁肝组织HBV—DNA的原位杂交检测

探讨乙型肝炎病毒ＤＮＡ五增生结了和肝癌的关系，应用原位杂交技术检测５８例肝细胞癌及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ的表达。结果 肝细胞癌及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３７．９％和４４．８％〉差异无显著性。ＨＢＶ－ＤＮＡ在癌旁组织中主要位于胞浆内，而肝癌组织中以胞核定位为主。     

石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒DNA的检测

石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒ＤＮＡ的检测骆抗先，梁炽森，何海棠，侯金林，陈伟华，章廉检测肝内乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶＤＮＡ），一般从组织匀浆中提取ＤＮＡ，用斑点或Ｓｏｕｔｈｅｒｍ吸印转移杂交。我们曾报告１０９例慢性无症状ＨＢＶ携带者（ＡｓＣ）...     

微流芯片定量检测血清HBV DNA

目的 选择一种能进行HBV DNA准确定量的检测方法。方法 比较内对照竞争PCR-微流芯片分析法与内对照竞争PCR-微孔板杂交法及PCR-微孔板杂交法在血清HBV DNA检测上的优劣。结果 微流芯片分析的线性范围高于两种微孔板杂交．前者标本稀释试验线性相关较好，后者则寿在滞现象。结论内对照竞争PCR-微流芯片分析法检测HBV DNA特异性强灵敏度高。     

肝细胞癌与HBV感染的血清标记类型

为了解HBV染与肝癌发生的临床联系,我们调查了1989～1990年50例接受手术、病检证实为肝细胞癌病人的HBV血清标记类型。 1 一般资料 50例中,男44例,女6例。年龄15～70岁。病程     

乙型肝炎病毒标志物与HBV-DNA检出率的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒标志物（HBV－M）常见模式与HBV－DNA检出率的关系。方法：采用地高辛标记探针斑点杂交法检测200例HBV－M常见模式血清中HBV－DNA。结果：41份HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性（大三阳）标本中检了HBV－DNA阳性38例（HBV－DNSA阳性率为92．6％）;52例HBsAg、HBeAb、HBcAb三项阳性（小三阳）标本中检出HBV－DNA阳性9例（阳性率17．3％）;30例HBV－M全阴性标本中检出HBV－DNA阳性2例（阳性率6．7％）;20例仅HBsAb阳性的标本,其HBV－DNA全部阴性。结论：BHeAg阳性与HBV－DNA关系极为密切,其HBV复制最活跃,传染性最强。无论何种原因产生HBsAb,都能有效地清了HBV;只有HBsAb是保护性抗体,能有效地清除HBV或抑制HBV复制。即使HBV－M全阴性人群中,仍可能有病毒复制,一般都应接种乙肝疫苗。     

整合型HBV—DNA前C区基因突变与肝细胞癌的相关性

１．目的 探讨整合型ＨＢＶ－ＤＮＡ前Ｃ区基因突变与肝细胞癌的关系。２．方法应用聚合酶链反应单链构象多态技术,对２９例肝癌１２例慢性肝硬化和１４例非肝病病伯肝组织内整合型ＨＢＶ－ＤＮＡ前Ｃ区进行突变分析。３．结果 肝癌、肝硬化和正常肝组织中整型ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．５５％,６６．６７％和１４．２９％,组间比较差异有显著性（ｘ＾２＝２９．４３,Ｐ〈０．００１）,３组整合型ＨＢＶ－ＤＮＡ前Ｃ区     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

巨细胞病毒在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达

目的探讨巨细胞病毒(CMV)在慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织中表达意义。方法采用免疫组化以抗-CMV单克隆抗体对76例CHB患者肝组织进行检测,然后用抗-HBcAg多克隆抗体和抗-CMV单克隆抗体双标记技术在CHB患者同一张肝组织切片上显示两种病毒分布特点。结果轻度和重度慢性肝炎患者CMV检出率无显著差异(P=0.444),而重度CHB患者中CMV表达阳性细胞明显多于轻度患者(P=0.012)。双标记染色显示CMVAg和HBcAg多数表达于肝小叶内同一区域肝细胞甚至同一肝细胞内,也可见于肝小叶中不同部位。结论CHB患者更易重叠CMV感染,并且其感染程度与肝组织的活动性病变密切相关。     

乙型肝炎患者HBV-DNA与血清e系统的关系

目的：探讨乙型肝炎患者HBV－DNA与血清e系统的关系。方法：用PCR和ELISA法分别检测135例急、慢性乙型肝炎患者血清中HBV－DNA和HBsAg、抗－HBs、HBeAg、抗－HBe、抗－HBc。结果：e抗原阳性组与e抗体阳性组,HBV－DNA阳性率差异有显著性（P＜0.01）;但与各临床类型间差异无显著性（P＞0.05）。结论：HBV－DNA阳性多见于活动性乙型肝炎患者,且与e抗原表达水平有一定关系。     

乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒-DNA与常用血清标志物的相关性分析

目的: 评估乙型肝炎(乙肝)患者血清乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量与血清免疫和生化标志物之间的关系。方法: 收集214例乙肝患者血清, 分别用荧光定量PCR法、化学发光法和速率法检测血清中的HBV-DNA、乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和丙氨酸氨基转移酶(ALT), 分析各标志物之间的关系。结果: 214例中, HBV-DNA阳性率为57.48%;HBeAg阳性率为28.04%。HBV-DNA载量与HBsAg和ALT水平均无相关关系(P>0.05), 但与HBeAg水平密切相关(P<0.01), HBV-DNA阳性组的HBeAg和ALT水平均明显高于HBV-DNA阴性组(P<0.01)。结论: HBV-DNA载量与HBeAg水平呈正相关关系, 与HBsAg和ALT水平无相关性, HBsAg水平作为HBV-DNA的替代方法仍需进一步验证。     

胃癌组织中的HBV-DNA检测

探讨乙型肝炎病毒感染在胃癌中的意义。方法：采用基因扩增检测６０例胃癌中的ＨＢＶ－ＤＮＡ存在的情况。结果：６０例胃癌中２例可见ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性,阳性率３．３％。结论ＨＢＶ感染可能在某些胃癌中起一定作用。     

原发性肝癌患者及慢性乙肝病毒携带者肝组织中乙型肝炎病毒X基因的变异

目的:探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因及其变异与原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生、发展的关系。方法:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法,检测22例乙型肝炎表面抗原(hepatitis Bsurface antigen,HBsAg)阳性的HCC患者及15例慢性乙肝病毒携带者(chronic asymptomatic carrier,CAC)患者肝组织中HBVX基因,并对PCR产物进行基因测序,同时检测5例无HBV携带者正常肝脏组织中HBV X基因。结果:22例HCC患者癌组织及15例CAC患者肝组织中HBVX基因检出率分别为68.18%和46.67%,5例正常肝脏组织中均未检测到HBVX基因,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组织及HBV携带者肝组织中HBV X基因检出率差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组织及携带者肝组织中HBV X基因发生1 762T/1 764A双突变率分别为93.33%和2/7,肝癌组织中双突变率高于携带者肝组织(P=0.004 3),未发现1 762T及1 764A单独发生突变。结论:HCC患者肝组织中HBV X基因检出率高,肝癌组织中发生1762T/1764A双突变的频率高,HBV X基因及1762T/1764A双突变与HCC的发生可能有重要关系。     

原发性肝癌患者乙型及丙型肝炎病毒感染的检测

目的　调查原发性肝癌患者乙型及丙型肝炎病毒感染情况。　方法　采用免疫组织化学 SP法检测15 7例原发性肝癌患者乙型肝炎病毒 (HBV)及丙型肝炎病毒 (HCV)感染情况 ,每例患者均有血清学检测资料 ,另取 30例良性肝病组织作对照 ,所有数据用卡方检验。　结果　 15 7例原发性肝癌患者中 HBV感染阳性率为31.8% (5 0 / 15 7) ,HCV感染阳性率为 5 1.0 % (80 / 15 7) ,其中 10 7例原发性肝细胞癌 HBV、HCV感染阳性率分别为39.3% (42 / 10 7) ,4 5 .8% (49/ 10 7) ,5 0例胆管细胞癌 HBV、 HCV感染阳性率分别为 16 .0 % (8/ 5 0 ) ,6 2 .0 %(31/ 5 0 ) ,原发性肝细胞癌、胆管细胞癌 HBV、HCV重叠感染率分别为 2 7.1% (2 9/ 10 7) ,14 .0 % (7/ 5 0 ) ,良性肝病组HBV、HCV感染阳性率分别为 16 .7% (5 / 30 ) ,30 .0 % (9/ 30 )。原发性肝细胞癌 HBV感染、胆管细胞癌 HCV感染率高于良性肝病组 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。原发性肝细胞癌 HBV、HCV血清学检测阳性率分别为 87.8%(94 / 10 7) ,13.1% (14 / 10 7) ,胆管细胞癌 HBV、HCV血清学检测阳性率分别为 6 8.0 % (34/ 5 0 ) ,16 .0 % (8/ 5 0 )。　结论　原发性肝癌与 HBV、HCV的感染有密切关系     

乙型肝炎患者血清HBV-DNA表达水平及其临床意义

目的　探讨乙型病毒性肝炎患者血清HBV DNA的表达水平及其与乙肝标志物的相互关系。方法　用定性PCR法和定量PCR同步检测 144例乙肝患者血清HBV DNA ,同时用ELISA法检测血清乙肝标志物。结果　定性PCR与定量PCRHBV DNA总体阳性率相同 ,均为 78 47%(113/ 144 )。乙肝患者血清HBV DNA平均滴度 (每毫升拷贝数 )为 4 3× 10 3 ,其中急性肝炎、慢性肝炎轻度、慢性肝炎中度、慢性肝炎重度、肝炎后肝硬化者血清HBV DNA平均滴度分别为 2 7× 10 3 、6 7× 10 2 、2 5× 10 5、6 .9× 10 5、9 9×10 4 。相互比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。HBeAg( )、HBeAg(- )患者血清HBV DNA平均滴度分别为 3 1× 10 5、6 7× 10 2 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　HBeAg( )患者血清中HBV DNA水平高 ,定量PCR可更准确反映体内HBV增殖水平和传染性强弱     

慢性乙型肝炎患者血清e系统与HBV-DNA含量的关系及临床意义

[目的]探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA的表达水平与e系统的关系及其与肝细胞损害的关系.[方法]用实时荧光定量PCR方法检测乙肝患者血清HBV-DNA,同时用ELISA法检测血清乙肝标志物.[结果]HBeAg（＋）组与抗-HBe（＋）组HBV-DNA阳性率分别为100%、58.89%,两组HBV-DNA含量比较,差异无显著性（P＞0.05）;两组肝细胞损害指标ALT、AST、TBA比较,差异有显著性（P＜0.05）,HBV-DNA含量与肝细胞损害各指标均无相关性.[结论]HBV-DNA的定量检测可更准确地反映体内HBV增殖复制水平,HBV-DNA的含量与肝实质损害程度无关.     

前S1抗原和HBV-DNA与HBV血清标志物之间的相关性探讨

目的 探讨前S1抗原和HBV-DNA与HBV血清标志物之间的关系.方法 对1158例慢性乙型肝炎患者用酶联免疫吸附试验(EUSA)检测HBV血清标志物和PreS1,聚合酶链反应(PCR)方法检测HBV-DNA.结果 1158例慢性乙型肝炎患者中HBV-DNA总阳性率68.9%,PreS1总阳性率54.8%,有显著性差异(X2=53.24,P<0.005).HBV-DNA、PreS1在HBeAg( )组的阳性率均明显高于HBeAg(-)组(HBV-DNA:X2=226.24,P<0.005;PreS1:X2=49.64,P<0.005).PreS1和HBeAg与HBV-DNA的总符合率分别为56.9%和63.3%,PreS1的敏感性高于HBeAg,但特异性则相反.随着HBV-DNA拷贝数的升高,PreS1和HBeAg的阳性率亦随之升高,HBV-DNA含量低时PreS1的阳性率明显高于HBeAg.结论 联合检测HBV血清标志物、PreS1,并动态监测HBV-DNA的含量,在观察慢性乙肝患者HBV复制、疗效时具有重要的临床应用价值.PreS1可作为HBeAg阴性、无条件开展HBV-DNA检测时的补充指标.     

Preliminary research on the relationship between expression of HBV antigens and liver cell necrosis in the liver tissue of patients with chronic liver diseases

Summary The relationship between the patterns of expression of HBsAg and HBcAg and liver cell necrosis in liver tissue of 83 patients with chronic liver diseases has been studied. The results suggest that the membranous expression of HBsAg and HBcAg is associated with the activity of the liver diseases. Cytoplasmic-membranous HBcAg may be the main target antigen attacked by host immune system, thus leading to liver cell necrosis, but the possibility of the relation of membranous expression of HBsAg to liver cell necrosis can not be excluded. Various factors affecting the host immune function and the relationship between membranous expression of HBAg and liver cell necrosis were discussed in the present paper.