The expression of mTOR and p70S6K in hemangioma vascular endothelial cell in vitro

目的 观察mTOR、p70S6K在体外培养血管瘤血管内皮细胞中的表达,探讨其与血管瘤血管内皮细胞周期分布的关系.方法 用组织块法培养血管瘤内皮细胞,同步化培养血管瘤内皮细胞后,采用Western blot法检测血管瘤内皮细胞mTOR、p70S6K-α的表达水平,同期用流式细胞仪检测血管瘤血管内皮细胞周期的变化;并分析mTOR、p70S6K-α的表达水平与血管瘤血管内皮细胞周期分布的关系.结果 mTOR蛋白表达水平较高0.20±0.01,p70S6K-α蛋白表达水平较低时0.25±0.01,处于G0/G1期的细胞较少(55.95±4.38)％; mTOR蛋白表达水平下降至0.16±0.02,p70S6K-α蛋白表达水平升高至0.29±0.01,处于G0/G1期的细胞明显增多(77.86±8.18)％;二者比较差异有统计学意义(t=- 5.781,P＜0.01).结论 mTOR和p70S6K参与了体外培养的血管瘤血管内皮细胞细胞周期G0/G1阻滞.     

表皮生长因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的 了解表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与血管瘤及血管畸形的关系.方法 标本选自1998年3月至2005年10月经手术切除的先天性皮肤血管病变92例患儿,女52例,男40例,年龄为40 d至13岁,平均年龄为1.6岁.组织标本取出后立即浸入10%的中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,HE染色,同时采用含有正常血管的皮肤标本10例作为对照.采用免疫组织化学方法,对72例血管瘤和20例血管畸形组织切片进行EGF表达的测定.结果 EGF在血管瘤组织中高表达,而在血管畸形组织中低表达(P<0.01).在血管瘤增殖期、退化早期和退化完成期三者之间,EGF的表达存在着差异.在血管瘤中EGF的表达与其内皮细胞的增生程度有关.内皮细胞增生越强,EGF的表达越高(P<0.05).结论 提示EGF与血管瘤的增生及退化有关,而与血管畸形无明显关系.     

Maternal nicotine effects on vascular endothelial growth factor expression and morphometry in rat lungs

Aims

Maternal smoking during pregnancy may impair pulmonary function in infants, and the exact mechanisms underlying these changes are unknown. We evaluated the effects of maternal nicotine exposure on lung VEGF expression and morphometry during the postnatal period in rats.

Methods and results

Timed pregnant Sprague–Dawley rats were injected subcutaneously with nicotine at a dose of 2 mg/kg/day from Day 3 to Day 21 of gestation. A control group was injected with saline. Body weight, lung weight, and lung volume were comparable between control and nicotine-exposed rats. Plasma vascular endothelial growth factor (VEGF) levels and lung VEGF mRNA expression decreased with advancing age, and nicotine exposure insignificantly decreased plasma VEGF levels and lung VEGF mRNA expression, compared with the control rats during the study period. Nicotine exposure caused a significant decrease in vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR)-2 mRNA expression, compared with the level of the control rats on Postnatal Day 1. On Postnatal Day 1, nicotine-exposed rats exhibited a significantly lower volume fraction of alveolar airspace and alveolar surface area and a significantly higher alveolar wall volume fraction than did the control rats.

Conclusions

Maternal nicotine exposure during pregnancy decreases VEGF and VEGFR-2 mRNA expression and alters lung structure in the lungs of postnatal rats. Because angiogenesis is vital for alveolarization during normal lung development, these results suggest that decreased VEGF expression might be involved in the structural alterations of the developing lung after exposure to antenatal nicotine.     

血管内皮生长因子及其受体与肺发育的研究进展

肺发育受多种因素影响,其中血管内皮生长因子(VEGF)是一种特异作用于血管内皮细胞的生长因子,具有促进血管内皮细胞增殖分化、新生血管形成、增加微血管通透性的功能,并通过其受体介导参与肺血管发育、肺泡形成、表面活性物质合成和肺成熟等,在建立正常肺形态和功能上发挥重要作用,表达异常可致肺发育异常.     

用蛋白印迹技术初步评价肝母细胞瘤血管内皮生长因子表达的意义

目的通过观察小儿肝母细胞瘤（pedo-hepatoblastoma）组织中血管内皮生长因子C（vascular endothelial cell growth factor C，VEGF-C）及其受体Fh4（又称VEGF-R3）蛋白的表达，初步评价其生物学行为间的关系及检测的意义。方法用蛋白印迹技术检测26例小儿肝母细胞瘤、瘤旁肝组织及20例正常对照组织中蛋白的表达。结果19例肝母细胞瘤有明显的VEGF-C蛋白印迹（73．1％），7例瘤旁肝组织中有不同程度的VEGF-C蛋白印迹（26．9％）；21例肝母细胞瘤有明显的Fh4蛋白印迹（80．8％），6例瘤旁肝组织中有不同程度的Flt4蛋白印迹（23．1％）。20例正常对照组织中均不与VEGF-C和Fh4反应，而没有蛋白表达。结论VEGF-C和Fh4在肝母细胞瘤中呈高表达，可能在肝母细胞瘤分化、浸润及病理组织类型中起作用；其蛋白的检测可能有一定的临床意义。     

Intestinal microcirculation and necrotizing enterocolitis: The vascular endothelial growth factor system

Necrotizing enterocolitis (NEC), a leading cause of morbidity and mortality in preterm neonates, is a devastating disease characterized by intestinal tissue inflammation and necrosis. NEC pathogenesis is multifactorial but remains unclear. Translocation of bacteria and/or bacterial products across a weak intestinal barrier in the setting of impaired mucosal immunity leads to an exaggerated inflammatory response and secondary mucosal epithelial injury. In addition to prematurity, other risk factors for NEC include congenital heart disease, maternal pre-eclampsia with placental vascular insufficiency, severe anemia and blood transfusion – all conditions that predispose the intestine to ischemia. We recently found that maldevelopment of the intestinal microvasculature plays an important role in NEC pathogenesis. Here we review the evidence supporting a role for defective development of the intestinal mucosal microvasculature and perturbations of intestinal blood flow in NEC, emphasizing the importance of vascular endothelial growth factor (VEGF) and the VEGF receptor-2 signaling pathway.     

儿童急性白血病患者血清血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的 　探讨儿童急性白血病患者化疗前血清血管内皮生长因子 (VEGF)水平与急性白血病的发生及复发之间的关系。方法 　采用酶联免疫吸附法 (ELISA)对4 6例儿童急性白血病患者治疗前后及 33例健康体检者 (对照组 )进行VEGF测定。结果 　初发及复发的儿童急性白血病患者VEGF高于对照组水平 (P <0 0 0 1 ) ;完全缓解者和部分缓解者较治疗前明显降低 (P <0 0 0 1 ) ;AML的VEGF表达高于ALL(P<0 0 5)。结论　VEGF可作为儿童急性白血病的辅助诊断、疗效的评定及预后判断的有效指标。     

三氧化二砷对白血病细胞系K562和HL-60血管内皮生长因子表达的影响

目的研究三氧化二砷对白血病细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养白血病细胞株K562、HL-60,加入不同浓度的As2O3干预,用Westem bloting和荧光定量RT-PCR测定VEGF的蛋白和mRNA表达。结果K562和HL-60细胞经As2O3作用后,VEGF的蛋白表达明显减少,但VEGFmRNA拷贝数无差异。结论As2O3在蛋白水平抑制白血病细胞VEGF的表达,从而抑制骨髓血管生成,抑制白血病细胞的生长。     

肾母细胞瘤VEGF及其受体Flk-1的表达及其临床意义

目的 探讨肾母细胞瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk-1)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)的临床意义.方法 应用免疫组织化学(SABC)法检测33例肾母细胞瘤、瘤旁组织和6例正常肾组织中VEGF、Flk-1表达和MVD计数.观察并分析三个指标之间的相关性,同时分析其临床意义.结果 33例肿瘤组织VEGF阳性表达率81.8%,Flk-1阳性表达率69.7%,瘤旁组织VEGF阳性表达率9.1%,Flk-1阳性表达率6.1%,6例正常肾组织VEGF及Flk-1均为阴性表达,三者之问差异具有统计学意义.肿瘤组织MVD值29.7±12.4,瘤旁组织MVD值10.3±9.6,正常肾组织MVD值9.8±2.3.肿瘤组织的血管密度与后二者比较差异具有统计学意义.VEGF表达与Flk-1、MVD计数正相关,Flk-1与MVD表达正相关,VEGF、Flk-1表达在不同临床分期,及转归之问均具有显著性差异.结论 肾母细胞瘤中VEGF及其受体Flk-1呈高表达,血管生成增多,VEGF、Flk-1表达与MVD密切相关,提示VEGF及其受体Flk-1参与肾母细胞瘤的血管形成过程,促进血管生成,与预后相关.     

酪氨酸激酶受体B-脑源性神经营养因子信号传导通路对神经母细胞瘤细胞分泌血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶-9的影响

目的 探讨酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)-脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)信号传导通路对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞SH-SY5Y分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的影响.方法 用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导SH-SY5Y细胞表达TrkB,加入外源性BDNF,从而激活TrkB-BDNF信号传导通路及其3条下游信号通路.再用特异性酪氨酸激酶抑制剂K252a阻断TrkB-BDNF信号传导通路;用磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-hydrox y kinase,PBK)抑制剂LY294002、磷脂酶C抑制剂U73122、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂U0126分别阻断TrkB-BDNF的3条相应下游信号传导通路.采用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中VEGF及MMP-9含量.结果 ATRA+ BDNF组VEGF[(485.89±109.99) pg/ml]及MMP-9[(15.73±1.72) pg/ml]含量明显高于对照组及ATRA组(P ＜0.05);ATRA+ BDNF+ K252a组VEGF[(272.42±86.33) pg/ml]及MMP-9[(5.25±1.44) pg/ml]含量明显低于ATRA+ BDNF组(P＜0.05),与对照组及ATRA组比较差异无统计学意义(P＞0.05);ATRA+ BDNF+ LY294002组VEGF[(314.12±24.68) pg/ml]及MMP-9[(4.91±1.08) pg/ml]含量明显低于ATRA+ BDNF组(P＜0.05),与对照组及ATRA组比较差异无统计学意义(P ＞0.05);ATRA+ BDNF+ U73122组VEGF[(444.08±64.49) pg/ml]及MMP-9[(13.28±3.38) pg/ml]含量与ATRA+ BDNF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).ATRA+ BDNF+ U0126组VEGF[(429.97±19.95) pg/ml]及MMP-9[(13.96±4.45) pg/ml]含量与ATRA+ BDNF组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 激活TrkB-BDNF信号传导通路可促进NB细胞合成、分泌VEGF及MMP-9.TrkB-BDNF信号传导通路可能通过进一步激活其下游PI3 K/Akt通路来促进VEGF及MMP-9的合成及分泌,用K252a阻断TrkB-BDNF信号通路、LY294002阻断其下游PI3K通路均可有效抑制NB细胞合成及分泌VEGF及MMP-9.     

糖皮质激素受体在血管瘤和血管畸形中的表达及意义

目的：检测血管瘤和血管畸形组织中是否存在糖皮质激素受体，并探讨其在血管瘤和血管畸形中的意义。方法：手术切除25例血管瘤、18例血管畸形标本及12例正常皮下组织标本，用免疫组织化学方法检测其组织中糖皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67的表达，做图像分析测定，并对3项指标作相关性分析。结果：在血管瘤增生期，皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67均有较高表达；在血管瘤退化期、血管畸形和正常皮肤中，糖皮质激素受体、血管内皮生长因子、Ki-67表达极弱或无表达。并且糖皮质激素受体与血管内皮生长因子、Ki-67在血管瘤中的表达呈正相关。结论：糖皮质激素受体、血管内皮生长因子可能在血管瘤的病理发生过程发挥作用，外源性糖皮质激素与糖皮质激素受体结合，可能使血管内皮生长因子分泌减少，而促进血管瘤消退。而糖皮质激素受体、血管内皮生长因子在血管畸形的发生中则无明显作用。     

高浓度氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:研究持续吸入75%氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体（VEGFR1和VEGFR2）表达的影响,探讨较高浓度吸氧对肺血管发育的影响及与支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）的关系。方法:新生足月Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为对照组和实验组。实验组生后12 h开始持续吸入75%氧气。分别于实验开始后的7 d、14 d和21 d处死留取肺组织标本,苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF及其受体蛋白表达,RT-PCR检测其mRNA表达。结果实验组大鼠肺组织结构发生类似“新型”BPD的病理改变。75％氧暴露21 d时,VEGF（10.9±2.7 vs 30.8±6.4）、VEGFR1（5.4±1.4 vs 15.6±3.4）和VEGFR2（11.3±2.6 vs 21.7±4.5）的蛋白表达均较对照组减少（P<0.05）;VEGF（1.6 vs 3.3）、VEGFR1（0.4 vs 6.6）及VEGFR2（0.5 vs 4.9）的mRNA表达均较对照组减少（P<0.05）。结论:在新生大鼠中,长时间吸入较高浓度氧可能通过抑制肺血管发育导致BPD的发生。［中国当代儿科杂志,2009,11（11）：927-930］     

急性淋巴细胞白血病患儿血浆血管内皮生长因子及组织因子的测定及其临床意义

目的：检测血浆血管内皮细胞生长因子(VEGF)和组织因子(TF)在急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿中的含量变化并探讨其临床意义。方法：用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测33例ALL患儿血浆VEGF及TF在不同组别治疗前后含量的变化，并探讨两者之间的相关性及其临床意义。结果：与正常对照组相比, ALL初治患儿在治疗前血浆VEGF，TF含量明显增高, 两组差异有显著性(均P<0.01)。未缓解组患者化疗前血浆VEGF及TF的含量与缓解组化疗前和对照组相比明显升高，差异有显著性（P<0.05或P<0.01），未缓解组化疗后血浆VEGF和TF的含量无明显下降，与化疗前相比差异无显著性，但明显高于缓解组治疗后患者和对照组(均P<0.01)。血浆VEGF和TF在ALL患儿治疗前后低危、中危和高危组之间其差别具有显著性（均P<0.05)。高危组治疗后血浆VEGF和TF水平下降，与化疗前相比差异无显著性，但仍高于对照组(P<0.01)。ALL初治患儿治疗前血浆VEGF与TF含量的增加呈正相关(r=0.50, P<0.01)。结论：VEGF，TF可作为了解ALL病情、观察疗效和判断预后的指标之一。 ［中国当代儿科杂志，2007，9（6）：526-528］     

α-干扰素对血管瘤血管内皮细胞周期、凋亡的影响

目的 观察α-干扰素对体外培养血管瘤内皮细胞周期、凋亡的影响,探讨干扰素治疗血管瘤的机制.方法 用组织块法培养增生期血管瘤内皮细胞,分别用1×104U,1×105U,1×106Uα-干扰素干预,对照组不加任何药物,继续培养24h后,用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡变化.结果 α-干扰素作用24 h后血管瘤内皮细胞G1期前出现二倍体凋亡峰;1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组G1期百分率分别为(63.68±0.66)%、(72.97±1.56)%、(63.27±5.64)%,对照组为(58.75±0.32)%,与对照组比较,P＜0.05;1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组S期百分率分别为(32.99±2.01)%、(25.02±1.31)%、(37.93±5.31)%,对照组为(26.46±1.94)%,与对照组比较,P＞0.05;1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组G2/M期百分率分别为(0.01±0.05)%、(2.43±0.27)%、(3.99±1.27)%,其百分率随α-干扰素浓度升高而增高.细胞凋亡百分率随α-干扰素浓度增加而增高,1×104U、1×105U、1×106Uα-干扰素组凋亡百分率分别为(11.89±0.56)%、(18.88±3.04)%、(31.92±1.92)%,对照组凋亡率为(3.25±0.23)%,与对照组比较,P＜0.01.结论 α-干扰素能导致血管瘤血管内皮细胞G1、G2期阻滞和凋亡,细胞凋亡率与药物浓度存在剂量依赖关系.干扰素可能通过血管内皮细胞G1、G2期阻滞,抑制血管瘤血管内皮细胞的增殖、诱导血管内皮细胞凋亡而达到治疗血管瘤的作用.     

外源性血管内皮生长因子基因对新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑细胞凋亡的影响

目的 探讨外源性血管内皮生长因子(VEGF)基因对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)脑细胞凋亡的影响.方法 将36只7日龄新生大鼠随机分为对照组和治疗组,制备HIBD大鼠模型,经前囟分别注射空载质粒PCDNA 3.1和负载VEGF 120 cDNA的质粒PCDNA 3.1(100μg/只),应用流式细胞仪检测脑细胞的凋亡情况.结果 治疗组的脑细胞凋亡率为8.93±0.332,明显低于对照组的17.505±0.949,差异有非常显著性(P<0.01).结论 外源性VEGF可以减少脑细胞的凋亡,可能成为治疗HIBD的一条新途径.     

High-dose vascular endothelial growth factor increases surfactant protein gene expressions in preterm rat lung

AIMS: To investigate the effects of intra-amniotic vascular endothelial growth factor (VEGF) treatment on surfactant pool sizes and surfactant protein (SP) gene expressions in fetal rat lung. METHOD: On the 18th day of gestation, an abdominal midline incision was performed on timed pregnant Sprague-Dawley rats and the two uterine horns were exposed. VEGF (2.5 microg or 5.0 microg) and saline were injected into the amniotic cavity of the left and right uterine horns, respectively. On the 19th day of gestation, fetuses were delivered by caesarean section. RESULTS: We analyzed the data between the fetuses within the same dam in each group. Mean fetal body weight and lung tissue saturated phosphatidylcholine and total phospholipids were comparable between control and VEGF-treated rats at each VEGF dosage. Lung SP mRNA expressions were comparable between control and VEGF 2.5 microg-treated rats. VEGF 5.0 microg treatment increased lung SP mRNA expressions and the values were statistically significant for SP-B and SP-D mRNAs when compared with the control rats. CONCLUSIONS: These results suggest that VEGF might have potential therapeutic implications in enhancing fetal lung maturation.     

血管内皮生长因子及其受体在儿童急性白血病中的表达以及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(vas-cular endothelial growth factor,VEGF)在儿童急性白血病骨髓中的表达,以及化疗前后的变化。方法53例儿童急性白血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukem ia,ALL)33例,急性髓系细胞白血病(acute myeloid leukem ia,AML)20例,对照组21例为骨髓象正常的非恶性血液病患儿。采用免疫组化方法检测53例急性白血病患儿治疗前后以及对照组骨髓中VEGF/VEGFR(包括Flt-1和KDR两种)的表达。结果VEGR、Flt-1、KDR在急性白血病患儿骨髓中表达水平高于对照组,在AML组中的表达高于ALL组。化疗后获得完全缓解(CR)的40例患儿,其VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后差异有显著性(P<0.05);化疗后未获得CR患儿VEGF、Flt-1、KDR的表达在化疗前后无显著性(P>0.05)。同时VEGF、KDR在儿童ALL中化疗后有明显的降低,但Flt-1无明显改变;VEGF、Flt-1、KDR在儿童AML中化疗后均有明显的降低。结论①VEGF、Flt-1、KDR在儿童急性白血病中表达增高。提示VEGF、Flt-1、KDR在儿童急性白血病的发生过程中起着重要作用。②VEGF、Flt-1、KDR在儿童AML中表达比ALL高。VEGF可以作为评价儿童急性白血病化疗反应的指标,同时说明ALL与AML可能具有不同的血管新生机制。     

血管内皮生长因子及胰岛素样生长因子-1在早产儿视网膜病变中的作用

早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)多发生于早产儿尤其是极低出生体重儿,是导致儿童视力下降甚至失明的重要原因.视网膜新生血管形成是其主要的病理特点,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)通过控制血管内皮细胞增殖,在新生血管形成中起到了关键作用.近年来临床研究表明,玻璃体内注射VEGF抑制剂及生后早期提高早产儿血清IGF-1水平是防治ROP的有效方法.该文以国内外相关研究为背景,综述VEGF及IGF-1在早产儿视网膜病变发病过程中的作用,以及针对其作用机制而采取的防治方法.     

血管内皮生长因子及其受体在急性白血病儿童骨髓和血浆中的表达

目的　血管内皮生长因子(VEGF)与实体瘤的发生、发展和预后相关,但其与儿童急性白血病的 关系尚不明确。本实验通过检测VEGF及其受体fms样酪氨酸激酶受体(Flt 1)及含激酶插入区受体(KDR)在儿 童急性白血病的表达情况,分析它们与儿童急性白血病的发生与预后的关系,为进一步研究抗白血病治疗新靶点 提供思路。方法　采用RT PCR法检测21例初发和复发、20例缓解后白血病患儿和5例健康儿童骨髓单个核细 胞VEGF、Flt 1、KDRmRNA的表达。使用酶联免疫吸附法检测上述患儿及20例正常儿童外周血VEGF蛋白浓度。 结果　健康儿童骨髓单个核细胞均未检测到VEGF及其受体Flt 1,KDR的表达。90%(19/21)初发/复发白血病 患儿骨髓单个核细胞表达VEGF,86%(18/21)表达Flt 1,30%(6/20)缓解后白血病患儿骨髓单个核细胞表达 VEGF,15%(3/20)表达Flt 1,两组差异有显著性(均P<0.001)。初发/复发组VEGF和Flt 1阳性率与正常组 [0%(0/5);0%(0/5)]比较差异有显著性(均P<0.001),而缓解组与正常组比较差异无显著性。两组白血病患 儿未检测到KDR表达。初发/复发组血浆VEGF浓度为405±270pg/mL,高于缓解组(136±98pg/mL,P<0.01) 和正常组(91±41pg/mL,P<0.01)。缓解组与正常组比较差异无显著性。结论　白血病患儿表达VEG