姬松茸菌丝体多糖体外抗肿瘤活性的研究及结构初探

姬松茸(Agaricus blazei Murill,ABM),又名巴西蘑菇,是近年来在日本、美国和我国各地区掀起栽培热潮的一种重要的药食兼用菌种[1]。近些年来,姬松茸作为抗癌剂、免疫调节剂、抗突变剂和抗菌物质引起了人们的极大关注。国内外学者已经证明姬松茸中丰富的多糖是发挥抗肿瘤作用的最主要的成分之一[2~4]。深层发酵获得的菌丝体多糖的生理活性接近于子实体多糖[2,3],并且由于深层发酵具有生产工艺简便、培养材料易得、生产成本低、易于实现工业化等优点,从而成为开发姬松茸活性多糖的一种有效手段。对于姬松茸多糖发挥抗肿瘤作用的机制,目前尚…     

低分子量姬松茸多糖提取分离及抗肿瘤活性筛选的研究

姬松茸(agaricus blazei murill,ABM)是一种药食兼用的真菌,其抗癌作用被认为居抗癌真菌之首[1-3]。多糖是发挥抗肿瘤作用的主要活性成分,目前,对姬松茸粗多糖研究较多,对分子量在10万以下的多糖研究很少。笔者认为,低分子量多糖也含有活性集团,应该具有药理活性,具有深入研究价值。本实验对姬松茸粗多糖进行分离纯化,得到4种低分子量多糖,通过脾淋巴细胞增殖实验和对肿瘤细胞抑制实验,筛选出抗肿瘤活性高的多糖ABMⅡ。材料1·取材姬松茸粗提物,购于浙江庆元博瑞药业有限公司(多糖含量为46·7%)。2·仪器和药品、试剂UV-2550型紫外分光…     

姬松茸多糖的分离纯化及其初步鉴定

目的：从姬松茸中分离纯化多糖并对其进行初步鉴定。方法：将姬松茸粗多糖配成均匀的5％糖溶液反复冻融离心,Sevage法除蛋白,H2O2脱色,DEAE-纤维素和Sepharose CL-4B凝胶柱色谱,酚-硫酸法检测糖峰的存在。采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝G-250法对多糖和蛋白质含量进行测定。结果：从姬松茸粗多糖分离得到AB-Ⅰ、AB—Ⅱ-b和AB-Ⅲ-b3个组分,分别为淡黄色、黄色、褐色粉末,经鉴定后均为单一分子量组分,总糖含量分别为91．8％,90．4％,89．2％,蛋白质含量分别为7．1％,8．8％,9．3％。结论：有效分离纯化出姬松茸多糖单一组分,这为姬松茸多糖的应用奠定了一定的实验基础。     

姬松茸多糖对大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的:观察姬松茸多糖对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱发大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响.方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常组,模型组,姬松茸多糖低、高剂量组,每组10只.正常组和模型组灌胃(ig)生理盐水,姬 松茸多糖低、高剂量组ig姬松茸多糖溶液(60,120 mg·kg-1),1次/d,连续7d.模型组和姬松茸多糖低、高剂量于第7日腹腔注射DEX(0.02 g·kg-1).3h后处死各组动物,迅速无菌取胸腺,采用显微观察、流式细胞技术观察胸腺细胞形态学改变,胸腺细胞凋亡、脱氧核糖核酸(DNA)断裂百分率及线粒体膜电位变化,胸腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化.结果:与模型组比较,姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体嵴肿胀明显减轻;姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞凋亡率[低、高剂量(5.96±1.14)％,(5.07±1.02)％],DNA断裂率[低、高剂量(3.67±0.49)％,(3.24±0.45)％]及胸腺组织MDA含量[低、高剂量(1.87±0.25),(1.72±0.23)μg·mg-1]均明显低于模型组[(7.14±1.62)％,(4.25±0.86)％,(2.16±0.38) μg·mg-1];姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体膜电位(荧光指数:低剂量38.57±6.29,高剂量41.36±7.18)及胸腺组织SOD活性量[低、高剂量(25.78±3.94),(27.36 ±4.21)U.mg-1]明显高于模型组(32.76 ±5.48)荧光指数,(21.45±3.52) i g· mg-1.结论:姬松茸多糖可阻断胸腺细胞DNA断裂和线粒体膜电位的下降,有效抑制DEX诱导的胸腺细胞凋亡,其作用机制与姬松茸多糖提高胸腺组织抗氧化功能有关.     

姬松茸多糖抗肿瘤作用研究

目的:研究姬松茸多糖(ABP)对肝癌细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT法检测ABP体外与肝癌细胞Bel-7402作用48小时的直接细胞毒作用、ABP与小鼠脾细胞共培养上清(ABP-SL-CM)体外与Bel-7402细胞作用48小时的抑制作用;用流式细胞仪分析诱导肿瘤细胞凋亡情况;腹腔注射给药观察对移植性H22小鼠腹水型肝癌模型的抑瘤率。结果:ABP体外无直接细胞毒作用;不同浓度的ABP-SL-CM体外对Bel-7402细胞生长均有抑制作用,其中低剂量组(ABP-SL-CM-L)作用最显著,抑制率为39.65%;诱导Bel-7402细胞凋亡率为21.68%,DNA直方图上可见到亚二倍体峰;体内实验对肿瘤的生长的抑瘤率为45.83%。结论:姬松茸多糖对肝癌细胞生长有一定的抑制作用,其作用机制不是直接的细胞毒作用,而是通过增强小鼠的细胞免疫功能诱导肿瘤细胞凋亡实现的。     

膜法分级纯化姬松茸子实体多糖的研究

目的通过微滤和超滤对姬松茸子实体粗多糖分级纯化,获得最佳试验操作条件,考察各级相对分子质量范围内的多糖分布情况及所得制品的纯度。方法使用微滤和不同截留相对分子质量的超滤串联工艺。结果试验按相对分子质量将其分成>3×105、3×105~8×104,8×104~1×104以及<1×1044个级别,所得多糖质量分布比例约为5∶1∶3∶1。试验确定操作条件为室温,操作压力0.08~0.1MPa,微滤和各级超滤分别将各级多糖最高浓缩至45、35和25g/L。在低温下干燥制备的姬松茸多糖制品,质量分数高于70%,多糖总回收率高达83.7%。结论该工艺简单可行,姬松茸子实体多糖相对分子质量主要分布于>3×105和8×104~1×105。     

梁金菇多糖对脐血单个核细胞增殖活化的研究

姬松茸Agaricus blazei系菌类植物的地上菌丝体,属于担子菌纲,原产于巴西,又名梁金菇。日本的姬松茸多糖具有抗肿瘤、抗突变、促进免疫、促进造血,保护肝脏[1]等功能。为了进一步探讨移植国内后的梁金菇多糖对造血功能的影响,本实验采用从脐带采集的脐血,其中含有丰富的干细胞和祖细胞,研究了梁金菇多糖对脐血单个核细胞的增殖活化作用。1材料1·1药物制备梁金菇(LJPS)由福州华胜食品有限公司提供,经中国科学院植物研究所梁峥研....     

姬松茸多糖与OVA共同免疫改善E.G7-OVA荷瘤小鼠免疫功能的研究

目的通过小鼠体内免疫的方法,观察姬松茸多糖与模型肿瘤抗原卵清白蛋白(OVA)共同免疫对E.G7-OVA荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法姬松茸多糖(高、中、低剂量)与OVA共同免疫E.G7-OVA荷瘤小鼠,观察其对EG7荷瘤小鼠脾指数、胸腺指数以及小鼠外周血中T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+比例的影响。结果姬松茸多糖(高、中剂量)与OVA共同免疫组小鼠的脾指数、胸腺指数明显大于单独使用OVA组,外周血中CD4+/CD8+T细胞比值也有明显升高。结论姬松茸多糖能够辅助OVA改善EG7-OVA荷瘤小鼠的免疫功能状态,姬松茸多糖可能作为免疫佐剂用于肿瘤的预防与治疗。     

地龙蛋白和姬松茸多糖的药理研究

现代研究表明中药地龙除具有定惊、清热、通络、平喘、利尿的传统功效外,其主要有效成分地龙蛋白还具有抗血栓、溶栓和改善血液循环、抗肿瘤、调节免疫、抗辐射、降压、抗心律失常及镇痛消炎等多种现代药理作用;姬松茸多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗突变、抗辐射,提高免疫力等主要药理活性。二者都能增强机体免疫功能,对辐射引起的细胞损伤,免疫力低下等不良反应,具有改善作用。     

富硒姬松茸提取物硒蛋白多糖对荷瘤小鼠的影响

目的:提取及分析富硒姬松茸硒蛋白多糖活性成分,初步探讨富硒姬松茸硒蛋白多糖的抗肿瘤作用。方法:分别应用Lowry-酚试剂法、用苯酚-硫酸法和2,3-二氨基萘荧光分光比色法测定蛋白质、多糖及硒含量。建立荷瘤小鼠模型,观察富硒姬松茸硒蛋白多糖的体内抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果:富硒姬松茸硒蛋白多糖能明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,并显著提高荷瘤小鼠NK细胞活性、淋巴细胞转化率。其活性成分蛋白质、多糖及硒含量分别为16.32%、81.2%、7.01 mg/g。结论:富硒姬松茸提取物硒蛋白多糖具有良好的抗肿瘤生长作用。     

姬松茸多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤作用的影响

目的:研究姬松茸多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤功能的影响,为临床应用提供理论依据。方法:体外培养小鼠骨髓来源DC,加入ABP溶液,流式细胞仪检测DC表面CD86和CD11a的表达,混合淋巴细胞反应检测ABP对DC抗原提呈能力的影响,MTT法检测ABP对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对H22肝癌细胞杀伤功能的影响。结果:中剂量ABP组(100μg/mL)DC表面CD86、CD11a表达上调;CTL对肿瘤细胞的杀伤率升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:适当浓度的ABP能促进DC分化成熟,增强DC的抗肿瘤作用。     

蒙成药高尤-13中多糖的研究

多糖几乎存在于所有生物体中 ,具有能量储存、防御功能、抗肿瘤作用、免疫促进活性等多方面的生物功能 ,所以近年来多糖成为天然药物研究的热点 [1 ,2 ]。高尤 -1 3为丸剂 (水丸 ) ,由槟榔、肉豆蔻、沉香、当归、木香、草乌 (制 )、筚拨、紫硇砂、葶苈子、丁香、广枣、干姜、胡椒等组成 ,调节“赫依”,安神止痛 ,用于心悸 ,失眠 ,精神失常 ,游走刺痛等症 [3]。本实验在研究广枣多糖组分 [4 ] 的基础上 ,研究了高尤 -1 3水溶性多糖组成和含量。关于高尤 -1 3化学组分的研究尚未见报道。1　仪器及药品HP5 890气相色谱仪 ,72 1型分光光度计 (…     

不同品种、产地淫羊藿多糖的含量测定

[目的]测定不同品种不同产地淫羊藿多糖的含量。[方法]采用苯酚-硫酸法。[结果]不同品种淫羊藿多糖含量结果相差较大，其中朝鲜淫羊藿含多糖量稍高。[结论]淫羊藿不同品种产地多糖的含量相差不大。     

五味子多糖的分离、纯化及结构表征

[目的]通过对五味子多糖的分离纯化、结构表征,以期为五味子的进一步开发利用提供科学研究数据.[方法]采用水提醇沉法得五味子粗多糖,通过分级醇沉及葡聚糖凝胶G-150进一步分离纯化得五味子多糖组分.采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,高效分子排阻色谱联用多角度激光光散射检测器和示差检测器(HPSEC-MALLS-RID)的方...     

桑叶多糖的降糖降脂作用

[目的]研究桑叶多糖的降糖降脂作用。[方法]将桑叶水溶部分多糖分离提纯，对2型糖尿病大鼠模型进行降血糖和抑制作用实验。[结果]桑叶多糖具有降低血糖和抑制血脂升高的作用。[结论]桑叶多糖治疗2型糖尿病具有多项调节作用。     

姬松茸多糖对HT-29细胞与内皮细胞侵袭、 黏附的影响和作用

目的:探讨低分子量姬松茸多糖(LMPAB)对肿瘤细胞与内皮细胞侵袭和黏附的影响和作用。方法:不同剂量的LMPAB(5,10,20 mg.L-1)分别作用于人结肠癌细胞(HT-29)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)48 h,采用MTT法检测LMPAB对HT-29和HUVECs增殖的影响、采用分光光度法检测LMPAB对HT-29细胞与HUVECs黏附的影响、采用Transwell双层小室观察LPMPAB对HT-29迁移穿过单层HUVECs的影响。结果:不同剂量LMPAB(5,10,20 mg.L-1)对HT-29和HUVECs增殖无显著性作用;使HT-29黏附于单层HUVECs的数量得到了明显的抑制,抑制率分别为26.96%,23.60%,27.66%;对HT-29迁移穿过HUVECs也具有抑制作用,抑制率分别为23.96%,23.59%,41.36%。结论:低分子量姬松茸多糖通过抑制HT-29肿瘤细胞与内皮细胞的黏附以及肿瘤细胞迁移穿过内皮细胞而发挥其抗肿瘤转移作用。     

蒙药哈斯-哈图古日水溶性多糖的组分研究

文献记载哈斯-哈图古日主要用于气滞血瘀,胸痹作痛,咽喉肿疼等疾病[1].多糖几乎存在于所有生物体中,具有能量储存、防御功能、抗肿瘤作用、免疫促进活性等多方面的生物功能,所以近年多糖成为天然药物研究的热点[2,3].本文在研究广枣多糖组分[4]的基础上,研究了哈斯-哈图古日的水溶性多糖组成和含量,为研究天然药物活性,开发研制蒙药新制剂,更好地发挥其药效提供理论依据.     

芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响

[目的]考察芦笋多糖对S180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响。[方法]芦笋多糖对S180小鼠腹腔注射给药7d,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定小鼠红细胞膜带3蛋白及血型糖蛋白A的相对含量,采用试剂盒测定红细胞膜磷脂、胆固醇和唾液酸含量,荧光偏振法结合探针1,6-二苯-1、3、5己三烯测定红细胞膜流动性。[结果]芦笋多糖能增加S180小鼠红细胞膜表面带3蛋白、血型糖蛋白A的含量;升高S180小鼠红细胞膜磷脂含量,降低胆固醇含量;增加S180小鼠红细胞膜表面唾液酸含量;提高S180小鼠红细胞膜流动性。[结论]芦笋多糖可以改善S180小鼠红细胞膜组分的异常变化,从而保持细胞膜的流动性,恢复红细胞的结构和功能。     

响应面法优化零陵香水溶性多糖组分提取工艺及其抗炎作用的研究

[目的]优化零陵香水溶性组分中多糖的最佳提取工艺,研究其抗炎效果。[方法]应用Design Expert软件响应面法(RSM)对零陵香多糖的提取工艺进行优化,以最佳提取工艺提取零陵香多糖,并进行抗炎实验。[结果]零陵香多糖浸提的最佳工艺条件为:温度98℃,时间20 min,液料比30 mL/g,实际最大提取率为1.28%,与预期的1.34%拟合度较高。零陵香多糖在0.75~3.00 g/kg(生药)浓度范围具有抗炎能力。[结论]响应面法可应用于零陵香多糖提取的工艺优化;其抗炎效果与剂量成呈正相关性。     

中药多糖与肠道菌群相互作用研究进展

多糖又称多聚糖,是中药重要成分,也是中药的有效成分[1],随着深入研究,已有300多种多糖被提取出来。研究发现中药多糖具有降血脂、降糖、抗肿瘤、增强免疫功能等作用[2]。肠道菌群与众多疾病的发生发展密切相关[3],同时疾病的发生也常引起肠道菌群的紊乱。肠道菌群的组成受不同疾病及环境因素的影响,同时又反过来通过调节机体的免疫系统[4]、产生的代谢产物[5]等影响着疾病的发生与发展。