肝癌大鼠各组织中的鞘糖脂图谱

作者应用微量法(Ladish法)对正常及肝癌大鼠肝、心、肺、肾、脾等组织的鞘糖脂图谱及脂结合唾液酸含量进行比较分析。肝癌大鼠上述各组织中,脂结合唾液酸含量大幅升高,单唾液神经节苷脂减少(GM_8减少,GM_2与GM_1稍有增多),而多唾液酸神经节苷脂(GD_8,GD_(1a))相对增多;中性鞘糖脂也有明显变化。研究结果表明,大鼠肝细胞癌变伴有肝外其他组织中鞘糖脂代谢的改变。     

人胃癌、乳腺癌组织中神经节苷脂的提纯及其薄层层析图谱的分析

本文比较分析了人胃癌和乳腺癌与对照组织中神经节苷脂(GLS)结合型唾液酸含量和GLS高效硅胶薄层层析图谱的差别。胃癌及乳腺癌组织中GLS结合型唾液酸含量较对照组织明显升高,分别为对照组织的1.4倍和2.8倍。胃癌组织的主要GLS组分与对照组相比虽无明显改变,但在移动距离相当于GD_(1a)—Gal NAc处出现一条小带,含量仅约4.7%,而在对照组织的GLS图谱中未见此带。乳腺癌组织的GLS图谱中,位于GD_3和GD_(1a)之间的一条带较对照明显增多,由3.7%增加到13.6%,实际含量增加9.7倍。同时,在GM_3和GM_2之间出现一条对照组织中没有的带,含量甚微,仅约为1.98%。     

组织神经节苷脂的简易快速薄层分离纯化法

组织神经节苷脂(Gls)传统的分析方法,是用薄层层析,在分析之前要先进行操作步骤繁杂的分离纯化。Harth等于1978年报告用组织粗提液直接点样于层析薄板,再以三种不同的溶剂系统展开的方法,得清晰的薄板层析图谱。它们的展开剂为:1.氯仿;2.氯仿-甲醇-水(70:30:4,V/V/V);3.氯仿-甲醇-0.25%KCl(60:35:8,V/V/V)。此法简便,但未能推广采用。根据我们的经验它未能推广的原因是粗提液颜色较深,对唾液酸测定干扰甚大,薄板上的点样量较难掌握。我们用硅胶G层析薄板(5×20厘米),将组织的氯仿-甲醇粗提液直接点样于其上,以Harth的前两种展开剂展开后,用问苯二酚显色,参考定位,刮下含Gls部分硅胶,经洗脱、离心、氮气吹干后,溶于C:M(1:1),以唾液酸含量为参数,点样于高效层析(HPTLC)薄板上,在氯仿-甲醇-0.15%CaCl_2(60:40:9,V/V/V)展开,可得良好的图谱。这一改良可去掉呈色物质,大大减少HPTLC板的用量,降低了成本,同时本法未经Folch分配,有可能获得比传统方法更为真实的结果。     

防风薄层层析研究

防风具有散风解表,胜湿止痛,祛风止痉之功。为外感表证,头痛身痛,风寒湿痹,肢节疼痛与外风引起的痉挛抽搐之常用中药(《实用中药学》,周凤梧主编)。含防风的中成药很多,但关于防风的可靠鉴别方法未见报道,为了鉴别其药材及提高中成药质量,作者对其进行了薄层研究。一、实验材料三用紫外分析仪上海顾村电光仪器厂生产防风经鉴定为伞形科植物防风Saposhnikovia divaricata(Turcz.)Schischk.的根和川防风Ligustium brachylobum Franch.的根。二、方法与结果 1.样品液的制备取两种防风粗粉各1克,各加95％乙醇20ml浸渍3小时,不断振     

胶束薄层层析法分离生物碱

目的：用胶束水溶液分离生物碱。方法：薄层层析。结果：将０００１ｍｏｌ·Ｌ－１ＣＴＡＢ与００５ｍｏｌ·Ｌ－１ＳＤＳ水溶液等体积混合，加入３％（Ｖ／Ｖ）乙醇改性剂。结论：胶束薄层层析法可分离生物碱，且分离效果较好。     

人正常生育期子宫肌肉的鞘糖脂组成

从正常生育期人子宫肌肉组织分离、纯化了神经节苷脂(Gls)和中性鞘糖脂(N-GSL),测定了两类鞘糖脂的含量、对其组分进行 HPTLC 谱分析,并通过酶水解法对 Gls 主要成份作了鉴定。结果表明子宫肌肉组织的 Gls中 GD_3含量高达56. 6%,其次为 GM_3占16. 9%,GT_(1b)占9. 8%。此外,还有少量 GM_1、 GD_(1a)、与 GD_(1b)。N-GSL 主要组分为 CTH 和 CQH,各为30. 5%与35. 4%,次为 CDH 占16. 8%,CMH 与含多糖基(≥5个糖基)的组分各<10%。本样品每100克湿重神经节苷脂含量约3. 48mg(以唾液酸表示),N-GSL 为3. 71mg(以鞘氨醇表示)。     

胶束薄层层析法分离单糖

目的：用胶束水溶液分离单糖，探讨pH值、CTAB、SDS水溶液浓度对分离的影响。方法：胶束薄层层析。结果：CTAB溶液浓度在0．004mol·L－1至0．006mol·L－1，SDS溶液浓度在0．08mol·L－1至0．10mol·L－1范围内，分离效果好。pH值可改变单糖的Rf值。。结论：胶束薄层层析法可做为单糖分离方法。     

胶束薄层层析法分离苦参散

目的：研究苦参散主要成份的分离鉴定，为该药建立企业质量标准提供实验依据。方法：胶束薄层层析。结果：ＣＴＡＢ、ＳＤＳ胶束水溶液浓度分别为０．００６ｍｏｌ·Ｌ￣（－１０）．０４ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）时，甘草的Ｒｆ值为０．５０，０．５２；黄芩的Ｒｆ值为０．７２，０．６９；苦参的Ｒｆ值为０．３０，０．３７。分离效果最好。结论：胶束薄层层析法，可做为苦参散中各主要成份含量的分离方法。     

血小板激活因子薄层层析分离和生物法测定的应用体会

目的：介绍作者应用薄层层析分离和生物活测定法测定血小板激活因子的体会,重点讨论分离和测定过程中可能出现的问题及注意事项。方法和结果：采用上述方法测定猪急性重症胰腺炎时门静脉血标本,结果显示,血小板激活因子的浓度较对照组明显升高,结论：薄层层析分离和生物测定的方法适用于血小板激活因子的检测,只要在检测过程中注意操作的合理性与规范性,检测结果就可满意。     

羊心房钠尿因子的提取与部分纯化和生物学活性

本文报道了羊心房钠尿因子的提取、部分纯化过程和生物学活性。结果表明:羊心房粗提物经超滤,Sephadex G-15、Sephadex G-75凝胶柱层析分离得到的部分纯化的羊心房提取物有较高的利尿钠尿活性。给麻醉大鼠静脉注射小剂量(350μg蛋白/Kg体重)部分纯化的羊心房提取物后,尿量,尿钠、尿钾分别增加2.17倍,4.95倍和0.81倍。这种利尿和钠尿效应与剂量有明显的依赖关系。     

蝮蛇毒磷酸二酯酶抗原的制备及性质

为研究蛇类毒腺细胞分化过程中磷酸二酯酶的作用,需制备特异性和敏感性较高的该酶单克隆抗体用于免疫组化研究.本文所介绍为浙江蝮蛇蛇毒中磷酸二酯酶抗原的提取纯化过程,为制备单克隆抗体提供条件.作者采用离子交换技术和分子筛过滤法相结合的方法提取抗原,具有步骤少、分离效率高的特点.所得抗原经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳呈单一条带,测定分子量为20900.     

猪脑钙调素的分离、纯化及鉴定

作者用苯-琼脂糖(Phenyl-Sepharose)亲和层析等方法从猪大脑组织中分离纯化出钙调素。经鉴定,PAGE板电泳呈现一条带;产率:4.2mg/100g大脑;分子量,经SDS-PAGE测定为14.1±1.0kd(含1mmol/L CaCl_2)和164.9±1.2kd(含1mmol/L EGTA),pI=4.35;对猪脑依赖钙调素磷酸二酯酶激活6.5倍,其激活作用被三氟拉嗪抑制。     

猪卵透明带的分离和提纯

用机械方法绞碎猪卵巢,经不同孔径尼龙筛过滤及热溶解等方法取得的去卵母细胞透明带,用双向-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称2D-PAGE)后,不论用考马斯蓝染色或银染色,均得两条分子量分别为74000～102000和98000～118000的条带,称为ZP_1和ZP_2。 将去卵母细胞的透明带用葡聚糖凝胶(Sephadex)G-100柱层析分离,得到A和B两个吸收峰,用2D-PAGE分析,证实A峰内仍含有ZP_1及ZP_2抗原,而B峰内为一些其他蛋白的染色点,提示Sephadex柱层析可进一步纯化透明带抗原。     

人胎盘催乳素的纯化与鉴定

以正常产妇的新鲜胎盘为原料，经过盐析、等电点沉淀、离心等粗提，再经ＤＥＡＥ─纤维素阴离子交换层析，Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００凝胶过滤，并首次利用圆盘制备电泳纯化。最后获得人胎盘催乳素纯品，其活性采用１２５Ｉ－ｈＰＬ放免检测药盒测定。     

人血浆低分子量激肽原的分离与纯化

血浆低分子量激肽原是舒缓激肽前体之一。本文报道应用四柱层析纯化法,分离两种高纯化低分子量激肽原。纯化的低分子量激肽原Ⅰ的分子量为50000,低分子量激肽原Ⅱ分子量为55000。并测定其等电点分别为4.7与4.6。     

大鼠血清ApoA-I、LDL的分离和纯化

用沉淀法分离大鼠血清高密度脂蛋白(HDL),SephadexG—200层析纯化;将脱脂的HDL(ApoHDL)通过SephadexG—200柱层析得到单一的载脂蛋白A-I(ApoA-1)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)测定该ApoA-Ⅰ的表观分子量为27000道尔顿,其免疫学特征及化学组成分析结果与文献报道一致。同时用超速离心法分离制备出纯化的大鼠血清低密度脂蛋白(LDL)。     

人类胎盘碱性磷酸酶的分离纯化

①目的分离纯化人类胎盘碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）。②方法应用正丁醇抽提、丙酮沉淀、热处理、ＤＥＡＥ－纤维素和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析，从人类胎盘中提纯ＰＬＡＰ；聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和高压液相层析（ＨＰＬＣ）鉴定其纯度；十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳测其亚基分子量。③结果ＰＬＡＰ的纯化倍数为１６１倍，比活力为１３８ｍｍｏｌ·ｓ－１／ｇ；纯化的ＰＬＡＰ经ＰＡＧＥ鉴定为单一区带，ＨＰＬＣ分析为单一对称峰；测得酶的亚基分子量为６４．６９ｋｕ．④结论纯化的ＰＬＡＰ已达电泳纯和层析纯，可用于其结构与功能的研究