蓝莓对肝纤维化大鼠肝组织自噬相关蛋白LC3和Beclin1表达的影响

目的:观察蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠肝组织微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)及Beclin1表达的影响.方法:60只健康♂SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、蓝莓原浆高剂量组、蓝莓原浆中剂量组、蓝莓原浆低剂量组及复方鳖甲软肝片组.除正常对照组外,其余各组均采用腹腔注射无菌猪血清复制大鼠肝纤维化模型.造模同时各蓝莓组给予不同浓度蓝莓原浆(0.25 m L/100 g、0.5 m L/100 g、1.0 m L/100 g)灌胃,复方鳖甲软肝片组用复方鳖甲软肝片灌胃(0.054 g/100 g),1次/d.12wk处死大鼠,测定血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)含量,行肝组织病理学检查;Western blot检测LC3-Ⅱ、Beclin1、Ⅰ型胶原(ColⅠ)的蛋白水平;实时定量PCR(realtime quantitative PCR,q RT-PCR)检测LC3-Ⅱ、Beclin1的m RNA水平.结果:各组大鼠血清ALT、AST水平差异无统计学意义(均P0.05).与正常对照组比较,模型组肝纤维化程度明显(P0.05),LC3-Ⅱ、Beclin1的m RNA及蛋白表达、ColⅠ的蛋白表达明显增高(均P0.01).与模型组比较,蓝莓原浆高、中剂量组肝纤维化程度明显减轻(P0.05),胶原表达减少;LC3-Ⅱ、Beclin1的m RNA、蛋白表达及ColⅠ的蛋白表达明显降低(均P0.01).结论:猪血清所致的大鼠免疫性肝纤维化中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1升高,蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化的干预作用可能与下调LC3和Beclin1的基因及蛋白表达,进而抑制自噬有关.     

肝复康对大鼠肝组织血小板衍生生长因子表达及对胶原合成的影响

目的探讨中药肝复康对大鼠肝组织血小板衍生生长因子(PDGF)表达的影响及其对胶原合成的调节作用。方法制备四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型,应用肝复康干预;测定各组大鼠血清白蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量;采用免疫组织化学法检测肝组织PDGF表达;采用RT-PCR法测定肝组织及HSC-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA水平的变化。结果治疗组与模型组相比,血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶和球蛋白水平均降低,白蛋白及白/球比例则升高(P<0.01);模型组肝组织PDGF的表达上调,而肝复康治疗组表达则下调(P<0.01);模型组肝组织及HSC-T6细胞Ⅰ型胶原mRNA水平较正常对照组明显上调(P<0.01),而肝复康治疗组则明显下调(P<0.01)。结论肝复康通过降低PDGF的表达,抑制Ⅰ型胶原的合成,对肝纤维化具有一定的防治作用。     

不同浓度罗英化浊解毒方对胃癌大鼠病理改变、细胞凋亡及RegⅠ蛋白的影响

目的 研究不同浓度罗英化浊解毒方对胃癌大鼠病理改变、细胞凋亡及RegⅠ蛋白的影响。方法 选取健康ACL雄性大鼠80只，分为正常组、模型组、低剂量组(20.0 mg/kg)、高剂量组(40.0 mg/kg)、对照组(0.6 g/kg),每组16只。苏木素-伊红(HE)染色光镜法观察胃黏膜组织。TUNEL检测胃癌细胞凋亡；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中胃动素、胃泌素水平；RT-PCR检测胃黏膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)、自噬蛋白(Beclin)1 mRNA水平；Western印迹检测RegⅠ、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果 与正常组相比，模型组与低剂量组胃黏膜组织有炎性细胞浸润产生，排列杂乱无章、胃壁增厚，高剂量组与对照组胃黏膜组织炎性细胞浸润减少，排列较为有序。与正常组相比，模型组胃黏膜组织中Beclin1、Bax水平明显降低，VEGF、胃动素、胃泌素、RegⅠ、Bcl-2水平明显提升(P<0.05)。与模型组比较，低剂量组凋亡率、Beclin1、Bax水平明显升高，VEGF、胃动素、胃泌素、RegⅠ、Bcl-2水平明...     

姜黄素激活自噬对非酒精性脂肪性肝病大鼠线粒体途径凋亡的影响

目的探讨姜黄素对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠的治疗作用及机制。方法油红O染色观察各组大鼠肝内细胞脂滴分布,透射电镜观察肝组织中自噬泡形成情况。蛋白印迹检测P62、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬相关蛋白(Beclin-1)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、相关x蛋白(Bax)、线粒体内细胞色素C(mCytc)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3、Caspase-9)标记蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,肝组织脂质沉积在模型组中明显增加;姜黄素明显抑制模型组大鼠肝组织脂质沉积,自噬抑制剂削弱姜黄素的治疗作用;透射电镜观察发现正常对照组可见散在自噬泡,模型组自噬泡数量显著减少,姜黄素可明显增加自噬体数量。蛋白印迹结果提示,模型组大鼠肝组织中Bax、Caspase-3、Caspase-9、P62蛋白表达均升高,而mCytc、Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均降低;经姜黄素治疗后肝组织中Bax、P62、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达均降低,而mCytc、Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高;自噬抑制剂可以部分抑制姜黄素对自噬和凋亡相关蛋白的影响。结论姜黄素对NAFLD大鼠模型的抗凋亡作用与诱导自噬有关。     

蓝莓对非酒精性脂肪性肝病大鼠Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究蓝莓对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠的保护作用及相关机制.方法:40只健康大鼠随机分为4组:正常组、蓝莓组、姜黄素组、模型组.正常组饲喂正常饲料,其余各组饲喂高脂饲料.蓝莓组每日灌胃蓝莓原浆[15 m L/(kg·d)];姜黄素组每日灌胃姜黄素溶液[200 mg/(kg·d)];其余组大鼠灌胃等体积生理盐水,12 wk后处死.HE染色、油红O染色观察各组肝细胞损伤及脂肪沉积情况;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT),谷草转氨酶(aspartate transaminase,A S T),甘油三脂(t r i g l y e r i d e,T G),胆固醇(total cholesterol,TC)含量;酶联免疫吸附法检测肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、甘油三酯(triglyeride,TG)含量;免疫组织化学、Western blot和逆转录-聚合酶链反应检测大鼠肝组织中B淋巴细胞瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(bclassociated x protein,Bax)的表达.结果:与模型组大鼠相比,蓝莓组、姜黄素组HE染色、油红O染色肝组织中脂肪沉积明显减少,血清AST、ALT、TG、TC含量升高幅度较小(P0.01),肝组织中TG、MDA含量升高幅度也较小(P0.01),而SOD活性、GSH含量明显增高(P0.01).与模型组大鼠相比,蓝莓组、姜黄素组Bcl-2 mR NA和蛋白质的表达明显增加(P0.01),Bax m RNA和蛋白质的表达明显降低(P0.01),Bcl-2/Bax比值明显增加(P0.01).结论:蓝莓对NAFLD有较好的预防作用,其机制可能是上调肝脏Bcl-2表达,下调Bax表达,纠正两者平衡失调,提高机体抗氧化能力从而抑制肝细胞凋亡有关.     

茶花粉水提物对酒精性肝损伤大鼠模型肝脏组织中COL1A1、α-SMA表达水平的影响

目的探究茶花粉水提物对酒精性肝损伤大鼠模型肝脏组织中胶原蛋白Ⅰ(COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平的影响。方法选取45只雄性SD大鼠,体重200±30 g,将大鼠制成酒精性肝损伤模型,并分为:模型组、低剂量茶花粉水提物组和高剂量茶花粉水提物组,每组各15只,另选15只作为对照组。测量大鼠肝脏质量并计算肝指数;检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量; HE染色观察肝脏组织的病理学改变;使用蛋白质印记检测肝脏组织中COL1A1和α-SMA表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠肝指数、血清ALT,AST水平、肝组织MAD水平,COL1A1和α-SMA蛋白表达水平均显著升高(P 0. 05),肝脏组织中SOD水平显著降低(P 0. 05);相比模型组,低剂量茶花粉水提物组和高剂量茶花粉水提物组大鼠肝指数、血清ALT,AST水平、肝组织MAD水平,COL1A1和α-SMA蛋白表达水平均显著降低(P 0. 05),且高剂量茶花粉水提物组上述指标显著低于低剂量茶花粉水提物组,肝脏组织中SOD水平显著升高,且高剂量茶花粉水提物组显著高于低剂量茶花粉水提物组(P 0. 05)。结论茶花粉水提物可以降低酒精性肝损伤大鼠肝脏组织中胶原蛋白Ⅰ(COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,有效缓解酒精性肝损伤。     

芍药苷对日本血吸虫感染小鼠肝组织免疫病理的影响

目的 观察芍药苷(paeoniflorin)对日本血吸虫病小鼠肝组织免疫病理的影响, 探索芍药苷预防血吸虫病肝虫卵肉芽肿和肝纤维化的作用机制。 方法 日本血吸虫尾蚴感染昆明小鼠, 制成肝虫卵肉芽肿和肝纤维化小鼠模型。然后随机分为4组: 模型组 (A组) (15只), 吡喹酮治疗前 (B组)、 治疗同时(C组)及治疗后(D组)给予芍药苷组(各45只)。其中后3组又各分为低剂量组 [芍药苷30 mg/(kg·d) ×30 d］、高剂量组 [芍药苷120 mg/(kg·d) ×30 d］及对照组 (0.5%羧甲基纤维素钠溶剂2 ml×30 d)。B组感染后第12 天起、 C及D组分别于感染后第42 及72天起, 灌胃芍药苷或0.5%羧甲基纤维素钠溶剂。B、 C和D等3组均于感染后第42 天起灌胃吡喹酮 [500 mg/(kg·d)×2 d］。感染后第102天处死取血及肝脏。用竞争放射免疫法检测血清透明质酸(HA)含量, 苏木素-伊红(HE)及Masson胶原纤维染色观察肝虫卵肉芽肿面积及纤维化程度, 用免疫组化技术评价α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达情况。 结果 B组HA水平, 低剂量组及高剂量组均显著低于对照组 (F=9.429, P值均＜0.01); 肉芽肿面积及肝纤维化程度, 低剂量组及高剂量组均显著低于对照组 (F=862.540、 F=29.738, P值均＜0.01); α-SMA阳性细胞表达强度(F=12.323, P值均＜0.01)、 TGF-β1表达强度 (F=148.990, P值均＜0.01)、 ColⅠ含量 (F=180.881, P值均＜0.01), 低剂量组和高剂量组均显著低于对照组。 C组及D组各项检测数据与其相应的对照组之间差异均无统计学意义 (P>0.05)。 结论 吡喹酮治疗前给予芍药苷, 能明显降低肝虫卵肉芽肿和肝纤维化程度, 减少肝组织TGF-β1、 α-SMA的表达。     

化浊抗纤保肝汤对肝炎后肝纤维化大鼠肝纤维化的影响及机制

目的探究化浊抗纤保肝汤对肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响及机制。方法通过灭活的猪血制备肝纤维化大鼠模型,实验分为对照组、模型组、化浊抗纤保肝汤1组(保肝汤1组)、化浊抗纤保肝汤2组(保肝汤2组)、化浊抗纤保肝汤3组(保肝汤3组)。模型组、保肝汤1组给予蒸馏水、化浊抗纤保肝汤浓缩剂灌胃至第9周,保肝汤2组、保肝汤3组分别在第3周和第6周给药至第9周,对照组经腹腔注射生理盐水,同时给予蒸馏水至第9周。全自动生化分析仪分析肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平,放射免疫法检测透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)指标。实时定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹法检测肝组织中Bcl-2和Bax基因蛋白与Ki-67 mRNA抗原表达的水平。结果模型组血清ALT、AST、HA、LN显著高于对照组(P<0. 01);保肝汤1组、保肝汤2组、保肝汤3组血清ALT、AST、HA、LN显著低于模型组(P<0. 01),且保肝汤2组、保肝汤3组血清ALT、AST、HA、LN显著高于保肝汤1组(P<0. 01);模型组肝组织Bcl-2、Bax、Ki-67mRNA和蛋白水平显著高于对照组(P<0. 01);给药后肝组织中Bcl-2、Ki-67 mRNA和蛋白显著增加(P<0. 01),但Bax差异不显著;保肝汤2组、保肝汤3组肝组织中Bcl-2、Ki-67 mRNA和蛋白水平显著低于保肝汤1组(P<0. 01)。结论化浊抗纤保肝汤有可能通过抑制细胞凋亡、促进其增殖,缓解肝纤维化的进程。     

肾气丸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠Bcl-2/Bax、Fas/FasL信号通路的影响

目的:观察Bcl-2/Bax、Fas/Fas L介导的信号转导通路在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠的作用及肾气丸对其的影响。方法:采用高脂饲料连续喂养12周建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,同时以肾气丸进行干预12周。HE染色观察大鼠肝组织病理组织学变化,免疫组织化学检测肝组织中Fas、Fas L、Bcl-2、Bax、Caspase-8蛋白的表达;Realtime-PCR法检测肝组织Caspase-8 mRNA表达。结果:模型组大鼠肝组织Bcl-2、Bax、Fas、Fas L蛋白以及Caspase-8 mRNA和蛋白表达均较正常组显著增加(P<0.01),Bcl-2/Bax比值较正常组明显的降低(P<0.05);大鼠肝组织Caspase-8蛋白表达与Fas、Fas L蛋白表达均呈明显正相关(r分别为0.907、0.804,P均<0.01);予以肾气丸干预后,Bax、Fas、Fas L蛋白的表达以及Caspase-8 mRNA和蛋白的表达均较模型组明显的降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值较模型组明显的增加(P<0.05),Bcl-2蛋白的表达与模型组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:肾气丸可能通过影响Bcl-2/Bax、Fas/Fas L信号转导通路,下调Bax、Fas、Fas L、Caspase-8表达,减少肝细胞的脂性凋亡,从而防治大鼠非酒精性脂肪性肝炎的发生发展。     

实验性肝纤维化Bcl-2、Bax的表达及干扰素-γ对其的作用

目的 研究Bcl-2、Bax蛋白在四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型大鼠肝组织中的表达以及干扰素-γ(IFN-γ)对其的作用。 方法用CCl4诱导形成大鼠肝纤维化模型,使用IFN-γ 0.2 MU·kg-1·d-1,肌肉注射,治疗12周,设正常对照组和模型对照组。用免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织Bcl-2、Bax的表达情况。 结果 Bcl-2在正常对照组大鼠肝细胞浆和肝窦呈低水平表达,在模型对照组大鼠肝组织分布广泛,主要表达在纤维间隔、汇管区、肝窦和肝细胞膜,中央静脉和肝细胞浆也有一定表达。正常对照组和模型对照组表达量分别为(3.87±2.37)％和(9.46±4.29)％,t=2.83,P<0.05。Bax在正常对照组大鼠肝组织的中央静脉及其周围的肝窦呈低水平表达,在模型对照组主要表达在肝细胞浆,其还表达在肝窦、纤维间隔和肝细胞膜中,胆管上皮细胞偶见表达。正常对照组和模型对照组表达量分别为(3.50±1.88)％和(9.80±3.75)％,t=3.72,P<0.01。IFN—γ组Bax的表达量为(5.85±2.35)％,模型对照组为(9.80±3.75)％,t=2.98,P<0.01,Bcl-2的表达无明显改变(t=1.49,P>0.05)。IFN-γ组对纤维间隔Bcl-2的表达量为(6.58±4.13)％,模型对照组为(9.46±4.29)％,t=2.80,P<0.05,Bax的表达差异无显著性,t=0.58,P>0.05。 结论 肝纤维化时Bcl-2和Bax表达加强,IFN     

雷帕霉素通过下调微小RNA-27a介导的雷帕霉素靶分子信号通路调控糖尿病肾脏疾病大鼠足细胞自噬的影响研究

目的 探讨微小RNA-27a(miR-27a)介导的雷帕霉素靶分子（mTOR）信号通路调控DKD大鼠足细胞自噬的作用。方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组（NC,n=10）、糖尿病模型组（DKD,n=10）和雷帕霉素治疗组（Rap,n=10）。检测各组肾功能相关指标和细胞凋亡率，HE染色及免疫组化评估肾组织形态学变化。Western blot法检测各组肾组织中自噬相关指标Beclin1、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)及mTOC蛋白表达，qRT-PCR检测足细胞特异性蛋白miR-27a、Podocalyxin、Nephrin、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Bax、Beclinl mRNA表达量。结果 与NC组比较，DKD组第6、12周FPG、24 hUAlb、BUN、血肌酐（Scr）、肾脏指数（KI）表达升高（P<0.05）。与NC组比较，DKD组细胞凋亡、mTOC蛋白、miR-27a、mTOR、Bax mRNA表达升高（P<0.05）,Beclinl、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1、Podocalyxin、Nephrin mRNA...     

灯盏花素干预大鼠肝星状细胞TGFβ1、α-SMA的表达

目的 研究灯盏花素对CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠TGFβ1、α-SMA表达的研究.方法 本实验用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,喂服灯盏花素.60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、灯盏花素高剂量组、灯盏花素中剂量组、灯盏花素低剂量组、秋水仙碱组.用药4w后,测定肝纤维化模型大鼠的谷草转氨酶、谷丙转氨酶,检测平滑肌肌动蛋白mRNA和蛋白的表达,转化生长因子mRNA与蛋白的表达.结果 模型组大鼠血清ALT、AST明显高于正常对照组(P＜0.05).与模型组相比较,灯盏花素高、中、低剂量组ALT、AST均明显降低(P＜0.05).模型组与正常对照组α-SMA mRNA及蛋白有显著性差异(P＜0.01);灯盏花素不同剂量组均能使α-SMA mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01).模型组与正常对照组TGFβ1 mRNA及蛋白有显著性差异(P＜0.01),灯盏花素不同剂量组均能使TGFβ1 mRNA及蛋白的表达显著降低(P＜0.01或P＜0.05).光镜显示:灯盏花素各剂量组的肝脏病理学改变较模型组减轻.结论 ①灯盏花素能保护肝细胞活性,促进肝细胞修复再生;降低转氨酶,具有抗肝纤维化作用.②灯盏花素可以降低α-SMA、TGFβ1表达,抑制星状细胞激活.     

激动素对实验性肝纤维化大鼠Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的研究实验性肝纤维化大鼠肝组织Bcl-2和Bax的表达及激动素对它们的影响,初步探讨激动素抗肝纤维化的机制.方法用CCl4诱导形成大鼠肝纤维化模型,使用0.1%激动素溶液0.5ml/100g·d-1,背部皮下注射,治疗12周,设立正常对照组、肝纤维化模型组及激动素治疗组.以苏木精-伊红染色观察肝组织炎症和纤维化程度.采用免疫组化方法检测各组大鼠肝组织Bcl-2、Bax基因的表达.结果模型组肝纤维化程度明显高于激动素治疗组.Bcl-2在正常对照组大鼠肝细胞浆和肝窦呈低水平表达,在模型组大鼠肝组织分布广泛,主要表达在汇管区、纤维间隔、肝窦和肝细胞膜、中央静脉和肝细胞浆,表达的量明显高于正常对照组.Bax在正常对照组大鼠的中央静脉及其周围的肝窦呈低水平表达,在模型组大鼠肝组织主要表达在肝细胞浆、肝窦、纤维间隔和肝细胞膜中,表达的量也明显高于正常对照组基因的表达.激动素治疗组大鼠肝组织Bcl-2的表达明显低于模型组,Bax的表达也明显低于模型组,Bcl-2/Bax比值无明显差异;激动素对纤维间隔Bax的表达无明显作用,但能降低Bcl-2的表达,下调Bcl-2/Bax比值.结论肝纤维化时Bcl-2和Bax表达加强,激动素可促进纤维间隔中肝星状细胞的凋亡,促进肝星状细胞凋亡可能是激动素抗肝纤维化机理之一.     

上调Shh表达对去势骨质疏松大鼠干预效果及作用机制

目的 研究上调音猬因子(Shh)表达对去势骨质疏松模型大鼠的干预效果及作用机制。方法 选取清洁及健康的雌性昆明大鼠32只，随机选取8只分为正常组，剩余24只建立去势骨质疏松模型，分为模型组、空白组、上调组，各8只。比较各组Shh、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原交联N-末端肽(NTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TPACP)5b、骨密度、核因子KB受体活化因子配体(RANKL)、自噬相关蛋白(Beclin)1、微管相关蛋白1轻链(LC)3-Ⅱ、骨保护素(OPG)水平。结果 与模型组、空白组相比，上调组Shh表达、骨密度、OPG水平显著升高(P<0.05),ALP、NTX、TPACP5b、RANKL、Beclin1、LC3-Ⅱ水平显著降低(P<0.05),股骨最大扭矩、股骨最大载荷显著增大(P<0.05)。结论 上调Shh基因可通过调控RANKL、Beclin1、LC3-Ⅱ、OPG蛋白而降低ALP、NTX、TPACP5b水平，增强骨密度，进而降低骨代谢，改善去势骨质疏松大鼠的骨生物力学。     

丹酚酸B对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞凋亡的影响

目的探讨丹酚酸B对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞凋亡的影响及对NASH的治疗作用。方法清洁级雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、NASH模型组、丹酚酸B治疗组,每组20只。对照组以普通饲料喂养,其余2组以高脂饲料连续喂养12周复制NASH模型。第13周开始治疗组每天以浓度为1 mg/ml的丹酚酸B溶液20 ml/kg灌胃,模型组以20 ml/kg蒸馏水灌胃。治疗12周后,处死大鼠,取血及肝组织,计算肝指数,检测血清ALT、AST、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC),观察肝组织病理学变化,免疫组织化学法检测肝组织细胞色素C(Cyt C)、caspase-3蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织p53、Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果模型组大鼠肝指数、ALT、AST、TG、TC较对照组增高,肝组织炎症明显;Cyt C及caspase-3蛋白表达增加(P值均0.01);Bcl-2 mRNA表达降低,p53、Bax mRNA表达增高(P值均0.01)。治疗组与模型组相比肝指数、ALT、AST、TG、TC降低,炎症减轻;Cyt C及caspase-3蛋白表达减少(P值均0.01);Bcl-2 mRNA表达升高(P0.05),p53 mRNA表达降低(P0.05),Bax mRNA表达降低(P0.01)。结论丹酚酸B可通过调节Bcl-2、p53、Bax mRNA表达,降低Cyt C及caspase-3蛋白的表达,抑制肝细胞凋亡,对NASH起治疗作用。     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi Chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响及作用机制.腔注射制备大鼠肝纤维化模型,造模的同时,TFL干预组分别以高、低剂量的TFL灌胃6wk进行干预治疗,空白对照组、秋水仙碱组分别以生理盐水、秋水仙碱灌胃作为阴阳性对照.HE及Masson染色观察肝纤维化程度;免疫组织化学二步法检测Bcl-2、Bax的表达;测定血清ALT、AST的水平.结果:模型组大鼠肝组织中Bcl-2、Bax的表达较正常组显著升高(P=0.000),TFL高、低剂量给药组及秋水仙碱组Bcl-2的表达较模型组升高(P=0.000,0.047,0.021),Bax的表达较模型组降低(P=0.000,0.014,0.007),TFL高剂量组与低剂量组比较Bcl-2的表达升高(P=0.018),Bax的表达显著降低(P=0.002).Bcl-2、Bax在秋水仙碱组与TFL低剂量组中的表达无显著性差异(P=0.726,0.767).肝纤维化严重程度与Bax的表达显著正相关(P=0.000);与Bcl-2的表达负相关(P=0.000).空白对照组、TFL高低剂量给药组及秋水仙碱组血清ALT、AST均明显低于模型组,具有显著性差异(P=0.000).低剂量组与秋水仙碱组无显著性差异(P=0.597,0.669).结论:TFL具有较好的抗肝纤维化和改善肝功能的作用,并推测这种作用可能与上调Bcl-2、下调Bax的表达,抑制肝细胞的凋亡有关.     

消黄方对二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化氧化应激的影响

目的探讨消黄方对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)肝纤维化大鼠肝组织氧化应激的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常组及DMN模型组,DMN模型组大鼠DMN(10 mg/kg)每周前3天连续腹腔注射共4周制备大鼠肝纤维化模型,造模第3周,DMN大鼠随机分为模型对照组和消黄方组(例数10),消黄方组每天造模的同时给予方剂煎出液灌胃2周。造模4周末,处死全部大鼠,获取肝组织,检测肝组织羟脯氨酸(hydroxy prone,Hyp)含量,检测肝组织超氧化物歧化酶活性(superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-transfcrase,GST)活性、谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛含量(malondialdehyd,MDA)等氧化应激指标,实时定量PCR检测肝脏Ⅰ型胶原mRNA表达。结果与正常组相比,DMN模型组大鼠肝组织MDA含量及GST活性显著升高(P<0.01),分别为正常组的2.37倍和2.04倍,而GSH含量和SOD活性则显著降低(P<0.01),分别是正常组的0.37和0.47倍。与模型对照组相比,消黄方组显著降低肝组织MDA含量(P<0.05),增高GSH含量和SOD活性(P<0.01),实时定量PCR结果显示Ⅰ型胶原造模后达到正常组的34倍,消黄方组显著降低(P<0.01)。结论氧化应激是肝纤维化形成的重要病理因素之一,消黄方能显著改善DMN纤维化大鼠肝组织氧化应激。     

高渗盐水对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 研究高渗盐水(7.5％氯化钠注射液)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制.方法 清洁健康雄性SD大鼠60只,体重220 ～ 260 g,随机分为4组:假手术组(Ⅰ组,Sham组)、缺血再灌注组(Ⅱ组,IR组)、缺血预处理组(Ⅲ组,IP组)、高渗盐水预处理组(Ⅳ组,HTS组)每组15只.制作70％肝脏缺血再灌注模型,肝脏缺血40 min,再灌注1、6、24h三个亚组,每个亚组5只.测定血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、一氧化氮(N0)、内皮索-1(ET-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)的水平及再灌注6h后的肝组织病理学改变.免疫组化法检测再灌注6h的肝组织Bcl-2及Bax的表达;TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(AI).结果 IR组、IP组及HTS组各时点AST、ALT、Bax及AI较同时点Sham组高,IL-10、NO且及Bcl-2水平较Sham组低,肝组织病理学损害重于Sham组;HTS组及IP组各时点AST、ALT、TNF-α、ET-1、Bax 及AI较同时点IR组低,HTS组最低,且IL-10、NO及Bcl-2水平较IR组高,HTS组最高,肝组织病理学损害明显轻于IR组,HTS组最轻.结论 HTS可以通过抑制血清TNF-α的升高、维持IL-10的水平,抑制肝组织Bax的表达,促进Bcl-2的表达,抑制肝细胞凋亡,从而减轻肝脏缺血再灌注损伤.     

柴胡皂苷对抑郁症大鼠海马BDNF表达的影响

目的目的观察柴胡皂苷酒精性肝病大鼠的治疗作用研究。方法将60只wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组和柴胡皂苷组,采用白酒灌胃的方法建立酒精性肝病大鼠模型,给予柴胡皂苷治疗。12 w后检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;HE染色观察肝脏的病理变化。结果与模型组比较,柴胡皂苷组血清中ALT、AST的含量均低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);柴胡皂苷组肝组织中MDA含量的低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);柴胡皂苷组肝组织中SOD活性高于模型组,差别有统计学意义(P<0.05)。肝组织病理结果提示柴胡皂苷对酒精性肝病大鼠具有保护作用。结论柴胡皂苷能抑制酒精诱导脂质过氧化反应对肝组织的损伤,对酒精性肝损伤有明显保护作用。     

针灸联合自拟茶方调节肝AMPK、p38 MAPK、PPARγ信号改善脂肪肝大鼠脂质代谢紊乱的机制

目的探讨针灸联合自拟茶方改善脂肪肝大鼠脂质代谢紊乱的疗效及机制。方法以高脂饲料建立脂肪肝胰岛素抵抗模型大鼠,将大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及治疗组,对照组及模型组不经药物干预,阳性对照组以吡格列酮进行治疗,治疗组以针灸联合自拟茶方进行治疗。检测肝脏组织匀浆三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。对各组大鼠肝脏病理、肝指数、肝酶[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)]、血脂水平[TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、血清炎症相关因子α肿瘤坏死因子[(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6]及肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)γ蛋白表达进行测定。结果模型组各指标与对照组相比有明显差异,表明造模成功。治疗组肝脏细胞脂肪变性程度明显优于模型组,肝指数明显低于模型组(P<0.05),血清ALT、ALP、TC、TG、LDL-C、IL-1、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),肝组织AMPK及PPARγ表达水平升高(P<0.05),p38MAPK表达水平降低(P<0.05)。治疗组在改善肝指数、降低血清TC、ALT、AST、IL-1、TNF-α水平及降低肝脏TC、TG水平、升高HDL-C、下调肝脏p38MAPK水平方面与阳性对照组无显著差异(P>0.05)。结论针灸联合自拟茶方可明显改善脂肪肝胰岛素抵抗模型大鼠的脂质代谢紊乱及胰岛素抵抗,该作用可能与上调肝脏AMPK及PPARγ表达水平、下调p38MAPK表达水平有关。