重楼药材性状与4种皂苷含量分析

正重楼Paridis Rhizoma为百合科Liliaceae植物云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎[1]。重楼药材中含有的主要活性成分为甾体皂苷类化合物,根据苷元的不同有薯蓣皂苷类和偏诺皂苷类[2]。2010年版《中华人民共和国药典》以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为质控指标性成分,其中重楼皂苷Ⅰ、     

4种重楼不同部位4种重楼皂苷含量的分析

目的:研究评价不同品种重楼的不同组织部位的药用价值。方法:分别提取华重楼、七叶一枝花、球药隔重楼和狭叶重楼的地下根茎、地上茎、叶、种子、果皮和外种皮的重楼皂苷,采用HPLC检测其重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ,Ⅶ含量。结果:4种重楼的地下根茎中重楼皂苷总含量均高于地上部分,其中,七叶一枝花的地下根茎的重楼皂苷总含量最高,为26.34 mg·g~(-1);对于地上不同组织部位而言,七叶一枝花果皮的重楼皂苷Ⅰ含量、种子的重楼皂苷Ⅵ含量、外种皮的重楼皂苷Ⅶ含量分别为10.18,0.84,8.61 mg·g~(-1);球药隔重楼种子的重楼皂苷Ⅱ含量最高,为1.1 mg·g~(-1)。结论:七叶一枝花地下根茎以及整株材料的重楼皂苷总含量最高,可作为后期人工栽培的优良品种;重楼地上茎、果皮和外种皮中的重楼皂苷Ⅰ含量与其地下根茎的含量具正相关性,可通过检测重楼地上部分的重楼皂苷Ⅰ含量初步评价其地下根茎的药用价值。     

关于完善2020年版《中国药典》重楼饮片质量标准

目的：开展重楼饮片【性状】【薄层鉴别】和【含量测定】研究,为完善2020年版《中国药典》重楼饮片质量标准提供参考。方法：采用文献总结和实际样品观察进行性状描述;采用薄层色谱法进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定市售和自制饮片中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ的含量;采用UPLC法测定自制饮片中10种甾体皂苷（伪原薯蓣皂苷,重楼皂苷Ⅶ,17-羟基纤细薯蓣皂苷,重楼皂苷H,重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅱ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅴ）的含量。结果：饮片外观性状上,除了色泽、质地、气味,增加直径1.0~4.5 cm的限定。薄层色谱图中正品重楼多不能检出重楼皂苷Ⅵ,伪品头顶一颗珠在相应位置斑点清晰。13批市售样品中只有5批符合现行2015年版《中国药典》规定的“重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ之和不低于0.6%的要求”。炮制过程软化和干燥方式对甾体皂苷含量有明显影响,以浸泡、晒干较好。结论：建议新增性状,将重楼皂苷Ⅵ从薄层鉴别删除,以重楼皂苷H替代重楼皂苷Ⅵ进行含量限度控制,规定“重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,H和Ⅶ之和应不低于1.0%”。     

基于多指标成分含量测定及HPLC指纹图谱的多茎重楼品质评价

目的 HPLC法测定不同产地多茎重楼Paris polyphylla Smith var. yunnanensis根茎中重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅰ、Ⅴ的含量,建立其HPLC指纹图谱,并与滇重楼根茎对照药材HPLC指纹图谱进行比较分析。方法采用Thermore C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水-乙腈,梯度洗脱,检测波长203 nm;柱温30℃;体积流量1 mL/min;进样量10μL,外标法与一测多评法同时对不同产地多茎重楼根茎中重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅰ、Ⅴ的含量进行测定,采用单因素方差分析法对含量差异进行分析;建立多茎重楼根茎HPLC指纹图谱,并与滇重楼根茎对照药材HPLC指纹图谱进行比较分析。结果不同产地多茎重楼根茎重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅰ、Ⅴ的含量测定结果表明,在线性范围内线性关系良好(r0.9997),平均加样回收率为98.34%～99.34%,RSD≤1.00%;不同产地多茎重楼根茎中重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅰ、Ⅴ的含量存在显著(P0.05)或极显著(P0.01)差异,重楼皂苷(Ⅰ+Ⅱ+Ⅵ+Ⅶ)总量在1.239%～6.236%,显著高于《中国药典》规定的重楼药材质量控制标准的0.60%,且外标法与一测多评法测定结果无显著性差异。HPLC指纹图谱相似度评价结果表明,不同产地多茎重楼和滇重楼对照药材根茎中共有12个共有指纹特征峰,二者HPLC指纹图谱相似度较高。结论该方法操作简单、准确、重复性好,可用于多茎重楼根茎中重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅰ、Ⅴ的含量测定;不同产地多茎重楼根茎中重楼皂苷(Ⅰ+Ⅱ+Ⅵ+Ⅶ)总含量较高,不同产地多茎重楼与滇重楼对照药材根茎HPLC指纹图谱相似度较高。     

陕产七叶一枝花的生药学研究

目的：对陕产七叶一枝花Paris polyphylla Sm.进行系统的生药学研究。方法：用形态组织学方法研究原植物形态、生药性状和显微特征,并用高效液相色谱法（HPLC）测定重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总含量。结果：陕产七叶一枝花生药为其根茎,显微特征为横切面有栓化表皮、外皮层、皮层和内皮层,中柱为薄壁组织中散布周木式维管束等结构;生药粉末中含极多单粒淀粉,常见草酸钙针晶、螺纹、梯纹、网纹和梯-网纹导管。重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ总质量分数达到2%以上。结论：陕产七叶一枝花药用植物分类特征明显,药材性状稳定,显微结构显著;重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ和Ⅶ的总含量达到了《中华人民共和国药典》2015年版一部标准,为陕产重楼药材质量标准制订及资源合理开发利用提供参考。     

多叶重楼与云南重楼中4种重楼皂苷的积累差异

目的考察多叶重楼Paris polyphylla Smith var.polyphylla与云南重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的积累差异。方法 HPLC法测定多叶重楼根、叶、茎中4种重楼皂苷含有量,建立20批样品的指纹图谱,聚类分析对2种植物不同部位中各重楼皂苷的积累差异进行评价。结果不同居群多叶重楼中各重楼皂苷含有量及其总量均有显著差异(P0.05,P0.01)。根中未检测到重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ平均含有量最高;叶中重楼皂苷Ⅶ平均含有量和总含有量最高;茎中仅检测到重楼皂苷Ⅶ,总含有量最低。多叶重楼和云南重楼根的相似度较高,叶和茎较低。根据不同部位重楼皂苷总含有量,样品可分为3类。结论可考虑将多叶重楼作为云南重楼的替代品。     

15种重楼属植物中8种甾体皂苷的含量测定

建立了同时测定重楼中8种重楼皂苷(重楼皂苷Ⅶ、H、Ⅵ、Ⅱ、Ⅰ、Ⅴ,薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷)的分析方法,并对15种重楼属植物根茎中重楼皂苷的含量进行了评价。本研究采用Waters Acquity H-Class~(TM)液相色谱系统,PDA检测器,色谱柱为资生堂CAPCELL PAK ADME色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水为流动相(0.8 mL·min~(-1))梯度洗脱,柱温21℃;检测波长为203 nm。可知(1)8种重楼皂苷得到良好分离,稳定性和重复性好,且线性良好(R20.999 9),线性范围较宽(0.041 70~3.812 00μg),平均回收率在95.91%~103.8%。(2)不同种重楼中重楼皂苷的含量差异显著,毛重楼、狭叶重楼和金线重楼中含量较低或基本不含重楼皂苷,不适合作为重楼药用;不同产地的七叶一枝花含量差异显著;滇重楼、长柱重楼、大理重楼和五指莲中重楼皂苷含量较高,最高达5.0%,长柱重楼、大理重楼和五指莲可作为潜在的重楼药用资源。     

重楼多指标UPLC定量分析及其化学品质综合评价

目的探讨10种重楼药材中7种有效成分含量,并进行化学成分整合评控,为其资源评价提供了科学依据。方法收集不同产地55批重楼药材,采用UPLC法测定重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、薯蓣皂苷、重楼皂苷H、纤细薯蓣皂苷的含量,进一步采用TOPSIS数学模型对含量结果进行归一化与多指标数据集成化,获得重楼中7种指标的化学品质综合指数。结果 10种重楼药材的综合评价排名由高到低依次为长柱重楼(Ci=0.275 5)多叶重楼(Ci=0.273 2)大理重楼(Ci=0.269 8)滇重楼(Ci=0.244 5)南重楼(Ci=0.234 5)狭叶重楼(Ci=0.159 1)黑籽重楼(Ci=0.141 6)矮重楼(Ci=0.117 8)七叶一枝花(Ci=0.115 1)毛重楼(Ci=0.114 9),表明不同种重楼化学综合质量差异较大,其长柱重楼、多叶重楼和大理重楼的化学综合质量优于滇重楼,南重楼与滇重楼的结果较为接近,可作为滇重楼资源扩充的优势品种。结论通过TOPSIS整合评控对重楼类中药材的质量评价有一定的参考依据。     

多基源重楼的质量等同性研究

目的： 对不同种属、不同产地重楼属植物中甾体皂苷（重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ）含量进行对比研究,为重楼属药材合理利用提供理论依据。 方法： 采用HPLC-UV法测定重楼属4种药材中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ的含量。Agela Venusil XBP-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相A相为乙腈,B相为水,梯度洗脱（0~5 min,34%~44%A;5~15 min,44%~49%;15~18 min,49%~50.5%;18~22 min,50.5%~51.8%;22~25 min,51.8%~52.5%;25~30 min,52.5%~53.5%）,检测波长203 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温25 ℃,进样量20 μL。 结果： 不同种属、不同产地的重楼属植物中甾体皂苷含量和组成有显著性差异。 结论： 4种重楼属植物具有化学等同性,花叶重楼、毛重楼可替代重楼使用。     

基于茎痕判定的不同生长年限重楼药材中皂苷含量分析

目的:明确基于茎痕判定的不同生长年限重楼药材中甾体皂苷含量。方法:基于茎痕数目判定重楼药材的生长年限;采用HPLC测定不同样品中重楼皂苷Ⅶ,重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅴ,重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ的含量。结果:不同批次重楼药材被区分为生长年限3~7年,3~8年和3~9年的样品。所有检测样品均符合2015年版《中国药典》重楼药材项下重楼皂苷Ⅶ,Ⅵ,Ⅱ和Ⅰ的总量不低于0.6%的要求;在检测的5个指标成分中,以偏诺皂苷类重楼皂苷Ⅶ为主。不同年限样品甾体皂苷的含量总体上呈现随年限增长而增加的趋势。结论:茎痕可以作为典型外观特征纳入重楼药材传统质量评价体系。     

Analgesic and sedative effects of the Chinese drug rhizoma Paridis

The analgesic and sedative actions of Chinese drug Rhizoma Paridis are reported. All of the 6 experimented species and varieties in common use are obviously effective. Among them Paris polyphylla var. chinensis, P. polyphylla var. yunnanensis are stronger in analgesic action. Sedative action of P. fargesii, P. polyphylla var. chinensis, P. thibetica is also strong. In addition, pariphyllin A and gracillin were also used in the experiment.     

影响滇重楼产量和品质诸因素的研究进展

滇重楼具有较强的生物活性,又是一些著名中成药和新药的主要原料之一。从分布、气候等生态因子,以及人工栽培、管理技术、加工炮制、寄生菌等因素对滇重楼产量和品质影响研究进展进行了综述,为实现滇重楼人工大量栽培产业化提供理论依据,并就滇重楼生产中存在的问题及未来研究方向予以展望。     

云南重楼种子育苗技术研究

目的：缩短云南重楼种子萌发和出苗所需时间,提高其出苗率；提出在生产中切实可行的云南重楼种子有性繁殖育苗方法。方法：考察不同温度、不同播种方式(播种时间、覆土厚度、地膜覆盖)等因素对云南重楼种子萌发和出苗的影响。结果：云南重楼种子胚后熟和萌发的最适温度在18～20 ℃,在此温度下处理3～4个月以后,转至0～10 ℃低温处理2～4个月,可在翌年4月出苗；适宜的播种时间是4月份以前,育苗土覆盖厚度为1 cm左右,播种后用黑色地膜进行覆盖,可提高出苗率。结论：上述试验结果可为云南重楼种子育苗提供操作参考。     

重楼的基源、生长条件与质量相关性研究

目的 比较不同基源、生长条件及采收季节的重楼皂苷含量,为重楼的引种栽培提供科学依据.方法 采集不同基源、不同生长年限、不同海拔及不同采收季节的重楼药材,按2015年版《中华人民共和国药典》重楼总皂苷含量测定方法进行测定.色谱柱为ACQUITY UPLC?HSS T3(3.0 mm×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,检测波长203 nm,进样量5μl,流速0.5 ml/min,柱温35℃.结果 在所测样品中,总皂苷含量范围在1.35%~3.89%之间,含量顺序为:多叶重楼>滇重楼>华重楼;3~10年生的华重楼,生长年限越长,总皂苷含量越高;在海拔400~800 m生长的华重楼,总皂苷含量随着海拔上升而增加;春季采收的云南重楼其皂苷含量高于其他季节.结论 不同基源、生长条件、采收季节的重楼皂苷含量不同,引种栽培重楼应综合考虑.     

不同生境滇重楼根际解磷菌的筛选与鉴定

二级濒危药用植物滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis野生资源严重匮乏,引种栽培可缓解市场需求,筛选滇重楼根际土壤解磷菌,为开发高效微生物菌肥提供数据支撑.该研究从云南、四川和贵州3个地区10个不同地点的野生和移栽品种的滇重楼根际土壤中分离筛选具有矿化有机磷能力的根际解磷菌,经分离纯化后...     

不同丛枝菌根真菌组合对滇重楼光合生理和化学成分的影响

目的:研究接种不同丛枝菌根(AM)真菌组合对滇重楼幼苗的生长发育和入药品质的影响,为培育优质滇重楼药材提供参考。方法:通过室温盆栽接种试验方法,在灭菌栽培土壤中分别接种9组不同AM真菌组合,以不接种为空白组,观察不同AM真菌组合对滇重楼幼苗的根系侵染率、光合参数、生理指标及化学成分等的影响。结果:接种外源AM真菌组合显著增加滇重楼根际土壤中的孢子密度、根系AM真菌的侵染率和侵染强度,以及根内琥珀酸脱氢酶和碱性磷酸酶活性;与空白组相比,不同AM真菌处理组对滇重楼叶片叶绿素含量、丙二醛、可溶性糖和可溶性蛋白含量、抗氧化酶活性等均有不同程度的提高;接种混合AM真菌可以诱导滇重楼次生代谢过程的变化,总皂苷含量在T1至T2时期呈上升趋势,T2至T4时期急速减少,到T5时期有所提高。结论:不同混合AM真菌能与滇重楼根系形成良好的共生关系,提高菌根生活力,增强滇重楼对外界不利环境的抗逆性,促进滇重楼的生长发育以及提高根茎品质。从综合接种效应来看S5,S8,S9组AM真菌组合效果最佳,为滇重楼菌根生物技术的运用提供了参考价值。     

HPLC测定贵州不同产地的七叶一枝花中9种甾体皂苷的含量

目的:通过比较贵州不同产地七叶一枝花中的主要活性成分甾体皂苷的种类和含量,为进一步探讨贵州地区作为七叶一枝花药材种植基地提供参考依据.方法:采用HPLC-UV测定来源于贵州省8个不同产地的七叶一枝花中9种甾体皂苷重楼皂苷Ⅶ,偏诺皂苷-3-O-α-L-rha(1→2)[α-L-rha(1→4)] -β-D-glc (PGRR),重楼皂苷H,重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅱ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,重楼皂苷Ⅰ及重楼皂苷V的含量.结果:重楼皂苷Ⅶ,PGRR,重楼皂苷H,重楼皂苷Ⅵ及纤细薯蓣皂苷5个甾体皂苷均可检测到,这可为增加鉴别重楼药材提供依据;独山产地的七叶一枝花中甾体皂苷含量最高(9.62％),其次为铜仁产地(6.39％),含量最低的为遵义产地的药材(0.99％).结论:贵州不同产地的皂苷种类和含量差别很大,适宜作为种植基地的为独山地区.     

华重楼中一个新的类胆甾烷皂苷

目的：从华重楼Paris polyphylla var.chinensis中分离活性成分皂苷类化合物。方法：药材用95％乙醇提取，提取物经D101大孔树脂柱，硅胶柱和ODS柱反复柱层析，得到化合物(1)。结果与结论：通过化学方法和波谱方法鉴定该化合物为一个新的类胆甾烷皂苷，命名为：Parispolyside E。该化合物结构为：3-氧-α-L-阿拉伯糖(1→4)[α-L-鼠李糖(1—2)]-β-D-葡萄糖-β-D—chacotriosyl-26-氧-β-D-葡萄糖苷，是在重楼属发现的第一个具有芳香环的类胆甾烷型的皂苷。     

中药重楼全球产地生态适宜性分析

在野外调查和数据收集的基础上,结合药用植物全球产地生态适宜性分析系统(geographic information system for global medicinal plants,GMPGIS),对中药重楼全球产地生态适宜性区域进行分析和评价。以重楼药材基原物种云南重楼Paris polyphylla var.yunnanensis和七叶一枝花P.polyphylla var.chinensis道地产区、主产区与野生分布区的采样点为依据,选取最冷季平均气温、最热季平均气温、年平均气温、年均降水量、年均相对湿度、年均日照强度和土壤类型7个生态指标作为主要参考因子,经过生态相似性比对分析得出云南重楼与七叶一枝花在全球范围内的生态适宜性产区和潜在种植区。结果表明云南重楼和七叶一枝花的最大生态相似度区域相似,在全球范围内主要分布在中国、巴西、美国、赞比亚、刚果、缅甸、坦桑尼亚、墨西哥、安哥拉及玻利维亚等19个国家。其中,中国的最大生态适宜性产区主要包括云南、四川、广西、湖南、湖北、广东、贵州、江西、福建和安徽等16个省区。该研究表明GMPGIS可以较好地应用于中药材引种及生产区划,研究结果可为重楼药材的资源保护和可持续利用提供参考依据。     

滇重楼根际微生物分布与甾体皂苷含量的相关性

观察了滇重楼栽培中根际土壤细菌、真菌、放线菌和3类促生细菌数量的变化规律,探讨了根际土壤微生物数量与滇重楼品质的关系。结果表明,滇重楼植物根际土壤微生物资源丰富,不同产地滇重楼根际土壤细菌、真菌、放线菌、解钾细菌、解无机磷细菌和解有机磷细菌数量具有显著性差异(P<0.05),根际土壤微生物数量的分布规律是:细菌数量>放线菌数量>真菌数量。随着种植年限的增加,真菌与解钾细菌数量呈逐年增加,细菌、放线菌、解无机磷细菌与解有机磷细菌数量呈逐年减小的变化趋势,土壤微生物类型由"细菌型"向"真菌型"过渡。不同产地滇重楼根茎的药用品质具有生境依赖性,种植年限的增加造成滇重楼药用品质下降作用明显。由此可见,种植年限增加会引起土壤微生态区系的变化,降低了滇重楼对营养物质的吸收利用,进而造成滇重楼药用品质下降。