丁香叶提取物通过调控SIRT1/PGC-1α/NRF1信号通路改善急性胰腺炎大鼠肝损伤

目的 探讨丁香叶提取物对急性胰腺炎(AP)大鼠肝组织的保护作用,以及沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)/核呼吸因子(NRF1)信号通路所发挥的作用.方法 将60只SD雄性大鼠随机分成对照组、AP组和低剂量、中剂量、高剂量组(低剂量、中剂量、高剂量丁香叶提取物),每组12只.除对照组外,其余各组大鼠均构建AP大鼠模型,并给予相应剂量的丁香叶提取物灌胃治疗.无菌条件下解剖大鼠,剥离肝脏,计算肝脏系数;检测血清中血清淀粉酶(AMY)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清炎性因子[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量;检测肝脏组织氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)];HE染色检测肝组织病理学变化;Western blot检测肝脏组织中SIRT1、PGC-1α、NRF1蛋白表达水平.结果 对照组大鼠肝脏组织结构正常;AP组大鼠肝脏组织结构损伤严重,且大量炎性细胞浸润;低剂量、中剂量、高剂量组大鼠肝脏组织病理损伤明显改善,炎性细胞浸润减少.与对照组相比,AP组大鼠肝脏系数及AMY、ALT、AST、IL-6、TNF-α、MDA水平升高(P＜0.05);SOD和GSH-Px水平及SIRT1、PGC-1α、NRF1蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与AP组相比,低剂量、中剂量、高剂量组大鼠肝脏系数,AMY、ALT、AST、IL-6、TNF-α、MDA水平降低(P＜0.05);SOD和GSH-Px水平及SIRT1、PGC-1α、NRF1蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 丁香叶提取物可能通过激活SIRT1/PGC-1 α/NRF1信号通路,降低氧化应激和炎症反应,改善AP大鼠肝组织损伤.     

汉黄芩素调节AMPK/SIRT1信号通路对骨质疏松大鼠骨折愈合的影响

目的 探究汉黄芩素（WOG）调节腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/沉默信息调节因子1(SIRT1)信号通路对骨质疏松（osteoporosis,OP）大鼠骨折愈合的影响。方法 将60只SPF级SD雌性大鼠随机分为假手术组（Sham组）、骨质疏松性骨折（OPF）模型组（Model组）、低剂量WOG组（WOG-L组，50mg/kg）、高剂量WOG组（WOG-H组，100 mg/kg）和高剂量WOG+AMPK抑制剂Compound C组（WOG-H+CC组，100 mg/kg WOG+0.2 mg/kg Compound C），每组12只。Model组、WOG-L组、WOG-H组、WOG-H+CC组采用双侧卵巢切除术与右侧股骨干骨折髓内固定术构建骨质疏松性骨折（OPF）大鼠模型。放射性检查评估骨折愈合情况。采用双能X线骨密度扫描仪检测大鼠股骨痂骨密度（BMD）。通过三点弯曲实验和压缩实验对大鼠股骨骨生物力学进行检测。比色法检测大鼠血清骨钙素（OC）、I型前胶原羧基端肽（PICP）水平。HE染色观察骨折处骨痂的病理学变化。Western blot法检测股骨组织中AMPK/SIRT1信号通路相关蛋...     

二甲双胍改善脂代谢的可能机制探讨

目的观察二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠脂肪组织中腺苷酸活化蛋白激酶α2（AMPKα2）的表达及对脂代谢的影响,探讨其改善血脂的可能机制。方法高脂饮食伴一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备2型糖尿病模型,造模成功后随机分为模型组（DM-C）和治疗组（DM-T）。DM-T组给予盐酸二甲双胍灌胃治疗。测定大鼠治疗前后的体质量,实验末测定各组大鼠肾周及睾周脂肪质量,并检测各组大鼠总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平,计算大鼠脂肪质量/体质量比值。同时以半定量逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测各组大鼠脂肪组织AMPKα2 mRNA的表达。结果与DM-C组比较,DM-T组大鼠脂肪组织AMPKα2的表达及血清HDL-C显著增高,AMPKα2（0.17±0.07）vs（1.06±0.50）（P〈0.01）;HDL-C（0.44±0.08）mmol/L vs（0.88±0.12）mmol/L（P〈0.05）。DM-T组大鼠TC、TG和LDL-C比DM-C组显著降低,TC（5.22±1.70）mmol/L vs（1.87±0.57）mmol/L（P〈0.05）;TG（5.11±0.92）mmol/L vs（0.78±0.39）mmol/L（P〈0.05）;LDL-C（2.08±1.44）mmol/L vs（0.93±0.38）mmol/L（P〈0.05）。结论二甲双胍可能通过上调2型糖尿病大鼠脂肪组织AMPKα2表达,调节机体脂代谢。     

阿托伐他汀对慢性心力衰竭患者左室重构和心功能的影响

目的：探讨阿托伐他汀对慢性心力衰竭患者左室重构和心功能的影响。方法：98例慢性心力衰竭患者随机分成治疗组（50例）和对照组（48例）。对照组给予强心、利尿、扩血管治疗,治疗组在此基础上加用阿托伐他汀10 m g/d。分别于治疗前、后6个月查彩超评价心功能,测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和血脂水平。结果：治疗组6个月后左心室射血分数（LVEF）较对照组有明显改善（P〈0.01）;治疗组LDL-C、左心室舒张末容积指数（LVEDV I）、左心室收缩末容积指数（LVESV I）及TNFα-、IL-6水平减低,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）。结论：阿托伐他汀能降低TNFα-、IL-6水平,改善心肌重构和心功能。     

白术内酯Ⅲ调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对脓毒症大鼠肝损伤的影响

目的 探究白术内酯Ⅲ(AtractylideneⅢ，Atr-Ⅲ)对脓毒症大鼠肝损伤的影响以及对腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/去乙酰化酶1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节作用。方法 将60只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、阳性组、Atr-Ⅲ低、高剂量组、Atr-Ⅲ高剂量+AMPK抑制剂组。检测大鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平；苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化；TUNEL染色检测肝细胞凋亡情况；ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性；Western blot检测通路相关蛋白表达情况。结果 与假手术组相比，模型组大鼠肝细胞损伤严重，AST、ALT、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、细胞凋亡率、p65 NF-κB磷酸化表达均升高，SOD、CAT活性、AMPK磷酸化、SIRT1蛋白表达均降低(P <0.05)；与模型组相比，阳性组和Atr-Ⅲ组大鼠肝细胞形态恢复，AST、ALT、IL-...     

间歇性低氧干预对心肌梗死大鼠AMPKα1/SIRT3通路及心肌能量代谢的影响

目的探讨间歇性低氧(IH)干预对心肌梗死(MI)大鼠心肌能量代谢的影响及可能作用机制。方法采用随机数字表法将21只SD大鼠分为假手术组、心梗组及观察组, 将心梗组及观察组大鼠制成左冠状动脉前降支(LAD)闭塞心肌梗死模型。于造模结束1周后假手术组及心梗组大鼠均给予常氧干预, 观察组大鼠则给予4周(4 h/d, 5 d/周)间歇性低氧干预。于造模后1周、IH干预4周后检测各组大鼠左心室射血分数(LVEF);于IH干预4周后检测各组大鼠心肌纤维化指数、线粒体结构、ATP含量、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα1)及Sirtuins蛋白家族成员3(SIRT3)蛋白表达水平。结果经IH干预4周后与假手术组比较, 心梗组LVEF、线粒体数量、ATP含量、AMPKα1及SIRT3蛋白表达均明显降低(P<0.05), 心肌纤维化指数明显增加(P<0.05);观察组LVEF明显降低(P<0.05), 心肌纤维化指数明显增加(P<0.05), 线粒体数量、ATP含量、AMPKα1及SIRT3蛋白表达组间差异均无统计学意义(P>0.05)。与心梗组比较, 观察组LVEF、线粒体数...     

淫羊藿苷介导AMPK/PGC-1α/GLUT4通路对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝损伤和脂代谢的调节作用

目的探究淫羊藿苷(ICA)介导AMPK/PGC-1α/GLUT4通路对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)损伤和脂代谢的调节作用。方法 50只SD大鼠随机分为对照组(Control组),模型组(NAFLD组),淫羊藿苷低、中、高剂量组(20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg ICA),10只每组。Control组大鼠常规饮食喂养,剩余4组采用高脂饲料喂养方式建立NAFLD模型,12周后进行给药治疗。采用全自动生化分析仪分析血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)含量; HE染色观察肝脏组织形态; ELISA法检测肝脏乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量; Western blot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达;免疫组化检测肝脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素6(IL-6)阳性表达。结果相比较于Control组,NAFLD组大鼠血清TC、TG及LDL含量均升高,而HDL含量降低(P 0. 05);肝脏组织SOD含量及Bcl-2、AMPKα1、PGC-1α、GLUT4及CPT-1蛋白相对表达量均降低,而MDA、LDH含量,Bax、ACC蛋白相对表达量及TNF-α及IL-6阳性细胞数占比均升高(P 0. 05)。相比较于NAFLD组,ICA各给药组大鼠血清TC、TG及LDL含量均降低,而HDL含量升高(P 0. 05);肝脏组织SOD含量及Bcl-2、AMPKα1、PGC-1α、GLUT4及CPT-1蛋白相对表达量均升高,而MDA、LDH含量,Bax、ACC蛋白相对表达量及TNF-α及IL-6阳性细胞数占比均降低(P 0. 05),且均呈剂量依赖性。结论 ICA对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪肝损伤具有明显的改善作用,其可能通过介导AMPK/PGC-1α/GLUT4通路调节脂代谢,发挥对肝脏的保护作用。     

2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤转录因子E2相关因子2/血红素氧合酶1信号通路的表达及白藜芦醇的干预研究

目的探讨白藜芦醇在糖尿病心肌缺血再灌注（I/R）损伤中对转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶1（HO-1）信号通路的影响。 方法将2型糖尿病模型制备成功的60只大鼠分成假手术组、I/R组、白藜芦醇（R）组、白藜芦醇+ EX527（RE）组,每组各15只。采用结扎左冠状动脉前降支30 min、恢复灌注120 min的方法制备心肌I/R损伤模型。R组及RE组大鼠于术前7 d连续腹腔注射白藜芦醇15 mg/kg,假手术组及I/R组大鼠腹腔注射等容量的等渗NaCl溶液,RE组大鼠于缺血前15 min尾静脉注射EX527 1 μg/kg。于再灌注120 min末,采用酶联免疫吸附测定法检测血清乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸激酶同工酶（CK-MB）。随后处死大鼠取心肌组织,采用苏木素-伊红（HE）染色观察心肌病理学变化,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑法检测心肌梗死面积百分比,并检测心肌组织丙二醛含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。采用Western-blotting法检测各组大鼠心肌沉默信息调节因子1（SIRT1）、Nrf2及HO-1蛋白表达水平。 结果HE染色可见,假手术组大鼠心肌细胞轻度断裂、水肿,少量炎症细胞浸润;I/R组大鼠心肌纤维排列杂乱,心肌间质充血水肿伴大量炎症细胞浸润;R组大鼠心肌组织结构相对整齐,偶见核固缩;RE组大鼠心肌纤维排列杂乱,核固缩现象明显,炎症细胞浸润明显。假手术组大鼠无心肌梗死发生,I/R组大鼠心肌梗死面积占比为（51 ± 6）%,R组大鼠占比为（37 ± 4）%,RE组大鼠占比为（41 ± 3）%,各组间比较差异有统计学意义（F = 160.703,P < 0.001）,R组及RE组大鼠心肌梗死的占比面积均显著小于I/R组大鼠,且R组大鼠心肌梗死面积的占比更小（P均<0.05）。各组大鼠血清LDH、CK-MB、丙二醛、SOD、SIRT1、Nrf2及HO-1表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 144.101、158.545、53.682、99.273、50.121、59.153、143.702,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,与假手术组比较,I/R组、R组、RE组大鼠的LDH、CK-MB及丙二醛含量均显著升高,SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均显著降低（P均<0.05）;与I/R组比较,R组及RE组大鼠的LDH、CK-MB及丙二醛含量均显著降低,SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均显著升高,且LDH、CK-MB及丙二醛含量在R组大鼠更低,SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平在R组大鼠更高（P均<0.05）。 结论白藜芦醇可通过促进SIRT1激活Nrf2/HO-1信号通路来减轻2型糖尿病大鼠心肌的氧化应激反应及心肌I/R损伤。     

抗α1肾上腺素能受体自身抗体对糖尿病大鼠心肌TGF-β1和smads2/3表达的影响

目的 探讨抗α1-肾上腺素能受体自身抗体（抗α1-R抗体）对糖尿病（DM）大鼠心肌损害的作用机制.方法 （1）以抗α1-R抗体阳性的DM大鼠（抗体阳性组）为模型,设立抗α1-R抗体阴性DM大鼠（抗体阴性组）、正常Wistar大鼠（健康对照组）为对照.（2）用酶联免疫吸附试验法检测抗α1-R抗体.（3）用电子天秤称体重.（4）用免疫组织化学方法 检测左心室心肌组织的TGF-β1和smads2/3的表达,并在光镜下观察心脏病理变化,计算平均光密度值（MOD）.（5）在电镜下观察心脏超微结构的改变.结果 （1）实验结束时,DM抗体阳性组和抗体阴性组大鼠体重均明显低于实验前（均P〈0.01）,健康对照组大鼠体重明显高于实验前（P〈0.01）.（2）TGF-β1和smads2/3在抗体阳性组DM大鼠心肌组织中过度表达,MOD值明显高于抗体阴性组和健康对照组（分别P〈0.05,P〈0.01）.（3）心肌超微结构显示DM大鼠心肌纤维变性坏死,肌原纤维之间糖原减少,肌质网肿胀、扩张,线粒体大小悬殊,或肿胀或萎缩,微血管基底膜轻度增厚,其中抗体阳性组损伤更严重;健康对照组未见明显异常.结论 抗α1-R抗体可影响DM大鼠心肌组织的TGF-β1和smads2/3的表达,并且可能通过增加促纤维化生长因子TGF-β1的表达导致DM大鼠心肌损害的进展、加重.     

阿托伐他汀对扩张型心肌病患者细胞因子及心功能的影响

目的研究阿托伐他汀对扩张型心肌病患者血清细胞因子水平及心功能的影响，探讨他汀类药物应用于非缺血性心肌病的可行性。方法69例心功能NYHAⅠ、Ⅱ级的扩张型心肌病患者随机分为2组。阿托伐他汀组（35例）每日口服立普妥20mg，对照组（34例）不服用降脂药物。于实验开始及6个月结束时采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素石（IL-6）水平；采用全自动免疫分析系统测定血清超敏C-反应蛋白（hs—CRP）水平，并测定血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）等水平的变化；通过超声心动图评价左心室舒张末期内径（LVEDD）、短轴缩短率（FS）、左心室舒张末期容积（LVEDV）、左心室收缩末期容积（LVESV）及射血分数（EF）。结果①阿托伐他汀组较对照组TNF—α、IL-6、hs—CRP、TC、LDL-C水平及TC／HDL—C明显降低（均P〈0．01）；②阿托伐他汀组较对照组LVESV明显减低（P〈0．05），而FS、EF明显增高（均P〈0．01）。结论短期应用阿托伐他汀可以改善扩张型心肌病患者的心功能，降低血清炎性细胞因子和炎症标志物的水平。阿托伐他汀很可能成为治疗非缺血性心肌病的又一有效药物。     

白藜芦醇通过AMPK/PGC-1α信号通路缓解三硝基丙酸诱导的亨廷顿病模型小鼠的作用研究

目的以三硝基丙酸诱导亨廷顿病模型为切入点,从记忆功能、平衡协调能力、脑组织的生化指标以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)表达等多角度探讨白藜芦醇缓解亨廷顿病的作用机制。方法 50只雄性3月龄无特定病原体级ICR小鼠,体重18～22 g。按照随机数字表法将其分为正常对照组、模型组和白藜芦醇低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均采用三硝基丙酸诱导亨廷顿病模型,模型组与正常对照组给予等量蒸馏水,白藜芦醇低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg/kg白藜芦醇灌胃,1次/d。连续灌胃14 d后检测各组小鼠记忆功能、平衡协调能力、脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),超氧化物歧化酶(SOD)、Na⁺-K⁺-ATPase酶表达水平、AMPK和PGC-1α阳性表达情况及脑组织中AMPK和PGC-1α蛋白表达量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠的逃避潜伏期的延长,差异有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,随白藜芦醇剂量的增加,白藜芦醇组小鼠的逃避潜伏期缩短,差异...     

人参总皂苷经HIF-1α/HO-1信号通路减轻脓毒症大鼠心肌损伤的机制研究

目的观察人参总皂苷(TG)对脓毒症心肌损伤(SMI)大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的调控作用,探究其治疗SMI的作用机制。方法SD雄性大鼠给予内毒素+脂多糖诱导建立大鼠SMI模型,随机分为模型组(SMI组),TG低(20mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量组和乌司他丁阳性对照组(阳性组,10 000 U/kg)组,每组10只。另取10只,给予生理盐水设置为正常对照组(Normal组)。观察各组大鼠毛发、活动、精神状态等一般行为后,麻醉处死,取血清,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠心功能指标心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平及血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素-8(IL-8)含量;取心脏组织,用苏木精-伊红试剂(HE)染色观察心脏组织病理损伤形态;用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测心脏组织HIF-1αmRNA、HO-1mRNA相对表达水平;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心脏组织HIF-1α、HO-1、IL-8及TNF-α蛋白相对表达水平。结果与Normal组比较,SMI组大鼠出现精神萎靡、毛发松乱、活动减少、眼睑部出现黏稠分泌物等脓毒症表现,心肌细胞水肿、坏死、炎性浸润等病理损伤现象明显,血清TNF-α、IL-8、cTnI、CK-MB含量和心肌组织HIF-1αmRNA及蛋白、HO-1 mRNA及蛋白、IL-8及TNF-α蛋白表达升高(P <0.05)。与SMI组比较,TG低、中、高剂量组及阳性组大鼠心肌组织HIF-1αmRNA及蛋白、HO-1 mRNA及蛋白表达升高(P <0.05),脓毒症表现改善,病理损伤现象减弱,血清cTnI、CK-MB含量以及血清及组织中IL-8和TNF-α表达降低(P <0.05),且TG各剂量组上述指标改善呈剂量依赖性。与TG高剂量组比较,阳性组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TG可激活HIF-1α、HO-1基因及蛋白表达,抑制炎症反应,改善SMI大鼠心肌损伤。     

化橘红对糖尿病心肌病心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用

目的观察化橘红对糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用。方法（1）构建DCM大鼠模型,将40只大鼠用链脉佐菌素处理后,15只血糖浓度<16.7 mmol/L的大鼠纳入空白对照组,剩余的25只血糖浓度>16.7 mmol/L的大鼠随机分为DCM组（n=11）与化橘红组（n=14）。化橘红组大鼠给予化橘红400 mg/(kg·d)灌胃,DCM组和对照组给予等量生理盐水灌胃。测量各组大鼠不同时间点血糖（1、8、16、22周）;测量心功能相关指标;光镜下观察心肌形态学改变,电镜下心肌纤维化定量分析;测定心肌胶原总量;免疫组化测定心肌胶原;Western印迹检测心肌细胞TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白含量;RT-PCR检测TGF-β1、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白的mRNA表达。（2）构建心肌成纤维细胞增殖模型,随机分为两组,化橘红预处理组为血清培养基加0.5 mmol/L化橘红,而对照组为等量血清培养基。检测两组一氧化氮变化、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况。结果化橘红组的大鼠各时间点血糖、心肌纤维化、心肌胶原总量及各型胶原较DCM组显著下降,心收缩、舒张功能明显改善（P<0.05）,TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1蛋白的表达明显下调（P<0.05）,相关蛋白的mRNA表达也明显抑制（P<0.05）。化橘红预处理组一氧化氮、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况较对照组相比明显下降（P<0.05）。结论化橘红对DCM中TGF-β1/Smad通路起到了抑制作用,从而调控其下游的MMPs/TIMPs等通路,改善DCM的心肌纤维化进程,抑制心肌肥厚,减少心肌的损伤。     

针灸预处理对大鼠心肌缺血/再灌注后高迁移率族蛋白B1的影响

目的：探讨针灸预处理对大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）后的保护作用以及对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达的影响。方法选择60只Wistar大鼠,按随机数字表法分为假手术组、心肌I/R模型组、针灸预处理组,每组20只。采用结扎冠状动脉左室支左心耳下缘约0.5 cm处阻断血流10 min后再灌注1 h制备I/R损伤模型;假手术组仅穿线不结扎;针灸预处理组于I/R前7 d给予每日1次电针内关穴20 min,连续治疗7 d。采用苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观察心肌组织病理学变化,半定量积分法计算3组心肌组织病理学评分;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）的含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测心肌组织HMGB1、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、TNF-α的mRNA及蛋白表达水平。结果光镜下可见心肌I/R模型组心肌纤维部分断裂,心肌细胞大片状坏死,边界不清,细胞出现浓缩、破裂、溶解、甚至消失,间质水肿并伴大量炎性细胞浸润;针灸预处理组上述表现较心肌I/R模型组明显减轻。与假手术组比较,心肌I/R模型组HMGB1、TNF-α、cTnT含量和组织病理学评分均明显升高〔HMGB1（μg/L）：9.64±1.16比2.15±.031,TNF-α（μg/L）：91±22比19±5, cTnT（μg/L）：1.50±0.35比0.07±0.03,组织病理学评分（分）：2.5±0.3比0.0±0.0,均P＜0.01〕,HMGB1、MCP-1、TNF-αmRNA和蛋白表达均明显升高（HMGB1 mRNA：1.42±0.16比0.02±0.00,MCP-1 mRNA：0.46±0.06比0.01±0.00,TNF-αmRNA：0.75±0.04比0.03±0.00;HMGB1蛋白：1.08±0.01比0.02±0.01, MCP-1蛋白：0.92±0.03比0.40±0.01,TNF-α蛋白：1.10±0.02比0.35±0.01,P＜0.05或P＜0.01）;与心肌I/R模型组比较,针灸预处理组HMGB1（6.58±0.73）、TNF-α（63±19）、cTnT（1.15±0.31）含量均明显降低（均P＜0.01）,HMGB1、MCP-1、TNF-αmRNA和蛋白表达明显降低（mRNA表达分别为0.74±0.12、0.18±0.02、0.10±0.03,蛋白表达分别为0.40±0.01、0.36±0.02、0.50±0.02,均P＜0.05）,组织病理学评分（1.2±1.0）明显降低（P＜0.01）。结论针灸预处理可减轻大鼠心肌I/R损伤,其机制可能与减轻HMGB1介导的晚期炎症反应有关。     

NGF预处理对AMI大鼠心肌VEGF及其受体KDR/flk-1表达的影响

目的研究神经生长因子（NGF）预处理对急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌中VEGF及其受体KDR/flk-1表达的影响。方法雄性成年Wistar大鼠60只,随机分为3组：NGF预处理组和非NGF预处理组和对照组（每组20只）。大鼠NGF预处理使用注射用鼠神经生长因子（0.5μg/kg）尾静脉注射。采用电凝烧灼左冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死动物模型。观察各组大鼠心肌损伤的病理改变;以RT-PCR方法检测大鼠心肌组织中血管内皮生长因子（VEGF）及其受体KDR/flk-1的表达情况。结果大鼠心肌坏死面积组间比较差异有统计学意义（F=12.13,P〈0.01）,NGF预处理组（25.41±9.06）%明显少于非NGF组（40.08±11.38）%,P〈0.01。大鼠心肌VEGF、KDR/flk-1mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F=18.23,14.10,P均〈0.01）;NGF预处理组VEGF（45.41±11.54）、KDR/flk-1（47.40±7.83）均高于非NGF组VEGF（32.34±8.10）、KDR/flk-1（31.09±7.88）,P均〈0.01。大鼠心肌VEGF mRNA表达与其受体KDR/flk-1 mRNA表达呈正相关关系（r=0.691,P〈0.01）。结论 NGF预处理可能通过上调VEGF及其受体表达,增加大鼠心肌中新生血管密度,减轻AMI大鼠心肌损伤。     

sOX40L对急性冠脉综合征诊断价值的探讨

目的探讨血浆可溶性OX40L（sOX40L）的水平在急性冠脉综合征（ACS）中的意义及与C反应蛋白（CRP）和血脂的关系。方法按照WHO关于冠心病的诊断标准,并结合冠状动脉造影结果,选择急性心肌梗死（AMI）组25例,不稳定心绞痛（UA）组24例,稳定型心绞痛（SA组）22例,对照组18例。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定标本中的sOX40L水平,并同时测定CRP、血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。结果 AMI组sOX40L水平[（14.18±2.75）ng/ml]和UA组sOX40L水平[（13.02±2.92）ng/ml]明显高于SA组[（7.57±2.12）ng/ml]和对照组[（7.77±2.04）ng/ml]（P〈0.01）;sOX40L与CRP,TC/HDL-C均呈显著正相关,与HDL-C呈负相关。结论 AMI和UA组血浆中sOX40L水平明显高于SA组和对照组,且与炎症标志物CRP以及血脂TC/HDL-C呈显著正相关,提示sOX40L有可能作为ACS早期预测的参考指标。     

辛伐他汀在充血性心力衰竭治疗中的疗效观察

目的观察辛伐他汀对充血性心力衰竭（CHF）患者心功能的影响。方法选择住院病例104例（心功能Ⅱ-Ⅳ级），随机分为治疗组（58）例，对照组（46例）。入院当时所有患者给予卡托普利、螺内酯等基础治疗，治疗组加辛伐他汀20mg／d，次日晨化验CK-Mb、TC、LDL-C、CRP。病例稳定后行超声心动图检查。6个月后复查上述指标。结果6个月后二组患者心功能多项指标及血清TC、LDL-C、CRP、左室射血分数（LVEF）及左室流出道最大血流速度（VLvor）改善较对照组有统计学意义（P〈0.05）。亚组分析结果：冠心病心衰治疗组心功能各项指标的改善均优于对照组（P〈0.05），TC、LDL-C、CRP较对照组下降更显著（P〈0.01）。结论CHF患者在全面拮抗神经-内分泌的基础上，加用辛伐他汀可以进一步改善心力功能并降低TC、LDL-C、CRP。冠心病心力衰竭患者受益更大。     

应用CRISPR/Cas 9 系统构建肺癌细胞系获得AMPKα1 基因敲除的稳定细胞株

目的 利用CRISPR/Cas 9 系统在人肺癌细胞系A549 和H460 中获得敲除腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1(adenosine monphosphate-activated protein kinase, AMPKα1) 的稳定表达细胞系。方法 根据CRISPR/Cas 9 靶点设计原则,设计三条引导RNA（sgRNA）,分别构建AMPKα1-CRISPR/Cas9 KO 及其HDR 质粒。将质粒转染至A549 和H460 细胞后,筛选稳定的单克隆细胞株。用Western blot 鉴定筛选获得的肺癌细胞株是否表达AMPKα1。实验被分为原始对照组和敲除组,采用MTT 法检测AMPKα1 的肺癌细胞增殖情况。结果 经过CRISPR/Cas 9 系统处理后,筛选获得的A549 和H460 敲除AMPKα1 稳定细胞株与原始细胞株A549 和H460 相比,Western blot 检测不到AMPKα1蛋白质的表达,差异具有统计学意义(t=137.7, 79.17, 均P ＜ 0.000 1)。MTT 结果显示,筛选获得的A549 和H460 敲除AMPKα1 的稳定细胞株与原始细胞株A549 和H460 相比,敲除细胞株的增殖速度明显减弱,差异具有统计学意义（t=3.956 ～ 28.16,均P ＜ 0.05）。结论 CRISPR/Cas 9 系统成功建立敲除AMPKα1 表达的稳定肺癌细胞株,为进一步研究AMPKα1 在肺癌发生发展中的作用提供细胞模型。     

电针丰隆穴对高脂血症大鼠血脂及肝脏组织炎症细胞因子的调控作用

目的:探讨电针丰隆穴对高脂血症大鼠肝脏组织炎症细胞因子的调控作用。方法:将30只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组各10只。电针组给予丰隆穴电针治疗。4周后,检测各组大鼠血脂水平,即总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,ELISA检测各组大鼠肝脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)蛋白水平变化。结果:治疗后,血脂水平比较,与正常组比较,模型组大鼠TC、TG及LDL-C均显著升高(P<0.01,0.05),HDL-C显著降低(P<0.05),电针组的TC、LDL-C均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠TC、TG及LDL-C均显著降低(P<0.01,0.05),HDL-C显著升高(P<0.05)。肝脏组织炎症因子蛋白水平比较,与正常组比较,模型组炎症因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ均有显著性升高(P<0.05,0.01),电针组炎症因子差异均无统计学意义。与模型组比较,电针组炎症因子均明显降低(P<0.05,0.01)。结论:电针丰隆穴能够明显下调高脂血症大鼠血脂中TC、LDL-C水平,并能降低肝脏组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ的蛋白水平变化,对高脂血症具有一定的治疗作用。     

老年慢性心力衰竭患者血脂及血清C-反应蛋白水平与心功能关系

目的：通过测定老年慢性心力衰竭（CHF）患者的血脂及血清C-反应蛋白（CPR）血浓度．了解血脂及CPR在老年CHF发生、发展过程中的作用。方法：选择心功能Ⅱ-Ⅳ级（NYHA）老年CHF患者126例，同期住院惠有上呼吸道感染或住院体检的老年人42例。用全自动生化分析仪检测血清CPR，血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。结果：老年慢性心衰急者血清CPR浓度均明显增高，具有显著差异（P〈0.05）。且随着NYHY心功能级别增高，血清CPR水平明显升高（P〈0.001）。血清TC、TG及HDL-C在不同NYHY心功能分级组存在显著差异，尤其在心功能Ⅳ级组的TC、TG均明显低于心功能Ⅱ、Ⅲ级组，具有显著差异，但LDL-C未显示出有显著的改变。心功能分级与CPR、TC、TG、HDL-C均呈显著负相关（P〈0．05及P〈0．01），而与LDL-C无明显相关（P〉0．05）。结论：老年CHF患者血脂、血清CRP与CHF程度相关，NYHA分级方法结合血脂、血清CRP也许更能客观评价心衰的严重程度，对评估老年心衰患者预后及其临床诊治价值有待进一步的研究。