骆驼蓬总碱体外抗肿瘤实验研究

目的研究骆驼蓬总碱对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。方法采用MTT法检测不同质量浓度骆驼蓬总碱分别在给药24,48和72h时对鼠源S180肉瘤细胞、H22肝癌细胞及人源HepG2肝癌细胞体外增殖的抑制情况,倒置显微镜下观察HepG2肝癌细胞形态的变化。结果骆驼蓬总碱各质量浓度对体外培养的S180,H22和HepG2肝癌细胞均有较好的抑制作用,且以72h抑制作用相对较好,半数抑制质量浓度(IC50)分别为299.99,306.34和28.21μg.mL-1。结论骆驼蓬总碱对体外培养肿瘤细胞有较好的抑制作用。     

干扰素γ诱导肝癌HepG2细胞表达B7分子的实验研究

目的研究干扰素γ(IFN-γ)对人肝癌细胞B7分子表达的影响。方法选用人肝癌HepG2细胞进行体外培养,经过不同浓度的IFN-γ干预后,采用MTT法检测细胞增殖作用,RT-PCR检测B7-1和B7-2mRNA的表达。结果不同浓度的IFN-γ对HepG2细胞体外生长有明显抑制作用;干预后HepG2细胞的B7基因表达明显增加。结论IFN-γ能直接抑制HepG2细胞增殖,显著上调HepG2细胞B7基因的表达,具有一定的抗肿瘤效应。     

白藜芦醇对人肝癌细胞系HepG2抑制作用的探讨

目的:观察白藜芦醇(Res)对体外培养的人肝癌细胞系HepG2生长增殖的影响.方法:采用MTT法、流式细胞仪分析Res对肝癌细胞系HepG2细胞生长的影响及其细胞周期的变化,并且检测端粒酶的活性.结果:Res对肝癌细胞系HepG2的增殖具有抑制作用,IC50为5.91mg/L,流式细胞仪显示,Res能引起肝癌细胞系HepG2细胞的S期阻滞,Res也能显著地抑制端粒酶的活性.结论:Res通过改变肝癌细胞系HepG2细胞的细胞周期分布来抑制人肝癌细胞系HepG2细胞的生长.     

相思子蛋白P2抗肝癌作用及对端粒酶活性影响

目的研究相思子蛋白P2对肝癌细胞生长的抑制作用及机制。方法体外实验:MTT法检测相思子蛋白P2对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪检测对HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响。TRAP-SYBR-Green染色法检测相思子蛋白P2作用前后细胞端粒酶活性的改变。体内实验:相思子蛋白P2 50、75、100μg.kg-1连续灌胃给药10 d,观察对小鼠肝癌H22移植性肿瘤的生长抑制作用。小鼠口服给药急性毒性观察。结果相思子蛋白P2可明显抑制HepG2细胞增殖,IC50值为5.172×10-3 mg.L-1。在5×10-5～1×10-3 mg.L-1剂量作用下,可引起HepG2细胞凋亡。相思子蛋白P2主要将细胞周期滞留在S期,从而抑制了肿瘤细胞增殖。同时可使细胞端粒酶活性明显降低,其下调端粒酶活性的作用随药物浓度的增加而明显增强。相思子蛋白P2对小鼠H22肝癌细胞生长有明显抑制作用,100μg.kg-1抑瘤率达62.47%,且对胸腺和脾脏指数的影响较环磷酰胺小。小鼠口服给药LD50值为6.77 mg.kg-1。结论相思子蛋白P2体内外均可明显抑制肝癌细胞的生长,其抗肿瘤作用可能与下调细胞端粒酶活性、改变细胞周期分布,诱导细胞凋亡有关。     

索拉菲尼对肝癌细胞的抑制作用及其对CDK5表达水平的影响

目的探讨索拉菲尼对体外培养的人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用及其对周期素依赖性蛋白激酶5表达的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞株,采用MTT法检测不同浓度索拉菲尼对HepG2细胞增殖的影响;同时经细胞爬片后,采用免疫细胞化学法检测肝癌细胞内CDK5的表达情况。结果索拉菲尼可使人肝癌细胞增殖率明显下降,且呈明显的时间-剂量依赖效应;药物作用48h后,给药组CDK5的表达较对照组明显减少,其着色程度随药物浓度增高而逐渐变淡。结论索拉菲尼对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,并能下调肝癌细胞中CDK5的表达,从而起到抗肿瘤的治疗作用。     

熊果酸的抗肿瘤作用

目的 研究熊果酸的抗肿瘤活性.方法 体外用MTT比色法测定熊果酸对肿瘤细胞HepG2和S180的增殖抑制作用,再用DNA凝胶电泳法测定熊果酸对HepG2细胞凋亡的诱导作用;体内采用小鼠实体瘤模型,观察熊果酸对HepG2和S180实体瘤的抑制作用.结果 熊果酸对HepG2和S180的增殖有良好的抑制作用,48h内对细胞半数生长的抑制剂量(IC50)分别为12.5μg/ml和13.9μg/ml.同时熊果酸能够诱导HepG2发生凋亡.20.0μg/ml熊果酸对HepG2和S180实体瘤抑制率分别达到52.98%和44.41%.结论 熊果酸通过抑制增殖和诱导凋亡对肿瘤细胞株HepG2和S180表现出良好的抗肿瘤活性.     

阿托伐他汀抑制肝癌细胞增殖作用的研究

摘要　目的：体外观察阿托伐他汀对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期及COX-2蛋白表达的影响。方法：取对数期人肝癌HepG2细胞,加入阿托伐他汀使其终浓度为0μM、0.1μM、1μM、10μM、100μM,采用细胞计数法及噻唑蓝(MTT)法观察阿托伐他汀对HepG2细胞增殖的影响,流式细胞仪(FCM)研究阿托伐他汀对细胞周期的作用,免疫细胞化学观察阿托伐他汀对COX-2蛋白表达的影响。结果：1.体外阿托伐他汀呈浓度和时间依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,但0.1μM组与0μM组差异无统计学意义。2. 细胞周期分析显示,阿托伐他汀作用24h后,呈浓度依赖性改变细胞周期分布,一方面增高G0/G1期细胞的比例,一方面降低S期及G2/M期的细胞比例,但细胞凋亡不明显。3.体外阿托伐他汀呈浓度依赖性地抑制HepG2细胞COX-2蛋白的表达。结论：体外阿托伐他汀对HepG2细胞增殖有抑制作用,该作用可能与使细胞生长阻滞于G0/G1期及抑制COX-2蛋白表达有关。     

杠柳毒苷体外抑制肝癌细胞和乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的探讨杠柳毒苷在体外对人乳腺癌MDA—MB．468细胞和人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法MTT法观察杠柳毒苷对人乳腺癌MDA-MB-468细胞和人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞术观察杠柳毒苷对两种肿瘤细胞的细胞增殖周期作用。结果与对照组比较,杠柳毒苷能明显抑制两种肿瘤细胞的增殖,其抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。流式细胞仪检测发现,杠柳毒苷对乳腺癌MDA-MB-468细胞和肝癌HepG2细胞持续作用24h后,可以使GdG1期细胞增多,G2／M期细胞减少。结论杠柳毒苷具有抑制乳腺癌MDA-MB-468细胞和肝癌HepG2细胞增殖的作用,并可将乳腺癌MDA-MB-468细胞和肝癌HepG2细胞的细胞生长周期阻滞在G0／G1期。     

大蒜素对人肝癌细胞HepG2的抑制和诱导细胞凋亡作用

目的 观察大蒜素对人肝癌细胞HepG2的抑制和诱导细胞凋亡作用.方法 用不同浓度大蒜素处理对数生长期的人肝癌细胞HepG2.比色还原法检查4、8、16 h时HepG2细胞生长的抑制率;Hoechest荧光染色观察8 h时细胞形态的变化;JC-1检测40 mg/L大蒜素作用4 h后细胞线粒体跨膜电位的变化;免疫组化法检测经浓度为40 mg/L大蒜素作用4 h后其对细胞色素C的影响.结果 与无药阴性对照组比较,大蒜素能明显抑制HepG2细胞的增殖,且抑制率随浓度增加和作用时间延长而升高(P<0.01).Hoechst 33258荧光染色观察到细胞凋亡形态学特征.结论 大蒜素对人肝癌细胞株HepG2有明显的生长抑制作用,诱导人肝癌细胞株HepG2的凋亡.这可能与其通过线粒体途径引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放有关.     

拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331对HepG2细胞体外生长的抑制作用

目的:研究拓扑异构酶Ⅱ抑制剂GL331体外对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法:采用MTT法测定GL331对人肝癌HepG2细胞存活率的影响;克隆原形成法检测对细胞集落形成的影响;DAPI染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡百分率的变化;蛋白免疫印迹技术观察Bax,Bcl-2,Fas,FasL,Akt/p-Akt,caspase-3,clea-caspase等相关蛋白水平变化;caspase-3酶活性检测试剂盒检测对蛋白酶caspase-3活性的影响。结果:GL331可以浓度和时间依赖性地抑制HepG2细胞的增殖,同时促进HepG2细胞凋亡,提高Bax/Bcl-2比率,增加FasL的表达,降低p-Akt的表达。结论:GL331对HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用,其作用机制与诱导HepG2细胞发生凋亡,调节凋亡相关蛋白的表达,并抑制存活通路相关蛋白的活化有关。     

梓醇通过调控肿瘤血管生成及能量代谢抑制肝癌生长

目的探讨梓醇对HepG2肝癌细胞增殖、侵袭、生长、血管生成和能量代谢的影响。方法细胞增殖实验研究梓醇对HepG2细胞体外增殖的影响;LDH试剂盒检测梓醇对HepG2细胞的毒性作用;构建人肝癌HepG2裸小鼠细胞移植瘤模型,研究梓醇对体内肝癌生长的影响;Transwell实验研究梓醇对HepG2细胞体外侵袭的影响;小管形成实验检测梓醇对HepG2细胞诱导的血管生成的影响;免疫组化研究梓醇对移植瘤中能量代谢关键指标单羧酸转运蛋白-1 (monocarboxylate transporter-1,MCT-1)、单羧酸转运蛋白-4(monocarboxylate transporter-4,MCT-4)和葡萄糖转运蛋白1(Glucose transporter 1,GLUT1)蛋白表达的影响。结果在一定浓度范围内,梓醇能够抑制HepG2细胞的体外增殖及侵袭,且具有一定的浓度依赖性;LDH检测显示其在50μmol·L~(-1)时对HepG2细胞表现出毒性作用;与对照组相比,梓醇能够显著抑制HepG2裸小鼠移植瘤的体内生长;HepG2细胞培养上清液能够显著刺激HUVEC细胞的小管形成,而梓醇能够在体外抑制HepG2细胞诱导的小管形成;梓醇能够抑制HepG2裸小鼠移植瘤组织中MCT-1,MCT4和GLUT1蛋白的表达。结论梓醇具有抑制肝癌细胞增殖、侵袭及生长的能力,其机制可能与抑制肝癌的血管生成及肿瘤能量代谢密切相关。     

姜黄素对肝癌的抑制作用实验研究

目的　探讨姜黄素对肝癌的抑制作用。方法　以MTT法观察姜黄素对人肝癌细胞BEL 740 2的抑制作用 ;建立大鼠移植性肝癌模型 ,观察姜黄素对肝癌实体瘤生长的抑制作用。结果　姜黄素具有明显的体外抑制肝癌细胞作用 ,IC50 为 0 .41mg ml;体内抑制肝癌生长作用不明显 ,但可显著延长存活时间     

雷公藤甲素对肝癌细胞株HepG2顺铂化疗敏感性的影响

目的 观察雷公藤甲素对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用,以及对顺铂化疗敏感性的影响.方法 应用不同浓度雷公藤甲素和顺铂单独或联合作用于体外培养的肝癌HepG2细胞不同时间,MTT方法 观察药物对细胞生长抑制作用;Western blot方法 分析细胞胞核中核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白表达变化;流式细胞术检测细胞凋亡;Caspase-3活性检测试剂盒分析其凋亡机制.结果 雷公藤甲素对HepG2细胞的增值有明显生长抑制作用,呈剂量和时间依赖性;联用顺铂与单用药比较,明显提高细胞生长抑制率和凋亡率(P<0.05);HepG2细胞胞核可见NF-κB p65蛋白少量表达,单用顺铂后能使其表达增强,联用雷公藤甲素后可逆转此现象;各药物组细胞中Caspase-3活性显著增高,且联合用药组高于单用药组(P<0.05).结论 雷公藤甲素对肝癌HepG2细胞有明显的生长抑制作用,呈剂量和时间依赖性,并能增强顺铂化疗敏感性.其机制可能与抑制胞核内NF-κB p65蛋白表达和增加Caspase-3活性有关.     

3种方法提取洋葱中的类黄酮物质对肝癌细胞株HepG2的作用

目的研究3种方法提取洋葱中的类黄酮物质对肝癌细胞株HepG2的作用。方法采用水煎煮法、50%乙醇回流法及50%乙醇冷浸法从洋葱中提取类黄酮物质,将其分别加入处于对数生长期的HepG2肝癌细胞中培养,以PBS为对照组,20、30、40、50、70μg.ml-1的类黄酮物质为实验组,用MTT法分别测定给药前及给药72 h后各浓度组在490 nm处的吸光度。结果水煎煮法、50%乙醇回流法及50%乙醇冷浸法提取的类黄酮物质抑制HepG2肝癌细胞生长的起始浓度分别为40、50、40μg.ml-1,随着浓度的增加,抑制作用显著增强。结论洋葱中类黄酮物质对体外培养的HepG2肝癌细胞表现出明显的抗肿瘤活性,50%乙醇冷浸法所提类黄酮物质的抗肿瘤活性最强。     

槲皮素抑制人肝癌细胞HepG2的体内外活性研究

目的系统评价槲皮素( Qu)体内外干预 HepG2人肝癌细胞增殖效果。方法使用 MTT法检测不同浓度 Qu在不同作用时间对 HepG2细胞的体外抑制活性;采用裸鼠移植瘤实验,评价腹腔注射 Qu对 HepG2人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用;使用 TUNEL法检测凋亡指数。结果 Qu作用 HepG2细胞 24、48和 72 h的 IC50分别为 110.50,63.73和 46.38 μmol/L;12.5,25和 50 mg/kg的 Qu都能显著抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,且呈浓度依赖性;其中 50 mg/kg的 Qu对人肝癌 HepG2细胞裸鼠皮下肿瘤模型的抑瘤率为 46.65%,差异有统计学意义( P＜0.05),相对肿瘤增殖率为 46.68%。同时 Qu还会导致约 20.17%的体内肿瘤细胞发生凋亡,且几乎无毒性,表现出良好的抑瘤效果。结论 Qu能较为显著的抑制体内外 HepG2肝癌细胞的增殖并会导致其发生凋亡,且由于极低的毒性及在自然界的广泛分布,使 Qu成为新型抗肝癌药物开发的重要资源。     

Cyclin L2在化疗诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的探讨cyclin L2基因在化疗药物顺铂（DDP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）和多西紫杉醇（Doc）诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法用肝癌SMMC7721细胞株进行培养传代,MTT试验检测DDP、5-FU和Doe不同药物浓度对肝癌细胞生长的抑制作用,以及cyclin L2转染及反义转染后对该细胞生长抑制作用的影响。用流式细胞术定量检测细胞凋亡。结果不同浓度DDP、5-FU和Doc对肝癌细胞生长均有明显的浓度依赖性抑制作用。细胞凋亡率和cyclinL2基因表达率成正相关。在5-FU和DDP作用下,cyclin L2转染组凋亡率均高于对照组（P〈0．01）,反义转染组细胞凋亡率低于对照组（P〉0．05）。结论Cyclin L2基因在化疗药物诱导肝癌细胞凋亡中起重要作用。     

掌叶半夏总蛋白诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的实验研究

目的研究掌叶半夏蛋白对人卵巢癌细胞SKOV3体外增殖凋亡活性的影响,以确定掌叶半夏蛋白能否抑制卵巢癌的生长及其可能的作用机制。方法应用CCK-8法检测掌叶半夏蛋白对SKOV3细胞体外生长的影响;利用流式细胞仪,采用Anexinn-V法检测掌叶半夏蛋白诱导SKOV3细胞凋亡的作用。结果SKOV3细胞经掌叶半夏蛋白作用后,细胞生长受到明显的抑制,Anexinn-V法检测到细胞凋亡,凋亡率随着作用浓度的增加及作用时间的延长而升高。结论掌叶半夏蛋白对卵巢癌细胞SKOV3有抑制增殖和促凋亡作用,其诱导凋亡机制有待进一步研究。     

FK228对人肝癌细胞HepG2凋亡及细胞周期基因表达的影响

目的：探讨FK228对人肝癌细胞HepG2凋亡及细胞周期基因p 21,cdk4表达的影响。方法：培养HepG2,应用四氮唑蓝(MTT)比色法观察FK228对HepG2的生长抑制作用,琼脂糖凝胶电泳分析细胞DNA特征,流式细胞术分析细胞周期,以RT-PCR检测HepG2细胞中p 21,cdk4基因表达水平。结果：组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228能抑制人肝癌细胞HepG2生长,并具有时间和剂量依赖性；FK228引起细胞周期G1期阻滞并诱导凋亡；FK228能明显促进p21mRNA转录,同时抑制cdk4mRNA的转录。结论：FK288能抑制HepG_2细胞增殖,诱导HepG_2细胞凋亡和周期阻滞；调节p21和cdk4基因的表达可能是FK228抑制HepG_2细胞生长的重要机制。     

Rho激酶抑制剂Y-27632对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用

目的 研究Rho激酶特异性抑制剂Y-27632对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用.方法 体外培养人肝癌HepG2细胞,分为正常对照组(C组)以及不同浓度Y-27632 2.5、5、10、25、50μmol/L处理组(分别为A1组、A2组、A3组、A4组、A5组).镜下观察HepG2细胞的生长变化,MTT法检测各组HepG2细胞增殖情况.结果 在Y-27632作用下,HepG2细胞失去原有“铺路石”样排列,细胞间连接减少,细胞间隙增大,细胞胞体皱缩、变圆,细胞黏附性下降,有倾向凋亡趋势.与C组相比,不同浓度Y-27632作用后的HepG2细胞光密度值减少,细胞活力相对下降,且呈浓度依赖性(P＜0.05).结论 Rho激酶抑制剂Y-27632能有效抑制人肝癌HepG2细胞增殖.     

莪术提取物对肝癌细胞系HepG2的抗癌作用及机制研究

目的制备莪术提取物莪术油(zedoary turmericoil)和莪术醇(curcumol)的脂质体,并研究其对肝癌细胞系HepG2的作用及机制,为临床上利用莪术提取物治疗肝癌提供理论依据。方法利用机械分散和超声乳化法制备莪术醇脂质体和莪术油脂质体。通过MTT法观察莪术醇和莪术油对HepG2细胞生长的影响;用Hoechst33258/PI双染色、激光共聚焦法观察细胞凋亡情况;采用RT-PCR法测定HepG2细胞中COX-2 mRNA和VEGF mRNA表达情况。结果莪术醇脂质体和莪术油脂质体的包封率分别为86.2%和74.5%。MTT测定结果显示,莪术醇和莪术油都可抑制HepG2细胞增殖。同时,莪术醇和莪术油都能明显引起HepG2细胞凋亡。与对照组相比,莪术醇81mg·L-1剂量组的VEGF mRNA表达量明显减少,莪术醇27、81mg·L-1剂量组的COX-2 mRNA的表达量明显减少。结论莪术提取物能明显抑制体外培养的HepG2细胞生长,并可诱导其凋亡,其机制可能是通过抑制HepG2细胞COX-2和VEGF基因表达而发挥作用。