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1.
目的: 探讨重组日本血吸虫26 k Da G S T 抗原免疫家兔后抗体水平动态变化。方法: 家兔随机分为免疫组与佐剂对照组,免疫组用纯化重组日本血吸虫 26 k Da G S T 抗原加福氏佐剂免疫;佐剂对照组用0.85% 盐水加福氏佐剂免疫。免疫后,每兔逐周取耳静脉血,采用酶联免疫吸附试验( E L I S A) 检测血清中特异性抗体水平。结果: 免疫组家兔从免疫后第4 w k 起血清中特异性抗 G S T 抗体升高,且维持在较高的水平达65 w k。结论: 重组日本血吸虫 26 k Da G S T 抗原免疫家兔后,特异性抗 G S T 抗体水平较对照组明显升高,且至少能维持 1 年。 相似文献
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金标抗rSjc26GST多克隆抗体斑点免疫金渗滤法检测?… 总被引:5,自引:1,他引:4
目的 探索一种简捷的检查血吸虫循环抗原的方法。方法 应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶(rSjc26GST)的多克隆抗体标记胶体金,建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法(S-DIGFA),并以S-ELISA作对比。结果 用S-DIGFA和S-ELISA平行检测95例慢性血吸虫病患者,阳性检出率分别为81.05%和82.11%;正常人血清180份,两者的假阳性率分别 相似文献
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金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究 总被引:15,自引:1,他引:14
目的 建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法 在已建立的检测血吸虫抗体的DIGFA基础上,以抗血吸虫重组蛋白SVLBP多抗为捕捉抗体,金标抗SEA多抗为覆盖抗体,建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心DIGFA。结果 用该法检测了急性血吸病人血清30 人份和慢性血吸病人血清38 人份,其阳性检出率分别为100 % 和52-6 % ;120 人份流行区健康人血清全为阴性;100 人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为100% ,与10 例华支睾病人血清无交叉反应;15 例肺吸虫病人血清有1 例阳性,交叉反应率为6-7 % ;与双夹心ELISA的符合率为97-4% ,经χ2 检验表明两法检测效果无显著性差异。结论 用DIGFA检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性,并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备,有广阔的应用前景。 相似文献
4.
采用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)和斑眯酶联免疫吸附试验(Dot-EI.ISA),以弓形速殡子可溶性蛋白抗原作为靶抗原检测65例弓形虫感染者血清抗弓 虫IgG,Dot-IGSS和Dot-ESISA检测阳性率分别不98.46%和92.46%。血清平均滴度在Dot-IGSS为1:394,在Dot-ELISA为1:218。两法均一的有59例,其中在两法中抗体滴度相同者28例,Dot-IGSS检测滴 相似文献
5.
目的: 探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法: 将日本血吸虫病患者尿液用15% 三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫 B A L B/c小鼠制备单克隆抗体。结果: 建立了 2 株分泌抗人尿日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株2 E6 及2 B11,两者免疫球蛋白鉴定均属 Ig M 类, E L I S A测得单抗对尿液循环抗原( I H U C Ag),效价分别为2.56×105 和6.4×104 。琼脂双扩散试验显示2 株单抗与正常人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线,而2 E6 与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用2 B11 和2 E6 腹水为捕捉抗体, H R P H11 为酶标抗体检测 12 例急性血吸虫病患者尿液,依次为6 例和3 例阳性,8 例正常人尿液均为阴性。结论: 用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫 B A L B/c 小鼠制备单克隆抗体用于检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。 相似文献
6.
斑点免疫金银染色与Dot—ELISA检测抗弓形虫抗体的对比研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为比较斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测弓形虫抗体的敏感性和特异性,本实验以弓形虫速殖子可溶性蛋白抗原为诊断用抗原,同时用Dot-IGSS和Dot-ELISA检测65份弓形虫感染者血清、176份其他寄生虫感染者血清和76份对照血清。结果显示,用Dot-IGSS及Dot-ELISA检测弓形虫感染者抗体阳性率分别为98.46%及92.31%,平均抗体滴度分别为1:384及1: 相似文献
7.
抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的研究 总被引:15,自引:3,他引:15
抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的研究是血吸虫疫苗研究的重要策略之一。本研究探讨了未成熟卵等不同抗原免疫诱导宿主生产抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的效果。研究证明SIEA26-28kDa抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖和卵胚发育成熟的免疫力。与对照组比较,SIEA26-28kDa抗原免疫鼠减虫虽不明显,但肝组织内每雌产卵数、成熟卵数和粪卵数(EPG)分别减少48.1%、83.6%、87.3%,死亡卵数 相似文献
8.
日本血吸虫感染动物血清中循环抗体(CAb)及循环抗原(CAg)水平的动态研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用膜片固相抗原免疫酶测定法(D-IEA)和ELISA检测日本血吸虫感染家兔血清中CAb和CAg水平时,高峰分别在感染后10~12周和10周,CAb和CAg水平均与感染度和感染期密切相关。实验结果表明,感染宿主血清中CAb/CAg水平的消长规律并不一致,宿主在感染中期(感染后10~20周)显示CAb检测为优势,在感染早期(感染后10周内)则以CAg检测为优势。本项研究可为选用适宜的CAb/CAg检测途径,提供依据。应用改进方法D-IEA检测血吸虫感染者血清中特异性抗体时,可取得满意效果。 相似文献
9.
日本血吸虫未成熟虫卵26/28kDa抗原诱导抗雌虫生… 总被引:17,自引:0,他引:17
目的:探讨日本血吸虫未成熟虫的26/28kDa抗原(SIEA26-28kDa)诱导小鼠产生抗雌虫生殖免疫的效果。方法:采用纯化的SIEA26/28kDa抗原以及SIEA-I抗原,分别免疫BALB/c小鼠,于攻击感染后46d进行粪卵,组织内虫卵定量。结果:证明SIEA26/28kDa抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。与对照组比较,SIE26/28kDa抗原免疫鼠减虫虽不明显,但肝组织内总卵数、 相似文献
10.
日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原的初步分析 总被引:9,自引:3,他引:9
采用SDS-PAGE和ELIB技术分析了日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原(SIEA),并与可溶性成熟卵抗原(SEA)进行比较,二者主要蛋白区带存在明显差异,同时,ELIB结果表明,SIEA中感染血清和免疫血清所识别的65kDa、62kDa、50kDa、28kDa和和26kDa等抗原组分不出现于SEA,推测其在SIEA诱导宿主产生抗雌虫生殖及抗卵胚发育免疫应答方面起作用。 相似文献
11.
日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究 总被引:10,自引:0,他引:10
探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。感染日本血吸虫的BALB/c小鼠淋巴结B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合,制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探讨针,检测日本血吸虫病患者和健康人血清;晚期血吸虫病患者脾血和外周血;感染日本血吸虫兔和小鼠的门脉血和外周血。 相似文献
12.
血吸虫病快速免疫诊断——胶体染料试纸条法的研究 总被引:48,自引:27,他引:21
目的 开发一种血吸虫病快速免疫诊断方法。方法 用国产胶体染料D-1标记日本血吸早虫可溶性虫卵抗原(SEA),以此标记物与血吸虫病人血清中的抗血吸虫抗体反应,再用点有羊抗人IgG(第二抗体)的硝酸纤维层析膜以年捕获标记抗原与抗体的复合物。结果 用 纸条法检测急性血吸虫病人血清30份,慢性血吸虫病人血清84份,其敏感性分别为96.7%和94.0%,检测健康人血清60份,其特异性为96.7%,检测肝吸虫 相似文献
13.
试剂条双夹心酶联免疫吸附试验检测日本血吸虫感染者经尿液排泄的循环趋阴极抗原 总被引:2,自引:1,他引:1
目的:建立一种检测感染宿主尿内排泄抗原的简易免疫学试验。方法:用经改良的兼具dot-ELISA和酶标板-ELISA优点的试剂条双夹心酶联免疫吸附试验,检测了家兔及人宿主尿样本中的日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。结果:10只高感染兔尿样经透析冻干保存达10年,复原后检测均呈强阳性反应,滴度可达512-1,12只经相同处理的正常兔尿,仅1只出现8-1以下的弱反应。58例采自四川省的感染者和60例正常对照者尿液的CCA检测,敏感性和特异性分别为43.1%和96.7%。与板-ELISA比较,检出率相仿而呈现一定的互补效应,互补检出率为58.6%。兔尿样内加入适量捕获单抗,反应强度即出现剂量依赖的竞争抑制,提示了尿内被检测到的靶微粒具有被抗CCA单抗特异地识别的属性。对于采用同一检测系统不同方法的互补检测性也进行了讨论。结论:实验结果不仅显示了试剂条夹心ELISA适合现场应用的诸多优点,也证明用于特异地检测感染宿主尿内排泄抗原的可行性。 相似文献
14.
Comparative evaluation of cysticercal antigens and immunoassays in the diagnosis of neurocysticercosis. 总被引:2,自引:0,他引:2
Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), dot immunobinding assay (DIA) and passive haemagglutination assay (PHA) were evaluated for the detection of anticysticercal antibodies in cerebrospinal fluids (CSF) from neurocysticercosis (NCC) patients. Results from the three tests were similar. Higher titres of antibodies were observed to the antigens in porcine whole-cyst sonicate than to those in vesicular fluid or scolex or membrane sonicates. Affinity purified parasitic antigens showed a higher degree of specificity and sensitivity in PHA than in ELISA or DIA. Western blot analyses with cyst antigens showed that CSF antibodies from confirmed NCC patients consistently recognized a protein in the region of 64-68 kDa. Other proteins, of 110, 94-97, 80, 72-75, 52, 45, 26-28 and 16-18 kDa, showed heterogenous reactivity, whereas the partially purified antigen of 64-68 kDa showed a high degree of sensitivity and specificity. 相似文献
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目的:探索一种便捷的血吸虫病诊断方法。方法:在原已建立的ELISA法的基础上,应用3个针对日本血吸虫抗原的不同表位的单克隆抗体标记胶体金,建立检测日本血吸虫病患者血清中血吸虫抗原的斑点金免疫渗滤法。抗原与抗体通过渗滤在硝酸纤维薄膜上进行反应,数分钟用肉眼观察结果。结果:本法检测SEA的敏感度为16ng/ml,在69例慢性日本血吸虫病患者血清的检测中,阳性率为60.8%,特异性为95.2%;同时用dot-ELISA检测137例慢性日本血吸虫病患者,阳性率为54.7%、特异性为94.6%;夹心ELISA检测118例 慢性日本血吸虫病患者,阳性率为61.9%、特异性为95.7%。结论:经数理统计G检验证实斑点金免疫渗滤法的敏感性和特异性同ELISA 相近, 且操作更简便且快速。 相似文献
16.
量化检测日本血吸虫循环抗原的初步研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探索量化检测日本血吸虫循环抗原的方法。方法用AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA(S-ELISA)检测SEA-TCA抗原,并根据测得的OD490值和相应抗原浓度计算回归方程式,再用该法和fSjc26GST-PcAb双抗体夹心ELISA方法检测急慢性日本血吸虫病人的血清循环抗原。并初步应用于检测流行区和传播阻断地区的人群血清循环抗原。结果AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA测得SEA-TCA浓度(y)与OD490值(x)呈明显的正相关(r=0.981,y=128.08x-46.95);血清循环抗原的平均含量,急性血吸虫病人(206.27±36.62 ng/ml)显著高于慢性血吸虫病人(122.88±75.13 ng/ml)。两组双抗体S-ELISA检测急性血吸虫病人循环抗原的阳性率均为100%(34/34),慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率则分别为87.50%(70/80)和78.57%(63/80),特异性分别为90.74%(98/108)和92.59%(100/108)。用以上两法对流行区和传播阻断地区的人群血清进行循环抗原检测,其阳性率分别为34.52%(87/252)和9.72%(49/504),具有显著性差异。结论两组双抗体S-ELISA用于检测日本血吸虫循环抗原均有较好的效果,其中AWA-PcAb/MG2双抗体夹心ELISA能量化检测日本血吸虫循环抗原。 相似文献
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日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)及其单克隆抗体用于诊断的价值 总被引:13,自引:1,他引:12
目的探讨纯化的日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)及其相应单克隆抗体对日本血吸虫病的诊断价值。方法利用纯化的rSj14-3-3抗原和可溶性虫卵抗原(SEA)间接ELISA方法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清中特异性抗体;以纯化的抗rSj14-3-3单克隆抗体包板,以兔抗rSj14-3-3多抗和酶标羊抗兔多抗为检测系统的酶标夹心法检测患者血清中的循环抗原。结果用rSj14-3-3检测急、慢性血吸虫病患者血清中特异性抗体的阳性率分别为100%和933%,用抗rSj14-3-3单克隆抗体检测循环抗原的阳性率分别为100%和956%,两者联合检测的总阳性率分别为100%和978%;经治疗后2、4、6、12个月,抗体转阴率分别为387%、548%、75%、90%,血清循环抗原转阴率分别为177%、419%、55%、85%,两者联合检测的总转阴率分别为452%、63%、85%、90%;对正常人血清的检测未见假阳性反应,与华支睾吸虫病和钩虫病患者血清出现轻微的交叉反应;用SEA检测抗体的阳性率分别为978%和956%,与正常人及华支睾吸虫病和钩虫病患者血清均有不同程度的交叉反应,治疗后2、4、6、12个月阴转率分别为32%、65%、125%、15%。结论rSj14-3-3检测急慢性血吸虫病患者血清中的特异性抗体和利用抗rSj14-3-3单克隆抗体检测循环抗原具有高度的特异性和敏感性,抗原和单抗可规模化 相似文献
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[目的 ]探讨尿液中血吸虫循环抗原和抗体检测对日本血吸虫病的诊断价值。 [方法 ]用单克隆抗体夹心 ELISA法检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原 ,间接ELISA检测尿液中特异性抗体。 [结果 ]10例急性血吸虫病和 6 1例慢性血吸虫病患者尿液中循环抗原的阳性率分别为 6 0 %和 40 % ,特异性抗体的阳性率分别为 80 %和 6 1 7%。两者联合检测的总阳性率分别为 10 0 %和 71 7%。 10 0例健康对照者尿液中仅 3%出现假阳性。 [结论 ]检测尿液中日本血吸虫循环抗原和特异性抗体简便、实用 ,为一种非损伤性的血吸虫病诊断方法。 相似文献
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胶体染料斑点免疫试验检测血吸虫病人抗体方法的建立及初步应用 总被引:3,自引:3,他引:3
本研究首次从国产染料中筛选出一种能用于免疫反应显色的蓝色染料(D-1),并对用此染料标记羊抗人IgG的最适条件进行了探讨。这种标记抗体的胶体染料能与相关抗原反应并直接显色,双抗体夹心法检测人IgG蛋白的最低检出量为25—10ng/ml,胶体染料斑点免疫试验(DIA)检测62份血吸虫病人血清,61份阳性,阳性率为98.4%,40份姜片虫病人血清均为阴性,30份非血吸虫病流行区的健康人血清有1份出现阳性,假阳性率为3.3%,与Dot-ELISA检测结果相似。标记的胶体染料在室温下保存1wk仍保持活性不变,冻干能保存更长时间,与酶联免疫斑点法相比似有更高的实用价值。 相似文献
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目的评价日本血吸虫抗体磁分离酶联免疫试剂盒(magnetic particle antibody immunoassay,MPAIA)与血吸虫循环抗原酶联免疫吸附试剂盒(ELISA)在血吸虫病免疫诊断中的应用效果.方法采取随机单盲法,分别用MPAIA法和ELISA法检测经病原学确诊的急性和慢性日本血吸虫病、并殖吸虫病、钩虫病、旋毛虫病、囊尾蚴病、华支睾吸虫病、乙肝患者血清及非疫区健康人血清,评价这两种试剂盒的灵敏度、特异度、Youden指数、一致百分率、阳性似然比和阴性似然比等指标. 结果MPAIA法和ELISA法检测确诊急性日本血吸虫病患者血清阳性符合率分别为100%和89.13%,MPAIA与ELISA法的差别无统计学意义(χ2=1.125,P>0.05),两者检出结果呈高度一致(kappa=0.891);检测确诊慢性日本血吸虫病患者血清阳性符合率分别为100%和17.65%,MPAIA法显著高于ELISA法(χ2=36.36,P<0.05),两者结果一致性低(kappa=0.194).检测非疫区健康人特异度分别为100%和98%;MPAIA法除与并殖吸虫交叉反应率为8.33%外,与其他寄生蠕虫病无交叉反应发生,ELISA法与其他寄生蠕虫无交叉反应现象,根据金标准确定的血吸虫病阳性检测结果和非疫区健康人检测结果,上述两种检测试剂的Youden指数为1和0.5436,一致百分率为100%和76.19%,阳性似然比为∞和28.18,阴性似然比为0和0.44. 结论MPAIA与ELISA法均可用于现场筛查,但MPAIA在检测慢性血吸虫方面检测性能优于ELISA. 相似文献