肺腺癌细胞增殖分化及抗凋亡作用与STAT3的调控效应

目的:探明STAT3在肺腺癌细胞中增殖分化、抗凋亡作用与耐药之间的关系.方法:2003-09/2004-01在第三军医大学,采用浓度梯度递增法诱导A549形成耐药细胞系,免疫组化及蛋白印迹法联合检测A549及耐药株中STAT3,肺耐药蛋白,多药耐药蛋白表达情况.结果:成功诱导了A549/CARP耐药细胞株.免疫组化:A549组,A549/CARP组STAT3阳性细胞数差异无显著性意义(146.53&;#177;23.41和166.73&;#177;43.06,t=1.519,P＞0.05);肺耐药蛋白(119.93&;#177;42.10和172.67&;#177;44.89,t=3.350)和多药耐药蛋白(112.40&;#177;35.07和151.73&;#177;33.92,t=3.747)阳性细胞数差异有显著性意义(P＜0.01);STAT3,肺耐药蛋白,多药耐药蛋白之间表达均无相关性意义(P＞0.05).蛋白印迹:A549组,A549/CARP组均存在STAT3蛋白的表达,二者差异无显著性意义(P＞0.05);STAT3,肺耐药蛋白,多药耐药蛋白之间表达均无相关性(P＞0.05).结论:STAT3参与了肺腺癌的增殖分化和抗凋亡作用,并未参与介导肺腺癌的耐药;肺耐药蛋白和多药耐药蛋白均参与了诱导肺腺癌的耐药,但二者之间无相关性;肺耐药蛋白和多药耐药蛋白介导的耐药机制与STAT3信号传导途径无关;可通过破坏STAT3信号传导来控制肿瘤细胞的生长和增殖,为肺癌的治疗提供以STAT3为靶向的基因治疗.     

5种蛋白在肠道腺癌中的表达及临床意义

目的探讨肠道腺癌中肺耐药相关蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp/P170)、拓扑易构酶(ToPoⅡ)、胸腺嘧啶合成酶(Ts)及谷胱甘肽转移酶(GST)-π的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组化法检测96例原发性肠道腺癌及15例正常肠黏膜中Ts、P170、ToPoⅡ、LRP、GST-π的表达情况,并综合分析其与各临床参数和预后的关系。结果 LRP、P170、ToPoⅡ、Ts在肠道腺癌组织中呈高表达状态;5种蛋白在癌组织中的表达水平与年龄、性别无关,但在有淋巴结转移者表达高于无淋巴结转移者,LRP、P170在低分化腺癌组织中的表达明显高于高中分化腺癌,而Ts的表达明显低于高中分化腺癌;浸润肌层及以内的腺癌表达ToPoⅡ明显高于浸润至浆膜者;LRP、P170、Ts阳性表达患者的5年存活率低于阴性表达者。结论 Ts、P170、ToPoⅡ、LRP、GST-π5种耐药蛋白与肠道腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及5年存活率均有不同程度的相关性,这在制订肠道腺癌的个性化化疗方案以及患者预后评估上具有重要的临床意义。     

多药耐药基因相关蛋白在原发性肝癌中的表达及意义

目的探讨原发性肝细胞癌中耐药基因相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、DNA拓扑异构酶-Ⅱ(Topo-Ⅱ)、谷胱苷肽-S-转移酶(GST-π)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学方法S-P法检测49例原发性肝癌组织、14例肝硬化组织及13例正常肝组织中P-gp、Topo-II、GST-π的表达。结果肝癌组三者表达均高于肝硬化组及正常组(P<0.05),肝硬化组与正常组之间两者表达差异无统计学意义。P-gp表达与肿瘤Edmondson分级呈负相关;Topo-II表达则与Edmondson分级和转移呈正相关。P-gp、Topo-II表达呈负相关。结论联合检测肝癌耐药基因相关蛋白P-gp、Topo-II、GST-π的表达有助于临床判断肝癌对化疗的敏感性及预后。     

Mucin-3和MDR3在胆固醇结石形成中的作用

目的探讨黏蛋白Mucin-3基因和多重耐药因子3（MDR3）在胆固醇结石形成中的作用及其相互关系。方法应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测Mucin-3和MDR3在36例胆囊结石（结石组）、20例胆囊炎（炎症组）和12例正常胆囊（对照组）的胆囊黏膜和肝组织中的表达。结果结石组和炎症组胆囊黏膜Mucin-3表达阳性率分别为30.1%（11/36）和35.0%（7/20）,显著低于对照组75.0%（9/12）（2χ=12.74、13.46,P〈0.01）;结石组与炎症组之间比较,差异无显著性（χ2=0.21,P〉0.05）。结石组的肝组织中MDR3 mRNA的表达量低于炎症组和对照组,差异有显著性（F=19.785,q=8.432-10.037,P〈0.01）;炎症组肝组织MDR3 mRNA的表达量与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）。结石组胆囊黏膜中Mucin-3蛋白阳性表达者肝组织中的MDR3 mRNA的表达量与Mucin-3蛋白阴性表达者比较,差异有显著意义（t=3.142,P〈0.05）。结论 Mucin-3基因参与了胆囊结石形成的全过程。在胆囊结石形成的后期阶段,MDR3与Mucin-3基因相互作用,共同影响胆囊结石的形成。     

肺腺癌细胞STAT5信号传导途径的初步研究

目的探讨STATS在肺腺癌细胞中增殖分化,抗凋亡作用与耐药之间的关系。方法采用浓度递增法诱导A549细胞株形成耐药细胞系,免疫组检测A549及耐药株（A549／CARP）中STATS．LRP、MRP蛋白表达情况。结果成功诱导了A549／CARP耐药细胞株。免疫组化显示A549组、A549／CARP组STATS阳性细胞数差异无统计学意义（P〉0．05）;LRP、MRP阳性细胞数差异有统计学意义（P〈0．01）STATS、LRP、MRP之间均无相关性（P〉0．05）。结论STATS参与了肺腺癌细胞的增殖分化和抗凋亡作用,并没参与介导肺腺癌的耐药;LRP、MRP均参与了诱导肺腺癌细胞的耐药,但二者之间无相关性;LRP、MRP介导的耐药机制与STATS信号传导途径无关;可通过破坏STAT5信号传导来控制肿瘤细胞的生长和繁殖。STATS可能成为肺癌基因治疗的新靶点。     

非小细胞肺癌肺耐药相关蛋白和多药耐药相关蛋白表达与化疗疗效关系的探讨

化疗是治疗晚期非小细胞肺癌的主要手段之一。目前研究发现,化疗失败的主要原因是由于多药耐药（multi—drug resistance,MDR）现象的产生,即肿瘤细胞对多种化疗药物产生的耐药,而肿瘤的这种多药耐药的产生是多途径、多基因共同参与的过程。肺耐药相关蛋白（LRP）是人类的主要穹隆蛋白,多药耐药相关蛋白（MRP）是ABC家族成员之一的跨膜蛋白,二者在MDR中发挥着重要作用。我们应用免疫组化技术检测LRP和MRP在112例非小细胞肺癌支气管镜活检组织中的表达水平,并探讨其与化疗疗效的关系。     

卵巢上皮癌组织TLR4和P—gP表达及其临床意义

目的探讨Toll样受体4（TLR4）、P糖蛋白（P-gp）在卵巢上皮癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法,检测50例卵巢上皮癌（化疗敏感组25例,化疗耐药组25例）组织和10例正常卵巢组织中TLR4、P—gP的表达。结果卵巢上皮癌组织中TLR4和P—gP的阳性表达率分别为62％和46％,明显高于正常卵巢组织的20％和10％（χ^2=5．939、4．500,P〈0．05）。卵巢上皮癌化疗耐药组TLR4和P—gP阳性表达率明显高于化疗敏感组（χ^2=6．876、6．522,P（0．05）。卵巢上皮癌组织TLR4的表达与病理分级、临床分期和淋巴结转移有相关性（χ^2=6．848、6．376、5．433,P〈0．05）,P—gP表达与病理分级、淋巴结转移具有相关性（χ^2=9．071、6．402,P〈0．05）;TLR4、P—gP蛋白表达具有正相关性（r=0．392,P〈0．05）。结论TLR4和P-gP的高表达及其相关性与卯巢上皮癌的化疗耐药及预后关系密切。     

多药耐药基因在大肠癌组织中的表达及其体视学测定研究

目的:探讨两种多药耐药基因在大肠癌组织中的表达及对其肿瘤细胞进行体视学分析。方法:采用微波EnVision免疫组化法联合检测63例大肠癌患者癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达水平。运用图像分析系统在显微镜下测量肿瘤细胞的体视学参数,依据有关体视学公式计算出参数核的体密度(Vvn)、核的表面积密度(Svn)、核的平均体积(V)、核的平均表面积(S)、核的平均自由程(")、核的数密度(Nv)、核的平均曲度密度(Kv),比较这些参数在不同分化肿瘤中的差异。结果:P-gp和MRP在大肠癌组织中的阳性表达率分别为54%和30%。参数Vvn、Svn、V、S依高、中、低分化的顺序增加,Kv,Nv、λ依高、中、低分化的顺序减小,Vvn、Svn参数的比较差异有显著性(P<0.05)。结论:大肠癌组织表达多种耐药因子,各耐药因子间共表达具有明显相关性。所有的多药耐药因子表达均与大肠癌分化程度有密切关系,肿瘤细胞Vvn、Svn参数是肿瘤细胞分化的重要指标,且为临床形态学诊断提供了依据。     

原发性卵巢癌组织中肺耐药相关蛋白的表达及其临床价值

目的 研究肺耐药相关蛋白（LRP）在原发性卵巢癌组织中的表达状况，探讨其在卵巢癌化学治疗耐药中的作用机制，以及与临床病理生物学特征间的相关性。方法 应用免疫组织化学技术对52例原发性卵巢癌、12例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中肺耐药相关蛋白表达状况进行测定。结果 肺耐药相关蛋白（LRP）在卵巢癌组织中阳性表达率均显著高于良性肿瘤和正常组织对照组。LRP阳性表达与卵巢癌组织类型、肿瘤分化程度无关，但与临床病理分期及化疗敏感性相关显著，Ⅲ、Ⅳ期组织中LRP阳性表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期。结论 LRP在原发性卵巢癌中存在较稳定的表达。检测LRP对前瞻性预测化疗药物敏感性和判断化疗疗效具有一定的临床指导价值。     

As2O3对人胃癌多药耐药细胞模型的逆转耐药作用

目的体外建立人胃癌细胞多药耐药模型,研究多药耐药机制及三氧化二砷（As2O3）对其逆转耐药作用。方法采用阿霉素（ADM）浓度梯度递增法诱导建立人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/ADM,MTT法检测SGC7901/ADM细胞对ADM、长春新碱（VCR）、紫杉醇（TAX）的敏感性及As2O3对其逆转耐药倍数,免疫细胞化学法（PV法）检测细胞P-糖蛋白（P-gp）、Caspase3表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 SGC7901/ADM细胞对ADM、VCR和TAX均耐药,耐药倍数分别是7.49、7.56及5.33。在As2O3作用48h后,3种抗癌药物对SGC7901/ADM细胞生长抑制50%时的浓度（IC50）明显降低,差异有显著性（F=169.766-1 199.812,q=6.86-70.40,P〈0.01）;耐药细胞经As2O3及环孢素A（CsA）作用后,P-gp表达明显下调,差异有显著性（F=42.870,q=7.70-21.50,P〈0.01）;As2O3高浓度组细胞中Caspase3表达上调,差异有显著性（F=7.220,q=6.63,P〈0.05）。As2O3作用组SGC7901/ADM细胞凋亡率随As2O3浓度增加而增加（F=1 986.63,q=21.23-95.08,P〈0.05）。结论 SGC7901/ADM细胞具有多药耐药性,As2O3可逆转其耐药,并呈剂量依赖性。     

JAK/STAT3通路在瘦素促进肺癌细胞增殖机制中的作用

目的:探讨瘦素在促进肺癌细胞增殖过程中的可能机制,并探讨其在肺癌发生发展中的作用.方法:MTT法检测瘦素对肺癌A549细胞的促增殖作用.流式细胞术检测不同浓度瘦素处理组肺癌A549细胞的增殖率.免疫细胞化学法检测经不同浓度瘦素处理的A549细胞中STAT3、p-STAT3及Bcl-2蛋白的表达.结果:STAT3、p-STAT3及Bcl-2蛋白在A549细胞中均有表达.瘦素处理后的A549细胞中STAT3、p-STAT3及Bcl-2的表达随着处理浓度增加而增强,且100ng/mL瘦素处理组表达增加最明显,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05);瘦素刺激A549细胞24h后增殖效应最明显,且100.ng/mL组G2/M期细胞所占的比例较对照组和10ng/mL组显著增加(P＜0.05).结论:瘦素可能通过JAK/STAT3通路,活化STAT3介导抗凋亡基因Bcl-2的过度表达而使肺癌细胞呈持续增殖.     

STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌放射治疗的增效作用

目的:评价STAT3反义寡核苷酸对人肺腺癌细胞A549增殖抑制作用及辐射增敏作用,探讨新的肺癌分子靶向治疗药物。方法:2003-10/2004-11于解放军第二军医大学放射医学教研室,应用阳离子脂质体介导STAT3反义寡核苷酸转染人肺腺癌A549细胞,westernblot检测STAT3总蛋白和p-STAT3蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖状态;流式细胞术检测细胞周期;用克隆形成分析和SF2研究人肺腺癌细胞A549辐射敏感性的变化。结果:STAT3反义寡核苷酸转染人肺腺癌A549后STAT3蛋白的表达和磷酸化水平下降,细胞增殖受抑制,出现G1阻滞;照射后12d,反义寡核苷酸组测定SF2值是(46.78%±3.25%),较对照组(61.52%±2.74%)明显降低(P<0.01)。结论:STAT3反义寡核苷酸可以抑制STAT3蛋白表达和细胞增殖,对人肺腺癌细胞A549有辐射增敏作用。     

RNA干扰生存素基因表达对肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的采用RNA干扰技术探讨生存素（survivin）对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的分子机制。方法采用脂质体介导将pGCsi—shsurvivin与pGCsi质粒转染人肺腺癌细胞株A549,经G418筛选获得稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型;Westernblot检测转染细胞survivin、p21、鼠双微体基因2（MDM2）蛋白表达;M,丌比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果成功构建稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型。与对照组相比,反义组p21表达及细胞凋亡率显著增加,而MDM2表达及细胞增殖显著降低。结论下调A549细胞survivin表达后,细胞增殖降低而细胞凋亡增加,其作用机制与p21表达增加和MDM2降低有关。     

miR-1290对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 探究miR-1290对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 回顾性收集2018年3月至2019年6月海南省人民医院收治的45例患者,取肺腺癌组织及癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测组织中miR-1290的表达.将肺腺癌细胞随机分为对照组、miR-1290 mimic组和miR-1290 in...     

STAT3反义寡核苷酸对肺腺癌裸鼠移植瘤辐射增敏的研究

目的：探讨STAT3反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotide,ASODN）对肺腺癌裸鼠移植瘤辐射增敏的影响,为提高恶性肿瘤的辐射敏感性提供新的思路和方法。方法建立裸鼠体内肺腺癌移植瘤动物模型,待瘤体直径＞0.5 cm后,瘤内多点注射STAT3 ASODN,给药剂量：15 mg/kg,1次/d,连续2周,给药后2 h联合γ射线局部照射总剂量20 Gy,每次2 Gy,每周5次,连续2周,照射剂量率0.75 Gy/min,定期测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线;测量肿瘤质量,计算抑瘤率;记录存活情况,估算生存率,绘制生存曲线,计算总生存期;免疫组化检测肿瘤组织细胞内STAT3蛋白表达变化情况;Western Blot 检测肿瘤组织内 P-STAT3、Bcl-xL、CyclinD1蛋白表达情况。结果反义（antisense,AS）＋照射（irradiation,IR）组肿瘤体积治疗第8天开始明显小于其余各组肿瘤体积（P＜0.05）;AS＋IR组的抑瘤率为68.4%,高于IR组与AS组的之和;AS＋IR组的平均总生存期为（28.38±0.96）d,明显高于IR组及无义（nonsense,NS）＋IR组（P＜0.005）;STAT3蛋白及其下游Bcl-xL、CyclinD1蛋白表达变化明显下降, STAT3蛋白磷酸化水平也降低。结论 STAT3反义寡核酸能够增强肺腺癌裸鼠移植瘤的辐射敏感性,具有良好的放疗增敏剂临床应用开发前景。     

FGFR3-targeted mAb therapy for bladder cancer and multiple myeloma

Gain-of-function mutations in FGF receptor 3 (FGFR3) have been implicated in severe skeletal dysplasias and in a variety of cancers. In their study in this issue of the JCI, Qing et al. used specific shRNA probes to demonstrate that FGFR3 functions as an important driver of bladder carcinoma cell proliferation (see the related article beginning on page 1216). A unique anti-FGFR3 mAb was shown to exhibit antitumor activity in human bladder carcinoma cells in vitro and in mouse bladder cancer or multiple myeloma xenograft tumor models bearing either wild-type or mutant FGFR3. These results suggest that clinical development of anti-FGFR3 mAbs should be considered for targeted therapy of cancer and other diseases. FGFs are members of a large family of growth factors that play an important role in the control of diverse cellular processes (e.g., cell proliferation, differentiation, survival, and migration) during embryonic development and in the maintenance of cellular homeostasis in virtually all organs and tissues (1, 2). FGFs act in concert with heparan sulfate proteoglycans (HSPGs) to activate a family of four receptor tyrosine kinases (RTKs) designated FGF receptors 1–4 (FGFR1–4). Each FGFR consists of an extracellular region composed of three Ig-like domains designated D1, D2, and D3; a short stretch of amino acids in the D1–D2 linker region, designated the acid box; and a single transmembrane domain followed by an intracellular tyrosine kinase domain with additional regulatory sequences (1). Diversity in ligand-binding specificity and tissue expression patterns of FGFR1–3 are further enhanced by alternative RNA splicing in the C-terminal half of D3 to generate either the IIIb or the IIIc splice isoform. It was previously shown that the IIIb isoform is expressed in epithelial cells and the IIIc isoform is expressed in mesenchymal cells (1). Interestingly, FGFs that activate the epithelial IIIb FGFR isoforms are expressed in mesenchymal cells, whereas FGFs that activate the mesenchymal IIIc FGFR isoforms are produced in epithelial cells (1). A variety of human skeletal dysplasias associated with severe impairment in cranial, digital, and skeletal development have been shown to be driven by gain-of-function mutations in FGFR1–3 (1). Gain-of-function mutations in FGFRs have also been identified in a variety of human cancers, including myeloproliferative syndromes, lymphomas, glioblastoma, as well as prostate, bladder, and mammary carcinomas (1). Importantly, the t(4;14)(p16.3;q32) chromosomal translocation that results in FGFR3 overexpression in 20% of multiple myeloma patients is correlated with poor clinical response and patient survival (3). FGFR3 overexpression has also been identified in bladder carcinoma (4). Moreover, somatic gain-of-function mutations in FGFR3 have been identified in 65% of papillary and in 20% of muscle-invasive bladder carcinomas (4). These studies suggest that FGFR3 could be considered a candidate for targeted therapies for the treatment of cancers and skeletal dysplasias driven by gain-of-function FGFR3 mutations. Several small molecule inhibitors of the tyrosine kinase activity of FGFR3 and other members of the FGFRs have been described, some of which are currently in clinical development (5, 6). However, potent small molecule inhibitors that specifically interfere with the tyrosine kinase activity of FGFR3 are difficult to develop because of the close structural similarity of the FGFR3 tyrosine kinase domain to that of other members of the FGFR family and other RTKs. An alternative approach for developing a selective inhibitor of FGFR3 that does not interfere with the activity of other FGFRs and RTKs is to raise inhibitory mAbs that selectively bind to the extracellular domain of FGFR3.     

丹参酮ⅡA对肺腺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA对肺癌细胞株NCI-H460的增殖抑制作用与促凋亡的影响。方法:分别以不同浓度的丹参酮ⅡA干预肺腺癌H460细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪观察丹参酮ⅡA对NCI-H460肺腺癌细胞的促凋亡作用。结果:丹参酮ⅡA可显著抑制肺腺癌NCI-H460细胞的生长,抑制程度与作用时间和药物浓度成正相关,流式细胞仪结果显示:用0.3125μg/mL的丹参酮ⅡA作用NCI-H460细胞24、48、72h后,细胞凋亡率分别为3.69%、6.67%、12.01%,成时间依赖性。结论:丹参酮ⅡA对NCI-H460细胞的增殖具有明显的抑制以及诱导凋亡的作用。     

shRNA干扰IER3IP1基因表达对K562细胞增殖和红系分化的影响

目的 探讨靶向干扰IER3IP1基因对K562细胞增殖和红系分化的影响.方法 针对IER3IP1基因设计并构建小发夹状(shRNA)真核表达载体,转染K562细胞后用RT-PCR方法鉴定沉默效果.采用MTT实验、联苯胺染色、光镜和电镜观察、流式细胞术以及RT-PCR,观察抑制IER3IP1基因表达后对K562细胞的影响;采用0.2μmoL/L伊屿替尼诱导K562细胞2 d,观察诱导分化过程中IER3IP1基因表达变化情况.抑制IER3IP1基因表达后对红系分化相关基因Gfi-1B、GPA和γ-globin以及细胞表面GPA蛋白表达的影响.结果 成功构建针对IER3IP1基因的shRNA真核表达载体,转染至K562细胞中,该基因mRNA表达水平明显降低,抑制率达76%(P<0.01).与对照组细胞相比,K562-shRNA-IER3IP1组bcr-abl mRNA表达升高(P<0.05);MTT检测结果显示细胞增殖能力增强(P<0.01);流式细胞术检测结果显示S期细胞比例增加,G0/G1期细胞比例减少(P<0.05);电镜可见细胞常染色质增加、异染色质减少,内质网部分扩张,囊泡样结构滞留.0.2μmol/L伊马替尼作用48 h后,K562-shRNA-IER3IP1组联苯胺染色阳性率由作用前的(44.7±2.5)%降低至(22.7±1.5)%(P<0.01),且红系分化相关基因Gfi-1B、GPA和γ-globin的mRNA表达水平明显降低,细胞表面GPA蛋白表达水平降低.同时伊马替尼作用过程中IER3IP1基因在作用3 h时表达明显升高,6 h时降低,12～48 h表达水平基本不变.结论 干扰IER3IP1基因表达后,K562细胞增殖加快,红系分化过程受阻,提示该基因可能在K562细胞增殖和向红系分化过程中发挥作用.     

Selective effects of cyclophosphamide therapy on activation, proliferation, and differentiation of human B cells.

The immune function of B lymphocytes from 12 patients with nonneoplastic immune-mediated diseases receiving chronic low-dose (2 mg/kg per d) cyclophosphamide (CY) was evaluated. There was a selective and differential suppressive effect of CY therapy on the various stages of the B cell cycle including activation, proliferation, and differentiation. The proliferative responses to Staphylococcus aureus Cowan strain I (SAC) and mitogenic concentrations of anti-mu were suppressed. In contrast, B cells that have been presumably activated in vivo proliferated with a normal pattern when exposed to B cell growth factor in vitro. Chronic low-dose CY therapy also suppressed B cell differentiation. Secretion of immunoglobulin by B cells following in vitro triggering with SAC and a T cell supernatant was suppressed in CY-treated patients. Moreover, differentiation of the large in vivo-activated B cells (which do not require an in vitro activation signal) in the presence of appropriate T lymphocyte supernatant was also suppressed. This selective suppression of B cell function at multiple points in the B cell cycle may be responsible for the efficacy of CY therapy in certain antibody and immune complex-mediated diseases.