ENA多肽抗体的检测在风湿性疾病中的应用

风湿性疾病的一个显著特点是患者体内产生自身细胞抗原成分的抗体，其中抗Sm、抗Rib．细胞核核糖核蛋白抗体(抗RNP)，干燥综合症相关抗体甲(抗SSA)，干燥缩合症相关抗体乙(抗SSB)，抗原分子量为70KD的硬皮病相关抗体(抗SCL-70)及抗J0-1等抗体的检测有助于SLE、MCTD、SS、PSS、PM／DM等的诊断和鉴别诊断。我们应用IBT对203例各种风湿性疾病进行了ENA中不同蛋、白多肽的相应抗体的检测。     

抗核抗体在自身免疫性疾病诊断中的应用

自身免疫性疾病的诊断标准之一，是检测出疾病特异性或相关性自身抗体^[1]。这些抗体包括抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（抗dS-DNA）、抗可提取的核抗原抗体（抗ENA）谱。及时准确地检测到这些自身抗体，为自身免疫性疾病的诊断与疗效观察提供了重要依据。笔者对126例自身免疫性疾病患者进行了ANA、抗dS-DNA、抗ENA谱检测，对3个项目与自身免疫性疾病间的关系进行分析，对其在临床诊断及应用中的作用进行探讨。     

ENA多肽抗体的检测对风湿病的诊断意义

在风湿病患者中有多种自身抗体,我们应用免疫印迹法（Western-blot）检测了52例风湿病患者和70例其他病种患者的ENA多肽抗体,了解风湿病中ENA多肽抗体的分布及其与临床诊断的关系。     

SLE患者ENA多肽抗体检测

从1848年Hargraves发现红斑狼疮（LE）现象到现在抗核抗体（ANA）的研究有了很大进展，特别是随着分子生物学和检测技术的突飞猛进发展，自八十年代开始，国外对抗核抗体的研究就开始转入抗体所作用的自身披抗原的分子组成，抗原表位及其在细胞内的生物学免疫沉淀技术和免疫印迹技术。本文对15例SLE患者和20树非风湿性疾病患者应用免疫印迹技术（IBT啦出SLE患者血清中的ENA多肽抗体措的特征．现将结果报告如下．1材料与方法1．1患者15例SLE患者均由我院皮肤科按国际诊断标准确诊的门诊和住院病人。其中男2例，女13例，年龄从15～54…     

免疫印迹技术检测ENA实验中常见问题及注意事项

免疫印迹技术 (immunblotting technique,IBT)是从分子水平识别各种自身抗体与特异性蛋白多肽结合的分子量 [1 ]。ENA是盐水可提取抗原的英文缩写 ,又称可提取性核抗原抗体 ,该部分核抗原可溶于盐水 ,许多自身免疫性疾病 (例如 :系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、硬皮病等 )患者可产生针对可提取核抗原的抗体 ,例如 :抗 Sm、抗 U1RNP、抗 SSA、抗SSB、抗 Sc L- 70等十几种抗体 ,因此该检测对疾病的诊断有重大的帮助。免疫印迹法检测可提取核抗原即 ENA多肽抗体谱的实验原理是 :将已知的与自身免疫性疾病相关的抗原通过…     

一步免疫印迹法同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体及其对RA患人的诊断价值

目的 提高抗RA33抗体诊断类风湿性关节炎（RA）的特异性。方法 建立一步免疫印迹法，可同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体。并对266例不同风湿性疾病患者血清和24例正常人血清进行了检测。结果 抗RA33抗体阳性率：RA38％（38/100），SLE35．8％（24/67），MCTD36．4％（8／22），SS8．3％（3/36）。抗RA33抗体阳性血清中抗ENA抗体的检出率：95．8％（23／24）SLE有抗Sm／ulRNP抗体，100％（8／8）MCTD有抗ulRNP抗体，100％（3／3）SS有抗SSA/SSB抗体，RA血清抗ENA抗体均为阴性。结论 本文建立的一步免疫印迹法可有效地鉴别抗RA33抗体阳性的RA和SLE、MCTD等病人。     

免疫印迹技术检测抗ENA抗体谱的应用现状及技术进展

目的 分析探讨免疫印迹法(IBT)检测可提取核抗原(ENA)多肽抗体谱报告结果和临床应用中出现的常见问题、解决措施及技术进展。方法 利用万浮生物技术公司的IBT试剂盒检测抗ENA抗体进行观察，分析总结近年来该项检测结果出现的问题。结果 因为对抗ENA自身抗体谱的谱带特征认识不足，对免疫印迹法缺乏深入了解，在临床中出现抗Sm、抗U1RNAP、抗SSA、抗rRNP等抗体的错误判断；另一方面，临床医师过分地看重实验报告，以至为数不少的病人被误诊、误治，造成不可弥补的医源性疾患。结论 为了使免疫印迹法测定抗ENA抗体谱更好地运用于，临床，不论检验人员还是风湿免疫科医师，均应正确看待多肽抗体检测的临床意义。     

抗核抗体谱在自身免疫性疾病中的临床应用

目的探讨抗核抗体（ANA）谱在自身免疫性疾病中的临床应用。方法 ANA检测采用间接免疫荧光法,可提取性核抗原（ENA）抗体多肽抗体谱用免疫印迹法。结果 540例患者中,有45例自身免疫性疾病患者,混合性结缔组织病（MCTD）5例,干燥综合征13例,皮肌炎1例,系统性红斑狼疮（SLE）26例,所有自身免疫性疾病患者ANA均为阳性,但是干燥综合征患者仅抗SSA或抗SSB阳性,皮肌炎仅Jo-1阳性,MCTD患者抗nRNP、抗SSA、抗SSB阳性,而SLE患者的ENA抗体谱可以显示,抗nRNP、抗Sm、抗SSA、抗SSB、抗dsDNA等多条阳性带。结论抗体谱对各种自身免疫性疾病的诊断具有重要意义。     

126例ENA多肽抗体谱的检测结果分析

我们采用免疫印迹法（IBT）对126例已确诊为风湿病患者的血清做了ENA多种抗体的检测．试剂为ENA多肽抗体谱试剂盒，由深圳恒佳生物公司提供，按说明书操作．检测结果见附表．附表126例风湿病患者ENA抗体诸[阳性数和（％）]系统性红斑狼疮患者Sm抗体阳性率最高，此抗体阳性可作为SLE诊断依据之一.SLE中U1RNP和Rib抗体阳性率分别为14．7％和8．2％，SSA＋SSB阳性率为11．6％，因此SSA＋SSB阳性也可作为SLE诊断参考指标．混合性结缔组织病时u1RNP抗体阳性率为76．9％，此抗体阳性是混合性结缔组织病的重要血清学特征。在干燥…     

血清抗ENA抗体的检测及临床应用

血清抗ENA抗体的检测是一种操作简便,灵敏度高,特异性强的实验项目,是目前临床诊断治疗自身免疫性疾病的重要参考指标。尤其抗ENA抗体中的部分抗体与相应疾病的活动性和临床表现进程相关。1何谓ENA以及抗ENA抗体ENA是可提取核抗原的总称,ENA抗原可用盐水或磷酸盐缓冲液从细胞核中提取。ENA为酸性蛋白抗原,是由许多小分子的RNA与各自对应的特异蛋白组成的核糖核蛋白颗粒。ENA抗原中主要包括Sm,RNP,SSA,SSB,Jo-1,Scl-70抗原,这些抗原除有各自的抗原特异性之外,尚可因与蛋白质组成后的分子量大小各不相同而在电泳后被分成不同分子量的条带。不同的自身免疫性疾病可产生不同的抗ENA抗体,根据ENA抗原分子量及抗原特性不同,可用不同的免疫方法对这些自身抗体进行检测[1]。2检测方法检测抗ENA抗体谱的方法较多,早期常用的有双向免疫扩散,对流免疫电泳,这两种方法灵敏度和特异性较低。目前常用的检测方法是斑点酶免疫和免疫印迹枝术,其中免疫印迹技术操作简便,特异性强,是目前各临床实验室广泛采用的检测方法。3抗ENA抗体检测的临床应用3.1抗Sm抗体抗Sm抗体仅发现于SLE患者血清中,是SLE的血清标志抗体,已...     

253例风湿性疾病的ENA自身抗体谱检测及临床意义

从分子水平识别细胞核内各种可抽提核抗原(ENA)是八十年代以来抗核抗体(ANA)研究的重大进展,其在各种风湿性疾病的诊断、分型、治疗及预后推测等方面应用日趋广泛。我们以兔胸腺提取物为抗原,应用免疫印迹技术从分子水平检测相应的抗体,以子解这些自身抗体在各种风湿性疾病中的意义,结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 受检血清:共293份,包括各种风湿性疾病253份和正常人血清30份。血清均来源于我院。     

免疫印迹法检测在自身免疫性疾病ENA多肽抗体谱及临床意义

目的探讨免疫印迹法检测自身免疫性疾病ENA多肽抗体谱的临床应用价值。方法应用免疫印迹法对系统性红斑狼疮(SLE)、混合性结缔组织病(MCTD)、干燥综合征(SS)、弥漫性硬皮病(PSS)、多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)、类风湿关节炎(RA)等140例自身免疫病患者进行可提取性核抗原(ENA)多肽抗体谱检测。一次性同时检测抗Sm、抗U1RNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70、抗JO-1、抗rRNP、抗DM-53、抗RA-54、抗D′E等10种自身抗体。结果6种疾病抗ENA谱阳性率依次为75.6%、90%、70%、50%、42.1%、25%,除出现单项自身抗体阳性外,均出现了两种或两种以上阳性结果,说明患者血清中含有多种自身抗体,ENA系列抗体有相应的疾病抗体谱。结论免疫印迹法检测ENA自身抗体操作简便、省时、特异性好、重复性好、用血量少、不需特殊设备,可同时完成对10种自身抗体的识别和过筛,对提高自身免疫性疾病的诊断水平有很大的帮助。     

二步免疫印迹法的建立及在诊断类风湿关节炎中的意义

建立类风湿关节炎(RA)的特异性诊断方法。方法 用制得的可溶性核提取物为抗原,用免疫印迹法检测类风湿疾病患者血清中的RA33抗体。再以ENA为抗原,第2次用免疫印迹法检测RA33抗体阳性的病人血清中的RNP和Sm抗体。结果和结论 60例RA病人中22例阳性(36.6％),60例系统性红斑狼疮(SLE)病人中12例阳性(20％),两病的RA33抗体阳性率有显著性差别(P<0.05),而122例其他风湿性疾病和正常对照血清全为阴性。第2次免疫印迹法检测发现83％的RA33抗体阳性的SLE病人抗RNP(75％)和(或)抗Sm(33％)抗体为阳性,RA病人全阴性。这样用二步免疫印迹法检测可相对特异地诊断RA。     

混合性结缔组织病

1969年Sharp等[1]提出混合性结缔组织病（MCTD）这一病名。1972年Sharp等进一步报道25例风湿性疾病综合征。临床以系统性红斑狼疮（SLE）、系统性硬化（PSS）和多发性肌炎（PM）等的混合表现为特征，而又不能完全符合各个疾病的诊断标准，同时伴有高效价的可提取的核抗原（ENA）抗体，该抗体对核糖核酸酶（RNase）高度敏感，对胰蛋白酶中度敏感，对去氧核糖核酸酶（DNase）不敏感。抗Sin抗体阴性。患者对激素治疗有效，预后好，命名为MCTD［。：。1免疫学特征典型血清学特征为：①高滴度免疫荧光抗核抗体阳性，呈斑点型；②高满…     

风湿免疫性疾病相关抗原的研究进展

风湿免疫性疾病是以皮肤、关节、血管及多系统损害为主或伴免疫功能异常的一类疾病。该病的发生多与自身免疫异常有关，临床常见的这类疾病主要有类风湿关节炎（RA）、系统性红斑狼疮（SLE）、干燥综合征（SS）、硬皮病（SSc）、炎性肌病、系统性血管炎及混合性结缔组织病（MCTD）等。其特点是在体内能检测出针对自身抗原的抗体，临床上通过检测自身抗体可帮助诊断疾病和判断预后，而寻找风湿免疫性疾病相关抗原对进一步理解其发病机制和寻找新的治疗方法有重要意义。近年来，国内外对风湿免疫性疾病相关抗原和抗体的研究取得很大进展，仅此主要对常见风湿免疫性疾病相关抗原的研究进展综述如下。     

ENA多肽抗体对进行性全身性硬皮病的临床意义

为探讨可提取核抗原(ENA)多肽抗体对进行性全身性硬皮病(PSS)的诊断价值,我们选择确诊PSS患者用免疫印迹法测定了ENA多肽抗体.     

系统性红斑狼疮患者自身抗体及免疫功能检测分析

系统性红斑狼疮是一种常见的累及多脏器的风湿性疾病,也是典型的自身免疫性疾病,由于患者免疫功能紊乱,大量自身抗体的产生及免疫复合物的形成,从而导致疾病的发生。其中抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)及ENA多肽抗体实验的检测,对本病早期诊断极有帮助。我们对70例SLE患者进行了自身抗体的检测并加以分析,为临床诊断治疗提供依据。1资料和方法1.1一般资料70例SLE患者皆按美国风湿协会(ARA)1982年诊断标淮[1]及1997年修订诊断标准确诊[2]。女61例,年龄在14～55岁,平均年龄34.5岁,男9例,年龄在20～52岁,平均年龄36岁。1.2方法(1)A…     

两种方法检测抗SSA抗体对干燥综合征诊断价值的比较

抗SSA抗体为抗ENA抗体中的抗体之一，与干燥综合征（pSS)密切相关，80年代抗ENA抗体的检测多用免疫双扩散法（Immunodiffusion,ID)近年来，随着分子生物技术的发展和应用，国内大多数医院普遍应用ENA多肽抗体谱试剂盒，用免疫印迹法（Immunobolttin test,IBT)来检测抗SSA抗体，但由于IBT法在试剂盒生产及检测操作等过程中受多因素的影响，仅凭52KD报告为抗SSA常给临床诊断造成误导，因此，我们比较了两种方法检测抗SSA抗与临床诊断的符合率，旨在使人们了解ID和IBT法检测抗SSA抗体对PSS的诊断价值，从而建立起多肽抗体检测的正确认识。     

新疆石河子地区汉族人群ANA与抗ENA抗体的检测结果分析

目的回顾本实验室开展抗核抗体（antinuclear antibody,ANA）与抗可提取性核抗原（extractable nuclear anti-gens,ENA）抗体联合检测的情况,分析新疆石河子地区汉族人群中ANA与抗ENA抗体之间的相关性。方法间接免疫荧光法检测ANA,欧蒙线性免疫法检测抗ENA抗体,并采用双盲法分析ANA阳性标本的荧光核型与抗ENA抗体的关系。结果 1084例临床标本中,ANA阳性的标本数399例,阳性率为36.81%（399/1084）。512例标本联合检测ANA抗体和抗ENA抗体。ANA阳性标本数为169例。其核型包括核均质型（122例）、核斑点型（31例）、核周型（12例）、混合型（4例）。抗ENA抗体阳性标本数161例,其中80例标本抗ENA抗体阳性且ANA阴性,有88例标本抗ENA抗体阴性且ANA阳性。在169例ANA阳性的标本中,主要的荧光核型是核均质型。而核均质型ANA标本中,常见的抗ENA抗体是抗Ro/SSA60抗体（35例）。核斑点型ANA标本中,常见的抗ENA抗体是R0/SSA 60抗体（14例）、抗U1RNP（7例）、抗Sm（9例）。核周型ANA标本中,常见的抗ENA抗体是抗R0/SSA60（5例）、抗dsDNA（6例）、抗核小体抗体（5例）、抗组蛋白抗体（5例）。结论 ANA与抗ENA抗体这两种检测方法的吻合程度不佳,ANA的荧光核型与抗ENA抗体类型没有固定的规律。用间接免疫荧光法筛查ANA,并联合抗ENA抗体谱进行分型,才能确定部分ANA靶抗原的类型,必须进一步扩大抗ENA抗体谱。     

ENA多肽抗体对进行性全身性硬皮病的临床意义

为探讨可提取核抗原 ( ENA)多肽抗体对进行性全身性硬皮病 ( PSS)的诊断价值 ,我们选择确诊PSS患者用免疫印迹法测定了 ENA多肽抗体。一、材料和方法1 .标本来源　 PSS组 :临床确诊的 PSS患者1 0 7例 ;疾病对照组 :排除结缔组织病的患者 65例 ;健康对照组 45名。各组间年龄性别无明显差别。空腹取静脉血 3ml分离血清备用。2 .ENA多肽抗体测定　试剂盒购自深圳恒佳公司 ,严格按说明书操作。二、结果和讨论结果表明健康组和疾病对照组 ENA多肽抗体均阴性。 PSS组 ENA多肽抗体谱中 ,仅见 U1RNP抗体阳性率 2 5.2 % ( 2 7/1 0 7) ,…