清开灵注射液生产中板蓝根提取液氨基酸分析

目的分析清开灵注射液生产过程中所用板蓝根提取液的氨基酸的成分。方法柱前衍生化反相高效液相色谱法,色谱柱为ZorbaxEclipse氨基酸分析柱,邻苯二甲醛（OPA）和9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）使氨基酸在柱前发生衍生化以用于色谱分析。结果板蓝根提取液中至少含有15种氨基酸,其中精氨酸、脯氨酸、苏氨酸、缬氨酸和丙氨酸的含量最高,板蓝根提取液是清开灵注射液中精氨酸的主要来源。结论为强化清开灵注射液生产的过程控制和提高产品的质量标准提供了研究思路。     

板蓝根中L-精氨酸的柱前衍生法HPLC分析

目的　建立板蓝根药材中 L-精氨酸的含量测定方法。方法　 2 ,4 -二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化 HPL C方法 ,以 Phenomen ODSC18柱 (4.6 mm× 2 5 0 mm,10μm)为分析柱 ,0 .1mol.L-1醋酸钠缓冲液 (p H 6 .4 ) -乙腈(86 :14 )为流动相 ,流速 1.0 m L .min-1,波长 36 0 nm下检测 ,分析了板蓝根药材中 L -精氨酸的含量。结果　本法操作简单 ,重复性好 ,并以该法分析了板蓝根药材中 L-精氨酸的含量。结论　本文建立的柱前衍生化 HPL C方法适合于板蓝根药材中 L -精氨酸的含量测定 ,结果表明 ,不同产地来源的板蓝根药材 L -精氨酸的含量存在着差别。     

高效液相色谱法测定板蓝根中主要游离氨基酸的含量

目的:采用柱前衍生法测定板蓝根中5种游离氨基酸含量。方法:采用异硫氰酸苯酯柱前衍生,高效液相色谱法测定了板蓝根中精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸和缬氨酸的含量。色谱柱:Phenomenex ODS 3(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相A:醋酸钠缓冲溶液-乙腈(370:28),流动相B:乙腈-水(4:1),流速1 mL·min~(-1),流动相A与B比例,0.00 min为100:0;18.00 min为91:9;18.01 min为80:20;40.00 min为67:33;40.01 min为0:100,保持5.00 min。柱温43℃,测定波长254 nm;结果:本方法测定精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸和缬氨酸的线性范围分别为0.016-0.47(r=0.9993),0.0018—0.072(r=0.9995),0.0022—0.086(r=0.9994),0.016-0.80(r=0.9997),0.0019—0.097 mg·mL~(-1)(r=0.9998);平均回收率分别为94.9%,108.8%,98.2%,99.0%和96.6%。结论:本法不需要专门的氨基酸分析仪,操作简便,灵敏度高,结果准确可靠。     

采用层析法对不同板蓝根制剂中几种成分的比较

板蓝根之主要成分含有靛蓝 ,靛玉红 ,β—谷甾醇 ,吲哚甙 ,芥子甙以及 7种氨基酸 (精氨酸、谷氨酸、酪氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、γ—氨基酸 )、糖类等。本文对湖南省、广东省、江苏省、甘肃省生产的板蓝根干糖浆、注射液中所含氨基酸的种类采用层析分析法进行比较试验 ,报告如下 :一、仪器和试药玻璃板、点样毛细管 10 μｌ。1′、2′、3′、4′分别为湖南、广东、江苏、甘肃生产的注射液。 5′、6′、7′、8′分别为湖南、广东、江苏、甘肃生产的干糖浆的丙酮提取液。 9为脂溶性成分对照品(Ｒｆ值大小顺序为 :靛蓝、β—谷甾醇、靛玉…     

中药注射液中高分子物质初步研究

目的:应用凝胶色谱法对几种中药注射液中的高分子物质进行测定。方法:采用TSK GEL 2000 SWxl(7.8 mm×300mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.83%三氟乙酸溶液(40∶60),流量为0.7 mL.min-1,检测波长214 nm,进样量为20μL。结果:清开灵注射液和黄芪注射液中均检出高分子物质,而参芪扶正注射液中未检出。结论:凝胶色谱法测定中药注射液中高分子物质操作简便,结果准确可靠,可作为中药注射液的质量控制方法,为中药注射液的安全性评价提供了思路。     

多波长高效液相色谱法测定清开灵注射液中3种有效成分

目的:测定清开灵注射液中的3种有效成分,黄芩苷、栀子苷和绿原酸的含量。方法:紫外-三波长同时检测的高效液相色谱法:色谱柱为Kromasil C18分析柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为(A)0.3％甲酸水溶液、(B)甲醇;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min-1。检测波长为240 nm(栀子苷)、280 nm(黄芩苷)、330nm(绿原酸);线性梯度洗脱:(B:30%→60%)/(0→25 min)保持10min(B:60%→100%)/(35→40 min) 保持5 min。结果:建立了对清开灵注射液中3个成分进行定量的测定方法,并将此方法用于10批清开灵注射液的各成分测定。结论:为中药注射液提供了更简便、合理、可靠的质控方法。     

板蓝根水醇提取液中氨基酸成份的测定

本文借助于氨基酸自动分析仪和荧光检测,从板蓝根水醇提取液中测出14种氨基酸成份。其中天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸等9种为在板蓝根中新发现成份。对板蓝根氨基酸成份研究,为制订地道板蓝根质量标准提供客观依据。     

板蓝根水醇提取液中氨基酸成份的测定

本文借助于氨基酸自动分析仪和荧光检测,从板蓝根水醇提取液中测出14种氨基酸成份。其中天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸等9种为在板蓝根中新发现成份。对板蓝根氨基酸成份研究,为制订地道板蓝根质量标准提供客观依据。     

AccQ-Tag法测定复方精氨酸胶囊中精氨酸的含量

目的：建立测定复方精氨酸胶囊中精氨酸含量的AccQ—Tag法^[1,2,3]。方法：以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)为衍生剂，与复方精氨酸胶囊中精氨酸柱前定量衍生，用Waters HPLC仪，AccQ—Tag^TM氨基酸分析柱，以pH4．95醋酸钠缓冲液为流动相A，乙腈—水(3：2)为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为248nm。结果：线性范围：0．1006～0．9054μg，r=0．9995(n=5)。回收率：99．7％，RSD0．38％(n=5)。结论：本法快速、简便，辅料无干扰，结果满意。     

三七中十八种游离氨基酸的柱前衍生化-HPLC法测定

建立了柱前衍生化-HPLC法同时测定三七中的18种游离氨基酸.以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,以乙腈-0.05 mol/L乙酸钠缓冲液为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm.结果显示三七根中的游离氨基酸以精氨酸、丙氨酸和脯氨酸为主,约占18种游离氨基酸总量的80%.18种氨基酸的平均回收率为96.5%～103.4%,RSD均小于3%.     

脂质体仿生膜联合LC-MS筛选板蓝根有效成分

目的借助脂质体仿生膜手段探寻传统中药板蓝根药材里的有效成分。方法采用薄膜分散法制备空白脂质体,将其与板蓝根提取液置于37℃水浴中孵化;运用离心沉淀-超滤法,分离脂质体、样品超滤液。借助HPLC-UV、HPLC-MS以及氨基酸衍生化手段跟踪检测样品被吸收情况,综合分析推断脂质体仿生膜筛选下的板蓝根有效成分。结果通过样品脂质体混悬液、板蓝根提取液、对照品溶液与阴性样品溶液之间的色谱、质谱数据对比分析,确定在板蓝根脂质体中存在5种主要板蓝根成分,分别是精氨酸、胞苷、尿苷、表告依春和腺苷。结论这5种成分可能是中药板蓝根药理作用的主要有效成分,而采用的脂质体仿生膜可以作为一种可行的中药复杂样品筛选手段。     

高效液相色谱法测定清开灵注射液中绿原酸含量

目的建立检测清开灵注射液中绿原酸含量的高效液相色谱法。方法采用Shimadzu-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87),检测波长327 nm,流速1.0 mL/min。结果绿原酸进样量在0.082 8～0.828 0μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 1(n=5);平均加样回收率为97.53%,RSD=1.21%(n=6)。结论所用方法准确可靠、重复性好,可用于清开灵注射液的质量控制。     

柱前衍生化HPLC测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量

目的:建立HPLC法测定人纤维蛋白粘合剂中盐酸精氨酸和亮氨酸的含量.方法:采用Shim-pack CLC-ODS色谱柱,柱前衍生化,流动相A为50%乙腈,流动相B为醋酸盐缓冲液;检测波长362 nm;用外标法检测.结果:本色谱条件下2种氨基酸衍生物能良好地分离,衍生化试剂对氨基酸分析无干扰.平均回收率:盐酸精氨酸为102.8%,RSD为0.83%;亮氨酸为103.8%,RSD为0.92%.结论:本方法准确,方便,费用低,可用于人纤维蛋白粘合剂中2种氨基酸含量的控制.     

HPLC法测定清开灵注射液中黄芩苷的含量

目的建立用HPLC法测定清开灵注射液黄芩苷含量的方法.方法以HYPERSIL,BDS,C18色谱柱,流动相:水-甲醇-冰醋酸(55:45:1),检测波长274nm.结果黄芩苷在0.2～1.0μg浓度范围内呈良好的线性关系.平均回收率为99.93%,RSD=0.7%(n=6).结论该法方便、快捷、准确,可靠.     

柱前衍生高效液相色谱法测定胎盘多肽注射液中的氨基酸

目的建立柱前衍生-高效液相色谱法测定胎盘多肽注射液中游离氨基酸和水解后总氨基酸的方法。方法以α-氨基丁酸为内标,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)为柱前衍生化试剂,采用KromasilC18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,140 mmol/L醋酸铵缓冲液(pH 5.10)和57%乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,同时测定胎盘多肽注射液中21种游离氨基酸和水解后氨基酸含量。结果该方法重现性好,精密度高,各氨基酸浓度在0.005～0.50 mmol/L范围内线性关系良好;各氨基酸检出限≤1.57 ng。结论建立的AQC柱前衍生-高效液相色谱法可用于检测胎盘多肽注射液中氨基酸的含量,测定的结果为胎盘多肽注射液的质量研究和评价提供了依据。     

清开灵注射液质量评价研究

目的建立清开灵注射液中测定胆酸、栀子苷、黄芩苷含量的HPLC方法,对不同厂家生产的样品进行质量评价。方法测定胆酸用C_(18) YMC—Pack ODS—A色谱柱,乙腈-水-磷酸(35:65:0.1)为流动相,检测波长192nm;测定栀子苷用C_(18)色谱柱,流动相为乙腈-水(10:90),检测波长238nm;测定黄芩苷用SUPELCO C_(18)色谱柱,甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相,检测波长276nm。结果胆酸平均回收率为97.63％,RSD为1.73％;栀子苷平均回收率为98.15％,RSD为1.64％;黄芩苷平均回收率为99.06％,RSD为1.27％。结论本方法灵敏、准确、简便,可用于清开灵注射液质量控制。     

反相高效液相色谱-柱前衍生化法测定大青叶中氨基酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定大青叶中精氨酸和脯氨酸含量的方法。方法:采用2,4—二硝基氟苯柱前衍生化,将氨基酸在碱性条件下衍生后直接进样测定;色谱柱为KromasilC18,流动相为醋酸钠缓冲溶液(pH=6.4)-乙腈(850∶150),检测波长为360nm,外标法计算含量。结果:精氨酸和脯氨酸进样量分别在0.627μg～5.016μg(r=0.9996)、0.874μg～7.000μg(r=0.9995)范围内线性关系良好;平均回收率均为98.2%(RSD=2.3%、2.2%)。结论:本法简便、准确、可靠,适用于大青叶中氨基酸的含量测定。     

柱前衍生RP-HPLC测定法半夏中的精氨酸和γ-氨基丁酸

目的采用柱前衍生RP-HPLC法测定法半夏中精氨酸和γ-氨基丁酸的含量。方法在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成的衍生物用于检测;采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),用二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05 mol·L-1醋酸钠溶液(pH6.5),流动相B为乙腈-水(80∶20),检测波长248 nm。结果精氨酸进样量10.20～132.60 ng、γ-氨基丁酸进样量12.01～156.13 ng与峰面积的线性关系良好,加样回收率分别为98.3%、99.1%。结论所用方法结果准确,重复性好。     

Determination of arginine and γ - aminobutyric acid in Pinellia tuber by HPLC

目的 采用柱前衍生RP - HPLC法测定法半夏中精氨酸和γ-氨基丁酸的含量.方法 在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成的衍生物用于检测;采用Venusil - AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5 μm),用二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05 mol·L-1醋酸钠溶液(pH6.5),流动相B为乙腈-水(80∶20),检测波长248 nm.结果 精氨酸进样量10.20 ～132.60ng、γ-氨基丁酸进样量12.01～156.13 ng与峰面积的线性关系良好,加样回收率分别为98.3％ 、99.1％.结论 所用方法结果准确,重复性好.     

HPLC—ELSD法测定疏血通注射液中17种未衍生氨基酸含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),直接测定疏血通注射液中17种未衍生氨基酸含量的方法。方法:以异亮氨酸等氨基酸为标准品;色谱柱:Prevail~(TM) C_(18)(4.6mm×250mm,5μm);流动相A:乙腈,流动相B:5.0mmol·L~(-1)七氟丁酸的0.7%三氟醋酸溶液,流动相A与B比例:0min为0∶100,5min为0∶100,8min为15∶85,25min为35∶65;漂移管温度:115℃;气体流量:2.5L·min~(-1);流速:0.8mL·min~(-1);柱温:35℃;进样量:10μL。结果:在25min内即可完成对疏血通注射液中17种氨基酸的分离测定,氨基酸质量浓度0.071～2.285g·L~(-1)时,其对数值与峰面积对数值线性关系良好,17种氨基酸的加样回收率为92.9%～105.1%,信噪比为3时,异亮氨酸检出限为20mg·L~(-1)。结论:该法不需要专门的氨基酸分析仪和衍生化氨基酸,操作简便,有足够的灵敏度,结果准确可靠。