TGF-β1通过Bim诱导胃癌BGC823细胞的凋亡

目的:探讨TGF-β1诱导胃癌细胞凋亡机制.方法:流式细胞术分析胃癌细胞BGC823细胞凋亡率的改变,Western blot分析Bim、Caspase 8和Caspase 9蛋白含量变化.结果:TGF-β1作用后,BGC823细胞凋亡率明显增加,同时伴有Caspase 9激活,但不伴Caspase 8激活;阻断Bim的表达后BGC823细胞凋亡率明显降低.结论:TGF-β通过Bim-Caspase 9途径诱导BGC823细胞的凋亡.     

TGF-β1通过诱导自噬促进胃癌SGC7901细胞侵袭

目的:探讨转化生长因子(TGF-β1)诱导人胃癌SGC7901细胞发生自噬的作用及其对细胞侵袭能力的影响.方法:将体外培养的人胃癌SGC7901细胞用不同浓度TGF-β1处理24 h,采用Western blot 法检测细胞中自噬标记蛋白LC3和Beclin1的表达水平.Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力变化.结果:TGF-β1可显著诱导人胃癌SGC7901细胞发生自噬,且随着浓度增加自噬表达水平逐渐升高.自噬抑制剂3-MA能够阻断TGF-β1诱导的自噬.此外,TGF-β1可显著增强人胃癌SGC7901细胞的迁移和侵袭能力,而自噬抑制剂3-MA能够逆转这一过程.结论:TGF-β1通过诱导自噬发生从而促进人胃癌SGC7901细胞的侵袭.     

TGF-β1对人早孕滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响

目的：研究转化生长因子-β1（TGF-β1）对人早孕滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响。方法：用流式细胞术法研究TGF-β1对人早孕滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响。结果：随着TGF-β1浓度的增高，早孕滋养层细胞的凋亡逐渐呈浓度依赖性增加，并且高浓度组的凋亡与低浓度相比，凋亡峰明显增大，各浓度组组问比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。结论：TGF-β1能诱导人早孕滋养层细胞的凋亡，从而预防其过度生长而导致恶性病变的发生。     

Snail在TGF-β1诱导胃癌细胞MGC-803上皮间质转化中的作用

目的 探讨Snail在TGF-β1诱导人胃癌细胞MGC-803上皮细胞向间质细胞转化过程中的表达及其作用。方法 TGF-β1处理人胃癌细胞MGC-803不同时间(0 h,3 h,6 h,24 h,48 h,72 h),倒置显微镜观察细胞形态的变化,Western blot方法检测Snail蛋白及E-cadherin,Vimentin蛋白的表达情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化。结果 (1)随着TGF-β1作用时间的延长,MGC-803细胞形态发生变化,伪足不同程度的增多;(2)在外源性TGF-β1作用下,胃癌细胞MGC-803均不同程度地表达Snail和E-cadherin,Snail从0 h到6 h表达量增强,到6 h时达到最高。E-cadherin蛋白从0 h到6 h表达逐渐增高,6 h时最高,后续变化不明显。Vimentin蛋白6 h表达量最低,此后逐渐升高,72 h时表达量最高;(3)Transwell小室实验显示6 h时,细胞开始穿过ECM膜,随着时间的延长,穿过的细胞逐渐增多,72 h最多。结论 在TGF-β1诱导人胃癌细胞MGC-803细胞EMT的过程中,Snail蛋白起到重要作用,启动Vimentin转录表达。     

TGF-β1对人早孕滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)对人早孕滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响。方法:用流式细胞术法研究TGF-β1对人早孕滋养层细胞细胞周期和凋亡的影响。结果:随着TGF-β1浓度的增高,早孕滋养层细胞的凋亡逐渐呈浓度依赖性增加,并且高浓度组的凋亡与低浓度相比,凋亡峰明显增大,各浓度组组间比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:TGF-β1能诱导人早孕滋养层细胞的凋亡,从而预防其过度生长而导致恶性病变的发生。     

Gli-1信号通路对TGF-β1诱导的人胃癌细胞上皮间质转化和侵袭的影响

目的:探讨核转录因子神经胶质瘤关联癌基因同源物1（glioma associated oncogene homolog 1,Gli-1）对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用机制。方法:体外采用10 ng/ml TGF-β1对胃癌SGC-7901细胞进行处理,使用倒置显微镜观察细胞形态变化,RT-PCR和Western blot检测EMT上皮表型蛋白E-cadherin和间质表型蛋白Vimentin的表达水平;Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力变化,检测TGF-β1 对SGC-7901细胞发生EMT 的影响;同时采用RT-PCR和Western blot检测Gli-1的mRNA和蛋白表达水平。随后进一步采用Gli-1基因特异性阻断剂GANT 61阻断Gli-1表达,并使用TGF-β1（10 ng/ml）对SGC-7901细胞进行处理,RT-PCR 和Western blot检测Gli-1、E-cadherin和Vimentin mRNA 及其蛋白表达水平的改变,并使用Transwell细胞侵袭实验检测阻断Gli-1对SGC-7901细胞侵袭能力的影响。结果:TGF-β1可以诱导人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化并促进细胞侵袭。TGF-β1可以在mRNA和蛋白水平下调上皮表型蛋白E-cadherin的表达、提高Gli-1和间质表型蛋白Vimentin的表达。TGF-β1可以明显提高SGC-7901细胞侵袭,而阻断Gli-1后可以抑制TGF-β1诱导的人胃癌SGC-7901细胞上皮间质转化和细胞侵袭。结论:胃癌SGC-7901细胞中Gli-1 可能参与TGF-β1 介导的EMT 的发生,Gli-1 可能作为胃癌基因治疗中的有效靶点发挥作用。     

腹腔中由游离癌细胞分泌的TGF-β1影响腹膜间皮形态与功能进而促进癌转移的研究

目的:研究胃癌分泌的转化生长因子-β1(TGF-β1)对腹膜的破坏机制及TGF-β1抑制剂对腹膜的保护.方法:ELISA法检测胃癌分泌上清中的相关细胞因子含量及在胃癌-腹膜相互作用中TGF-β-Smad信号通路蛋白的水平.观察TGF-β1抑制剂SB431542对腹膜癌转移的抑制作用.结果:5种胃癌细胞系均能分泌大量TGF-β1,TGF-β1的分泌量明显多于其他细胞因子.Western证实了TGF-β1及其信号通路TGF-β1/Smad2、3参与胃癌对间皮的损伤.胃癌上清能破坏间皮层,致损伤脱落,与TGF-β1共培养能明显影响间皮细胞生长.TGF-β1抑制剂SB431542可阻止胃癌上清对间皮的损伤.结论:胃癌上清中TGF-β1高表达,影响腹膜间皮形态与功能进而促进了癌转移,机制可能与Smad信号通路有关.TGF-β1抑制剂能减轻胃癌上清对间皮的损伤.     

TGF-β1在非小细胞肺癌中的研究进展

转化生长因子-β（ transforming growth factor-β, TGF-β）是新近发现的具有多种生物学功能的生长因子超家族,在调节细胞生长和分化过程中起重要作用。近年来,许多学者在研究中发现TGF-β与肿瘤的发生发展具有紧密的联系,表现为其对肿瘤的作用呈双相性,即在肿瘤早期抑制细胞增殖并诱导凋亡,而在肿瘤生长的进展期作为肿瘤生长的刺激因子加速肿瘤生长转移。这种在肿瘤发生初期与进展期相反的作用特点逐渐引起了人们的关注,使TGF-β的研究成为了肿瘤学研究领域的一大热点。本文对TGF-β1在非小细胞肺癌（ non-small-cell lung cancer,NSCLC ）中的研究进展做一简要综述。     

腹腔液中TGF-β1mRNA表达与胃癌预后的关系

[目的]探讨腹腔液中TGF-β1 mRNA表达与胃癌预后的关系。[方法]采用RT-PCR法检测50例胃癌患者腹腔液中TGF-β1 mRNA的表达,同时行腹腔液细胞学检查（PLC）。[结果]50例腹腔液中均检测到TGF-β1 mRNA的表达,其表达水平与浆膜类型、PLC检查及TNM分期有关（P<0.05）。[结论]腹腔液中TGF-β1 mRNA的表达水平与胃癌腹膜转移相关因素及TNM分期密切相关,检测其表达对估计胃癌患者的预后具有重要意义。     

TGF-β1诱导乳腺癌细胞上皮-间充质转化中相关miRNAs筛选

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导乳腺癌细胞MCF-7上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的最佳浓度以及miRNAs在其中的差异表达.方法:不同浓度的TGF-β1作用于MCF-7细胞48h,光学显微镜下观察MCF-7细胞形态学的变化,同时Real-time PCR检测MCF-7细胞中上皮和间充质标志物表达变化;进一步利用Real-time PCR对通过生物信息学挑选的差异表达的miRNAs进行验证.结果:10ng/ml的TGF-β1作用MCF-7细胞48h后,能诱导MCF-7细胞发生EMT转化,同时筛选出与EMT密切相关的4个miRNAs(miR-16,miR-196a,miR-196b和miR-21).结论:miR-16、miR-196a、miR-196b和miR-21在TGF-β1诱导的EMT细胞模型中表达上调,发现这4个miRNAs与TGF-β1诱导的EMT密切相关.     

非小细胞肺癌患者血清中TGF-β1与VEGF的表达及临床意义

目的探讨NSCLC患者血清中转化生长因子β（1TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其临床意义。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测58例NSCLC患者术前血清和29例健康体检者血清中TGF-β1和VEGF的水平,比较两组血清TGF-β1和VEGF表达水平的差异以及与临床病理特征的关系。结果 58例NSCLC患者血清中TGF-β1和VEGF水平均显著高于健康者（P〈0.01）,血清TGF-β1和VEGF的表达水平与病理分化低、临床分期晚及淋巴结转移呈正相关关系（P〈0.01）,而与性别、年龄、病理类型等差异均无统计学意义（P〉0.05）;血清TGF-β1表达水平与VEGF水平呈正相关（P〈0.01）。结论 TGF-β1和VEGF可能共同参与了NSCLC血管生成的作用,从而促进NSCLC的发生、发展和转移。     

CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌细胞紫杉醇耐药的作用及机制研究

目的:探讨CTEN通过TGF-β1促进非小细胞肺癌(NSCLC)细胞紫杉醇耐药的作用和分子机制.方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导非小细胞肺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为A549/R,采用定量PCR和Western blotting检测耐药细胞和亲本细胞中CTEN和TGF-β1 mRNA及蛋白的表达,应用Lipo-f...     

TGF-β1可通过ERK信号通路调节胃癌细胞MMP-2和MMP-9的表达

目的 探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）/丝裂原活化的蛋白激酶（MAPK）通路在调节胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达中的作用。方法 以MKN45和BGC823胃癌细胞系为研究对象。明胶酶谱法检测TGF-β1对各细胞MMP-2和MMP-9表达的影响,Western蛋白印迹检测在TGF-β1作用下各细胞中MAPK（P38、JNK、ERK）的活化情况。用相应MAPK通路的特异抑制剂对TGF-β1调节各细胞MMP-2和MMP-9的表达进行阻断研究。结果 TGF-β1可上调MKN45和BGC823细胞MMP-2和MMP-9的表达;TGF-β1可诱导BGC823细胞P38、MKN45和BGC823细胞ERK及JNK的活化;ERK特异抑制剂PD98059可明显抑制TGF-β1诱导MKN45和BGC823细胞MMP-2和MMP-9的表达,但P38特异抑制剂SB203580和JNK特异抑制剂SP600125对TGF-β1诱导这两种细胞MMP-2和MMP-9的表达无明显影响。结论 TGF-β1可通过活化ERK信号通路上调MKN45和BGC823胃癌细胞 MMP-2和MMP-9的表达。     

Versican和TGF-β1在胃癌中的表达及临床意义

目的:研究胃癌组织中Versican和TGF-β1的表达及其与胃癌细胞增殖的关系。方法:用免疫组织化学方法检测80例胃癌组织和30例癌旁正常组织中Versican、TGF-β1和Ki-67的表达。结果:Versican在胃癌中的阳性率显著高于正常胃黏膜(P=0.001）。主要表达于胃癌间质纤维母细胞的胞浆，且与胃癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移显著相关（P<0.05）；胃癌中TGF-β1的阳性率和Ki-67表达均显著高于正常胃黏膜（P<0.001），且均与浸润深度、临床分期和淋巴结转移相关（P<0.05）；在胃癌组织中Versican与TGF-β1的表达呈正相关（r=0.256，P=0.022）。结论:胃癌组织中Versican和TGF-β1的表达异常增高，二者均可促进胃癌细胞的生长，并且与胃癌的临床病理特征有关，为胃癌的治疗提供了潜在的靶点。     

RNA干扰TGF-β1对Ms细胞肺转移的抑制作用及对Ki-67 VEGF和uPA表达的影响

通过RNA干扰技术沉默人涎腺黏液表皮样癌Ms细胞转化生长因子β1（TGF-β1）的表达,观察TGF-β1沉默后对裸鼠肺转移及Ki-67、VEGF和uPA蛋白表达的影响。方法：将Ms细胞、转染空载体的Ms细胞、转染TGF-β1 shRNA的Ms细胞分别经裸鼠尾静脉注射单细胞悬液,6 w后脱颈处死裸鼠,放大镜下计数肺表面肿瘤结节数,每组8只。免疫组织化学法检测裸鼠肺转移瘤组织中Ki-67、VEGF和uPA蛋白的表达。结果：与对照组和空载体组相比,转染TGF-β1 shRNA组裸鼠形成的肺表面结节数显著降低（P<0.05）,转移抑制率为47.6%;裸鼠肺转移瘤组织中Ki-67、VEGF和uPA蛋白的表达明显降低。结论： RNA干扰技术沉默人涎腺黏液表皮样癌Ms细胞TGF-β1,可显著降低Ms细胞在裸鼠体内的肺转移能力及下调Ki-67、VEGF和uPA蛋白的表达。     

TAM通过PLGF/Flt-1和TGF-β1通路促进非小细胞肺癌生长和肿瘤血管异生的研究

目的 探讨胎盘生长因子(PLGF)介导非小细胞肺癌(NSCLC)细胞和肿瘤相关巨噬细胞(TAM)之间相互作用的具体机制。方法 采用尾静脉注射法将转染腺病毒(AAV)的NSCLC A549细胞注入10周龄的雄性NOD/SCID小鼠体内,构建小鼠肺癌动物模型。流式细胞技术检测瘤体内各种巨噬细胞(MΦ)亚型,RT-qPCR检测肿瘤细胞和TAM中PLGF、血管内皮生长因子受体(Flt-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。根据A549细胞和MΦ细胞的培养条件不同,分为单纯A549组,单纯MΦ组,A549+MΦ组,A549+MΦ+sFlt-1组(加入10 μg/L sFlt-1),PLGF+MΦ组(加入100 ng PLGF)和PLGF+MΦ+sFlt-1组(加入100 ng PLGF和10 μg/L sFlt-1)。Transwell、MTT法分别检测不同共培养条件下A549细胞的增殖和迁移能力。根据HUVEC细胞的培养条件,分为对照组、条件培养基(CM)组、CM+SB431542组、TGF-β1组和TGF-β1+SB431542组,HUVEC细胞胶原凝胶测定法检测肿瘤血管异生情况。结果 与RFP-细胞相比,PLGF主要由肿瘤细胞表达(31.72±4.69 vs. 2.31±0.06,P＜0.001),而Flt-1主要由CD163+的巨噬细胞表达(P＜0.001)。A549+MΦ组A549细胞增殖能力显著强于单纯A549组和A549+MΦ+sFlt-1组(OD值:3.62±0.23 vs. 4.53±0.34 vs. 3.71±0.37,P＜0.05)。TAM/M2巨噬细胞中TGF-β1的表达量高于M1巨噬细胞(0.99±0.23 vs. 0.07±0.02,P＜0.05)。CM组和TGF-β1组中HUVEC细胞管状结构的形成最多(P＜0.05),TGF-β1抑制剂SB431542可抑制这一现象。结论 TAM和NSCLC细胞间通过PLGF/Flt-1和TGF-β1信号通路间的交互作用,促进NSCLC的生长和血管异生。     

TGF-β1和TβRⅡ在胰腺癌组织中的表达及临床意义

对人胰腺癌中转化生长因子β１及其Ⅱ型受体的表达进行研究,探讨其与胰腺癌进展,转移的关系,方法应用ＳＡＢＣ免疫组化方法检测ＴＧＦ－β１、ＴβⅡ在１０例正常胰腺,１３例慢性胰腺炎和３６例胰腺癌中的表达。     

TGF-β1对人单核细胞来源树突状细胞的影响

目的探讨TGF-β1对人单核细胞来源DCs活性的影响.方法在诱导DCs成熟时分别加入TGF-β1、IL-2+TGF-β1、CD40L+TGF-β1以及TNF-α+TGF-β1,比较不同细胞因子对DCs的细胞表面标志CD50、CD83、CD80、CD1-α、CD86、HLA-DR和CCR7表达的影响;对DCs分泌IL-12水平的作用以及DCs活化自体T细胞能力的变化.结果TGF-β1组DCs表面标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR、CCR7均明显低于其它各组(P＜0.05);IL-12的分泌水平低于其它各组(P＜0.05);激发自体T细胞能力亦较弱(P＜0.05);与其余各组比较,在第10天时TNF-α组DCs表面分子表达较成熟,活化T细胞能力亦较强(P＜0.05).结论TGF-β1对DCs的成熟以及免疫活性具有明显的抑制作用,而TNF-α能够有效逆转TGF-β1的作用.     

血浆TGF-β1对非小细胞肺癌（NSCLC）放射性肺损伤的预测价值

放疗在肺癌治疗中占有重要地位,在放疗中放射性肺损伤是治疗过程中的主要并发症,如何在临床治疗中早期预测放射性肺损伤的发生,对于疾病的治疗及预后具有重大意义。 TGF-β1（ Trans-forming growth factor-β1）可诱导炎性细胞包括淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞等促使纤维化的形成,采血检测发现放疗后发生放射性肺损伤的患者中,在放疗不同时期血浆TGF-β1表达水平发生变化,因此本文从细胞因子TGF-β1着手,综述了其单独、联合放射物理、其他细胞因子、基因等多方面探讨其在预测放射性肺损伤方面的价值。     

血浆TGF-β1与放射性肺损伤的相关性研究

目的探讨放疗前后血浆TGF-β1的水平和V20与发生放射性肺损伤的相关性。方法受三维适形放疗的53例肺癌患者,肿瘤总照射剂量40～70Gy,常规分割2Gy/次,5次/周。计划控制V20≤35%,脊髓剂量≤45Gy。应用ELISA方法对患者放疗前后血浆TGF-β1的浓度进行定量检测。结果全组放射性肺损伤的发生率为32.1%(17/53),其中Ⅱ级或Ⅱ级以上发生率为13.2%。放疗结束时,TGF-β1水平升高者放射性肺损伤的发生率为51.9%,明显高于TGF-β1水平正常者(11.5%)(P=0.002),而放疗前TGF-β1水平升高或在正常范围,放射性肺损伤发生率无显著差异(P=0.315)。V20>25%,放疗结束时TGF-β1水平升高,放射性肺损伤的发生率为62.5%,明显高于其它组别;而V20≤25%,放疗结束时血浆TGF-β1正常的患者没有发生放射性肺损伤。结论放疗结束时TGF-β1水平升高与放射性肺损伤密切相关。V20>25%,放疗结束时TGF-β水平升高者,属于发生放射性肺损伤的高危人群。