RT-PCR检测结肠癌患者外周血CEA mRNA的意义

目的　了解结肠癌患者外周血CEAmRNA的水平。方法　采用荧光定量RT PCR技术 ,检测结肠癌患者 73例 ,健康志愿者 30例外周血CEA mRNA的水平。结果　 73例结肠癌患者外周血CEAmRNA的水平为 (10 6 0 0 .0± 2 0 6 6 7.5 )copies/ml,其中38例阳性 ,阳性率为 5 2 .1%。健康志愿者未检测到CEAmRNA。CEAmRNA水平与肿瘤病理分期和分化程度相关 ;血清CEA阳性组中CEAmRNA的阳性率显著高于CEA阴性组 (P <0 .0 1) ;结论　外周血CEA mRNA可作为结肠癌辅助诊断指标 ,定量检测外周血CEA mRNA有助于结肠癌微转移的监测     

逆转录-实时定量PCR检测胃癌和肠癌病人CEA基因的表达

目的：通过检测胃癌和肠癌病人外周血中肿瘤细胞的CEAmRNA拷贝数，以实现对其肿瘤血运转移的定量监测。方法：采用逆转录-实时定量PCR技术检测65例正常人外周血和48例胃癌和肠癌病人外周血及肿瘤组织中CEAmRNA的拷贝数。结果：65例正常人外周血中无一检测到CEA基因转录本。经组织病理学诊断为恶性肿瘤的组织中CEA表达率为100％，CEAmRNA拷贝数在10^5～10^7／mg。48例肿瘤病人外周血CEA表达率为33．3％，CEAmRNA拷贝数范围在(10^1～10^3.2)／ml。结论：逆转录-实时定量PCR技术能特异、灵敏地检测胃癌和肠癌病人外周血中CEAmRNA，能早期客观地反映病人体内微转移的状况。     

RT-PCR检测外周血CEA和CK20 mRNA对结肠癌肿瘤微转移的预测价值

目的 检测结肠癌患者外周血CEA和CK20mRNA的表达水平及评估其对肿瘤转移的预测价值.方法 分别采用RT-PCR和传统定性PCR技术,检测结肠癌患者(85例)和健康志愿者(45例)外周血CEA和CK20mRNA的表达水平.结果 85例结肠癌患者外周血CEA和CK20mRNA的水平分别为(920±104)copies/ml和(532±91)copies/ml,健康志愿者未检测到CEA和CK20 mRNA表达;CEA和CK20 mRNA水平与Dukes分期、细胞分化程度相关,Logistic回归分析得随Dukes分期进展,肿瘤转移率逐渐增加(与A期相比OR值分别为1.087、1.983、2.876);RT-PCR检测灵敏度明显高于定性PCR.结论 RT-PCR检测结肠癌患者外周血CEA和CK20 mRNA表达水平灵敏度高,CEA和CK20 mRNA具有较好的肿瘤微转移预测价值.     

胃癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白20及生存素基因检测的临床意义

目的:研究癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白20(CK20)mRNA及生存素(survivin)mRNA与胃癌患者诊断、转移的相关性,评估其检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测79例胃癌、56例癌前病变及50例正常对照者外周血survivin、CEA、CK20基因的转录,并分析其与临床病理及预后关系。结果:正常对照组外周血未检测到CEA、CK20、survivin mRNA的转录,癌前病变患者survivin转录检测的阳性率为16.1%,平均拷贝数为1.6±0.8。胃癌外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录阳性率分别为48.1%、60.8%、87.3%,其阳性率和肿瘤的分期、淋巴结转移等相关。Survivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者。胃癌患者外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的联合检测对肿瘤预后的判断具有较高的特异度和阳性似然比。结论:实时RT-PCR联合检测胃癌外周血中多个肿瘤标志物基因的表达,是一种较为理想的监测肿瘤复发、判断预后的方法。     

大肠癌外周血循环肿瘤细胞数的检测及临床意义

目的 检测大肠癌（CRC）患者外周血循环肿瘤细胞（CTCs）数,探讨其临床意义.方法 58例CRC患者术前静脉采血,使用多重聚合酶链式反应（PCR）结合荧光定量PCR（RTFQ PCR）方法检测外周血细胞角蛋白20（CK20）及癌胚抗原（CEA） mRNA表达,比较CTCs细胞阳性率与临床病理参数的关系.结果 58例CRC患者外周血中CK20及CEAmRNA表达的阳性率为93.1％.CTCs的阳性检出率与Ducke＇s分期及淋巴结转移相关（P＜0.05）.结论 多重RTFQ PCR方法可应用于CRC患者外周血中CTCs检测,对预后判断有着重要的临床意义.     

肺癌患者外周血微转移检测的意义

目的研究肺癌患者外周血中CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA的表达及联合检测的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测48例肺癌患者、8例肺良性病变和30名健康志愿者外周血CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平。结果48例肺癌患者外周血CEAmRNA的水平为(16264±28765)copies/ml,其中26例阳性,阳性率为54.2%;CK19mRNA的水平为(14891±27244)copies/ml,其中27例阳性,阳性率为56.3%;CK20mRNA的水平为(10924±21678)copies/ml,其中20例阳性,阳性率为41.7%。8例肺良性病变中CK20mRNA阳性1例(12.5%),CEAmRNA和CK19mRNA均为阴性,健康志愿者30例未见表达。单项检测敏感度和准确性较低,联合其中二项检测敏感度和准确性较高,联合三项敏感度达77.1%、准确性可达87.2%。CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平和阳性率与肺癌类型和不同临床分期有关。结论CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA可作为标志物检测肺癌患者外周血微转移,联合二至三项指标有较高的检出率,定量检测有助于肺癌微转移的监测。     

荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的意义

目的探讨荧光定量PCR技术检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测大肠癌患者76例,健康志愿者30例外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA水平。结果76例大肠癌患者外周血CK19mRNA的水平为5 962.5±19 926.1 copies/ml,其中38例阳性,阳性率为50.0%;CK20mRNA的水平为6 244.3±15 113.1 copies/ml,其中28例阳性,阳性率为36.8%;CEAmRNA的水平为7 377.0±26 281.5 copies/ml,其中36例阳性,阳性率为47.4%。对照组30例未见表达。单项检测阳性率较低,联合其中二项检测阳性率较高,联合三项阳性率可达68.4%。结论外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA可作为大肠癌微转移辅助诊断指标,联合二至三项指标有较高的检出率,定量检测有助于大肠癌微转移的监测。     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原（CEA）、生存素（Survivin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）;TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组（P〈0.05、P〈0.01）;Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达的阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者（P〈0.01、P〈0.05）。结论采用逆转录real-time PCR检测外周血CEA、Survivin、MMP-2 mRNA的表达以及TIMP-2/MMP-2比值可以成为一种无创性乳腺癌辅助诊断、分期、转移的方法。     

胃癌患者外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

目的探讨胃癌患者外周血中CK20 mRNA的表达水平及与临床病理因素的相关性,评价其在微转移中的诊断意义。方法运用巢式逆转录-聚合酶链反应检测46例胃癌患者外周血CK20 mRNA的表达情况,并以20例慢性胃炎患者和20例健康志愿者作对照。结果胃癌组外周血CK20 mRNA阳性表达率为60．8％（29／46）,而慢性胃炎组和健康志愿者组均表达阴性,差异均有统计学意义（P〈0.0001）;胃癌组CK20 mRNA的阳性表达率与胃癌分化状态、TNM分期和有无淋巴结转移相关（均P〈0．05）,而与年龄、性别、肿瘤大小和浸润深度无关。结论胃癌患者外周血中CK20 mRNA的阳性表达可作为胃癌早期诊断及微转移的判断指标,可对临床分期、预后判断和治疗起指导作用。     

荧光定量RT—PCR检测肺癌外周血CK19、CK20mRNA表达

目的 应用荧光定量RT-PCR（Fluorogenic quantitative reverse trailsctiptase po1ymerase chain reaction，RT-PCR）检测肺癌外周血中微转移情况。方法 用荧光定量RT-PGR方法检测103例肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达。结果 103例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例，阳性率33．98％；CK20mRNA检测阳性17例，阳性率16．50％，其中6例患者CK19、CK20mRNA均阳性。统计结果显示外周血CK19、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关，与性别、年龄、病理类别无关。结论 用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA具有较高的灵敏度和特异性，有助于早期筛选亚临床转移。