犬肺缺血预处理对体外循环肺和心肌保护的实验研究

目的探讨肺缺血预处理对体外循环肺和心肌的保护作用及机制。方法12只健康杂种犬,体重12～15Kg,随机分为实验组和对照组,每组6只。对照组为单纯体外循环(CPB)组,实验组为缺血预处理组,在主动脉阻断前行左肺门阻断5min,再灌注5min,重复一次,然后同对照组行CPB。两组采用相同的心肌保护(冷晶体停跳液)。两组CPB均持续1h,于CPB前、再灌注120min后采集左下肺和心肌标本测定肺湿干重和心肌含水量、肺和心肌MDA、SOD活性以及肺和心肌病理改变。结果①CPB后实验组肺湿干重低于对照组(P<0.05),分别为3.4867±0.6776和5.3067±0.3034;肺组织MDA实验组低于对照组(P<0.05),分别为(5.3517±1.0769)nmol/mgprot和(7.4002±1.1569)nmol/mgprot;肺组织SOD活性实验组高于对照组(P<0.05),分别为(127.4512±18.8801)U/mgpro和(103.6103±9.5299)U/mgprot。②CPB后心肌含水量实验组低于体外循环前(P<0.05),分别为64.6173±4.1682和77.3333±3.0807;心肌MDA实验组低于对照组(P<0.05),分别为(5.3233±1.5304)nmol/mgprot和(7.5517±1.0236)nmol/mgprot;心肌SOD活性实验组高于对照组(P<0.05),分别为(166.0104±6.3458)U/mgprot和(140.4514±13.9413)U/mgprot;③组织学检查:CPB前两组肺和心肌病理检查组织结构正常。CPB后实验组肺和心肌标本可见轻度的中性粒细胞和淋巴细胞积聚、毛细血管淤血和轻度水肿,而对照组肺标本可见明显的中性粒细胞和淋巴细胞积聚、毛细血管淤血和间质明显水肿,对照组心肌组织可见明显的淋巴细胞积聚,心肌间质水肿明显,心肌组织损伤较重。结论犬肺缺血预处理对CPB肺和心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能是减轻了肺和心肌缺血再灌注损伤。     

缺血预处理对临床心肌保护的研究进展

1986年Murry等首次提出了缺血预处理(ischemic preconditton．IPC)的概念，即预先反复短暂缺血可以延缓或减轻组织后续缺血再灌注损伤的现象。这一概念的提出为心肌保护开辟了一崭新的领域。IPC介导的心肌保护作用发生于两个不同时相；早期保护作用于IPC后立即出现，2～3h后消失(经典时相)，之后数小时出现第二窗的保护作用(延迟时     

缺血预处理对体外循环中心肌磷脂酶A2活性和细胞膜微黏度变化的影响

目的 :观察缺血预处理 (IPC)对体外循环中心肌组织磷脂酶A2 (PLA2 )活性和细胞膜微黏度变化的影响 ,评价IPC的心肌保护作用。　　方法 :将 72只健康家猫随机均分为 3组 :单纯体外循环组、缺血再灌注组和IPC组。在猫体外循环模型的基础上 ,测定各组猫心肌丙二醛含量和血清乳酸脱氢酶水平 ,并应用荧光偏振法测定心肌细胞膜的微黏度 ,同时测定心肌组织PLA2 活性。比较IPC组和缺血再灌注组体外循环中心肌细胞膜微黏度和心肌组织PLA2 活性的变化。　　结果 :IPC可明显降低体外循环中的血清乳酸脱氢酶浓度、心肌丙二醛含量、心肌细胞膜微黏度和心肌组织PLA2活性。结论 :IPC可通过抑制心肌组织PLA2 活性以维持心肌细胞膜流动性 ,从而发挥其良好的心肌保护作用。     

心脏外脏器和组织的缺血预处理对心肌保护作用的研究进展

本文着重介绍心脏外脏器和组织短暂缺血预处理对心肌的保护作用。     

肢体无创缺血预处理对心肌保护的临床研究

急性心肌梗死是全球范围内主要的致死病因。其主要病理基础是心肌的缺血再灌注损伤。减轻缺血再灌注损伤是心血管疾病治疗的主要目的。如何对心脏进行处理,使它得以耐受急性缺血再灌注引起的损伤,成为临床迫切需要解决的问题。近年来学者们致力于研究各种不同的预处理方法,以期减少甚至避免心肌缺血再灌注引起的致死性损伤。以下是本文作者对各类成果的综述。     

犬肢体缺血预处理对心肌的影响

目的：缺血预处理的机制尚不清楚，本文探讨了犬肢体缺血对心肌的保护作用。方法：２４只犬分为３组。股动脉预处理组（Ｆ组，８只）：阻断股动脉１０分钟再灌注２０分钟，反复３次；心肌预处理组（Ｈ组，８只）：结扎冠状动脉左前降支１０分钟，再灌注２０分钟，反复３次；对照组（Ｃ组，８只）：旷置９０分钟。各组均结扎冠状动脉左前降支４０分钟，再灌注１２０分钟。资料统计用ｔ检验和χ２分析。结果：Ｆ组及Ｈ组心肌梗死／心肌缺血范围（１７．１±４．９％，１０．３±２．８％）小于Ｃ组（４１．８±６．０％，Ｐ均＜０．０５）。室性心动过速和心室颤动的发生犬数在持续缺血期及再灌注期Ｆ组（２，２）和Ｈ组（１，２）低于Ｃ组（７，８，Ｐ均＜０．０５）。结论：犬肢体缺血预处理引起的全身性改变对心肌也有保护作用，为冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）的治疗提供了新的线索。     

非心脏缺血预处理对未成熟心肌和心肌间质保护作用的研究

目的 :研究非心脏缺血预处理对未成熟心肌和心肌间质的保护作用。方法 :建立动物离体心脏 L angendorff灌注模型 ,分为 4组 :1缺血 /再灌注 （I/R,n=6 ） ,离体心灌注 15 min转为工作心 15 min;2心脏缺血预处理组 （IPC,n=6 ） ,离体灌注 15 min转为工作心 15 m in,缺血 5 m in/再灌 5 min各 2次 ;3双下肢缺血预处理组 （DL- IPC,n=6 ） ,反复 3次阻断双下肢血流 5 min/松开 5 m in,建立离体心脏 L angendorff灌注模型 ,灌注 15 min转为工作心 15min;4肾缺血预处理组 （K- IPC,n=6 ） ,反复 3次阻断左肾动脉 5 m in/放开 5 min,建立离体心脏 L angendorff灌注模型 ,灌注 15 min转为工作心 15 min。然后各组全心缺血 45 min,恢复灌注 15 m in改为工作心 30 m in。以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶 （CK）和乳酸脱氢酶 （L DH）漏出率、心肌组织 ATP和丙二醛 （MDA）含量、超氧化物歧化酶 （SOD）活性、心肌羟脯氨酸 （HP）含量及血清内皮素 （ET）含量作为观察指标。结果 :IPC,DL- IPC及 K-IPC组左室功能恢复优于 I/R组 （P<0 .0 5 ） ,ATP含量、SOD活性、HP含量均优于 I/R组 （P<0 .0 1） ,心肌含水量低于 I/R组 （P<0 .0 5 ） ,MDA含量 ,CK,L DH漏出率及 ET含量均低于 I/R组 （P<0 .0 1）。结论 :非心脏缺血预处理与心脏缺     

不同缺血预处理对未成熟心肌细胞功能的影响

目的比较不同方法的缺血预处理对未成熟心肌细胞功能的影响。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型。分为4组:缺血/再灌注(I/R)组,离体心脏灌注15min转为工作心15min后停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;心脏缺血预处理(MIP)组:离体心脏灌注15min转为工作心15min后反复2次缺血5min/再灌注5min,然后重复I/R组缺血/再灌注方法;肾缺血预处理(RIP)组:反复三次阻断左肾动脉5min,放开5min,切取心脏,重复I/R组方法;双下肢缺血预处理(DLIP)组:反复3次捆扎双下肢5min,松开5min,切取心脏,重复I/R组方法。以血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、心肌组织三磷腺苷(ATP)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成三磷腺苷能力[ATP]m作为观察指标。结果MIP、RIP及DLIP组ATP含量、SOD活性、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性、[ATP]m均高于I/R组(P<0.01),MDA含量、CK、LDH漏出率、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+含量均低于I/R组(P<0.01)。结论肾缺血预处理、双下肢缺血预处理与心脏缺血预处理有同等的心肌细胞保护作用。     

缺血预处理对体外循环中左心功能的恢复及心肌细胞膜流动性变化的影响

目的:观察缺血预处理(IPC)对体外循环(CPB)中心肌细胞膜流动性变化及心功能恢复的影响,评价IPC的心肌保护作用。方法:将72只健康家猫随机分为3组:单纯并行循环(CPB)组、缺血再灌注(IR)组和IPC组。监测CPB中猫左心室内压峰值(LVSP)、左心室等容收缩期压力升高最大速率(dp/dtmax)、左心室舒张期压力下降最大速率(dp/dtmin)等左心功能指标,并应用荧光偏振法测定心肌细胞膜的微黏度(η),以η的倒数表示心肌细胞膜脂流动性。结果:CPB组体外循环过程中左心功能各指标和心肌细胞膜微黏度均无明显变化;IR组主动脉阻断(ACC)期间η明显上升且于再灌注期间进一步升高,IPC组ACC期间η无明显变化,再灌注期间虽有所升高但明显低于IR组;心功能恢复阶段IPC组猫心LVSP、dp/dtmax和dp/dtmin均明显高于IR组。结论:IPC能够有效维持CPB中缺血再灌注心肌细胞膜脂的流动性,同时可改善左心功能的恢复。     

缺血预处理对体外循环中左心功能的恢复及心肌细胞膜流动性变化的影响

目的：观察缺血预处理（IPC）对体外循环（CPB）中心肌细胞膜流动性变化及心功能恢复的影响,评价IPC的心肌保护作用。方法：将72只健康家猫随机分为3组：单纯并行循环（CPB）组、缺血再灌注（IR）组和IPC组。监测CPB中猫左心室内压峰值（LVSP）、左心室等容收缩期压力升高最大速率（dp/dtmax）、左心室舒张期压力下降最大速率（dp/dtmin）等左心功能指标,并应用荧光偏振法测定心肌细胞膜的微黏度（η）,以η的倒数表示心肌细胞膜脂流动性。结果：CPB组体外循环过程中左心功能各指标和心肌细胞膜微黏度均无明显变化；IR组主动脉阻断（ACC）期间η明显上升且于再灌注期间进一步升高,IPC组ACC期间η无明显变化,再灌注期间虽有所升高但明显低于IR组；心功能恢复阶段IPC组猫心LVSP、dp/dtmax和dp/dtmin均明显高于IR组。结论：IPC能够有效维持CPB中缺血再灌注心肌细胞膜脂的流动性,同时可改善左心功能的恢复。     

双下肢缺血预处理对未成熟心肌保护作用的研究

目的 研究双下肢缺血预处理对未成熟心肌保护作用,探讨未成熟心肌保护方法。方法 采用经典心脏缺血预处理和双下肢缺血预处理动物Langendorff灌注模型分为3组：缺血／再灌（I／R,n=6）,建立模型,灌注15min转为工作心15min,心脏缺血预处理组（IPC,n=60,建立模型,灌注15min转为工作心15min,反复2次缺血5min,再灌5min;双下肢缺血预处理组（DL－IPC,n=6）,反复2次阻断双下肢血流5min,松开5min,建立模型,灌注15min转为工作心15min;然后各组全心停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min。以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、心肌组织ATP和丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性作为观察指标,结果 IPC和DL－IPC组在左室功能恢复优于I／R组（P＜0.050,在ATP含量、SOD活性均优于I／R组（P＜0.010,在心肌含水量低于I／R组（P＜0.05）,在MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于I／R组（P＜0.01）。结论 双下肢缺血预处理与心脏缺血预处理对未成熟心肌具有同等的心肌保护作用。     

阿司匹林对心肌晚期缺血预适应的干预作用

目的:观察环氧化酶-2(COX-2)在正常心肌中表达的部位及表达量,并探索不同剂量阿司匹林作用于心肌晚期缺血预适应(DPC)后,对心肌COX-2蛋白的表达及心脏超微结构的影响。方法:采用结扎兔冠状动脉左前降支建立DPC模型。随机分为5组,分别为正常对照组,DPC组,小、中、大剂量组(阿司匹林5mg/kg、12mg/kg、20mg/kg)。实验后48h取心肌组织,应用免疫组化法、蛋白质免疫印迹法测定COX-2蛋白表达,应用电镜观察心肌超微结构的变化。结果:兔DPC组心肌COX-2蛋白表达明显高于正常对照组水平,差异有统计学意义(P<0·05);小、中剂量组对COX-2蛋白表达影响较小,差异无统计学意义(P>0·05),电镜观察心肌超微结构无明显变化;大剂量组对COX-2蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0·05),电镜证实大剂量阿司匹林对心肌超微结构的损伤加重。结论:通过缺血、缺氧可刺激心肌COX-2蛋白表达增加,大剂量阿司匹林可抑制COX-2蛋白表达,可能导致心肌损伤加重,故临床上避免在心肌DPC过程中接受大剂量阿司匹林治疗。     

缺血预适应对高血脂动脉硬化兔心肌的影响

目的研究缺血预适应(IP)对高血脂动脉硬化兔心肌的影响。方法用高胆固醇饲料喂养家兔,血总胆固醇≥15mmol/L,29只高血脂兔分为三组,采用结扎/开放左冠状动脉前降支(LDADC)的方法,给予不同时间和强度的缺血预处理:无缺血预处理组(HR1);缺血预处理组(HR2);多次及延长缺血预处理组(HR3),24只正常血脂兔也分为三组(NR1,NR2,NR3),实验方法与上述各组相同。缺血预处理后阻断冠状动脉30min,再灌注30min,给予程序电刺激,测定心室颤动阈(VFT)。心肌切片氯化硝基四氮唑蓝染色(NBT),判断心肌梗死面积(IS)。结果IP对正常兔心肌有保护作用:NR2、NR3组与NR1组相比,IS缩小,(P<0.01);VFT增高(P<0.05);对高血脂兔无作用(P>0.05)。增加缺血次数,延长缺血时间,对正常血脂兔,保护作用无改变(P>0.05);但加重高血脂兔后续缺血的损害:IS增加(P<0.01);VFT降低(P<0.05)。结论缺血预处理的保护作用与心肌的状态有关。对高血脂、动脉硬化兔心肌,缺血预处理的保护作用可能消失。     

缺血预适应及侧支循环对缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨急性心肌梗死前心绞痛产生的缺血预适应独立于或协同冠状动脉侧支循环对缺血-再灌注心肌的保护作用。方法 44例发病6 h内接受直接冠状动脉介入治疗(PCI)的急性心肌梗死患者,按梗死前48 h内有无心绞痛分成2组,有梗死前48 h内心绞痛(PA)组24例、无梗死前48 h内心绞痛(NPA)组20例,每组再按有无冠状动脉侧支循环血管分成两亚组,PCI完成后对梗死相关血管(IRA)血流进行TIMI分级评价,同时左心室造影,记录室壁运动记分(WMS)及左心室舒张末期压力(LVEDP),监测心肌酶48 h,PCI完成后1周、4周末分别行99mTc-MIBI心肌灌注显像(SPECT),比较前后显像缺损程度记分(SS)的变化,计算并比较两组及亚组间心肌挽救指数(MSI),第2周时行平衡法核素心室造影(ERNA),比较两组及亚组间左心室收缩功能参数、左心室舒张功能参数、心室收缩同步性(LVSS)的差异。结果 PA组心肌损伤标记物肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)峰值水平显著低于NPA组[(1172±985)U/L比(2291±1267)U/L,P<0.05;(197±102)U/L比(316±144)U/L,P<0.05],冠状动脉造影(CAG)结果显示两组侧支循环Rentrop分级无差异,PCI完成时PA组IRA无再流(no-reflow)发生率显著低于NPA组(8.3％比20％,P<0.05),WMS和INEDP也显著低于NPA组[分别为(5.39±0.91比7.11±1.27),P<0.0     

Role of connexin 43 in ischemic preconditioning does not involve intercellular communication through gap junctions

Connexin 43 (Cx 43) has recently been implicated in protection of ischemic preconditioning. Cx 43 colocalization with protein kinase C and p38 mitogen-activated protein kinase is increased in preconditioned myocardium, Cx 43 phosphorylation is preserved in preconditioned myocardium, and hearts from Cx 43-deficient mice cannot be preconditioned. It is, however, unclear whether the important role of Cx 43 relates to intercellular communication through gap junctions or its function in volume homeostasis. To address this issue, we used isolated cardiomyocytes, which no longer-form gap junctions, from wild-type (n = 5) and heterozygous Cx 43-deficient mice (n = 8) and subjected them to 2 h simulated ischemia (hypoxia, acidosis) and an additional challenge by extracellular hypo-osmolarity (from 310 to 250 mOsm/l). Viability (trypan blue exclusion) was well maintained in normoxic wild-type cardiomyocytes (54 +/- 5% at baseline vs. 46 +/- 4 (mean +/- S.D.) % at 2 h). With simulated ischemia, viability was reduced to 17 +/- 5%. Preconditioning by a preceding exposure to 10 min simulated ischemia and 15 min reoxygenation preserved viability after 2 h simulated ischemia (36 +/- 1%, P < 0.001 vs. simulated ischemia). In Cx 43-deficient cardiomyocytes, viability was also well maintained in normoxia (56 +/- 10% vs. 44 +/- 10%). Viability was also reduced to 17 +/- 6% with 2 h simulated ischemia. In contrast to wild-type cells, preconditioning did not prevent the reduction in viability (18 +/- 8%). In conclusion, Cx 43 is essential for preconditioning in the absence of gap junctions, supporting its function through improved volume regulation.     

缺血预处理时心肌细胞三磷酸腺苷含量和超微结构变化

采用生物发光技术，分别测定缺血预处理和对照组再灌注60min时心肌细胞三磷酸腺苷（ATP）含量，同时留取心肌标本行光镜和电镜观察，探讨缺血预处理保护心肌的作用机理。结果表明：①缺血预处理组心肌细胞ATP含量明显高于对照组，差异显著（P＜0．05）；②缺血预处理组光镜、电镜所见心肌损伤均明显比对照组轻。提示：缺血预处理可以减少心肌细胞能量消耗，保护线粒体的结构和功能，从而对缺血心肌具有一定保护作用。     

肝素涂抹管道对心肌上细胞间粘附分子-1表达的影响

目的 :观察心脏瓣膜置换术患者在体外循环 (CPB)前后心肌上细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的表达 ,并探讨肝素涂抹管道对其表达的影响。方法 :对 16例双瓣膜置换术患者 ,随机均分为对照组和肝素涂抹管道组(HCC组 )。分别于手术开始及开放后 10min取右心房心肌标本 ,采用免疫组化法检测心肌细胞及心肌血管内皮细胞上ICAM 1的表达 ,以测得ICAM 1积分光密度值 (IOD值 )进行分析。结果 :心脏瓣膜置换术患者CPB后心肌细胞上ICAM 1的表达较术前有明显增加 (P <0 .0 5 ) ,而在HCC组则无明显变化。组间比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;在对照组 ,心肌血管内皮细胞上ICAM 1在CPB后表达明显增加 (P <0 .0 5 ) ,而HCC组差异无显著性意义。组间比较 ,P <0 .0 5。结论 :HCC可通过抑制心肌细胞及心肌血管内皮细胞上ICAM 1的表达 ,减轻心肌的缺血再灌注损伤