大肠癌核基质蛋白变化与其生物学行为的关系

目的：比较不同分化程度大肠癌及伴有或不伴有淋巴结转移大肠癌与切缘大肠正常组织核基质蛋白表达差异,初步探讨核基质蛋白变化与大肠癌生物学行为的关系及其机制.方法：应用高分辨率双向电泳分析12例大肠癌组织及切缘大肠正常组织核基质蛋白成分的差异.用免疫组织化学SP方法检测大肠癌MMP-9、CB的表达.结果：大肠癌组织中存在5个特异性核基质蛋白,在正常大肠组织中未表达.正常大肠组织中存在3个特异性核基质蛋白,在大肠癌组织中缺乏.不同分化程度大肠癌核基质蛋白表达也具差异.一核基质蛋白（N4）,存在于12例切缘正常大肠组织及9例中高分化不伴有淋巴结转移的癌组织中,而在3例低分化且伴有淋巴结转移的癌组织中则缺乏.免疫组织化学染色显示MMP-9、CB在缺乏核基质蛋白N4的低分化大肠癌中表达呈强阳性,明显强于具有核基质蛋白N4的中-高分化大肠癌.结论：大肠癌中存在肿瘤特异性核基质蛋白,不同分化程度及伴有或不伴有淋巴结转移大肠癌核基质蛋白表达也具有差异,大肠癌特异性核基质蛋白可望成为大肠癌的肿瘤标志物.大肠癌核基质蛋白改变可能与淋巴结转移有关,且可能与其对MMP-9、CB表达调节有关.     

人类食管癌核基质蛋白的相关表达

目的 探讨食管癌核基质蛋白的变化.方法 SDS-PAGE分析24例正常食管组织、食管癌旁组织和食管癌组织中核基质蛋白间的差异.结果 与正常组织比较,食管癌组织31 KD～15 KD的核基质蛋白表达量明显减少(p＜0.05).应用UVPtool软件定量分析结果,正常组织28KD表达量多于食管癌组织,差异有显著性.28 KD蛋白在高中分化和低分化癌组织中相比,差异无显著性.结论 食管癌组织中核基质蛋白的改变可能与食管癌发生有关.     

胃癌组织中核基质蛋白的变化

目的：研究胃癌组织核基质蛋白的改变。方法：应用SDS－PAGE技术及Geneools定量分析软件，对22例胃癌组织及正常组织的核心基质蛋白进行了研究，结果：胃癌组织与正常组织比较，Mr为30000，28000的核基质蛋白表达量明显减少（P＜0．05），不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间比较，此种核基质蛋白表达量差异无统计学意义（P＞0．05），结论：胃癌组织中核基质蛋白的改变可能在肿瘤的早期已经发生，是胃癌发生的早期分子事件。     

胃癌组织核基质与p16基因上游序列的相关性研究

目的 :研究胃癌组织核基质蛋白与 p16基因上游序列的相关性。 方法 :应用SDS PAGE技术和Southwestern印迹技术 ,对 2 2例胃癌组织、癌旁组织及正常组织的核基质蛋白进行研究。结果 :与正常组织比较 ,胃癌组织 3 0kD、2 8kD的核基质蛋白表达量明显减少 (P <0 .0 5 ) ;不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间比较 ,3 0kD、2 8kD核基质蛋白表达量无明显差异 (P >0 .0 5 )。正常组织核基质蛋白与p16基因上游序列的结合主带为 2 8kD、3 0kD、40kD、43kD、5 0kD ,胃癌组织中为 40kD、66kD。胃癌组织与正常组织比较 ,66kD结合阳性信号明显增强 (P <0 .0 5 ) ;而不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间 ,66kD结合阳性信号无显著性差异。结论 :胃癌组织中核基质蛋白的改变及 66kD蛋白与p16基因上游区结合量的异常可能是胃癌发生的早期分子事件。     

核基质研究现状与展望

引言Berezney和Coffey首先报导了真核细胞内核基质蛋白的存在。核基质是细胞桩内的一种动态非染色质结构，它调节DNA的功能并提供调控核酸功能活动的场所．近年来研究表明，视网膜母细胞瘤基因产物与棱基质间的互相作用对细胞周期的调节显得十分重要。核基质蛋白数量庞大且可变化，因化学修饰．浓度或某种新型蛋白出现而使核基质蛋白发生改变，     

外周血白细胞核基质蛋白检测在造血系统恶性肿瘤中的应用

采用高盐抽提方法制备正常人、慢性粒细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病及恶性组织细胞病患者外周血白细胞核基质蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧ电泳分析，发现不同来源的白细胞，其核基质蛋白表达存在显著差异，主要表现在分子量为２１０ＫＤ、１３５ＫＤ、１１ＫＤ、４６ＫＤ和２１ＫＤ的条带上。该方法简便，对于研究造血系统恶性肿瘤外周血白细胞核基质蛋白有显著意义。     

核基质蛋白在膀胱移行上皮细胞癌诊断中的应用

核基质蛋白在膀胱移行上皮细胞癌诊断中的应用首都医科大学宣武医院泌尿外科张弋孙玉成李进王建高伟刘燕晖核基质蛋白（ＮＭＰ）是细胞核内骨架系统的蛋白质，参与细胞核内的多种活动，包括ＤＮＡ复制、ＲＮＡ合成、基因表达等。肿瘤病人ＮＭＰ含量比正常人明显增高，我院...     

运用蛋白质组学研究三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中核基质蛋白的变化

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在体外对慢性粒细胞性白血病细胞系K562细胞核基质蛋白的影响. 方法:用DNA梯度电泳观察As2O3作用后K562细胞凋亡的情况.单向、双向电泳观察As2O3对K562细胞核基质蛋白分布影响. 结果:2.5 μmol/L As2O3处理72 h后,DNA电泳已能检测到发生凋亡的K562细胞,但早在As2O3处理48 h时, 即能观察到核基质蛋白分布的改变,此时尚不能观察到凋亡特征性的DNA片段梯形条带.双向电泳可检测出200多个核基质蛋白点,其中约18个点与As2O3处理相关. 结论:As2O3对K562细胞的影响是时间和剂量依赖性的.双向电泳检测As2O3对K562核基质蛋白分布的影响较DNA梯度电泳检测更为敏感.核基质蛋白成分可能是砷作用的靶蛋白,并且可能是药物发挥抗癌作用的关键点之一.     

核基质在消化系统肿瘤中的研究进展

核基质是指真核细胞的细胞核依次去除膜脂、可溶性蛋白及染色质后所残留下来的以非组蛋白为主的网架结构,包括外周核纤层、内部纤维-颗粒状网架结构体系和核仁基质3部分。核基质作为细胞核的支架结构,决定着核型,与DNA的复制、转录及转录后修饰以及染色体的组装等许多重要的生命活动相关。组织的细胞种类不同,核基质蛋白成分也有一定的差别。本文对核基质在消化系统肿瘤发生和诊断中的价值做一简要综述。     

三氧化二砷对肝癌细胞系HepG2生长及核基质蛋白的影响

目的 探讨三氧化二砷对人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２的生长及核基质蛋白的影响。方法 应用生长指数分析和高分辨ＳＤＳ－聚丙烯酰胺交双向电泳比较用Ａｓ２Ｏ３处理后的ＨｅｐＧ２细胞主核基质蛋白的改变。结果 Ａｓ２Ｏ３抑制ＨｅｐＧ２的生长,双向电泳显示经Ａｓ２Ｏ３处理后ＨｅｐＧ２细胞内出现新的核基质蛋白,并且该蛋白是细胞特异性的。结论 核基质蛋白是某些抗癌药物的作用靶子,Ａｓ２Ｏ３抑帛 癌细胞的生长可望有用于临床     

组织原位核基质制备方法的建立

目的：建立组织原位核基质(NM)制备法。方法：用改进的硫酸铵沉淀法对食管癌组织冷冻切片进行NM制备。结果：经NM制备后切片的组织结构基本保持完好，细胞核淡染，呈丝网状，组蛋白H1染色阴性，Feulgen DNA染色弱阳性。结论：建立了可保持完好组织结构的原位NM制备法。     

人T细胞基因组随机MARs的分离、克隆及序列分析

目的分离、克隆人基因组随机MARs片段,分析其序列特征,为进一步研究MARs在真核细胞DNA复制及基因表达调控中的作用与机制奠定基础.方法用DNaseⅠ、高盐和蛋白酶K处理细胞核,分离人T细胞基因组随机MARs片段,并将其克隆进入PUC19质粒;用体外结合实验筛选能与核基质蛋白结合的克隆并测序,生物信息学分析其序列的特征.结果从人T细胞基因组中分离得到大量的MARs片段,构建成MARs库,初步任意挑选58个克隆,体外结合实验证实其具有与核基质蛋白结合活性,对其中1个克隆的序列分析表明,其序列AT含量较高,不仅含有AC-和ATAT基序,还包含有多个转录/复制起点、增强子序列、弯曲DNA和扭结DNA基序以及多个反向重复序列.结论分离获得的DNA片段具有MAR的特性,同一DNA序列中存在不同的元件组合,其参与基因表达调控的功能应该是复杂、多样的.     

杜氏盐藻核基质的制备

目的：制备盐藻核基质,进而分离核基质结合区(matrix attachment regions)。方法：采用体积分数0．5％ TritonX—100破碎细胞,体积分数15％Percoll分离盐藻细胞核,二碘水杨酸锂(1ithium diiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,SDS—PAGE电泳分析蛋白质成分。结果：分离出了高纯度的盐藻细胞核,电泳分析表明绝大部分核蛋白已被去除。结论：体积分数0．5％TritonX—100能有效破碎盐藻细胞,体积分数15％Percoll可分离高纯度的盐藻细胞核,25mmol／L LIS抽提可除去盐藻绝大部分核蛋白获得核基质。     

尿核基质蛋白在膀胱癌中的临床意义

目的：探讨尿核基质蛋白22（NMP22）测定在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法：应用免疫酶标记法（ELISA）检测28例初发性膀胱癌,10例复发性膀胱癌和20例对照组尿中NMP22水平。初发性膀胱癌组中有10例患者在术后5～7d再次检测其尿NMP22。结果：初发性膀胱癌组尿NMP22的中位数为27．1149IU／mL,复发性膀胱癌组为13．001IU／mL均明显高于对照组1．6574IU／mL（P〈0．001）;初发性膀胱癌患者尿NMP22随肿瘤病理分级的递增而升高。lO例初发性膀胱癌患者术后复测尿NMP22,结果较术前明显下降。结论：尿NMP22作为膀胱癌的肿瘤标记物具有较高的特异性和敏感性,并可在一定程度上反映肿瘤的恶性程度和预后。     

胃癌组织中核基质蛋白与P16基因上游序列结合检测

目的 :研究胃癌组织核基质蛋白与p1 6基因上游序列的结合情况及其意义。方法 :采用Southwestern印迹技术及Genetools定量分析软件 ,对 2 2例胃癌及相应正常组织的核基质蛋白与P1 6基因上游序列的结合进行了检测。结果 :正常胃组织核基质蛋白与p1 6基因上游序列结合主带的相对分子质量 (Mr)为 2 80 0 0、30 0 0 0、4 0 0 0 0、4 30 0 0、5 0 0 0 0 ,胃癌组织中为 4 0 0 0 0、6 6 0 0 0。与正常胃组织比较 ,胃癌组织中核基质蛋白与P1 6基因上游序列结合的6 0 0 0主带阳性信号明显增强 (P <0 .0 5 ) ;而不同分化程度及不同临床分期胃癌组织间 ,此主带阳性信号强度差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :胃癌组织中 6 6 0 0 0蛋白与p1 6基因上游区结合量的异常可能是胃癌发生的早期分子事件。     

The role of nuclear matrix protein 22 combined with bladder tumor antigen stat test in surveillance of recurring bladder cancer

目的：探讨一种无创,快速,高效便携的监测膀胱肿瘤复发的方法用于肿瘤术后的随访。方法：采用标准ELISA法检测病人尿中的核基质蛋白22(NMP-22)值,并对患进行尿液膀胱肿瘤抗原（BTA stat）测定,膀胱镜检及病理检测以明确有无肿瘤复发。结果:与膀胱镜检及活检结果相比较,尿的NMP-22检测可发现76.7％（33/43）复发的病例,尿的BTAstat可发现67.4%(29/43)复发的病例。若将两项检测的结果综合考虑,则检测的准确率达93.0%(40/43)。结论：尿的NMP-22检测为一种快速、高效,便捷的监测膀胱肿瘤复发的方法,若同BTA Stat检测联合使用,会提高其准确率,并可在术后随访中减低膀胱镜检的频率。     

核基质蛋白22对膀胱移行上皮癌的诊断意义及临床应用

目的探讨核基质蛋白22(NMP22)检测膀胱癌的意义.方法应用酶联免疫吸附试验检测90例患者(其中膀胱癌40例,非膀胱癌患者50例)尿中的NMP22的水平,并与尿脱落细胞学(UC)检查比较.结果膀胱癌组患者术前的NMP22水平较对照组明显升高(分别为115.6 U/ml及6.1 U/ml),统计学上差异显著(P＜0.001),血尿不影响NMP22的检测.NMP22较UC敏感性高,但特异性不如UC.结论 NMP22检测膀胱癌的敏感性较高,可用于膀胱癌的筛选及术后随诊.     

系膜增殖性肾炎核因子-κB活化及其与系膜基质扩大的关系

目的：探讨系膜增殖性肾炎（MsPGN)患儿肾组织中核因子－kB(NF-kB)的活化及其与系膜基质扩大的关系,明确NF－kB在MsPGN发病机制中的作用。方法：应用免疫组化及真彩色医学图像分析系统观察MsPGN患儿肾活检组织中VF－kB的活化,并分析其与MsPGN病理改变的关系。结果：MsPGN患儿肾小球及肾小管中NF－kB的活性显著增加,且与MsPGN病理程度及肾间质中单核细胞浸润密切相关。肾小球中NF－kB的活化与系膜基质扩大呈直线相关。结论：NF－kB的活化在MsPGN发病机制中发挥着重要作用,阻断NF－kB的活化将可能为防治MsPGN的发生和进展提供新的思路。