角膜内皮细胞密度、细胞形态和年龄的关系

用非接触型镜面反射显微镜对321只正常眼进行活体角膜内皮照相,研究细胞密度、细胞形态和年龄的关系。结果表明:(1)细胞密度越高、细胞形态越接近同形细胞;细胞密度越低,细胞形态越接近多形细胞。(2)细胞的多形性随年龄的增加而增加。(3)多形细胞和同形细胞二者的细胞密度均随年龄的增加而下降,但同形细胞下降的幅度较多形细胞明显。     

小鼠B淋巴细胞在ConA反应中的辅佐作用

小鼠脾细胞经两次贴壁除去巨噬细胞,再经两次尼龙毛柱纯化T细胞,尼龙毛粘附的B细胞用抗θ血清加补体去除残余的T细胞后,得到高度纯化的B细胞,在体外用细胞重组实验方法观察B细胞在ConA反应中的作用。结果表明,静止B细胞和细菌脂多糖活化的B细胞均能非常显著地辅佐T细胞对ConA刺激的增殖反应,B细胞这种作用不受组织相容性抗原约束。B细胞还能辅佐T细胞产生IL-2,这证明B细胞具有辅佐细胞功能。     

胰岛A细胞的功能及研究进展

胰岛 (ｉｓｌｅｔｏｆｐａｎｃｒｅａｓ )是由多种内分泌细胞组成的球形细胞团 ,分布于胰腺小叶内的腺泡之间。目前 ,一般认为胰岛细胞主要有 4类 ,即Ａ细胞、Ｂ细胞、Ｄ细胞和ＰＰ细胞。此外还有Ｇ细胞、ＥＣ细胞 ,但各类胰岛细胞的数量因不同的动物而有差异 ,甚或完全缺少某种细胞。胰岛Ａ细胞又称为甲细胞 ,α细胞、Ａ2 细胞、α2 细胞 ,主要分布在胰体和胰尾的胰岛内 ,排列于胰岛周边部 ,少数散在于外分泌部的中、小导管上皮间和腺泡细胞之间 ,约占胰岛细胞数的 2 0 %～ 2 5 %。近年来发现胰岛Ａ细胞除了调节糖代谢以外 ,对中枢神经、周…     

骨转移瘤中侧群细胞的初步分析

目的研究骨转移瘤原代细胞中是否存在干细胞样侧群细胞(SP细胞)。方法对乳腺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、肾癌及宫颈癌骨转移瘤原代细胞进行Hoechst33342染色,应用荧光显微镜直接进行观察,检测骨转移瘤原代细胞中是否存在SP细胞及非SP细胞,并给予维拉帕米拮抗剂,观察各骨转移瘤瘤细胞中SP细胞亚群染色变化情况。结果所检测的乳腺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、肾癌及宫颈癌骨转移瘤原代细胞中均存在SP细胞。荧光显微镜下,SP细胞体积较非SP细胞小,SP细胞胞核蓝色荧光呈淡染或消失;非SP细胞经染色后发出较强的蓝色荧光。给予维拉帕米拮抗剂后,各骨转移瘤细胞中胞核发蓝色荧光的细胞数目明显增多。结论乳腺癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、肾癌及宫颈癌骨转移瘤原代细胞中存在干细胞样的SP细胞。     

人类羊膜细胞表达神经细胞和脂肪细胞表型

目的 探索羊膜组织来源的细胞向神经细胞分化的可能性,为神经移植探寻新的细胞来源。方法 采用组织块培养法培养羊膜细胞,酶消化法对细胞进行传代,应用免疫细胞化学的方法对细胞进行鉴定。结果 从羊膜组织成功培养出细胞,细胞贴壁生长,在体外短期内可以稳定增殖和传代,传代细胞在神经于细胞的培养基中可以形成典型的球状结构,类似神经于细胞的神经球。细胞表达波形蛋白和巢蛋白两种神经于细胞的标志物,也表达神经元的标志物神经元特异性烯醇化酶和βⅢ管蛋白;大部分细胞表达多巴胺能神经元的标志物酪氨酸羟化酶。少数细胞表达星型胶质细胞的标志物胶质纤维酸性蛋白。部分细胞可以随机分化为平滑肌细胞,表达平滑肌肌动蛋白;在诱导条件下,羊膜细胞也可以分化为脂肪细胞。结论 羊膜组织来源的细胞可以表达神经细胞的标志物,能够分化为脂肪细胞和平滑肌细胞,这种细胞对于神经移植有潜在的应用前景。     

小鼠脑垂体TSH细胞和ACTH细胞的体视学研究

用免疫组织化学PAP法,对小鼠脑垂体TSH细胞、ACTH细胞进行双重染色,在同一切片上同时显示两种细胞,观察细胞形态,并用体视学方法对两种细胞进行定量测定。结果显示,TSH细胞体积较大,呈多边形;ACTH细胞体积略小,呈不规则形。TSH细胞的体积密度、面数密度、数密度均高于ACTH细胞的相应数值,而TSH细胞的相邻细胞百分比则低于ACTH细胞的相应数值。     

人胎盘细胞滋养细胞的超微结构观察——明细胞与暗细胞

虽然应用电镜研究人胎盘滋养细胞的超微结构早有报道,但对细胞滋养细胞的电子致密度描述不一。本文对5周至41周人胎盘标本进行了动态观察,发现人胎盘细胞滋养细胞有明细胞与暗细胞之分,并对暗细胞型细胞滋养细胞的意义略加讨论。     

骨髓基质细胞成年大鼠脑内移植

【目的】研究骨髓基质细胞脑内移植后的分布和移行 ,为细胞移植治疗疾病奠定基础。【方法】常规培养大鼠骨髓基质细胞 ,应用免疫组织化学方法对细胞进行鉴定 ,Hoechst332 5 8标记细胞 ,立体定向移植到大鼠的纹状体 ,经过一段时间后处死大鼠 ,脑组织切片 ,直接在荧光显微镜下检查存活的细胞。【结果】细胞移植到大鼠脑内能够长时间存活 ,移植细胞与宿主细胞有很好的相容性 ,宿主脑组织的结构无破坏 ,移植细胞能够移行一段距离 ,说明脑内存在的信号诱导细胞向一定的方向迁徒。【结论】骨髓基质细胞脑内移植后 ,能够与宿主脑组织整合在一起 ,无细胞过度增生和胶质瘢痕形成 ,这种细胞可能成为中枢神经系统自体移植的细胞来源。     

Notch信号分子在人NK细胞淋巴瘤细胞中的表达及其意义

目的：探讨Notch信号分子及下游靶基因在人NK/T细胞淋巴瘤、NK细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤细胞中的表达,阐明Notch信号分子在NK细胞肿瘤中的作用及意义。方法：选择NK/T细胞淋巴瘤细胞SNK-6、NK细胞淋巴瘤细胞YTS、人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat和人Burkitt’s淋巴瘤细胞 Raji,通过实时荧光定量PCR技术检测上述细胞中Notch信号分子的表达水平。结果：Notch 1,3,4信号分子在YTS和SNK-6细胞中表达量均不同程度高于Raji和Jurkat淋巴瘤细胞（P<0.01）,但是在SNK-6中的表达量均不同程度低于在YTS细胞中的表达（P<0.01）。Notch 2信号分子在YTS、SNK-6细胞中的表达量高于Jurkat细胞（P<0.01）,但是与Raji细胞比较差异无统计学意义（P>0.05）。Notch 下游靶基因Hes1的表达量,YTS细胞高于Raji和Jurkat细胞（P<0.05,P<0.01）,而SNK-6细胞则低于Raji和Jurkat细胞（P<0.01）。结论：在NK细胞肿瘤细胞中Notch 信号分子表达异常,且明显区别于B、T细胞淋巴瘤细胞。     

抗菌药物对淋巴细胞功能的影响

<正>在免疫系统中淋巴细胞执行特异性免疫,即效应功能表现为对靶细胞的杀伤作用。淋巴细胞包括B细胞和T细胞及其它淋巴细胞,B细胞分为产生分泌抗体的浆细胞和记忆细胞,T细胞分为调节细胞和效应细胞二个主要功能亚群。调节细胞中的辅助细胞(T_H)和抑制细胞(T_S)分别增强和抑制其它免疫细胞的反应活性,效应细胞介导迟发型变态反应(DTH)、移植排斥反应、肿瘤免疫和病毒细胞的杀伤等、T细胞还分泌许多细胞     

早孕期蜕膜组织中细胞的形态学及组织化学研究

用多种组织化学方法对人早孕期蜕膜组织的细胞种类和各类细胞的化学成份作了研究。蜕膜组织内有两类细胞:大细胞和小细胞,其数量各占一半,大细胞胞质内含有丰富的糖原、脂类、脂酶,碱性磷酸酶以及3-β-羟基甾体脱氢酶,小细胞的胞质内含有丰富的酸性磷酸酶和三磷酸腺苷酶,部分小细胞内含有酸性粘多糖。含颗粒的小细胞占小细胞的20.7％,不含颗粒的小细胞有待进一步研究,研究表明,大细胞是形态一致,功能多样的细胞,而小细胞是形态各异和功能不一的细胞。     

不同来源骨髓基质细胞微环境对Jurkat细胞生物学特性的影响

目的观察正常及急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞微环境对Jurkat细胞生物学特性的影响。方法收集与正常及急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞微环境共培养10d的Jurkat细胞,观测Jurkat细胞增殖、细胞周期分布、凋亡、分化及DNR摄药量的改变。结果白血病骨髓基质细胞微环境对Jurkat细胞黏附、趋化及降低摄药量的作用强于正常骨髓基质细胞微环境;抑制增殖及促分化作用弱于正常骨髓基质细胞微环境。白血病骨髓基质细胞微环境抑制Jurkat细胞凋亡,而正常骨髓基质细胞微环境促进其凋亡。结论正常骨髓源基质细胞微环境较白血病源骨髓基质细胞微环境对Jurkat细胞具有更强的促进凋亡、分化及抑制增殖的作用,增加Jurkat细胞对DNR的敏感性。     

大鼠生后发育期间胰岛胰多肽细胞与胰高糖素细胞免疫组织化学双重染色观察

用免疫组织化学双重染色法,在一张切片上同时显示胰岛PP细胞与A细胞。观察生后发育期间大鼠全胰PP细胞、A细胞和PP-Glu共存细胞的形态、分布和数量。结果表明,PP细胞突起可伸达A细胞,PP和Glu在胞质内共存呈分散或分区两种形式,胰岛可分为PP细胞型、A细胞型和PP-A细胞型,PP细胞和PP-Glu共存细胞的计数表明,在生后7天最低,28天最高。     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白对肝癌细胞系Hep3B中侧群细胞的影响

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)分子对肝癌细胞系Hep3B细胞中侧群(SP)细胞的影响。方法雷帕霉素抑制mTOR,流式细胞术分析Hep3B细胞系中SP细胞的比例,软琼脂克隆形成实验检测Hep3B细胞中SP细胞和非侧群(non-SP)细胞成克隆能力。结果 Hep3B细胞中存在SP细胞,经过雷帕霉素处理后,SP比例明显降低。雷帕霉素能够明显降低SP细胞的软琼脂成克隆能力,对non-SP细胞的软琼脂成克隆能力影响不显著。结论 mTOR的活性对Hep3B细胞中SP细胞的维持起重要作用,抑制mTOR的活性使SP细胞比例明显减低,并能显著抑制SP细胞的软琼脂成克隆能力。     

小鼠骨髓间充质干细胞对人舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用及其对Cal27细胞增殖和迁移的促进作用

目的：探讨小鼠骨髓间充质干细胞（mBMSCs）对舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用,并观察mBMSCs影响下舌鳞状细胞癌Cal27细胞的生物学行为。方法：以全骨髓法分离提纯mBMSCs,采用流式细胞术分析细胞表型进行鉴定。将mBMSCs分为空白对照组、Hacat细胞对照组和Cal27细胞实验组,将正常培养基、Hacat细胞条件培养基和Cal27细胞条件培养基分别与mBMSCs共培养后,通过细胞迁移实验检测mBMSCs迁移的细胞数。再将Cal27细胞分为单纯Cal27细胞对照组和与mBMSCs共培养Cal27细胞实验组（共培养组）,共培养组使用Transwell法共培养Cal27细胞和mBMSCs,采用细胞增殖实验和克隆形成实验检测共培养后Cal27细胞的增殖能力;细胞迁移实验检测共培养后Cal27细胞的迁移能力。结果：倒置显微镜观察,mBMSCs多数细胞呈短梭形,细胞质丰富,细胞核呈椭圆形或肾形,细胞突长短不一,细胞排列整齐。流式细胞术检测,mBMSCs表面标志物CD44、CD29和Sca-1呈阳性,CD45和CD11b呈阴性。与空白对照组和Hacat细胞对照组比较,Cal27组细胞实验归巢至Cal27细胞的mBMSCs数量明显增加（P<0.01）。与单纯Cal27细胞对照组比较,共培养组Cal27细胞从共培养第3天起生长速度明显高于对照组（P<0.01）,克隆形成数增加。细胞迁移实验,共培养组Cal27细胞穿膜细胞数较单纯Cal27细胞对照组明显增加（P<0.01）。结论：mBMSCs可归巢至舌鳞状细胞癌,促进舌鳞癌Cal27细胞的增殖和迁移,从而促进舌鳞癌的发展,提示mBMSCs可作为抗肿瘤治疗靶点。     

适用于单细胞RNA测序的半月板细胞提取方法的优化

目的 优化半月板细胞提取的方法,缩短细胞提取时间,稳定地获取细胞数量多和细胞活率高的细胞悬液,使获得的细胞悬液悬液适用于单细胞RNA测序。方法 比较细胞悬液的细胞数量及细胞活率评价不同细胞提取方法的有效性,细胞提取方法包括传统半月板细胞提取法（短时间消化和长时间消化）和优化提取法;通过分析单细胞RNA测序数据集评价优化提取法获取的细胞悬液的稳定性;通过比较优化提取法获得的单细胞RNA测序数据集与公开的半月板单细胞RNA测序数据集,分析优化提取法的可靠性。结果 在3次重复实验中,优化提取法获得细胞数量最多的细胞悬液,细胞数量超过105,且细胞活率最高,平均达80%。通过分析单细胞RNA测序数据发现每个样本中80%以上细胞的线粒体基因含量少于20%。CD34+,MCAM+细胞以及COL1A1+胞均存在每个单细胞RNA测序数据集中。在比较基于优化提取法单细胞RNA测序数据集与公开的半月板单细胞RNA测序数据集时发现,优化提取法也能捕获COL3A1+细胞,COL1A1+细胞,MYLK+细胞,BMP2+细胞,CD93+细胞和CDK1+细胞。结论 优化细胞提取方法能稳定地获得适用于10×Genomics平台的单细胞RNA测序技术的单细胞悬液。     

以粘附分子为靶治疗自身免疫性疾病的进展

<正> 细胞介导的自身免疫性疾病的共同特点是单个核细胞对受累器官、组织的持续浸润,这些细胞包括T细胞、B细胞和抗原递呈细胞等免疫细胞。在这些细胞中,T细胞特别是CD4~+T细胞被认为起关键作用。特异的细胞粘附机理允许T细胞进入炎症部位。粘附分子参与发病的证据之一     

体外培养人胚鼻咽上皮生物学特性的观察——Ⅱ、人胚鼻咽上皮细胞分化的光镜、电镜研究

人胚鼻咽粘膜主要由假复层纤毛柱状上皮被覆,伴有少量过渡型上皮,未见典型的复层鳞状上皮。前者为鼻咽上皮的原基型,由纤柱细胞、杯状细胞、表面未分化细胞、中间细胞和基底细胞组成。纤柱细胞和杯状细胞均由基底细胞、中间细胞和表面未分化细胞分化而来。过渡型上皮由基底细胞向纤毛细胞和杯状细胞分化过程中不同分化阶段的中间细胞及表面未分化细胞所组成。基底细胞和中间细胞的胞浆内含有胞浆泡状系统和张力原纤维,具有双向分化的能力。过渡型上皮是演变为复层鳞状上皮或发生鳞状上皮化生的基础。     

CIK细胞对急性髓细胞白血病微小残留病作用的研究

目的:制备和观察CIK细胞对自体、异体原代急性髓细胞白血病(AML)细胞的杀伤作用和对G0期CD3+4白血病细胞的细胞毒作用,以及对正常骨髓造血干细胞的影响。方法:取AML化疗后及正常人外周血单个核细胞加入一系列细胞因子诱导培养CIK细胞,流式细胞仪检测CIK细胞表型,G带法分析CIK细胞核型。冻存、复苏后作为靶细胞,MTT法测定CIK细胞对自体、异体原代白血病细胞杀伤作用。AO染色法测定复苏后G0期AMLCD3+4细胞比例。流式细胞仪检测CIK细胞杀伤前后G0期CD3+4细胞比例变化。半固体培养法检测CIK细胞对正常骨髓CFU-GM、BFU-E集落形成的影响。结果:CIK细胞可从白血病患者外周血中获得,来源于正常淋巴细胞,对自体原代白血病细胞有明显杀伤作用,对G0期白血病细胞有明显抑制作用,对正常造血干细胞无杀伤作用。结论:CIK细胞可作为清除残留急性髓细胞白血病细胞的有效工具     

HBV的宫内传播与人绒毛膜滋养层细胞的HBV感染和凋亡关系的研究

目的检测HBV感染后人绒毛膜滋养层细胞的HBV标志物的表达和细胞的形态学变化,探讨HBV对滋养层细胞的感染与HBV宫内传播的关系。方法将HBV感染的血清与原代培养的人早孕绒毛膜滋养层细胞及传代细胞JEG-3共同孵育8～48h,通过倒置显微镜观察细胞的形态及细胞间连接,细胞免疫荧光方法检测滋养层细胞中HBsAg的表达,荧光定量PCR方法检测细胞中的HBVDNA,TUNEL方法检测滋养层细胞的凋亡。结果滋养层细胞与HBV感染的血清共同孵育后,滋养层细胞的形态及细胞间连接无明显变化;但通过免疫荧光方法检测到滋养层细胞中HBsAg的阳性表达,并通过荧光定量PCR方法检测到滋养层细胞中HBVDNA的存在;同时,细胞凋亡检测结果表明,与HBV感染的血清共同孵育后,滋养层细胞的凋亡数量明显增加。结论HBV可以感染体外培养的滋养层细胞;HBV感染可以诱导滋养层细胞凋亡,滋养层细胞的感染和凋亡可能与HBV的宫内传播机制有关。