HPLC方法检测水及水生动物中软骨藻酸

为了解水及水生动物体内软骨藻酸的污染状况 ,采用高效液相色谱 (HPLC)方法检测了部分水及水生动物中软骨藻酸的含量。结果表明 ,HPLC方法是检测水及水生动物中软骨藻酸的简便有效方法。部分海洋贝壳动物体内检出软骨藻酸 ;海水及地面淡水中未检出软骨藻酸。为防止软骨藻酸中毒 ,应加强软骨藻酸污染状况的监测。     

分散固相萃取净化-液相色谱-串联质谱法检测贝类中软骨藻酸

目的 建立分散固相萃取净化-液相色谱串联质谱定量检测4种贝类基质中软骨藻酸的方法.方法 0.1 g样品用25％甲醇水溶液提取后,用50 mg HLB和5 mg GCB吸附剂吸附净化,过0.22 μm PTFE滤膜,C18柱分离(100 mm×2.1 mm,1.9μm),电喷雾离子化,选择反应监测模式检测,基质匹配外标法...     

软骨藻酸的毒性作用机制研究概况

软骨藻酸是由硅藻产生的兴奋性神经毒素，在过去10年对人类和海洋动物的健康产生了严重危害。国外对其毒性和作用机制做了大量调查和研究。本文从几个方面讨论了其可能的毒性作用机制：（1）软骨藻酸作用于谷氨酸受体，与内源性神经递质协同发挥毒性作用；（2）引起细胞内Ca^2 超载和神经元肿胀；（3）引起细胞能量代谢紊乱。     

118 软骨藻酸的毒性作用机制研究概况

软骨藻酸是由硅藻产生的兴奋性神经毒素，在过去10年对人类和海洋动物的健康产生了严重危害。国外对其毒性和作用机制做了大量调查和研究。本文从几方面讨论了其可能的毒性作用机制(1)软骨藻酸作用于谷氨酸受体，与内源性神经递质协同发挥毒性作用；(2)引起细胞内Ca2+超载和神经元肿胀；(3)引起细胞能量代谢紊乱。     

水生态环境中神经毒性生物毒素--软骨藻酸

软骨藻酸是由水中藻类产生的具有神经兴奋作用和神经毒作用的生物毒素,本综述了软骨藻酸的生物及化学特性,水生态环境中软骨藻酸的污染,对人体的危害,并介绍了有关中毒机制的毒理学研究内容。     

海水和贝类中软骨藻酸的酶联免疫吸附分析方法研究

目的建立间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)方法测定海水样品和海洋贝类中赤潮毒素记忆缺失性贝毒主要成分软骨藻酸(DA)。方法采用碳二亚胺法,将半抗原DA分别与载体蛋白卵清蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到包被抗原和免疫抗原。以DA-BSA做为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA方法分析检测海水样品和海洋贝类中的软骨藻酸。结果最低检出限为10.0ng/ml(对于贝相当于4μg/g);海水样品回收率为83.2%～124.7%,批内变异系数在4.7%～5.9%之间;贝类样品回收率为85.9%～99.9%,批内变异系数2.4%～7.1%之间。结论建立的ELISA方法检测海洋贝类中DA可以满足国际规定的安全限值。     

舟山海域贝类海产品中软骨藻酸含量调查

目的:对舟山海域贝类等海产品中软骨藻酸含量进行初步调查。方法:采集舟山海域出产的贝类等海产品,使用高效液相色谱法对其中的软骨藻酸含量进行定量分析。结果:舟山海域贝类等海产品中软骨藻酸的总检出率为64%,含量范围为ND-1.68 mg/kg,含量中值0.21 mg/kg,贻贝等海产品中毒素含量相对较高。结论:舟山海域贝类等海产品中软骨藻酸总体含量远低于卫生标准限值,目前暂不存在食用风险。     

软骨藻酸对小鼠脑组织HO-1蛋白表达的影响

目的　研究软骨藻酸 (domoicacid)对小鼠脑组织丙二醛 (MDA)含量及血红素氧化酶 -1(hemeoxygenase-1,HO -1)蛋白表达的影响。方法　小鼠连续 5d腹腔注射软骨藻酸染毒后 ,采用硫代巴比妥酸 (TBA )法测定小鼠脑组织中MDA含量 ,并用免疫组织化学方法检测小鼠脑组织中HO -1分布及表达。结果　低剂量 (1/ 90LD5 0 )组海马、高剂量 (1/ 10LD5 0 )组大脑皮层和海马MDA含量明显升高 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 0 5)。对照组大脑皮层和海马HO -1阳性细胞平均光度 (A)分别为 0 0 953± 0 0 2 52和 0 0 940± 0 0 3 0 4;低剂量组皮层和海马A分别为 0 14 10± 0 0 40 7和 0 14 0 6± 0 0 3 54,与对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 0 5) ;高剂量组大脑皮层和海马A分别为 0 162 6± 0 0 3 74和 0 160 4± 0 0 3 2 5,与对照组相比 ,有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　软骨藻酸对小鼠大脑皮层和海马具有氧化损害作用 ,并诱导皮层和海马HO -1蛋白表达增多     

软骨藻酸诱导PC12细胞凋亡及对活性氧的影响

[目的]研究软骨藻酸诱导PC12细胞凋亡及对活性氧的影响. [方法]流武细胞仪法测定0、0.01、0.1、l μmol/L软骨藻酸作用PCI2细胞24h后,对细胞凋亡、细胞周期和活性氧生成的影响. [结果]软骨藻酸可诱导PC12细胞凋亡的发生,与对照组(凋亡率为0.250±0.053)相比,所有染毒浓度组PCI2细胞凋亡率均上升且差异有统计学意义;并将PC12细胞阻滞于细胞周期中的G2/M期,0.1、1 μmol/L组中处于G2/M期的PC12细胞数量与对照组相比,差异具有统计学意义;所有浓度组均可使PC12细胞的活性氧分子(reactive oxygen species,ROS)平均荧光强度增加(0.01 μmnol/L组为187.140±3.629,0.1 μmol/L组为206.023±5.277,1 μmol/L组为348.915±3.343),与对照组(163.660±4.059)相比,差异均具有统计学意义.[结论] 软骨藻酸能诱导PC12细胞凋亡的发生,将PC12细胞阻滞于细胞周期中的G2/M期,并使得细胞内的ROS产生增加.     

食品中糖精钠和苯甲酸的高效液相色谱测定法

目的探讨一种前处理方法简单并可快速测定食品中糖精钠、苯甲酸的检测方法——高效液相色谱法。方法研究各类样品的前处理方法,采用YWG-C18不锈钢柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇:乙酸铵为流动相,于230nm波长下进行检测。结果采用该方法糖精钠和苯甲酸在0～250mg/L范围内,相关系数均在0.999以上,最小检出限分别为0.15和0.5mg/L。糖精钠和苯甲酸相对标准偏差(RSD)为2.7%、2.5%,回收率分别为95.3%～103.5%和95.5%～104.8%。结论该方法操作简便,可同时快速测定2种物质,具有良好的准确性和精密度,可应用于大量食品样品中糖精钠和苯甲酸的检测工作。     

高效液相色谱法测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠样品前处理方法

目的探讨高效液相色谱法测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的样品前处理方法。方法不同样品用不同前处理方法,用二极管阵列管检测品（HPLC-DAD）分析测定,外标法定量。结果该前处理方法线性关系良好,相对标准偏差分别为山梨酸3.18%、苯甲酸2.74%、糖精钠2.15%,加标回收率均在90%~100%之间。结论该方法稳定性好、准确可靠、简单快速,适用于食品添加剂的测定。     

气相色谱法测定水中氯乙酸的研究

[目的 ]建立一种简便、准确、适于基层使用的测定水中氯乙酸方法。 [方法 ]用酸、甲醇酯化氯乙酸 ,15 ?GS填充色谱柱分离 ,电子捕获检测器检测。 [结果 ]氯乙酸最佳酯化条件 :温度 60℃ ,时间 60min ,浓硫酸 0 4ml,甲醇0 8ml。色谱最佳测试条件 :15 ?GS色谱柱分离 ,柱温 10 5℃ ,气化室温度 190℃ ,检测室温度 190℃。该法线性范围较宽 ,一氯乙酸线性范围在 2 5～ 40 0 μg/ml(r=0 993 9) ,三氯乙酸线性范围在 0 2 5～ 1 0 μg/ml(r =0 9940 ) ,回收率在 95 %～ 10 5 %之间 ,CV均小于 5 % ,显示出良好的精密度和准确度。 [结论 ]本法具有快速、灵敏、准确等优点 ,是适于基层使用的一种分析方法     

高效液相色谱法测定水中莠去津

目的研究水中莠去津含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法,检测波长254 nm;柱箱温度-40℃;流动相配比:甲醇∶水=5∶1;流动相流速为1.2 m l/m in;进样量:10μl。结果该方法测定RSD为1.41%,线性回归良好(r=0.999 3),平均回收率为95.3%。结论该方法可以快速准确测定饮用水中莠去津。     

软骨藻酸对H4细胞血红素氧化酶-1的诱导

[目的 ]研究软骨藻酸对H4细胞血红素氧化酶 1(hemeoxygenase 1,HO 1)的诱导。 [方法 ]流式细胞仪检测0、0 .0 64、0 .64、6.4μmol/L软骨藻酸作用细胞 2 4h后HO 1蛋白表达、HO 1mRNA转录和HO 1酶活性。[结果 ]HO 1蛋白表达 :0 .0 64、0 .64、6.4μmol/L浓度组的荧光强度分别为 ( 68.0 7± 7.0 7)、( 81.3 4± 8.64 )和 ( 81.95± 8.3 0 ) ,与对照组 ( 60 .60± 5 .3 6)比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。HO 1mRNA转录 :0 .0 64 μmol/L组相对表达量为 ( 0 .43 9± 0 .0 0 7) ,与对照组( 0 .411± 0 .0 0 8)比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;0 .64 μmol/L和 6.4μmol/L组分别为 ( 0 .5 0 6± 0 .0 13 )和 ( 0 .63 1± 0 .0 3 6) ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。HO 1酶活性 :0 .0 64mol/L组为 ( 3 89.3 2± 3 4.75 )pmol/(mg·h) ,与对照组 ( 3 2 6.75±2 7.0 5 )pmol/(mg·h)相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;0 .64和 6.4μmol/L组分别为 ( 4 61.75± 2 7.84)和 ( 687.5 0± 3 5 .93 )pmol/(mg·h) ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。前述 3指标结果均有随剂量浓度增加而逐渐升高的趋势。 [结论 ]软骨藻酸能诱导H4细胞HO 1蛋白表达、HO 1mRNA转录和HO 1酶活性升高     

高效液相色谱法测定川葛颗粒中葛根素的含量

目的建立高效液相色谱法测定川葛颗粒中葛根素含量。方法色谱柱Zorbax Eclipes XDB（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相甲醇∶水（25∶75）;流速1.0 ml/min;检测波长250 nm;柱温25℃。结果葛根素在0.090 4～0.904 0μg范围内线性关系良好（r=0.999 9,n=5）;平均回收率为97.48%（n=9）,RSD为1.47%。结论本方法操作简单、准确可靠,可用于川葛颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定肠内制剂中的谷氨酰胺含量

目的建立一种准确、简便、快速的高效液相色谱法用于测定肠内制剂中谷氨酰胺的含量。方法以邻苯二甲醛作柱前衍生剂，反相C18柱为固定相，以10mmol／L磷酸盐缓冲液（pH6．85）：甲醇=50：50为流动相进行洗脱，在340nm紫外波长处测定谷氨酰胺的含量。结果在100～1500μmol／L内线性关系良好（r=0．9995）。回收率为87．37％～100．99％。结论该方法简便、准确，适用于肠内制剂中谷氨酰胺含量的分析。     

工作场所空气中1,6-己二异氰酸酯的吸收液衍生-液相色谱检测方法

[目的]建立工作场所空气中1,6-己二异氰酸酯(HDI)的吸收液衍生-液相色谱检测方法. [方法]样品采用冲击式采样管,色胺/二甲亚砜吸收液采样并衍生,高效液相色谱测定HDI衍生物浓度. [结果]该方法在0.050～10 μg/mL范围内呈线性良好,回归方程)7=6.9×106x-4.6×104,相关系数r=1.000.当采样体积为45L时,HDI最低检出浓度为0.000 54 mg/m3,最低定量浓度为0.001 8 mg/m3.采样后的吸收液常温下可长期保存,14d的下降率小于5％.工作场所空气中可能存在的其他异氰酸酯类化合物等,在该方法条件下对测定结果无干扰. [结论]该方法适用于工作场所空气中HDI的日常监测.     

高效液相色谱法测定骨力片中淫羊藿苷的含量

目的建立高效液相谱对骨力片中淫羊藿苷含量测定的方法,为制剂的质量控制提供依据。方法以淫羊藿苷为含量测定指标,色谱柱Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm×5μm);流动相:乙腈-水(25∶75),流速:1.0 ml/min,检测波长:270 nm。结果淫羊藿苷的回归方程:y=1 259.462 5x-1.051 2,r=1.000 0,加标回收率为97.7%,RSD为0.74%。结论该方法具有样品处理简便、测定周期短、灵敏度高、重现性好、专属性强的特点,可以有效地控制骨力片的质量。