足部经典型卡波西肉瘤2例临床病理观察

目的探讨足部经典型卡波西肉瘤(KS)的临床病理特征、免疫组化及鉴别诊断。方法报道2例发生于足部的经典型卡波西肉瘤的组织形态学和免疫组化特征,结合文献对其临床病理学特征及鉴别诊断进行分析。结果 2例卡波西肉瘤均无HIV感染病史,其中1例发生于足背,1例发生于足底。低倍镜下肿瘤均呈多结节状,结节边界清楚,由增生的梭形细胞组成,伴间质出血;高倍镜下增生的梭形细胞纵横交错排列,梭形细胞被含有红细胞的裂隙样腔隙分割,呈筛孔状或蜂窝状,在梭形细胞胞质内或细胞外可见嗜伊红色透明小体,梭形细胞之间见外渗的红细胞。免疫组化显示瘤细胞CD34、CD31、Fli-1和ERG(+),其中1例HHV-8(+)。结论卡波西肉瘤是一种少见的中间型血管内皮瘤,诊断主要依靠其独特的形态学及免疫表型特征,需注意与梭形细胞血管瘤、卡波西型血管内皮瘤、血管肉瘤和上皮样血管内皮瘤等鉴别。     

卵巢癌细胞中CD117~+细胞群分离及其意义

目的从人卵巢癌细胞株HEY中筛选出CD117~+细胞亚群,探讨其体内、外增殖、呈瘤和分化能力。方法卵巢癌细胞株HEY采用流式细胞仪分选,筛选出CD117~+细胞亚群,分为CD117~+细胞组和CD117~-细胞组,2组分别取100个细胞接种在6孔板中培养2周,采用平板克隆实验检测克隆形成率;分别取100个细胞在无血清DMEM培养基中培养1周,显微镜下观察细胞成球情况;分别取2×10~4个细胞接种在6孔板中培养2周,采用流式分选法检测细胞中CD117~+细胞比例,检测细胞体外分化能力。BALB/c裸鼠16只,根据接种细胞密度分为10~3组和10~4组,每组8只。10~3组将1×10~3个CD117~+细胞和CD117~-细胞分别接种于裸鼠背部的左侧和右侧皮下,10~4组将1×10~4个CD117~+细胞和CD117~-细胞分别接种于裸鼠背部的左侧和右侧皮下,比较2组肿瘤形成情况和肿瘤体积。结果 HEY细胞中CD117~+细胞占1.23%;培养2周后,CD117~+组细胞克隆形成率[(44±4)%]和CD117~+细胞比例(31.4%)高于CD117~-组[(25±3)%、0](P0.05);培养1周后,CD117~+组细胞可形成状态良好、连接紧密的细胞球,生长速度较快,每个细胞球由40~50个细胞组成,CD117~-组细胞呈悬浮、球形生长,不能增殖成细胞球;接种CD117~+细胞4周后,103组裸鼠皮下移植瘤肿瘤体积[(0.300±0.042)cm~3]小于10~4组[(0.490±0.031)cm~3](P0.05),接种CD117~-细胞后,10~3组和10~4组裸鼠均未成瘤。结论卵巢癌细胞株HEY中仅小部分表达CD117~+抗原标记,但该亚群细胞具有较强增殖和分化能力,可在无血清悬浮培养中形成细胞球。     

人经血来源间充质干细胞对小鼠A549肺癌化疗效果的影响研究

目的:探讨人经血来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MenSCs)对小鼠A549肺癌化疗效果的影响。方法:取20只BALB/C裸小鼠建立肺癌模型,随机分为实验组和对照组各10只;对照组仅给予化疗干预,实验组则于化疗期间将某机构赠予的Men SCs经Di I荧光标记后于鼠尾静脉(3×10~5/只)进行注射。肺癌造模后14 d,两组小鼠均断颈椎处死并收集其肿瘤,比较两组小鼠瘤体体积、瘤体质量、抑瘤率及双肺湿重、肿瘤转移率、肿瘤转移个数、抑制转移率差异。结果:20只BALB/C裸小鼠均进行统计,无脱落报告。20只小鼠接瘤后第7天在右前肢腋下均可触及瘤体长出,两组小鼠瘤体生长曲线比较,差异无统计学意义(P0.05)。两组小鼠的平均瘤体体积和平均瘤体质量比较,差异均无统计学意义(P均0.05);抑瘤率为8.4%。实验组小鼠双肺湿重、肿瘤转移率及肿瘤转移个数均显著低于对照组小鼠,差异有显著性(P0.05);抑制转移率为71.8%。结论:Men SCs协同化疗在抑制小鼠肺癌肿瘤转移方面有一定效果。     

人滑膜肉瘤细胞株SW982中肿瘤干细胞的分离及鉴定

背景:滑膜肉瘤属于高度恶性肿瘤,目前尚无有效治疗手段。肿瘤干细胞理论的提出为滑膜肉瘤的治疗提供了新的思路。目的:探寻人滑膜肉瘤细胞系SW982中是否存在干细胞样细胞。方法:首先采用不断剥夺血清浓度的方法培养SW982细胞,选择在最低血清浓度培养下的细胞进行抗药实验。MTT法测定在1,10,20,30,40,50,60mg/L阿霉素浓度下的肿瘤细胞抑制率。裸鼠接种耐药细胞与非耐药细胞观察是否有肿瘤生成。结果与结论:经过降血清培养后的SW982细胞的耐药性有所增强;在裸鼠成瘤实验中耐药细胞接种后有2只裸鼠成瘤,余均未成瘤。说明:①体外培养的人滑膜肉瘤细胞系SW982中存在具有高致瘤性的肿瘤干细胞样细胞。②采用高浓度阿霉素药物筛选细胞实验可以有效富集具有高致瘤性的滑膜肉瘤细胞群,进而富集滑膜肉瘤干细胞,但尚需进一步纯化。     

筛选鉴定Thy-1标记阳性肝癌细胞系中的卵圆细胞样干细胞:可能是肝肿瘤干细胞吗?

背景:肝癌的转移复发被认为可能存在有肿瘤干细胞,后者在肿瘤细胞中数目极少,使得临床鉴别存在一定困难.Thy-1是卵圆细胞的表面标记蛋白,通过特异性标记物间接证明肿瘤中存在肿瘤干细胞是目前研究的重点.目的:探讨肝癌细胞中是否存在Thy-1标记阳性的卵圆细胞,并进行筛选鉴定.方法:流式细胞仪检测卵圆细胞标记蛋白Thy-1在肝癌细胞HepG2,BEL7402及正常肝细胞QSG7701的阳性表达情况,免疫磁珠分选Thy-1标记阳性的肝癌细胞,免疫荧光鉴定分选效率.裸鼠皮下接种实验设立3组,Thy-1~+细胞组裸鼠于背部皮下接种分选的Thy-1~+细胞5×10~5/只,HepG2细胞阳性对照组同法接种HepG2细胞0.5×10~7/只,Thy-1细胞阴性对照组同法接种分选的Thy-1-细胞0.5×10~7/只,1个月后观察各组成瘤性.结果与结论:卵圆细胞表面标记蛋白Thy-1在肝癌细胞HepG2,BEL7402中的表达明显高于正常肝细胞QSG7701(P＜0.05).Thy-1~+细胞组免疫荧光染色阳性率为85%,HepG2细胞阳性对照组为1%,Thy-1~-细胞阴性对照组几乎无免疫荧光表达.HepG2细胞阳性对照组、Thy-1~+细胞组5只裸鼠全部成瘤,且瘤体体积相对较大;而Thy-1~-细胞阴性对照组仅有1只裸鼠成瘤,瘤体体积明显小于前2组(F=144.568,P＜0.05),提示肝癌细胞中存在Thy-1标记阳性的卵圆细胞样干细胞,其可能是肝癌细胞中的肿瘤干细胞.     

急性B淋巴细胞白血病微小残留病动物模型的建立

目的:建立急性B淋巴细胞白血病微小残留病动物模型。方法:通过皮下注射2×10⁷个Nalm-6细胞形成移植瘤,观察裸鼠体重、活动状态及成瘤状况,取裸鼠外周血、骨髓、肝脾等组织进行病理检查,了解皮下造模的成功是否伴有全身转移情况。结果:裸鼠皮下注射2×10⁷个Nalm-6细胞,11.0±2.5 d后可观察到(3-4)×(3-4)mm肿瘤,体重降低,活动不受限,病理切片观察到肝脏、脾脏、骨髓有肿瘤细胞浸润。结论:采用裸鼠成功建立急性B淋巴细胞系白血病皮下肿瘤的动物模型。     

皮下软组织上皮样血管肉瘤2例临床病理观察

目的探讨上皮样血管肉瘤(EAS)的临床病理特点、诊断和鉴别诊断。方法对2例上皮样血管肉瘤的组织病理学、免疫组化结果进行分析,结合文献进行讨论。结果镜下肿瘤由细胞体积大、胞质丰富、具有上皮样特征的瘤细胞构成。瘤细胞呈弥漫片状、腺管状、单排条索状排列。免疫组化:肿瘤细胞CD34和FⅧAg(+),AE1/AE3和EMA部分(+)。结论上皮样血管肉瘤是一种罕见的高度恶性肿瘤,诊断和鉴别诊断主要依赖其病理形态学特点结合免疫表型。     

裸鼠皮下脑胶质瘤模型的复制与生长特性的观察

目的 建立裸鼠皮下C6脑胶质瘤模型,了解其生长特性.方法 将C6脑胶质细胞的培养悬液注射于裸鼠左侧腋下区皮下.观察接种区皮下肿瘤的生长状况,测量肿瘤直径并计算肿瘤体积,绘制肿瘤体积-时间生长曲线.HE染色和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色观察肿瘤细胞的生长及转移状况.结果 瘤细胞接种后第7天,裸鼠腋下区开始出现肿瘤,并呈加速生长.20 d后,皮下肿瘤呈快速的近指数生长.裸鼠生存期为22~48 d.光镜下见瘤体边界清晰,瘤内血管丰富,存在大量GFAP阳性细胞.结论 将体外培养的C6脑胶质瘤细胞植入裸鼠皮下,可建立重复性好的脑胶质瘤动物模型.     

CD44在卵巢癌细胞增殖及复发和耐药中作用

目的探讨CD44表达与卵巢癌体外增殖和体内复发、化疗耐药的关系。方法卵巢癌细胞株SKOV3应用流式细胞仪分选,筛选出CD44~+细胞亚群,分为CD44~+细胞组(CD44~+组)和CD44~-细胞组(CD44~-组),2组细胞接种在超低吸附6孔板中,无血清悬浮培养,观察细胞成球情况。BALB/C(nu/nu)雌性裸鼠24只,分为对照组、10mg/kg紫杉醇组、20mg/kg紫杉醇组和25mg/kg紫杉醇组,每组6只,各组分别于裸鼠背部左侧和右侧接种人卵巢癌细胞株SKOV31×10~7建立卵巢癌异种移植模型,小鼠成瘤后分别采用生理盐水和10、20、25 mg/kg紫杉醇处理小鼠,采用Western blot检测各组小鼠肿瘤组织CD44蛋白表达水平。结果流式细胞仪分选显示,SKOV3细胞中CD44~+荧光强度为121.90±1.18;2组细胞培养1周后,CD44~+组细胞亚群形成状态良好、连接紧密的细胞球,每个细胞球由40~50个细胞组成;CD44~-组细胞虽可在培养基中悬浮生长,折光性较好,但不能增殖成细胞球;25 mg/kg紫杉醇组小鼠肿瘤组织CD44表达水平(0.898±0.016)高于20mg/kg紫杉醇组(0.711±0.013)、10mg/kg紫杉醇组(0.621±0.015)和生理盐水组(0.583±0.008)(P0.05);20mg/kg紫杉醇组高于10mg/kg紫杉醇组和生理盐水组(P0.05),10mg/kg紫杉醇组与生理盐水组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论CD44在卵巢癌生长、复发和耐药中起重要作用,检测CD44表达水平可预测卵巢癌的复发和耐药。     

人胸腺和脐血造血干/祖细胞联合移植对裸鼠T细胞免疫功能影响

目的:建立人胸腺和脐血造血干/祖细胞联合移植裸鼠动物模型,探讨胸腺对造血干细胞发育分化的机制.方法:实验组为人胸腺与脐血CD34+细胞联合移植.对照组只给予人脐血CD34+细胞移植,通过观察裸鼠移植胸腺CD3、HLA-DR的表达、人源CD3+细胞在小鼠脾脏的表达、裸鼠血液CD3+、CD4+、CD8+和CD4+ CD25+细胞的百分比,以及联合移植裸鼠对移植肿瘤的排斥能力,判断联合移植对裸鼠免疫功能的影响.结果:移植胸腺在裸鼠肾被膜下存活,表达CD3和HLA-DR分子;裸鼠脾脏中检测到人源CD3+T细胞呈点块状分布;裸鼠血液中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+细胞均增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);联合移植组能抵抗肿瘤细胞的生长,单独脐血造血干/祖细胞移植组不能抑制肿瘤生长.结论:裸鼠移植人胸腺能促进人脐血造血干/祖细胞向T细胞分化、促进免疫功能重建.