DC-CIK疗法联合细胞因子对老年乳腺癌患者外周血CD4~+CD25~+Tr细胞水平和免疫功能的影响

目的探讨树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)疗法联合细胞因子对老年乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Tr细胞水平和免疫功能的影响。方法应用流式细胞仪检测23例老年乳腺癌患者,经DC-CIK细胞治疗联合细胞因子治疗前后外周血中CD4+CD25+Tr细胞水平。结果治疗前CD4+CD25+Tr细胞水平明显高于健康对照组(P0.05)。治疗后DC-CIK治疗组和DC-CIK疗法联合细胞因子组均明显低于健康对照组和治疗前(P0.05);DC-CIK疗法联合细胞因子组降低更为明显。随着培养时间的延长,CIK细胞中CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞的百分含量明显上升。治疗后,患者外周血T细胞亚群水平均升高,其中CD3+、CD4+、CD19+、CD16+CD56+细胞水平明显高于治疗前(P0.05)。结论老年乳腺癌患者处于免疫功能的抑制状态,接受DC-CIK细胞联合细胞因子的治疗后,CD4+CD25+Tr细胞水平降低,患者机体的免疫功能明显提升。     

沉默免疫负调控基因技术修饰的树突状细胞治疗原发性肝癌后T淋巴亚群分析

目的探究使用沉默免疫负调控基因(iAPA)细胞疗法对原发性肝癌术后患者T淋巴细胞亚群的变化。方法选取南京医科大学附属医院12例原发性肝癌手术切除后患者,男7例,女5例,年龄37~73岁。术前用血细胞分离机采集外周血单个核细胞悬液60 ml,贴壁分离培养树突状细胞(DC),iAPA因子(含抑制SOCS1的siRNA等)转染DC。第7天将成熟的DC回输至患者体内。患者治疗两个疗程后,采用流式细胞术检测治疗前后外周血T淋巴细胞亚群。结果患者一般情况普遍得到明显改善。外周血T淋巴细胞亚群检测结果表明:CD3~+T淋巴细胞高于治疗前,CD3~+CD4~+T+CD3~+CD8~+T淋巴细胞比例之和高于治疗前,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 iAPA-DC疗法可以改善原发性肝癌免疫抑制状态,提高T淋巴细胞抗肿瘤效应,是有效的生物细胞技术之一。     

DC、CIK白体回输对化疗后胃癌患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的影响

目的研究树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）自体回输对化疗后胃癌患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的影响。方法将92例胃癌患者随机分为观察组及对照组各46例,两组均行常规化疗,观察组于化疗结束后1个月实施DC、CIK自体回输治疗,治疗时间〉2个疗程。采集两组化疗前后及观察组DC和CIK自体回输之后4周的外周血,以流式细胞仪对外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞进行检测。结果两组化疗后CD;、CD4＋、CD4＋／cDf、NK水平均明显降低,观察组DC与CIK回输后CD^＋3、CD^＋4、CD^＋4／co^＋8、NK水平明显高于本组及对照组化疗后,P均〈0．05。结论化疗后胃癌患者DC、CIK白体回输后CD^＋3、CD4^＋4、CD^＋4／CD^＋8、NK水平升高,即细胞免疫功能得到改善。     

急性期骨关节型布鲁菌病患者外周血 CD4+T淋巴细胞亚群的表达水平及意义分析

目的 探讨急性期骨关节型布鲁菌病患者外周血CD4⁺T淋巴细胞亚群的表达水平及意义。方法 选取2014年1月至2021年5月期间本院收治的98例布鲁菌病患者为研究对象,分为骨关节型组(n=41)和非骨关节型组(n=57),并选取同期来本院体检的80例健康成人作为对照组。比较三组的外周血CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、Th1、Th2等T淋巴细胞的各亚群水平,计算CD4⁺/CD8⁺、Th1/Th2比值。采用Pearson相关分析来探讨骨关节型组患者WOMAC评分与外周血T淋巴细胞亚群水平的相关性。结果 骨关节型组外周血CD4⁺T淋巴细胞、Th1细胞的比例、CD4⁺/CD8⁺比值、Th1/Th2比值显著高于非骨关节型组,骨关节型组外周血CD4⁺T淋巴细胞、Th1细胞的比例、CD4⁺/CD8⁺比值、Th1/Th2比值显著高于对照组,非骨关节型组外周血...     

DC-CIK联合放化疗治疗非小细胞肺癌的效果及对外周血淋巴细胞亚群的影响

目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)和树突细胞(DC)联合放化疗对非小细胞肺癌(NSCLC)患者的效果及对外周血淋巴细胞亚群的影响。方法 66例NSCLC患者按随机数字表法分为联合治疗组和对照组各33例,联合治疗组给予DC-CIK联合放化疗治疗,对照组给予放化疗治疗。治疗前后检测患者外周血CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、白细胞介素(IL)-12、IL-4和干扰素(IFN)-γ的变化,治疗结束后对两组进行卡诺夫斯基健康状况量表(KPS)评分并评价两组疗效。结果治疗后联合治疗组IL-12、IL-4和IFN-γ水平低于治疗前,且低于对照组(P<0.05),治疗后对照组炎症因子水平与治疗前比较无统计学差异(P>0.05),治疗后对照组CD3~+CD4~+和CD3~+CD8~+的比例低于治疗前,且低于联合治疗组(P<0.05);联合治疗组有效率及KPS总提高率高于对照组(P<0.05)。结论 DC-CIK联合放化疗治疗NSCLC患者具有较好的临床疗效,降低患者体内的炎症因子水平,明显改善患者外周血淋巴细胞亚群水平。     

DC-CIK联合化疗治疗进展期胃癌45例的临床疗效评价

目的研究树突状细胞(dendritic cell,DC)共培养细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)联合化疗用于进展期胃癌术后治疗的临床疗效。方法选取90例进展期胃癌患者进行手术治疗,术后随机分为观察组(45例,DC-CIK生物治疗联合化疗)和对照组(45例,常规化疗)。观察两组患者治疗前后T细胞亚群、细胞因子的变化、临床疗效和不良反应等。结果观察组患者经过DC-CIK联合化疗方案治疗后,CD3+CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比率、NK细胞百分比和细胞因子IFN-γ均较治疗前、对照组治疗后显著升高(P0.05)。观察组1、2、3年累积复发率显著低于对照组(P0.05);观察组1年累积生存率明显高于对照组(P0.05)。DC-CIK回输过程中少量患者出现轻度发热,未见明显不良反应。结论进展期胃癌患者术后采用DC-CIK联合化疗治疗方法能够提高免疫细胞功能、减少肿瘤复发率,不良反应少,具有较强的临床推广价值。     

自体造血干细胞移植治疗狼疮性肾炎外周血淋巴细胞亚群的变化与临床疗效

目的:探讨自体造血干细胞移植(ASCT)治疗顽固性狼疮性肾炎(LN)外周血淋巴细胞亚群的变化及其与临床疗效的关系。方法:选取2011年6月至2014年6月间18例经免疫抑制治疗未缓解或反复复发的顽固性LN患者接受ASCT治疗。环磷酰胺(CTX)联合粒细胞集落刺激因子行干细胞动员,CTX联合抗胸腺球蛋白多克隆抗体预处理。观察ASCT治疗后外周血CD4~+T、CD8~+T、CD4~+/CD8~+比值、调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)和CD20~+B细胞的变化及其与临床疗效的关系。结果:ASCT治疗后系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)、尿蛋白和自身抗体阳性率显著下降,血清白蛋白和补体水平显著升高。采集后,患者CD4~+T细胞计数及CD8~+T细胞计数显著下降,回输后出现上升,回输后12个月、18个月CD4~+T细胞计数高于采集前,各时间点CD8~+T细胞计数均高于采集前;回输后CD4~+/CD8~+比值持续倒置,患者CD4~+CD25~+Treg计数显著增加。采集后,患者CD20~+B细胞计数显著下降,回输后快速增加。结论:ASCT治疗顽固性狼疮性肾炎有显著疗效,但淋巴细胞亚群失衡持续存在,CD4~+CD25~+Treg计数增加可能在治疗中发挥重要作用;6个月后CD20~+B细胞增加伴随自身抗体水平升高,表明抗B细胞治疗的必要性。     

老年肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞的临床及意义

目的探讨老年肺癌患者T淋巴细胞亚群和自然杀伤(NK)细胞水平及临床意义。方法该校附属医院80例老年肺癌患者作为观察组,回顾分析外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞检测结果,与另选的80例健康受检者(对照组)进行对比分析,并于术后20 d复查肺癌患者的外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞,对比缓解者与未缓解者的检查结果。结果外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞表达水平检测中,观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值与NK细胞水平较对照组明显降低(P0.05),CD8+表达水平明显高于对照组(P0.05)。观察组于术后20 d复查T细胞亚群和NK细胞,根据结果分为两组进行分析,发现缓解组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK表达均较化疗前明显上升,CD8+表达显著降低(P0.05)。而未缓解组各项指标化疗前后无明显变化(P0.05)。结论 NK细胞与外周血T淋巴亚群对诊断、评价肺癌的疗效、判断预后具有重要价值。     

强直性脊柱炎患者外周血Th1/Th2淋巴细胞类型

目的　通过检测强直性脊柱炎患者外周血中CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞分泌细胞因子的情况 ,探讨T淋巴细胞亚群与强直性脊柱炎发病的关系。方法　建立三色流式细胞分析法对强直性脊柱炎患者和健康志愿者外周血中淋巴细胞的胞内细胞因子 (IFNγ、IL 4)和表面抗原 (CD4、CD8)进行分析。同时采用夹心酶联免疫吸附法测定血清中IFNγ和IL 4的水平。结果　无论是CD4+ 还是CD8+ T淋巴细胞 ,分泌IFNγ的细胞群要比分泌IL 4的细胞群多 ;IL 4主要由Th2细胞产生 ,而Th1分泌的IFNγ要比Th2多 ;患者的Th1或Th2型细胞数与炎症活动指标呈负相关。与对照组相比 ,强直性脊柱炎患者外周血中Th1和Th2细胞在受刺激后并未增多。患者外周血中IFNγ水平明显升高 ,而IL 4水平无显著变化 ;IFNγ水平与炎症活动指标无明显相关性。结论　在强直性脊柱炎患者的外周血淋巴细胞中 ,以Th1型细胞为主。但Th1细胞在受刺激后分泌细胞因子的能力比Th2细胞低。     

脾栓塞对肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的 :研究部分脾栓塞治疗脾功能亢进对肝硬化患者T淋巴细胞亚群的影响。方法 :57例肝硬化并脾功能亢进患者 ,32例采用部分脾栓塞治疗 ,2 5例采用脾全切治疗 ,1 5例正常人作为对照 ,比较两组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果 :肝硬化患者外周血T淋巴细胞 (CD3+ )、T辅助 /诱导淋巴细胞亚群 (CD4+ )、T辅助淋巴细胞 /T抑制淋巴细胞亚群 (CD4+ /CD8+ )明显低于正常人 (P <0 .0 1 ) ;脾栓塞组治疗前后CD3+ 、CD4+ 、CD8+ 、CD4+ /CD8+ 无明显差异 (P >0 .0 5) ;脾全切组治疗后CD3+ 、CD4+ 、CD4+ /CD8+ 均较治疗前及部分脾栓塞组治疗后明显降低 (P <0 .0 1 )。结论 :肝硬化患者外周血CD3+ 、CD4+ 、CD4+ /CD8+ 降低 ,部分脾栓塞治疗脾功能亢进 ,对肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群无明显影响 ,显著优于脾全切治疗     

树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞在抗肿瘤生长免疫治疗中的应用

目的研究树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在抗肿瘤生长免疫治疗中的应用情况。方法采集26例恶性肿瘤患者外周血进行细胞培养与回输,随机分为观察组(PC、CIK回输)和对照组(CIK回输)。采用流式细胞仪检测细胞免疫表型、采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α细胞因子水平,记录患者不良反应与疗效。结果观察组CD3~+/CD8~+细胞、CD3~+/CD56~+细胞双阳性细胞比例显著高于对照组(P<0.05);CIK细胞的IFN-γ、IL-12、TNF-α细胞因子均显著低于DC-CIK细胞(P<0.05);观察组不良反应率显著低于对照组、治疗效果显著优于对照组(P<0.05)。结论肿瘤患者免疫结构受损,DC-CIK免疫功能优于单纯CIK;DC-CIK生成IFN-γ、IL-12、TNF-α细胞因子能力强、杀伤肿瘤细胞效果优;DC-CIK免疫治疗可有效缓解治疗中发热、发量减少、白细胞数量降低等副作用。     

乙肝患者自身CD3AK细胞抗病毒近期疗效观察

目的　观察抗CD3单克隆抗体激活的杀伤 (CD3AK)细胞过继回输治疗乙型肝炎的近期治疗效果。方法　从乙肝病人外周血获得单个核细胞 (PBMCs) ,用抗CD3单抗和IL_2体外诱导培养 ,7天后将培养的CD3AK细胞回输给病人 ;平均 1个疗程回输细胞数为 8～ 10× 10 9;检测T细胞亚群和HBVDNA含量变化情况。结果　CD3AK细胞过继回输治疗后 ,CD3 + 、CD4+ 、CD8+ 细胞均比治疗前明显增高 ;随着免疫治疗时间的延长 ,HBVDNA含量呈下降趋势。结论　CD3AK细胞过继免疫治疗可增强患者的细胞免疫功能 ,降低血清病毒含量 ,是一种安全有效的乙肝治疗方法。     

复元胶囊对老年气虚血瘀证免疫功能的调节作用

目的观察复元胶囊对老年气虚血瘀证患者外周血T淋巴细胞亚群和Th1类细胞因子IFN-γ，Th2类细胞因子IL-4的影响。方法45例老年气虚血瘀证患者随机分为治疗组（24例）和对照组（21例），另设健康非老年组（20例）。治疗组给予复元胶囊、对照组给予芪参胶囊治疗，疗程60d，检测用药前后T淋巴细胞亚群、血清IFN-γ、IL-4的水平，并与对照组进行比较。结果复元胶囊能明显提高老年气虚血瘀证患者CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋亚群及IFN-γ的水平，对CD4^＋／CD8^＋和IL-4的水平无明显影响。结论复元胶囊能增强老年气虚血瘀证患者的细胞免疫功能，改善处于劣势的Th1细胞的免疫应答。     

苏州地区血吸虫性肝病患者临床特征及外周血T淋巴细胞亚群分布

目的了解苏州地区晚期血吸虫病肝病患者临床特征及其外周血T淋巴细胞亚群分布。方法以2016年1月-2018年1月在苏州大学附属第一医院感染科住院治疗的32例晚期血吸虫病肝病患者为研究对象,并根据是否合并其他感染分组进行研究;同时随机选取20例老年健康体检者为对照。采集研究对象静脉血,采用流式细胞术检测外周血CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、调节性T(Treg)细胞和Th17细胞比例。结果苏州地区血吸虫性肝病患者多因门脉高压相关并发症入院,合并感染率较高(59.38%,19/32)。血吸虫性肝病患者外周血CD4^+T、CD8^+T淋巴细胞及Th17细胞百分比低于健康对照组(t=-5.111、-4.470和-2.749,P均<0.05);Treg细胞百分比高于健康对照组(t=5.628,P<0.05)。有感染组、无感染组及对照组患者的CD4^+T、CD8^+T淋巴细胞、Th17细胞及Treg细胞亚群分布差异均有统计学意义(F=15.837、16.594、9.290和27.866,P均<0.05)。结论苏州地区血吸虫性肝病患者入院多以门脉高压相关并发症多见,合并感染者较常见,且患者外周血T淋巴细胞亚群已处于失衡状态。     

慢性丙型肝炎患者CIK细胞的诱导培养及细胞亚群分析

目的 探讨慢性丙型肝炎患者细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞体外诱导培养过程中各细胞亚群的变化.方法 外周血单个核细胞(PBMC)在体外应用混合细胞因子(rhlFN-γ、IL-2和α-CD3)诱导培养,分别于0、7、10、13、15d时收集培养细胞,应用流式细胞技术检测各细胞亚群的频率.结果 动态分析发现培养过程中CD3+细胞频率迅速增加,至10d时到达平台期;在整个培养过程中,CD3+ CD8+T细胞和CD3+ CD56+细胞比例持续增加,表现出良好的扩增能力,且与患者基线ALT水平无关.结论 慢性丙型肝炎患者CIK细胞在体外培养的第10天,CD3+细胞呈现高扩增,且CD3+ CD8+T细胞和CD3+ CD56+细胞扩增状态良好,此时回输治疗可能效果较好.     

自体DC-CIK细胞联合替吉奥治疗中晚期肝癌的疗效

目的探讨中晚期肝癌患者行自体DC-CIK细胞联合替吉奥治疗的临床疗效及不良反应。方法采集48例中晚期原发性肝癌患者外周血单个核细胞,加入细胞因子定向诱导DC及CIK,8 d后将扩增的DC及CIK细胞以静脉回输的方式,对患者进行自体DC-CIK细胞输注治疗,同时联合口服替吉奥治疗。结果自体DC-CIK联合替吉奥治疗12 w后CR0例PR 10例,SD 22例,PD 16例,总有效率(RR)为20.8%,疾病控制率(DCR)为66.7%。患者免疫功能提高,生活质量改善。结论自体免疫细胞联合替吉奥治疗中晚期肝癌疗效尚可,副作用小,安全性好。     

Exosomes致敏的树突状细胞在中晚期大肠癌的临床应用研究

目的 评估Exosomes致敏的树突状细胞对中晚期大肠癌的临床疗效.方法 105例中晚期大肠癌患者随机分为免疫联合化疗组(n=65)和单纯化疗组(n=50),观察两组患者的外周血T淋巴细胞亚群含量、有效率、1年生存率、中位生存时间及毒副反应.结果 治疗前两组T淋巴细胞亚群含量比较无显著性差异,免疫联合化疗组治疗后与治疗前比较,CD3+、CD4+及CD8+明显增高(P＜0.05),且优于单纯化疔组(P＜0.05);联合治疗组与单纯化疗组有效率分别为56.9%和38.0%(P＜0.05),1年生存率分别为66.7%和52.1%(P＜0.05),中位生存时间分别为15.6个月和12.3个月(P＜0.05),两组毒副反应无统计学意义(P＞0.05).结论 Exosomes致敏的树突状细胞回输联合化疗对中晚期大肠癌有较好的疗效,可提高免疫功能,延长生存期.     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8~+T淋巴细胞亚群T淋巴细胞受体β链互补决定区3谱型研究

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD8+T淋巴细胞亚群T淋巴细胞受体(TCR)β链Ⅴ区(BV)中互补决定区3(CDR3)谱型特点.方法 采集8例CHB患者(ALT>2倍正常值上限)的抗凝血,分离外周血单个核细胞,磁珠分选CD8~+T淋巴细胞亚群,提取RNA并应用逆转录-聚合酶链反应扩增TCR BV中CDR3基因的24个家族,采用免疫指纹技术进行TCRBV各家族基因扫描和谱型分析.不同细胞亚群间数据比较采用配对t检验.结果 8例患者外周血淋巴细胞TCR BV家族CDR3谱型发生明显偏移,表现为单克隆性,寡克隆性及偏峰性克隆增生.8例患者CD8~+T淋巴细胞亚群发生TCR BV CDR3谱型偏移家族总个数高于去除CD8~+T淋巴细胞群的外周血单个核细胞[(10.6±4.7)个比(4.1±3.1)个,t=6.619,P<0.01)];比较单、寡克隆增生2种形式偏移的家族,CD8+T淋巴细胞亚群也高于代表CD4+T淋巴细胞的去除CD8~+T淋巴细胞群的外周血单个核细胞[(8.8±4.5)个比(3.9±2.8)个,t=5.706,P<0.01].对其中3例患者磁珠分选前后TCR BV谱型的比较发现,分选后CD8+T淋巴细胞亚群发生TCR BV谱型偏移家族数均高于分选前.结论 通过淋巴细胞亚群分选方式分析TCR BV家族CDR3谱型变化可以减少不同淋巴细胞亚群之间的峰型重叠干扰;应用这一方法分析外周血CD8~+T淋巴细胞亚群克隆增生程度有助于了解CHB患者炎症的发生机制.     

DC-CIK共培养在AL化疗后免疫治疗中的应用及其对NKG2D表达的影响

目的观察树突状细胞(DC)—细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养用于急性白血病(AL)化疗后免疫治疗的疗效,及其对自然杀伤(NK)细胞表面活化受体NKG2D表达的影响。方法 31例AL患者经诱导治疗骨髓达完全缓解后,给予DC-CIK共培养治疗。治疗前后检测外周血中T细胞亚群表达、血清IL-2、IL-12、TNF-α、IFN-γ水平及外周血中NKG2D的表达。结果所有患者治疗结束后骨髓均处于完全缓解状态;DC-CIK共培养治疗后,CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD5+6/CD1+6高于治疗前(P均<0.05);血清IL-2、IL-12、TNF-α、IFN-γ水平高于治疗前(P均<0.05);外周血单个核细胞中NKG2D阳性表达率为25.41%±8.47%,高于治疗前的8.07%±2.02%(P<0.05)。结论 DC-CIK共培养用于AL化疗后的免疫治疗效果较好,能更有效地清除微小残留病灶,提高外周血中NKG2D的表达,纠正AL细胞对自体NK细胞的免疫编辑作用。     

DC-CIK辅助治疗对老年晚期卵巢癌病人T细胞亚群和生活质量的影响

目的探讨DC-CIK辅助治疗对老年晚期卵巢癌病人T细胞亚群和生活质量的影响。方法选择本院收治的62例老年晚期卵巢癌病人作为研究对象,随机将其分为观察组和对照组,每组各31例,其中对照组给予TP化疗方案,观察组在对照组基础上联合DC-CIK辅助治疗方法,对比2组病人T细胞亚群和生活质量的情况。结果治疗后观察组CD3~+、CD3~+/CD4~+、CD4~+/CD8~+和NK细胞的水平显著高于对照组和治疗前,差异均有统计学意义(P0.05),而CD4~+/CD25~+和CD3~+/CD8~+水平显著低于对照组和治疗前,差异均有统计学意义(P0.05);观察组近期有效率为87.10%,显著优于对照组的54.84%,2组比较差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后有15例病人卡氏评分提高20分,显著优于对照组的3例;观察组不良反应中骨髓抑制(主要以Ⅲ度和Ⅳ度为主)及肝功能损害发生率显著低于对照组,2组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论老年晚期卵巢癌病人在术后应用DC-CIK细胞免疫辅助治疗不仅可提高其Th1类因子的抗肿瘤作用,有效提高T淋巴细胞的免疫学功能,而且还能显著改善病人生活质量,在临床应用过程中安全性较高,值得推广应用。