SDF—1α／CXCR4对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜修复的影响

目的观察基质细胞衍生因子1α（stromal derived factor-1,SDF-1α）与其受体CXCR4（CXC chemokiner receptor4）间的相互作用对血管损伤后内膜修复的影响。方法雄性SD大鼠分成对照组（C组,12只）、损伤组（S组）和AMD3100（octahydrochloride hydrate）干预组（A组,AMD3100200ng／kg,腹腔注射）,S组和A组大鼠均进行左侧颈总动脉球囊损伤术。S组和A组又分成术后即刻（So/Ao组,各12只）、术后1dS1d／A1d组,各12只）、术后4d（S4d／A4d组,各12只）、术后7d（S7d／A7d组,各12只）和术后1月（S1m／A1m组,各12只）,S组和A组大鼠均进行左侧颈总动脉球囊损伤术。所有大鼠均采血,应用流式细胞仪检测外周血CD34^＋CXCR4^＋细胞,应用ELISA法检测血浆SDF—1α水平,同时取左侧颈总动脉进行SDF-1α和CXCR4的mRNA和蛋白表达的检测,并应用免疫组化法检测损伤后血管内膜中CXCR4的表达。结果（1）在S组和A组中均发现损伤后外周血循环中CD34^＋CXCR4^＋细胞显著增加（P〈0．01）,以手术后即刻上升最明显,随后逐渐下降,在术后第7天恢复到基础水平,A0和A1d组的细胞数量多于So和S1d组。（2）ELISA法结果显示：S组和A组大鼠在颈总动脉球囊损伤术后,血浆内SDF—1α水平急剧上升,在术后1d达峰值（P〈0．01）,随后迅速下降,至术后7d已回复至术前水平（P〉0．05）。（3）在S组和A组中均可见到SDF—1α和CXCR4mRNA的表达,其中SDF-1α在损伤后即刻就有表达,在术后第7天表达减弱,CXCR4mRNA则在术后第4天开始出现,在术后1m时仍有表达,但是S组中CXCR4mRNA的表达强于A组;C组中无SDF—1α和CXCR4mRNA的表达。（4）在S组和A组中均可见到CXCR4蛋白的表达（67kD）,但是S组的蛋白表达是A组的1．05～1．36倍,C组中未见CXCR4蛋白的表达。（5）应用CXCR4抗体与新生内膜中的CXCR4受体结合,发现S组中颈总动脉损伤后第1天,损伤内膜处已有CXCR4抗体与相应受体结合的阳性反应,随后反应逐渐增强,而A组中直至第4天起才发现损伤内膜处有CXCR4抗体与相应受体结合的阳性反应。结论血管损伤后,损伤部位的SDF—1α表达增加,并吸引CD34^＋CXCR4^＋细胞定植于损伤处,参与损伤血管内膜的修复,应用CXCR4的受体拮抗剂AMD3100后可减少这一效应,说明SDF—1α／CXCR4之间的相互作用在血管损伤后修复、新生内膜的形成中具有重要的作用。     

弱激光促进糖尿病大鼠皮肤创伤愈合及对PI3K/Akt-HIF-1α信号系统的影响

目的分析弱激光促进糖尿病(DM)大鼠皮肤创伤愈合及对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)-缺氧诱导因子(HIF)-1α信号系统的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:正常组、非DM皮肤创伤组、DM皮肤创伤组、弱激光低剂量组和弱激光高剂量组,后3组为DM大鼠,20只/组。造模第2天给药,正常组、非DM皮肤创伤组和DM皮肤创伤组不给予任何干预,弱激光低和高剂量组分别接受1.2 g·cm~(-2)·6 min~(-1)和3.6 g·cm~(-2)·6 min~(-1)的弱激光照射,连续照射7 d。结果随着时间的延长,各组均有不同程度愈合,与非DM皮肤创伤组比,DM皮肤创伤组愈合最慢(P0.05);与DM皮肤创伤组比,弱激光低和高剂量组愈合明显(P0.05),各组体重和随机血糖变化差异无统计学意义(P0.05)。对照组皮肤肌细胞排列整齐,非DM皮肤创伤组、DM皮肤创伤组和弱激光低剂量组均存在不同程度的横纹肌坏死、肌纤维断裂和明显的嗜中性粒细胞浸润,其中DM皮肤创伤组最严重,非DM皮肤创伤组和弱激光低剂量组,弱激光高剂量组恢复较好。对照组和DM皮肤创伤组PI3K、Akt和HIF-1α均呈弱表达,非DM皮肤创伤组PI3K、Akt和HIF-1α均呈强表达,与DM皮肤创伤组比,弱激光低和高剂量组的PI3K、Akt和HIF-1α表达均较强(P0.05)。结论 PI3K/Akt-HIF-1α信号系统激活有利于DM大鼠皮肤创伤的愈合,DM可抑制PI3K/Akt-HIF-1α信号,弱激光可通过激活PI3K/Akt-HIF-1α信号促进DM大鼠皮肤创伤愈合。     

血糖波动对糖尿病大鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察糖尿病(DM)大鼠在血糖波动状态下海马神经元凋亡及Caspase-3的异常表达,探讨血糖波动对大鼠海马神经元凋亡的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)诱导,间断短效胰岛素应用制备DM血糖波动模型。12 w后,用TUNEL法检测海马神经元的凋亡,用免疫组化法检测海马神经元凋亡蛋白Caspase-3的表达。结果 DM组大鼠海马可见少数阳性凋亡细胞表达,与对照组(NC组)相比明显增多(P<0.01);血糖波动组(RDM组)凋亡阳性细胞较DM组增多更加明显(P<0.01)。DM组大鼠海马神经元Caspase-3表达较NC组明显增强(P<0.05),RDM组Caspase-3的表达较DM组进一步增强(P<0.05)。结论 DM大鼠血糖波动可明显加速海马神经元的凋亡,Caspase-3介导的细胞凋亡机制可能参与DM大鼠海马神经元的损伤。     

紫草素通过上调C-X-C基序趋化因子受体4促进细胞自噬加快糖尿病创面愈合的机制研究

目的探讨紫草素是否通过上调C-X-C基序趋化因子受体4(CXCR4)的表达调控细胞自噬促进糖尿病大鼠创面愈合。方法将24只Sprague-Dawley(SD)大鼠按照随机数字表法分成4组:对照组、糖尿病组、糖尿病+紫草素组和糖尿病+紫草素+干扰CXCR4的短发卡RNA(sh-CXCR4)组, 每组6只。通过腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型, 利用直径为1 cm的皮肤打孔器在大鼠背部建立溃疡模型。分别于创伤后第0、7、14和21天计算创面愈合率。于创伤后第21天, 采集皮肤组织, 进行HE染色和Masson染色分析创面病理变化, 采用CD31免疫组织化学法分析创面微血管密度以及Western blotting法检测创面组织CXCR4和细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和可溶性p62蛋白的相对表达量, 透射电镜观察自噬小体。组间比较采用单因素方差分析。结果与对照组相比, 糖尿病组大鼠创面愈合率(第21天分别为72.44%±6.21%和93.71%±6.76%)、创面组织新生血管和胶原沉积、微血管密度以及创面组织中CXCR4和细胞自噬相关蛋白LC3...     

温阳逐瘀汤对肾阳虚脑缺血损伤大鼠SDF-1、CXCR4表达的影响

目的 观察温阳逐瘀汤对肾阳虚脑缺血损伤大鼠脑组织基质细胞衍生因子(SDF)-1及其受体CXC趋化因子受体(CXCR)4表达的影响，探讨温阳逐瘀汤防治脑缺血损伤可能的作用机制。方法 选取192只健康雄性SD大鼠先分为空白组(n=48)和肾阳虚模型组(n=144)。肾阳虚模型组肌注氢化可的松注射液21 d,采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清中的肾阳虚证相关特异性指标环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量。将造模成功后的肾阳虚大鼠分为假手术组、模型组、温阳逐瘀汤组。空白组、假手术组、模型组灌胃等体积蒸馏水；温阳逐瘀汤组行脑缺血损伤造模术，灌胃温阳逐瘀汤。分别于灌胃3、7、14、21 d取材，采用苏木素-伊红(HE)染色法、Western印迹法和Real-Time PCR法检测脑组织SDF-1、CXCR4的mRNA及蛋白表达水平。结果 同一时间点，与空白组相比，假手术组SDF-1、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组相比，模型组、温阳逐瘀汤组SDF-1、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组相比，温...     

胸腺素β4调节血管内皮生长因子、层粘连蛋白5表达，促进糖尿病大鼠皮肤损伤愈合

目的研究胸腺素β1（Tβ1）调节血管内皮生长因子（VEGF）和层粘连蛋白5（LN-5）的表达,探讨其促进糖尿病大鼠皮肤损伤愈合的机制。方法60只雄性SD大鼠建立糖尿病大鼠全层皮肤损伤模型（D=8Mm）,随机分为糖尿病对照（DM）组和Tβ1治疗组[又分为低（L-Tβ4）、中（M—Tβ4）、高（H—Tβ4）3个剂量组]。计算皮肤愈合率和表皮迁移率。一侧伤口进行HE染色,弹力纤维、胶原纤维、网状纤维三联染色和VEGF、LN-5免疫组化染色;另一侧伤口进行LN-5ELISA测定。结果M—Tβ4和H—Tβ4组各时间点伤口愈合率均较DM组高（P〈0．05或P〈0．01）;损伤后10dM—Tβ4和H-Tβ4组的表皮迁移率高于DM组（P〈0．01）。Tβ4治疗组肉芽组织中VEGF表达较多、阳性血管较丰富,LN-5在表皮基底细胞和基底膜早期表达;损伤后2d和10dTβ4治疗组LN-5含量较高,损伤后4d较低。结论Tβ4可促进糖尿病大鼠皮肤损伤愈合,其机制可能与调节VEGF和LN-5表达有关。     

整合素连接激酶在大鼠烧伤创面中的表达及对创面愈合的影响

目的探讨整合素连接激酶(ILK)在大鼠烧伤创面中的表达及对创面愈合的影响。方法建立大鼠烧伤模型,免疫组化法测定大鼠烧伤创面愈合过程ILK的表达情况,将烧伤大鼠分为ILK转染组、阴性对照组和空白对照组,ILK转染组大鼠创面注射ILK过表达慢病毒,阴性对照组大鼠创面注射空质粒慢病毒,空白对照组大鼠创面注射等量生理盐水;免疫组化法测定各组大鼠烧伤创面愈合过程ILK的表达情况,观察各组大鼠创面愈合时间和愈合率。结果烧伤组烧伤后1 w和2 w后烧伤创面ILK的光密度值高于对照组(P0.05),烧伤后3 w烧伤创面ILK光密度值和对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。ILK转染创面后,荧光显微镜下见绿色荧光蛋白主要在皮肤基底层表达,部分毛囊中也可见绿色荧光蛋白表达。烧伤后1 w和2 w,ILK转染组创面组织ILK光密度值高于空白对照组和阴性对照组(P0.05);烧伤后3 w,三组创面组织ILK光密度值比较差异无统计学意义(P0.05)。烧伤后1 w和2 w,ILK转染组创面愈合率高于空白对照组和阴性对照组(P0.05);烧伤后3 w,三组创面愈合率比较差异无统计学意义(P0.05);ILK转染组创面愈合时间短于空白对照组和阴性对照组(P0.05)。结论大鼠烧伤创面中ILK表达量增加,大鼠烧伤创面转染ILK过表达慢病毒后创面中ILK表达量增加,并促进烧伤创面的愈合。     

硫酸锌对糖尿病皮肤损伤的修复作用

目的研究硫酸锌对糖尿病伴有皮肤创面愈合的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备糖尿病大鼠模型(48只),成模1个月后,进行背部9 cm2锐器皮肤损伤。尔后分2组:1组在伤愈过程中局部涂抹硫酸锌,另1组局部涂抹生理盐水自然愈合。以正常大鼠皮肤损伤为对照组(48只)。在创面愈合的不同时间点,采用创面愈合百分率计算大鼠皮肤创面愈合速度;通过免疫组织化学染色、实时定量PCR检测动态观察糖尿病创面愈合的过程及其组织学变化特征。结果第15天时,糖尿病硫酸锌组较盐水组愈合面积更大,创面组织微血管密度(MVD)相比更大(均P0.05);增殖性细胞核抗原(PCNA)阳性细胞在糖尿病硫酸锌组较盐水组表达增高(P0.05);糖尿病硫酸锌组的基质金属蛋白酶(MMP)-2在第5天和第10天时间点减少,且低于盐水组(P0.05)。糖尿病硫酸锌组的基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1 mRNA含量在第5天和第10天时约为盐水组的2倍,15 d时下降低于盐水组(P0.05)。结论硫酸锌对于糖尿病大鼠皮肤创面具有良好的促进愈合作用,其机制与创面MMPs表达和基质重建有关。     

丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸c-fos表达的影响

目的 观察2型糖尿病(T2DM)大鼠睾丸原癌基因c-fos表达的变化及丝胶的保护作用.方法 30只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组.链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型,以血糖≥16.7 mmol/L作为成模标准.待模型成功建立后,模型组大鼠不做任何处理;丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4 g·kg-1·d-1)35 d.ELISA方法检测大鼠血清睾酮水平,SP免疫组化法和RT-PCR法分别检测睾丸c-fos蛋白和mRNA的表达.结果 T2DM模型大鼠血清睾酮水平、睾丸c-fos蛋白和mRNA的表达均明显低于正常对照组大鼠(P＜0.01);丝胶治疗组大鼠血清睾酮水平、睾丸c -fos蛋白和mRNA的表达明显高于模型大鼠(P＜0.01,P＜0.05).结论 丝胶可通过上调睾丸c-fos的表达,促进精原细胞向精母细胞转化,发挥对T2DM生殖功能损伤的保护作用.     

糖尿病大鼠肾组织中AKT的表达及意义

目的 观察Akt1和Akt2在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其是否参与糖尿病肾病(DN)发病过程.方法 链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病(DM),分为2、4、8、12、16w和24w组,每一时点均设相应的正常对照组.测定各组血糖、24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、肾脏指数.HE和PAS染色光镜观察肾脏病理改变.免疫组化方法检测肾皮质Akt1、Akt2、TGF-β1、α-SMA和FN的表达,Western印迹和RT-PCR法检测Akt1、Akt2蛋白及mRNA表达水平.结果 DM各组大鼠的血糖、24h尿蛋白、血肌酐、肾脏指数均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),免疫组化显示DM各组TGF-β1、α-SMA和FN阳性染色较正常组明显增多(P＜0.01),以12 w增多最为明显,分别为19.67±2.73、9.50±3.45、22.17±2.79,免疫组化、Western印迹及RT-PCR显示DM各组Akt1及Akt2蛋白和mRNA表达较正常组明显增多(P＜0.01).免疫组化显示Akt1与TGF-β1、FN蛋白表达水平呈显著正相关(r＝0.694,r =0.532,P＜0.01),Akt2与rGF-β1、FN蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.789,r=0.743,P＜0.01).结论 Akt1、Akt2蛋白在DM大鼠肾组织过度表达,提示PI3 K/Akt信号通路可能参与了DN的发病机制.     

溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜CINC-1及其受体CXCR2的表达及意义

目的:探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠黏膜中性粒细胞趋化因子-1(CINC-1)及其受体CXCR2的表达及意义.方法:♂SD大鼠36只完全随机分为正常组、模型1组、模型2组, 共3组, 每组12只. 用2, 4,6三硝基苯璜酸100 mg/kg灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型, 7 d后处死模型1组动物, 14 d后处死模型2组动物. 运用RT-PCR法、免疫组化染色法分别检测各组大鼠CINC-1及CXCR2mRNA及其蛋白的表达.结果:CXCR2主要表达在中性粒细胞及肠上皮细胞膜表面. UC活动期CINC-1及CXCR2mRNA及其蛋白表达明显呈上升趋势, 与炎症相关. 与正常组相比, 模型1组、2组CINC-1mRNA及蛋白表达有显著差异(1.77±0.52,1.82±0.24 vs 0.29±0.10; 0.30±0.01, 0.31±0.04 vs 0.18±0.02, 均P<0.05); CXCR2 mRNA及蛋白表达也有显著差异(1.66±0.10, 2.49±0.29 vs 0.55±0.13; 0.20±0.03, 0.23±0.02 vs0.16±0.01, 均P<0.05).结论:CINC-1及其受体CXCR2表达水平与UC炎症正相关, CINC-1可能通过CXCR2介导中性粒细胞浸润, 造成结肠炎症及组织损伤.     

淫羊藿苷对阿尔茨海默病大鼠模型COX-2表达的影响

目的观察淫羊藿苷(ICA)对脂多糖(LPS)诱导的阿尔茨海默病(AD)炎症模型大鼠海马内环氧酶-2(COX2)表达的影响。方法将36只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、ICA低剂量组[ICA30 mg/(kg·d)]、ICA高剂量组[ICA120 mg/(kg·d)],侧脑室注射脂多糖建立AD炎症模型(对照组注射生理盐水),连续灌胃2周,每天1次,断头取脑,免疫组化法(SP法)检测大鼠海马内COX-2蛋白的表达,用图像分析系统对染色结果进行分析;通过SYBR GREENⅠ荧光定量PCR检测大鼠海马内COX-2m RNA的表达情况。结果与模型组相比,高剂量组COX-2蛋白及m RNA的表达明显降低(P0.01),但仍明显高于对照组(P0.01),低剂量组COX-2蛋白及m RNA的表达与模型组比较无统计学意义(P0.05)。结论高剂量淫羊藿苷可降低AD炎症模型大鼠海马内COX-2的表达,可抑制炎症反应对神经细胞的损伤。     

STZ诱导的2型糖尿病大鼠心肌组织TRPC7的表达上调

目的:观察2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织损伤过程中,TRPC7的表达变化。方法:以高脂饲料喂养并辅以腹腔注射小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)来建立T2DM大鼠模型,采用蛋白印迹及免疫组化染色方法检测TRPC7在T2DM大鼠心肌组织的表达变化。结果:1T2DM大鼠造模成功且T2DM大鼠心肌组织发生损伤性变化:与正常组大鼠相比,T2DM组大鼠血糖明显升高且体重显著降低(P0.05);T2DM组大鼠心脏体积与质量显著减小(P0.05);T2DM组大鼠心脏质量指数(heart weight index,HWI)明显高于正常组(P0.05);2在T2DM大鼠心肌损伤过程中TRPC7表达上调:TRPC7在正常及T2DM大鼠心肌组织中均有表达,但与正常大鼠相比,T2DM大鼠心肌组织TRPC7蛋白的表达显著增高(P0.05)。结论:首次证实在损伤的T2DM大鼠心肌组织中,TRPC7的表达显著上调。     

CXCR4基因修饰骨髓间充质干细胞移植对损伤血管内皮化的影响

目的:探讨基质细胞衍生因子受体4(CXCR4)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠颈动脉球囊成形术后内皮修复的影响。方法:运用密度梯度离心法、贴壁培养并扩增BMSCs,用携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒转染BMSCs,获得CXCR4修饰的BMSCs(EGFP-CXCR4-BMSCs)。建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,随机分成PBS移植对照组(对照组)、空病毒转染BMSCs组(EGFP-BMSCs组)及CXCR4转染BMSCs移植组(CXCR4-BMSCs组)。MTT分别检测慢病毒转染细胞后第1、2、3、4、5d的细胞活力,计算细胞增殖率;细胞移植后14d取血管组织行免疫荧光检测GFP表达,28d行免疫组织化学染色检测血管内膜血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达;苏木精-伊红(HE)染色检测血管形态学变化;Western blot检测血管局部内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果:BMSCs转染EGFP空病毒载体及CXCR4后,与对照组相比,各时间点细胞增殖率无统计学差异。CXCR4-BMSCs组损伤血管处有较多的阳性GFP表达。CXCR4-BMSCs与EGFP-BMSCs组血管新生内膜面积、新生内膜/中膜面积均较对照组减轻(均P0.05),CXCR4-BMSCs组尤为明显(P0.05)。CXCR4-BMSCs与EGFP-BMSCs组血管内膜较对照组相比均有CD31及VEGF的表达(均P0.05),损伤血管eNOS表达量较对照组均明显增高(均P0.05),以CXCR4-BMSCs组较为明显。结论:CXCR4基因修饰不影响BMSCs的增殖,CXCR4-BMSCs较单纯EGFP-BMSCs移植更能促进动脉损伤后早期再内皮化,降低血管成形术后再狭窄。     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏水通道蛋白2表达的影响及对肾脏的保护作用

目的观察黄芪多糖(APS)对糖尿病(DM)大鼠尿量、肾脏水通道蛋白-2(AQP-2)表达和肾脏超微结构的影响及其治疗DM的机制。方法腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备DM大鼠模型,实验分4组:正常组、DM组、APS低和高剂量组,实验持续6w。采用免疫荧光检测各组大鼠肾脏AQP-2的表达,电镜观察各组大鼠肾脏超微结构,简易代谢笼法测各组大鼠24h尿量,并测定大鼠肾重/体重、尿微量白蛋白(UAER)排泄率及内生肌酐清除率(Ccr)等。结果 DM组大鼠肾脏髓质AQP-2表达较正常组明显增多,APS可抑制DM大鼠肾脏AQP-2表达。DM组大鼠肾脏超微结构呈明显退行性变,APS干预可改善其超微结构。DM组大鼠尿量明显高于正常组(P0.01),APS可增加DM大鼠尿量(P0.01)。APS低剂量组和高剂量组大鼠UAER、Ccr、肾重/体重低于DM组(P0.01)。结论 APS下调肾髓质AQP-2过度表达,缓解DM水钠潴留,保护肾脏。     

灵芝对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制

目的 探讨灵芝(GL)对链脲佐菌素诱导的糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及其机制.方法将30只雄性SD大鼠随机均分为对照组、DM组及GL组.腹腔注射链脲佐菌素诱导大鼠造成DM模型,治疗组用GL治疗性灌胃.8周后,用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清高敏C反应蛋白(hs-XRP),免疫组化法检测肾皮质单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)蛋白表达.结果 DM组血清hs-CRP、肾小球MCP-1蛋白表达较对照组升高,GL组较DM组减少,病理变化明显好转(P均<0.01).结论 GL可能通过降低hs-CRP、MCP-1表达而减轻炎症反应,起到保护DM大鼠肾脏的作用.     

芦荟凝胶促进糖尿病创面溃疡愈合的机制

目的在分子水平探讨芦荟凝胶促进糖尿病创面溃疡愈合的机制。方法实验分为3组,A组为正常组,B组和C组应用链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型并建立全皮伤口模型,B组给予生理盐水处理创面,C组给予芦荟凝胶干预,4次/d,通过胶原纤维-Masson三色法和免疫组织化学法评估伤口形成后3、7、14 d皮肤组织的组织病理学改变,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠皮肤基质金属蛋白酶(MMPs)-9和金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)-1 mRNA的表达情况。结果 B组大鼠伤口愈合明显迟缓。芦荟凝胶干预可加速糖尿病大鼠大鼠伤口愈合。伤口愈合过程中,B组MMP-9 mRNA水平持续高于A组(P0.01),而TIMP-1 mRNA水平持续低高于A组(P0.01);给予芦荟凝胶干预的C组MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA水平仅在伤口形成第3天与A组相比具有统计学差异,其余时间点均与A组相近。芦荟凝胶干预可降低大鼠伤口组织MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值。结论糖尿病大鼠皮肤伤口愈合速度明显减慢,芦荟凝胶干预可加速糖尿病大鼠伤口愈合,芦荟凝胶的这种作用可能是通过调控MMP-9/和TIMP-l水平实现的。     

通络玉液汤对2型糖尿病心肌病大鼠心功能及心肌纤维化的影响

目的探讨通络玉液汤对2型糖尿病(T2DM)心肌病大鼠心肌损伤的治疗作用及其机制。方法采用高糖高脂饮食+小剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法复制T2DM心肌病大鼠模型。将48只大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病心肌病组、苯那普利阳性药物对照组、通络玉液汤组。分别处理8 w后,测定大鼠空腹血糖(FBG)水平,超声多普勒检测心功能,Masson染色测定心肌胶原含量,免疫组化、实时定量RT-PCR法分别观测心肌转化生长因子(TGF)-β1蛋白、基因的表达。结果与糖尿病心肌病组比较,各治疗组左心室收缩末期内径显著减小(P0.05)、射血分数及短轴缩短率显著升高(P0.01),FBG水平显著下降(P0.01),TGF-β1基因、蛋白的表达显著减弱(P0.01,P0.05),心肌间质纤维化程度显著减轻,以通络玉液汤组治疗效果最为显著。结论通络玉液汤可降低血糖,并通过降低TGF-β1表达来减轻糖尿病心肌病心肌损伤,改善心功能。     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

梓醇对糖尿病大鼠胰岛细胞Insulin表达的影响

目的观察梓醇对糖尿病大鼠胰岛细胞Insulin表达的影响。方法选取雄性Wistar大鼠,8周龄,根据随机数字表法分为正常组(10只)与实验组(90只)。实验组饲养8周高糖高脂饮食后经腹腔注射链脲佐菌素15 mg/kg,以空腹血糖≥16.7 mmol/L作为2型糖尿病成模标准,将符合2型糖尿病成模标准的60只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组、梓醇高剂量组。正常组和模型组灌胃蒸馏水5mL/(kg·d);二甲双胍组灌胃二甲双胍90 mg/(kg·d);梓醇低、中、高剂量组分别灌胃梓醇2.5mg/(kg·d)、5mg/(kg·d)、10mg/(kg·d)。分别干预12周后,经免疫组化检测胰岛细胞Insulin的表达水平,Western Blot检测腺苷酸活化蛋白激酶-α1(AMPK-α1)蛋白表达。结果免疫组化染色显示,各组大鼠胰岛细胞Insulin均有表达,与模型组相比,二甲双胍组、梓醇各剂量组大鼠胰岛细胞Insulin表达增多,其中梓醇高剂量组、梓醇低剂量组Insulin表达与二甲双胍组比较差异有统计学意义(P0.01)。Western Blot检测结果显示,与模型组比较,二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组、梓醇高剂量组胰岛细胞AMPK-α1蛋白表达相对增多(P0.01),其中梓醇高剂量组AMPK-α1蛋白表达较二甲双胍组、梓醇低剂量组、梓醇中剂量组表达增多,差异有统计学意义(P0.01)。结论梓醇可促进糖尿病大鼠Insulin分泌,其机制可能是通过上调AMPK-α1蛋白表达发挥作用。