地塞米松对支气管哮喘急性发作患者外周血T淋巴细胞亚群自噬的影响

目的 本文拟研究地塞米松对哮喘急性发作患者外周血T淋巴细胞亚群自噬的影响.方法 分离哮喘组及健康者外周血T淋巴细胞亚群(CD+4 T,CD+8 T和 CD+4CD+25 T 细胞),分别与地塞米松(10-5 mol·L-1)共培养.首先以电子显微镜及荧光显微镜观察培养后细胞的自噬形态学改变;然后丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色后,以流式细胞术检测上述细胞的自噬水平及CD+4CD+25 T细胞的Foxp3表达.结果 ①镜下可观察到与地塞米松共培养后细胞的典型自噬形态学改变;②地塞米松可以上调哮喘组外周血CD+4 T和 CD+4CD+25 T 细胞的自噬率(P<0.05),自噬水平的升高均呈时间依赖性 (P<0.05);③哮喘组CD+4CD+25 T细胞的Foxp3表达显著低于健康对照组(P<0.05),但地塞米松预处理对Foxp3的表达无影响(P>0.05).结论 地塞米松诱导哮喘急性发作患者外周血T淋巴细胞亚群自噬水平的增高可能是糖皮质激素治疗哮喘的作用机制之一.     

肺癌患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的检测肺癌患者外周血CD4 CD2 5调节性T细胞的分布并探讨相关机制。方法流式细胞仪分析46例肺癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞占CD4 T淋巴细胞的比例;并用ELISA方法检测同标本血中转化生长因子-1(TGF-β1)的浓度。结果46例肺癌患者外周血中CD4 CD2 5调节性T细胞占CD4 T淋巴细胞的比例为(19.1±2.3)%,与对照组(4.1±0.6)%比较差异有显著性(P<0.05)。22例鳞癌、19例腺癌、5例小细胞癌患者外周血中CD4 CD2 5调节性T细胞比例分别为(20.1±0.9)%、(18.8±0.4)%、(19.2±0.4)%,各组间比较差异无显著性(P>0.05);均显著高于对照组(4.1±0.6)%,P<0.05;20例Ⅲ、15例Ⅳ晚期肺癌患者外周血中CD4 CD2 5调节性T细胞比例为(21.4±2.1)%、(20.1±1.3%),均显著高于11例Ⅱ期患者(10.6±1.5)%,P均<0.05。肺癌组外周血清中TGF-β1的水平显著高于对照组,且随着TGF-β1浓度的增加,CD4 CD2 5调节性T细胞比例逐渐增高,两者呈正相关(r=0.0615,P<0.05)。结论肺癌患者外周血中有CD4 CD25 调节性T细胞比例增高,且与分期有关。     

CD28/CTLA-4:B7在特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞中的表达及意义

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4(CD152)、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)的表达及意义。方法:采用免疫荧光标记和流式细胞术检测41例ITP患者和40例健康对照者外周血CD3+CD28+细胞、CD3+CD152+细胞、CD80+CD19+细胞和CD86+CD19+细胞分别占淋巴细胞的比例及血小板表面相关抗体水平,进行2组对比、分析。结果:与正常对照组相比,急性ITP患者外周血CD3+CD28+细胞和CD3+CD152+细胞差异无统计学意义(P0.05),CD80+CD19+细胞增多(P0.05),CD86+CD19+细胞显著增多(P0.01),慢性ITP患者CD86+CD19+细胞增多(P0.05);急性ITP患者外周血CD86+CD19+细胞较慢性ITP患者增多(P0.05);与正常对照组相比,急性ITP患者PAIg's、PAIgG和PAIgM水平显著增高,慢性ITP患者PAIgG水平增高;CD80、CD86表达与PAIgG水平之间存在显著的相关性(均P0.01)。结论:ITP患者外周血B淋巴细胞上CD86和CD80表达均异常,可能与其发病相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞穿孔素表达及糖皮质激素对穿孔素的影响

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞穿孔素(PF)表达与分布,PF水平与疾病活动的相关性,探讨PF在SLE发病机制中的作用,观察糖皮质激素治疗对PF表达的影响.方法 SLE活动期患者16例,健康对照者12名.用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞PF、CD3、CD4或CD8表达,用直线相关分析PF水平与SLE疾病活动性评分(SLEDAI)的相关性;比较糖皮质激素治疗前后PF水平变化.结果 与健康对照组比较,SLE活动期患者组外周血PF+淋巴细胞的百分率显著增高(P<0.01),PF的平均荧光强度(PFMFI)增高(P<0.01),PF+CD8+CD3+淋巴细胞的百分率明显增加(P<0.01),差异均有统计学意义.SLE活动期患者外周血PP淋巴细胞百分率与SLEDAI呈正相关(r=0.673).经过短期大剂量糖皮质激素治疗,SLE活动期患者外周血淋巴细胞PF+细胞百分率和PFMFI都显著下降(P<0.05),差异有统计学意义.结论 SLE活动期患者PF高表达,主要分布于CD8+CD3+细胞;PF水平与SLE活动程度呈正相关;短期糖皮质激素治疗能够减少患者体内PF表达.     

强直性脊柱炎CD4+T细胞白细胞介素-17核孤儿受体的表达及意义

目的 探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+T细胞白细胞介素(IL)-17蛋白水平和IL-17、核孤儿受体(RORγt)mRNA水平及意义.方法 取AS患者和健康人外周血单个核细胞(PBMCs),免疫磁珠分选CD4+T细胞,加佛波脂(PMA)腐子霉素(Ion)作用,经固定/透膜处理进行细胞内染色,流式细胞术(FCM)检测CD4+T细胞IL-17蛋白水平;用或不用非特异性刺激剂[抗CD3单抗(A-CD3)、抗CD28单抗(A-CD28)]刺激CIM+T细胞12 h和24 h后,应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-17、RORγt mRNA水平.组间比较采用方差分析,相关性分析采用Pearson相关分析.结果 CD4+T细胞IL-17蛋白水平AS活动组(1.26±0.44)较稳定组(0.56±0.21)和对照组(0.45±0.13)显著增高(P<0.01),同时IL-17、RORγt mRNA水平活动组较稳定组和对照组显著增高(P<0.01). 用A-CD3/A-CD28刺激后,AS患者CD4+T细胞IL-17、RORγtmRNA水平显著高于未刺激组(P<0.05),12 h刺激组又高于24 h刺激组(P<0.01).结论 AS患者外周血CD4+T细胞IL-17、RORγt表达水平显著增高,IL-17、RORγt表达水平可能与AS病情活动相关.     

老年人淋巴细胞亚群和脂筏GM1与胆固醇水平的相关性

目的研究老年人淋巴细胞亚群、脂筏标志分子单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)和细胞活化与血清胆固醇水平的相关性,探讨高胆固醇水平调节淋巴细胞功能的分子机制以及与动脉粥样硬化的关系。方法样本采用在时间上随机抽样的方法选取2012年8月至2014年9月在天津医科大学总医院体检者60例,年龄60~80岁,其中女30例,男30例。采用抗体染色、流式细胞仪检测外周血中总B淋巴细胞(CD19+)、记忆B淋巴细胞(CD19+CD27+)、初始B淋巴细胞(CD19+CD27-)、总T淋巴细胞(CD3+)、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞亚群比例以及神经节苷脂GM1水平;采用细胞内染色方法检测活化细胞内磷酸化Stat3的水平,并与胆固醇水平和动脉粥样硬化的发生进行相关性分析。结果 CD19+B淋巴细胞比例与低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平、CD19+CD27+B淋巴细胞比例与极低密度脂蛋白胆固醇(VLDLC)水平呈显著正相关(P0.05);CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞比例与胆固醇水平无相关性(P0.05);记忆B淋巴细胞GM1水平与总胆固醇(TC)和VLDLC、CD3+CD8+T淋巴细胞GM1水平与高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)均呈显著正相关(P0.05)。与正常胆固醇组比较,在BCR抗体刺激后,高胆固醇组记忆B淋巴细胞中磷酸化Stat3水平显著升高(P0.01)。结论高胆固醇水平是老年人动脉粥样硬化发生的重要危险因素,同时高胆固醇水平与B淋巴细胞比例、脂筏GM1水平、Stat3的活化以及CD3+CD8+T淋巴细胞GM1水平的相关性,提示其可能调节淋巴细胞增殖、活化、炎症因子的产生,从而促进动脉粥样硬化的发生和发展。     

老年维持性血液透析终末期肾病患者外周血免疫细胞水平及分型的变化

目的探讨血液透析治疗的终末期肾病老年患者外周血免疫细胞水平及分型的变化。方法经血液透析治疗的终末期肾病的患者98例根据透析月份分为观察组(透析龄≥12个月)61例和对照组(透析龄<12个月)37例,比较两组外周血免疫细胞及其亚型比例的水平、外周血免疫因子白细胞介素(IL)-8、营养水平;分析观察组CD4~+/CD8~+T细胞比值与IL-8、血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)相关性。结果两组性别、年龄、平均体质指数(BMI)和合并糖尿病和高血脂的比例差异无统计学意义(P>0.05);两组T淋巴细胞亚型CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞比例和CD4~+/CD8~+T细胞比值差异有统计学意义(P<0.01);观察组血清IL-8水平较对照组显著升高(P<0.01);观察组平均Hb、Alb水平显著低于对照组(P<0.01)。观察组CD4~+/CD8~+T细胞比值与IL-8水平呈负相关(P<0.05),与Hb、Alb呈正相关(P<0.05)。结论维持性血液透析的老年患者外周血免疫细胞紊乱,CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和CD4~+/CD8~+T细胞比值减少,随着患者透析龄的增加,减少程度逐渐增加,且患者免疫抑制状态和营养水平密切相关。     

初发过敏性紫癜患儿外周血CD4+CD28-和CD8+CD28-T细胞水平变化及意义

目的 观察初发过敏性紫癜(HSP)患儿外周血T淋巴细胞亚群(CD4+ CD28-T细胞和CD8+ CD28-T细胞)的表达变化,并探讨其临床意义.方法 采用流式细胞技术(FCM)检测89例初发HSP患儿(HSP组)和30例健康儿童(对照组)外周血T淋巴细胞免疫表型.结果 HSP组CD4+ CD28+、CD8+ CD28+、CD3+ CD4+T淋巴细胞表达水平及CD4+/CD8+比率较对照组显著降低(P均＜0.05);HSP组CD3+和CD3+ CD8+T淋巴细胞表达水平与对照组相比无显著性差异(P＞0.05);HSP组CD4+ CD28-T细胞和CD8+ CD28-T细胞较对照组明显增高(P均＜0.05),但在皮肤型、关节型、腹型、混合型和紫癜性肾炎五种临床类型间无明显差别(P均＞0.05).结论 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群的紊乱,CD4+ CD28-T细胞及CD8+ CD22-T细胞的异常增高可能参与了其发病过程,但与HSP临床类型无关.     

间充质干细胞对系统性红斑狼疮CD4+Foxp3+T淋巴细胞的调节

目的 探讨同种异体骨髓间充质干细胞(MSC)体内外对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+Foxp3+T淋巴细胞及人脐带MSC移植对MRL/lpr鼠脾脏和淋巴结CD4+Foxp3+T淋巴细胞水平的影响.方法 血缘相关供者骨髓中分离培养MSC移植治疗5例SLE患者,采用流式细胞术检测移植前后外周血CD4+Foxp3+T淋巴细胞百分率.7例SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)分别与SLE患者和正常人骨髓MSC按不同比例体外共培养72 h,检测共培养后PBMC中CD4+Foxp3+T淋巴细胞百分率.MRL/Ipr鼠输注脐带MSC后检测脾脏和淋巴结CD4+Foxp3+T淋巴细胞百分率.结果 SLE患者异基因骨髓MSC移植后1周外周血CD4+Foxp3+T淋巴细胞百分率(4.8±1.6)%和移植后3个月(6.0±2.6)%均较移植前(2.1±1.2)%明显升高(5例,P<0.05).正常骨髓MSC与SLE患者PBMC共培养后CD4+Foxp3+T淋巴细胞百分率明显升高(P<0.05).且存在剂量依赖性,狼疮MSC也可上调SLE患者CD4+Foxp3+T淋巴细胞水平,但作用较正常MSC弱(P<0.05);正常MSC培养上清也可上调SLE患者PBMC中CD4+Foxp3+T淋巴细胞水平,但作用弱于MSC:PBMC=1:1组(P<0.05).MRL/Ipr鼠经1次或3次脐带MSC移植后脾脏CD4+Foxp3+T淋巴细胞百分率均较对照组高(P<0.05),但淋巴结CD+Foxp3+T淋巴细胞百分率均较对照组低(p<0.01),1次和3次移植组间差异无统计学意义.结论 异基因甚至异种MSC移植可上调SLE患者或MRL/Ipr鼠CD4+Foxp3+T淋巴细胞水平,同时体外试验也得出相同结论,且体外上调作用呈一定剂量依赖性,CD4+Foxp3+T淋巴细胞水平上调可能是MSC移植治疗SLE有效的机制之一.     

活动期类风湿关节炎患者外周血CD3+T淋巴细胞、NK细胞与IL-6水平的相关研究

目的探讨外周血T淋巴细胞、NK细胞分群在类风湿关节炎(RA)中的意义及与IL-6水平的相关情况。方法流式细胞仪法检测外周血淋巴细胞,记录20例RA患者和15例正常人的类风湿因子、血沉、抗核抗体(ANA)及免疫球蛋白、补体C3水平,ELISA法检测血清IL-6水平,并记录RA患者临床资料。结果活动期RA患者外周血CD3+T细胞计数与对照组分别为(68.8±7.8)、(62.3±4.2),活动期RA患者外周血CD3+T细胞计数轻度增高,但无统计学差异;RA患者外周血NK细胞(CD3-CD56+NK)计数与对照组分别为(9.8±1.8)、(12.3±2.0),RA患者明显低于对照组,P0.05;活动期RA患者IL-6水平高于对照组,分别为(13.8±4.4)ng/L、(4.8+3.0)ng/L,有统计学意义。结论IL-6水平增高、CD3+T细胞和NK细胞表达失衡,其各自免疫调节作用在RA中可能体现不同的效应作用,RA的发病机制中三者间可能具有相互调节的免疫机制。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.