吡喹酮对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察吡喹酮（Praziquantel）治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织中与凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法建立小鼠血吸虫病肝纤维化模型。模型对照组不做治疗，吡喹酮治疗组按500mg／kg给药，1次／d，连用2d。10周后处死小鼠，取肝组织制片，免疫组化染色（SP法），观察小鼠肝组织中Bcl2和Bax的表达水平；HE染色观察肝组织的病理学变化。实验设正常小鼠对照。结果模型对照组和治疗组小鼠肝组织Bcl2、Bax表达水平较正常对照组显著增高（P〈0．01或P〈0．05）；治疗组Bcl-2水平显著高于模型对照组（P〈0．05），而Bax的表达水平2组间差异无显著性（P〉0．05）。结论吡喹酮可能通过促进Bcl-2表达，减少肝细胞的变性坏死，阻止血吸虫病肝纤维化的发生。     

吡喹酮对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察吡喹酮(Praziquantel)治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠肝组织中与凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法建立小鼠血吸虫病肝纤维化模型。模型对照组不做治疗,吡喹酮治疗组按500 mg/kg给药,1次/d,连用2 d。10周后处死小鼠,取肝组织制片,免疫组化染色(SP法),观察小鼠肝组织中Bcl-2和Bax的表达水平;HE染色观察肝组织的病理学变化。实验设正常小鼠对照。结果模型对照组和治疗组小鼠肝组织Bcl-2、Bax表达水平较正常对照组显著增高(P<0.01或P<0.05);治疗组Bcl-2水平显著高于模型对照组(P<0.05),而Bax的表达水平2组间差异无显著性(P>0.05)。结论吡喹酮可能通过促进Bcl-2表达,减少肝细胞的变性坏死,阻止血吸虫病肝纤维化的发生。     

抗纤软肝胶囊对大鼠肝纤维化肝星状细胞活化及凋亡的影响

目的探讨抗纤软肝胶囊对大鼠肝纤维化肝星状细胞(HSC)活化及凋亡的影响。方法将32只清洁级SD大鼠采用随机数字表法分为正常对照组和肝纤维化建模组各16只。建模组大鼠皮下注射四氯化碳(CCl_4)诱导大鼠肝纤维化,正常对照组以同样方法注射等量植物油,随后将正常对照组随机分为正常组8只,药物组8只,建模组随机分为模型组8只,治疗组8只。药物组、治疗组均给予抗纤软肝胶囊治疗,其他组同期灌服相当量的生理盐水。应用苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察各组肝脏病理组织学改变;检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ-C型胶原(Ⅳ-C)及Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)水平;RT-PCR法或流式细胞术检测各组血清体外对HSC-T6细胞中α平滑肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子(TGF)-β1 mRNA表达以及细胞凋亡水平的影响。结果与模型组大鼠比较,治疗组大鼠肝脏的肝纤维化程度减轻;治疗组血清ALT、AST、HA、LN、IV-C、PC-Ⅲ水平明显低于模型组,而ALB水平明显高于模型组(均P<0.05);体外实验发现药物组及治疗组α-SMA和TGF-β1 mRNA的表达水平显著低于正常组及模型组(均P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,药物组及治疗组HSC-T6的凋亡水平显著高于正常组及模型组(均P<0.05)。结论抗纤软肝胶囊通过参与调控HSC的活化及凋亡,可发挥对肝纤维化大鼠的治疗作用。     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的:研究荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi Chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响及作用机制.腔注射制备大鼠肝纤维化模型,造模的同时,TFL干预组分别以高、低剂量的TFL灌胃6wk进行干预治疗,空白对照组、秋水仙碱组分别以生理盐水、秋水仙碱灌胃作为阴阳性对照.HE及Masson染色观察肝纤维化程度;免疫组织化学二步法检测Bcl-2、Bax的表达;测定血清ALT、AST的水平.结果:模型组大鼠肝组织中Bcl-2、Bax的表达较正常组显著升高(P=0.000),TFL高、低剂量给药组及秋水仙碱组Bcl-2的表达较模型组升高(P=0.000,0.047,0.021),Bax的表达较模型组降低(P=0.000,0.014,0.007),TFL高剂量组与低剂量组比较Bcl-2的表达升高(P=0.018),Bax的表达显著降低(P=0.002).Bcl-2、Bax在秋水仙碱组与TFL低剂量组中的表达无显著性差异(P=0.726,0.767).肝纤维化严重程度与Bax的表达显著正相关(P=0.000);与Bcl-2的表达负相关(P=0.000).空白对照组、TFL高低剂量给药组及秋水仙碱组血清ALT、AST均明显低于模型组,具有显著性差异(P=0.000).低剂量组与秋水仙碱组无显著性差异(P=0.597,0.669).结论:TFL具有较好的抗肝纤维化和改善肝功能的作用,并推测这种作用可能与上调Bcl-2、下调Bax的表达,抑制肝细胞的凋亡有关.     

化浊抗纤保肝汤对肝炎后肝纤维化大鼠肝纤维化的影响及机制

目的探究化浊抗纤保肝汤对肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响及机制。方法通过灭活的猪血制备肝纤维化大鼠模型,实验分为对照组、模型组、化浊抗纤保肝汤1组(保肝汤1组)、化浊抗纤保肝汤2组(保肝汤2组)、化浊抗纤保肝汤3组(保肝汤3组)。模型组、保肝汤1组给予蒸馏水、化浊抗纤保肝汤浓缩剂灌胃至第9周,保肝汤2组、保肝汤3组分别在第3周和第6周给药至第9周,对照组经腹腔注射生理盐水,同时给予蒸馏水至第9周。全自动生化分析仪分析肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平,放射免疫法检测透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)指标。实时定量PCR(qRT-PCR)和Western印迹法检测肝组织中Bcl-2和Bax基因蛋白与Ki-67 mRNA抗原表达的水平。结果模型组血清ALT、AST、HA、LN显著高于对照组(P<0. 01);保肝汤1组、保肝汤2组、保肝汤3组血清ALT、AST、HA、LN显著低于模型组(P<0. 01),且保肝汤2组、保肝汤3组血清ALT、AST、HA、LN显著高于保肝汤1组(P<0. 01);模型组肝组织Bcl-2、Bax、Ki-67mRNA和蛋白水平显著高于对照组(P<0. 01);给药后肝组织中Bcl-2、Ki-67 mRNA和蛋白显著增加(P<0. 01),但Bax差异不显著;保肝汤2组、保肝汤3组肝组织中Bcl-2、Ki-67 mRNA和蛋白水平显著低于保肝汤1组(P<0. 01)。结论化浊抗纤保肝汤有可能通过抑制细胞凋亡、促进其增殖,缓解肝纤维化的进程。     

实验性肝纤维化Bcl-2、Bax的表达及干扰素-γ对其的作用

目的 研究Bcl-2、Bax蛋白在四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型大鼠肝组织中的表达以及干扰素-γ(IFN-γ)对其的作用。 方法用CCl4诱导形成大鼠肝纤维化模型,使用IFN-γ 0.2 MU·kg-1·d-1,肌肉注射,治疗12周,设正常对照组和模型对照组。用免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织Bcl-2、Bax的表达情况。 结果 Bcl-2在正常对照组大鼠肝细胞浆和肝窦呈低水平表达,在模型对照组大鼠肝组织分布广泛,主要表达在纤维间隔、汇管区、肝窦和肝细胞膜,中央静脉和肝细胞浆也有一定表达。正常对照组和模型对照组表达量分别为(3.87±2.37)％和(9.46±4.29)％,t=2.83,P<0.05。Bax在正常对照组大鼠肝组织的中央静脉及其周围的肝窦呈低水平表达,在模型对照组主要表达在肝细胞浆,其还表达在肝窦、纤维间隔和肝细胞膜中,胆管上皮细胞偶见表达。正常对照组和模型对照组表达量分别为(3.50±1.88)％和(9.80±3.75)％,t=3.72,P<0.01。IFN—γ组Bax的表达量为(5.85±2.35)％,模型对照组为(9.80±3.75)％,t=2.98,P<0.01,Bcl-2的表达无明显改变(t=1.49,P>0.05)。IFN-γ组对纤维间隔Bcl-2的表达量为(6.58±4.13)％,模型对照组为(9.46±4.29)％,t=2.80,P<0.05,Bax的表达差异无显著性,t=0.58,P>0.05。 结论 肝纤维化时Bcl-2和Bax表达加强,IFN     

抗纤软肝颗粒对肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化的影响

目的 :观察抗纤软肝颗粒对实验性肝纤维化时肝组织 型胶原 ( - C)、层粘蛋白 (L N)以及肝窦毛细血管化的影响。方法 :大鼠皮下注射 2 5 0 m l/ L CCl4 制备肝纤维化模型 ,并同时给于秋水仙碱、抗纤软肝颗粒小和大剂量治疗 ,用光镜和电镜观察肝组织病理变化 ,免疫组织化学法检测肝组织 - C、L N。结果 :抗纤软肝颗粒能有效抑制 - C、L N的生成和沉积 (P <0 .0 1) ,改善肝纤维化大鼠肝组织病理变化 (P <0 .0 1) ,减轻肝窦毛细血管化程度。结论 :抗纤软肝颗粒能抑制肝窦毛细血管化的形成 ,产生抗肝纤维化的作用。     

青年乙肝患者肝组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达

Bcl-2蛋白具有对抗细胞凋亡的作用,而其蛋白家族中的Bax蛋白则可抑制Bcl-2的活性。二均可广泛定位于线粒体膜等细胞器上。Bcl-2和Bax蛋白可在肝组织中表达,而当发生病毒性肝炎时常伴有肝细胞的凋亡和坏死。本采用免疫组化技术观察青年乙肝患肝组织中Bcl-2及其相关蛋白Bax的表达,并对其间的关系和意义进行了探讨。     

不同剂量雌激素对去势雌性大鼠海马Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的分析不同剂虽17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）干预的去势雌性大鼠海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达,探讨雌激素的神经元保护作用及其可能机制。方法将大鼠随机分为3组：假手术组（A组）、去卵巢组（B组）、E2干预组（C组）,C组再随机分为3个剂量组。每组分别给予相应处理6周后处死。用放射免疫法（RIA）测定各组大鼠血清E2水平,采用免疫组织化学法（SP法）检测海马神经元Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果与假手术组相比,去卵巢后大鼠海马Bcl-2蛋白表达降低（P〈0．01）,补充外源性雌激素后Bcl-2蛋白表达逐渐恢复至正常水平;去卵巢后大鼠海马Bax蛋白表达升高（P〈0．01）,补充外源性雌激素后Bax蛋白表达逐渐恢复至正常水平。结论雌激素能够不同程度的上调海马Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,从而对海马神经元具有保护作用。     

结肠腺癌组织细胞的凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的表达

目的研究结肠腺癌组织细胞的凋亡、Bcl-2家族主要基因/蛋白(Bax和Bcl-2)的表达及Bax/Bcl-2比值在结肠腺癌发生和发展过程中的作用。方法选取临床标本50例,包括20例结肠腺癌组织和30例正常结肠黏膜组织。分别使用TUNEL法和免疫组化法检测细胞凋亡及其相关蛋白的表达。结果结肠腺癌组织和正常结肠组织细胞凋亡指数的中位数分别为0.26(四分位数间距0.09~0.59)和1.57(0.85~13.13),结肠腺癌组织的细胞凋亡水平明显低于正常结肠组织(P0.001)。Bax蛋白在两种组织中的阳性表达率分别为95%(19/20)和53.3%(16/30),差异有统计学意义(P=0.002);Bcl-2的阳性表达率分别为70%(14/20)和46.7%(14/30),差异无统计学意义(P=0.103)。Bax/Bcl-2≥1的样本数在两种组织中分别为70%(14/20)和36.7%(11/30)(P=0.021),差异有统计学意义。结论结肠腺癌组织的细胞凋亡水平明显低于正常结肠组织,Bax蛋白在结肠腺癌组织中的表达明显强于正常结肠组织,Bcl-2蛋白的表达未见明显差异,Bax/Bcl-2比值在结肠腺癌的发生和发展过程中可能发挥正相关作用。     

抗纤软肝颗粒对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的:探讨抗纤软肝颗粒(KXRG)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的影响。方法:传代培养的HSC-T6(肝星状细胞系)与KXRG(1.25mg/ml、2.5mg/ml、5mg/ml)及其药物血清(5%、10%、20%)共同培养72小时后,应用MTT法测定细胞增殖、流式细胞仪测定HSC细胞周期各时相的DNA含量。结果:KXRG及药物血清均能显著抑制HSC的增殖,使细胞周期阻滞于S期,且2.5mg/ml药物和10%药物血清作用最强(P0.01)。结论:KXRG通过抑制HSC的活化,阻滞其细胞周期的正常进行,进而抑制HSC增殖,从而起到抗肝纤维化的作用。     

软肝抗纤合剂治疗肝炎肝纤维化62例

软肝抗纤合剂是我们用于治疗肝炎肝纤维化的有效经验方,临床应用疗效确切。为明确其抗纤维化作用,我们于1999年3月～2002年3月对62例该病患者进行了临床研究,现报告如下。1 一般资料 102例病人均为门诊及住院患者,按1995年北京第5次全国传染病和寄生虫病学术会议修订的诊断标准诊断为肝炎肝纤维化。其中治疗组62例,男46例,女16例;年龄     

青年乙型肝炎患者肝组织Bcl-2,Bax蛋白的表达

0 引言Bc(?)-2蛋白具有对抗细胞凋亡的作用,而其蛋白家族中的 Bax蛋白则可抑制 Bc(?)-2的活性.Bc(?)-2和 Bax 蛋白可在肝组织中表达,而当发生病毒性肝炎时常伴有肝细胞的凋亡和坏死.我们采用免疫组化技术观寨青年乙肝患者肝组织中 Bc(?)-2及其相关蛋白 Bax 的表达,并对其间的关系和意义进行了探讨.     

抗纤软肝颗粒对肝星状细胞增殖的影响

目的 :研究抗纤软肝颗粒对肝星状细胞增殖的影响。方法 :传代培养的大鼠肝星状细胞系 (HSC- T6 )与中药复方抗纤软肝颗粒 (终浓度为 5 m g/ ml、2 .5 mg/ m l、1.2 5 mg/ ml)及药物血清 (5 %、10 %、2 0 %)共同培养 48h后 ,应用 MTT法及流式细胞仪测定细胞增殖。结果 :抗纤软肝颗粒无论是药物还是含药血清 ,均能显著抑制 HSC-T6增殖 ,并使细胞周期阻滞于 G1 期 ,在安全浓度范围内 ,5 m g/ ml组和 10 %药物血清组作用最强 (P <0 .0 1,<0 .0 5 )。结论 :抗纤软肝颗粒抗肝纤维化的作用机制可能在于阻滞细胞周期的进行 ,从而抑制 HSC增殖。     

肉桂醛对RSV宿主细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响

目的探讨肉桂醛对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的宿主细胞Hela细胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响。方法 RSV感染宿主Hela细胞后,选用不同浓度肉桂醛在不同作用方式下进行干预,采用免疫荧光方法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达量。结果与病毒对照组相比,给药组的Bcl-2表达量增加,Bax表达量降低(P<0.05);从蛋白的表达量可以看出肉桂醛在病毒直接灭活、吸附作用阶段对RSV有杀灭抑制作用。结论肉桂醛在有效浓度范围内通过对感染病毒细胞凋亡通路Bcl-2蛋白、Bax蛋白的影响,对RSV有杀灭作用。     

补肝散对感染血吸虫小鼠肝损伤后肝组织Bcl-2、Bax水平的影响

目的:观察补肝散干预感染血吸虫小鼠肝损伤模型后,对肝组织凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响,探讨补肝散对肝损伤的防护作用机制.方法:选择健康8周龄雄性昆明小白鼠108只,随机分为5组,将血吸虫尾蚴(18条/只)经小鼠腹部皮肤攻击感染造模,每组定期随机抽取6只小鼠,处死后留取其肝脏左叶,置于10％中性甲醛(用PBS配)固定,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平.结果:①Bcl-2、Bax表达在模型组小鼠肝组织中的阳性率均明显升高,与正常组比较差异有显著性意义(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P＜0.05);②补肝散组与模型组相比小鼠Bel-2表达升高差异有显著性意义(P＜0.05),Bax表达升高差异无显著性意义(P＞0.05),Bcl-2/Bax比值增高差异有显著性意义(P＜0.05).结论:补肝散可促进Bcl-2表达,使Bcl-2/Bax比值上调,减少肝细胞的凋亡,进而防护血吸虫性小鼠肝损伤,发挥抗纤维化的作用.     

抗纤软肝胶囊联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的:评价抗纤软肝胶囊联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效.方法:将104例慢性乙型肝炎肝纤维化患者随机分为3组:抗纤软肝胶囊治疗组、阿德福韦酯治疗组和抗纤软肝胶囊联合阿德福韦酯治疗组,治疗前后分别进行肝功能、肝纤维化血清学指标检测及超声影像学检查.结果:治疗1年后,①3组患者肝功能、肝纤维化指标和超声影像学指标均有不同程度的好转;②阿德福韦酯组和联合治疗组ALT降低和Alb升高幅度与抗纤软肝胶囊组相比较,差异有显著性意义(P＜0.05);③联合治疗组在肝纤维化指标(HA、LN、C-Ⅳ)和超声影像学指标(门脉主干内径、脾厚度)方面的改善与其他两组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:抗纤软肝胶囊和阿德福韦酯均有一定的抗慢性乙型肝炎肝纤维化的作用,两者联用时抗纤维化疗效更好.     

抗纤颗粒对肝纤维化大鼠肝组织胶原蛋白及血清TNF-α和γ-IFN含量的影响

目的 观察抗纤颗粒预防大鼠肝纤维化的疗效并探讨作用机理。方法 采用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型，观察抗纤颗粒干预前后肝胶原蛋白含量、血清INF-α和γ-IFN含量的变化。结果 抗纤颗粒预防组较模型组肝胶原蛋白含量、血清INF-α含量下降（P〈0．05），γ-IFN含量上升（P〈0．05）。结论 抗纤颗粒对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化有预防作用，其部份机理为通过调节细胞因子的含量，而达到抗肝纤维化的目的。     

干燥综合征唇腺组织中Bcl-2和Bax蛋白表达的意义

目的探讨Bcl-2/Bax在干燥综合征(SS)唇腺组织中的表达和意义。方法采用免疫组织化学的方法,对18例SS患者及8例正常对照唇腺组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达进行检测。结果Bax在SS患者唇腺组织细胞和导管上皮内大量表达,与对照组相比差异有显著性(P<0.05),而Bcl-2的阳性表达明显低于对照组。结论SS患者唇腺组织中Bax的增加及Bcl-2的减少都与促进细胞凋亡有关,可能是导致腺体破坏进而功能丧失的原因之—。     

抗纤软肝颗粒对肝纤维化大鼠肝组织核因子-κB基因表达的影响

目的观察中药抗纤软肝颗粒对四氯化碳加乙醇诱导肝纤维化大鼠的肝组织核因子-κB（NF-κB）p65 mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠40只,随机分为模型对照组（M）15只,抗纤软肝颗粒组（K）15只,正常对照组（N）10只。M组、K组分别以40%四氯化碳橄榄油液腹腔注射,每周2次,并以5%乙醇为唯一饮水。造模同时,K组即予抗纤软肝颗粒20 g.kg-1.d-1（中等剂量）灌胃,每天一次。7周末,各组取肝右叶分别作肝组织病理观察及检测肝组织NF-κB p65 mRNA表达。结果抗纤软肝颗粒组肝细胞变性坏死及肝纤维化水平较模型对照组明显减轻（P〈0.05）,肝组织NF-κB p65 mRNA表达较模型对照组明显减弱（P〈0.05）。结论抗纤软肝颗粒能下调肝纤维化大鼠肝组织NF-κB p65 mRNA表达,抑制肝纤维化的形成和发展,其机制可能是通过调控NF-κB p65 mRNA转录过程实现的。