贝那普利对不同血糖状态糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及相关基因表达的影响

腹腔注射链脲佐菌素建立SD大鼠糖尿病模型，TUNEL、免疫组化检测结果显示，糖尿病持续高血糖大鼠贝那普利处理组较未处理组。肾小管凋亡细胞明显减少，Bax表达减弱，肾小球Bcl-2蛋白表达增强（均P〈0．01）；糖尿病血糖波动大鼠贝那普利处理组较未处理组。肾小管凋亡细胞数、Bax和Bcl-2蛋白表达差异均无统计学意义。     

牛蒡颗粒剂对糖尿病大鼠氧化应激、细胞凋亡的影响及糖尿病心肌病变的防治

目的探讨中药牛蒡对氧化应激和心肌细胞凋亡的影响及对糖尿病大鼠的心肌保护作用和机制。方法雄性Wistar大鼠30只,腹腔内注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型,随机平均分为三组,正常对照组、糖尿病组、牛蒡(150 mg·kg-1·d-1)治疗组。切取大鼠心肌组织,检测超氧化物歧化酶(SOD)活性水平变化及丙二醛(MDA)含量,观察心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。取部分心肌组织光镜及电镜下观察细胞凋亡形态学改变。结果①糖尿病组大鼠心肌组织MDA含量均明显增高(P<0.01),SOD活性水平明显降低(P<0.01);牛蒡治疗组较糖尿病组MDA含量降低(P=0.000),SOD活性水平升高(P=0.000)。②糖尿病组Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增加;与糖尿病组相比,牛蒡治疗组的Bcl-2蛋白表达增多,而Bax蛋白表达减少。③光镜下可见糖尿病组心肌细胞排列紊乱、肿胀,牛蒡治疗组病变减轻。④透射电镜下见糖尿病组心肌细胞呈典型的凋亡形态学改变,牛蒡治疗组心肌细胞凋亡明显减轻。结论氧化应激及细胞凋亡参与了糖尿病心肌病变的发生发展。中药牛蒡对糖尿病大鼠心肌病变具有明显防治作用。改善氧化应激,调节Bcl-2,Bax蛋白的表达而抑制心肌细胞凋亡,可能是牛蒡发挥心肌保护作用的机制之一。     

糖尿病大鼠脑缺血再灌注后脑组织细胞凋亡与Bax、Bcl-2及P53基因表达

目的观察糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织细胞凋亡与Bax、Bcl-2和p53表达情况。方法将Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组、正常血糖脑缺血再灌注组(NIR)和糖尿病性高血糖脑缺血再灌注组(DIR),采用链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型、线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,应用TUNEL法和免疫组化法分别检测细胞凋亡和Bax、Bcl-2及p53表达。结果与假手术组和正常对照组比较,NIR组凋亡细胞百分率和Bax、Bcl-2、p53表达明显增加(P均<0.01);与NIR组比较,DIR组凋亡细胞百分率和Bax、p53表达明显增加,Bcl-2表达明显降低(P均<0.01)。结论糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后梗死周边区细胞凋亡增加是高血糖加重缺血性脑损伤的机制之一;Bax和p53表达上调、Bcl-2表达下调参与了糖尿病大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的调控。     

原花青素对I型糖尿病大鼠血管内皮功能、氧化性损伤和凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究原花青素(procyanidins,PC)对糖尿病大鼠血管内皮细胞的作用,并在三种凋亡相关蛋白水平探讨作用机制。方法雄性SD大鼠,尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造成1型糖尿病动物模型,随机分为糖尿病模型组,50 mg/kg原花青素治疗组和100 mg/kg原花青素治疗组,每组8只,另选8只健康雄性大鼠为正常对照组。各组大鼠灌服给药12周后,用血糖仪及专用血糖试纸现场检测各组大鼠空腹血糖;采用放射免疫分析仪检测血清内皮素1(ET-1)和前列环素(PGI2)水平;采用比色法检测血管内皮组织MDA含量和SOD活性;采用常规免疫组织化学染色方法对血管内皮细胞三种凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax和Bcl-2的表达进行检测;用Olympus成像分析系统高倍镜(×400)下观察和采集显微图像,采用美国显微镜图像分析测量软件Image-Pro Plus 6.0采集整个视野黄染灰度值并自动转化为光密度值,计算出单个内皮细胞平均光密度值(mean-density),分析三种凋亡相关蛋白的表达情况。结果糖尿病模型组大鼠,与正常对照组比较,大鼠空腹血糖水平明显增高,血清ET-1含量增高和PGI2含量降低(P0.01),血管内皮组织MDA含量提高(P0.01),血管内皮组织SOD活性降低(P0.01),血管内皮Caspase-3和Bax蛋白表达均增强(P0.01),Bcl-2蛋白表达及Bcl-2和Bax蛋白表达比值(Bcl-2/Bax)均减弱(P0.01);50 mg/kg原花青素治疗组和100 mg/kg原花青素治疗组,与糖尿病模型组比较,大鼠空腹血糖水平不同程度减低(P0.05和P0.01),血清ET-1含量降低和PGI2含量升高(P0.01),血管内皮组织MDA含量降低(P0.01),血管内皮组织SOD活性提高(P0.05和P0.01),血管内皮Caspase-3和Bax蛋白表达均减弱(P0.01),Bcl-2蛋白表达及Bcl-2和Bax蛋白表达比值(Bcl-2/Bax)均提高(P0.01),SOD含量均高于糖尿病模型组。结论原花青素对糖尿病大鼠血管内皮分泌功能和氧化性损伤有调节保护作用,同时可抑制血管内皮Caspase-3和Bcl-2蛋白表达水平,促进Bcl-2表达,提高Bcl-2和Bax蛋白表达比值。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响研究

目的观察辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏氧化应激和凋亡蛋白表达的影响,并探讨其可能的抗凋亡分子机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(NC,n=8)、糖尿病组(DM,n=8)和辛伐他汀治疗组(DM+Sim,n=8)。腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型。每天记录1次体重,每3d测1次血糖,在辛伐他汀治疗第1周末和第4周末分别检测24h尿蛋白含量。实验结束后,抽取腹主动脉血,检测TC和TG,并取出双侧肾脏,检测肾脏组织丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)水平及蛋白nephrin、p53、p-p53、Bax和Bcl-2的表达。结果与NC组比较,DM组和DM+Sim组体重增长缓慢,而血糖迅速升高;DM组和DM+Sim组体重和血糖比较,差异无统计学意义。辛伐他汀治疗第1周末时,与NC组比较,DM组24h尿蛋白增加(P0.01);辛伐他汀治疗第4周末时,DM组和DM+Sim组24h尿蛋白均增加,与NC组比较,DM组24h尿蛋白增加,而DM+Sim组较DM组24h尿蛋白下降(P0.05)。与NC组比较,DM组TC、TG和MDA水平及p53、p-p53和Bax表达升高(P0.01),而SOD活性以及nephrin、Bcl-2表达降低(P0.01);与DM组比较,DM+Sim组TC、TG和MDA水平及p53、p-p53和Bax表达降低(P0.05或P0.01),而SOD活性及nephrin、Bcl-2表达升高(P0.05)。结论辛伐他汀可通过抑制氧化应激,进而抑制促凋亡蛋白和上调抗凋亡蛋白的表达来保护糖尿病大鼠的肾脏。     

大鼠肢体缺血/再灌注后心肌细胞凋亡及氧化应激的调节作用

目的观察大鼠肢体缺血/再灌注(I/R)后心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的变化和氧化应激的调节作用。方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分成对照组、肢体I/R 2 h组(I/R 2 h组)和4 h组(I/R 4 h组)。免疫组化法检测心肌组织Bcl-2/Bax蛋白表达;原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记(TUNEL)技术检测心肌凋亡细胞;生化法检测血浆心肌酶含量;比色法测定心肌组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化。结果肢体I/R后与对照组比较,血浆心肌酶含量升高;心肌组织ROS和MDA含量增加,SOD活性降低(P0.05);心肌凋亡细胞明显增加(P0.01);心肌组织Bcl-2与Bax表达增强,但Bax表达较Bcl-2明显上调,Bcl-2/Bax比值降低(P0.01);相关分析显示,ROS含量与Bax蛋白表达平均吸光度值和凋亡指数(AI)之间呈显著正相关(P0.01)。结论大鼠肢体I/R后可致心肌细胞凋亡;心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达比值降低和心肌氧化应激增强有关。     

普罗布考对心肌梗死大鼠心肌组织Bcl-2和Bax表达及氧化应激的影响

背景 心肌梗死后心肌细胞凋亡与氧化应激有关,普罗布考为脂溶性强抗氧化剂,实验证明具有保护心肌细胞的作用,该药保护心肌细胞的作用是否通过调控细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax目前尚不清楚.目的 研究普罗布考对心肌梗死大鼠心肌组织Bcl-2和Bax表达及氧化应激的影响.方法 将心肌梗死后24 h存活大鼠41只随机分为2组:盐水组(5 mL/d,n=20),普罗布考组[60 mg/(kg·d),n=21],灌胃给药;另设假手术组(n=12)作对照.分别于心肌梗死后6周:导管法测定左室有创血流动力学指标,TUNEL法检测非梗死区心肌细胞凋亡;RT-PCR的方法观察心肌组织Bcl-2及Bax mRNA表达的变化;Western blot检测心肌Bcl-2及Bax蛋白表达;比色法测定心肌组织氧化代谢指标.结果 (1)与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠均出现显著的Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低,Pax mRNA及蛋白表达与心肌细胞凋亡指数显著升高(P均＜0.01).与盐水组相比,普罗布考组心肌组织Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著升高,Bax mRNA及蛋白表达及心肌细胞凋亡指数显著降低(P均＜0.01);(2)与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠心肌组织均出现显著的MDA升高,SOD、TAOC含量及SOD/MDA比值降低(P均＜0.01);与盐水组相比,普罗布考组MDA显著下降,SOD、TAOC含量及SOD/MDA均升高(P均＜0.01);心肌细胞凋亡指数与TAOC、SOD/MDA比值呈负相关(P均＜0.01).结论 心肌梗死后心肌细胞凋亡增加,普罗布考治疗可以抑制心肌细胞凋亡,降低心肌梗死后心肌组织的氧化应激.     

谷氨酰胺对急性肝衰竭大鼠肠上皮细胞线粒体凋亡途径的调控作用

目的:探讨谷氨酰胺对急性肝衰竭大鼠肠上皮细胞线粒体凋亡途径的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠45只,随机分为正常组、模型组、谷氨酰胺组。于造模前3d对谷氨酰胺组大鼠给予L-谷氨酰胺0.5g/(kg·d)灌胃,第4天模型组和谷氨酰胺组大鼠给予腹腔注射D-氨基半乳糖(400 mg/kg)和脂多糖(100 g/kg)制备急性肝衰竭模型。造模后48 h,观察各组大鼠生存情况,处死大鼠并收集血、小肠组织标本,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBil)水平;观察小肠组织病理学变化;Tunel联合DAPI染色检测肠上皮细胞凋亡情况;Western Blot检测小肠组织Bcl-2、Bax及Cyt-c蛋白表达量。结果:谷氨酰胺组大鼠的存活率(80.0%)高于模型组(46.7%);模型组大鼠血清ALT、AST和TBil水平分别为(5 345.9±287.3)U/L、(2 936.7±35.6)U/L和(93.5±1.6)μmol/L,均显著高于正常组大鼠(48.3±6.4)U/L、(128.6±14.3)U/L和(8.6±1.3)μmol/L(均P0.01),谷氨酰胺组大鼠ALT、AST和TBil水平均较模型组降低,分别为(696.4±14.5)U/L、(434.5±15.8)U/L和(32.5±1.8)μmol/L(P均0.05)。小肠黏膜组织Tunel染色表明模型组大鼠小肠可见大量肠上皮细胞凋亡、坏死;谷氨酰胺组大鼠肠上皮细胞凋亡较模型组明显减轻。Western Blot检测模型组大鼠小肠组织中Bax、Cyt-c蛋白表达与正常组比较均明显升高,Bcl-2蛋白表达则明显降低,Bcl-2/Bax值较正常组下降;而谷氨酰胺组肠组织中Bax、Cyt-c蛋白的表达均弱于模型组(P均0.05),Bcl-2蛋白表达较模型组高(P0.05),Bcl-2/Bax值较模型组升高。结论:谷氨酰胺可以提高急性肝衰竭大鼠的生存率,改善其肝功能,减轻肠上皮病理损伤,抑制肠上皮细胞凋亡,其机制可能是通过抑制肠上皮细胞线粒体凋亡途径来实现的。     

醛固酮诱导大鼠心肌细胞凋亡及天然VitE干预的影响

将32只大鼠随机分为对照组(C组)、醛固酮组(A组)、醛固酮 天然VitE组(E组)和醛固酮 螺内酯组(S组).比较各组大鼠间心肌组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,心肌细胞凋亡指数(AI),以及Bax和Bcl-2的表达.发现与C组比较,A组AI、Bax、MDA明显增加,Bcl-2、SOD明显减少;与A组比较,E组和S组MDA、AI和Bax均明显减少,Bcl-2、SOD明显增加.认为天然VitE能够改善醛固酮诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制与改善醛固酮诱导的心肌组织氧化应激水平,抑制促凋亡基因Bax表达和上调抑凋亡基因Bcl-2表达有关.     

miR-424靶向IGF1R调控高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞凋亡和氧化应激的机制

目的研究miR-424是否通过靶向胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)影响高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡和氧化应激。方法随机将大鼠肾小球系膜细胞(HBZY)-1分为正常糖浓度组、高糖组和高糖+转染组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-424和IGF1R mRNA表达,Western印迹检测细胞中IGF1R、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,比色法检测细胞上清培养液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,酶标法检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因实验检测miR-424对IGF1R转录活性的影响。结果与正常糖浓度组比较,高糖组人肾小球系膜细胞中miR-424及Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05),IGF1R mRNA、蛋白及Bax蛋白表达明显升高,细胞凋亡率明显升高(P0.05),细胞中LDH、MDA活性明显增强(P0.05),SOD活性明显降低(P0.05);上调miR-424和沉默IGF1R后,均明显抑制了高糖诱导的细胞凋亡和氧化应激水平;双荧光素酶报告基因实验证实miR-424靶向负调控IGF1R的表达;过表达IGF1R逆转上调miR-424对高糖诱导的细胞凋亡和氧化应激的抑制作用。结论 miR-424靶向负调控IGF1R的表达,抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡和氧化应激。     

石斛合剂对衰老糖尿病大鼠胰腺组织凋亡相关基因Bax,Bcl-2mRNA及蛋白表达的调控

目的观察石斛合剂对衰老及衰老糖尿病（DM）大鼠胰腺组织凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA及蛋白表达的影响。方法采用D-半乳糖致衰，继而加高脂高糖及注射低剂量链脲佐菌素（STZ）制备衰老DM模型，测定血清中SOD、MDA浓度，并利用RT-PCR法和Western-Blot法检测大鼠胰腺组织凋亡相关基凼Bax、Bcl-2mRNA及蛋白表达水平。结果与衰老及衰老DM组相比，石斛合剂各治疗组MDA浓度明显降低（P〈0．05），SOD浓度明显升高（P〈0．05～0．01），衰老DM石斛合剂治疗组胰腺组织BaxmRNA及蛋白水平明显降低（P〈0.05～0．01），Bcl-2mRNA及蛋白水平明显升高（P〈0．05）。结论①衰老大鼠呈现Bax／Bcl-2比值显著升高，衰老DM大鼠Bax／Bcl-2比值升高更为显著，即衰老大鼠Bax和Bcl-2mRNA及蛋白表达失衡，且这种失衡在衰老DM大鼠显得更为突出；②石斛合剂降低血糖，显著升高衰老及衰老DM大鼠SOD水平，降低MDA水平，其分子机制之一与其降低衰老DM大鼠胰腺组织Bax、增加Bcl-2 mRNA及蛋白水平，即调整Bax和Bcl-2mRNA及蛋白表达的失衡有关。     

α-硫辛酸对氧化损伤大鼠肝细胞凋亡的保护作用

目的 研究α-硫辛酸(α-LA)对氧化损伤大鼠肝细胞凋亡的保护作用.方法 将正常大鼠肝细胞(BRL)分为正常对照组,在含有5％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中培养24 h;H2O2损伤组,在含有5％ FBS的DMEM培养基中培养24 h后,以0.2 mmol/L H2O2作用1 h;α-LA低、中、高剂量组,分别用含有50、100、200 μmol/L α-LA的培养液培养细胞24 h后,以0.2 mmol/L H2O2作用1h.测定各组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、细胞凋亡率、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果 与正常对照组比较,H2O2损伤组的GSH-Px和SOD活性均降低,MDA含量和细胞凋亡率升高(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达量减少,Bax蛋白表达量增多(P＜0.05);与H2O2损伤组相比,α-LA各剂量组的GSH-Px和SOD活性均有所升高,MDA含量和细胞凋亡率下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达量增加,Bax蛋白表达量降低(P＜0.05).结论 α-LA可以通过抗氧化,上调Bcl-2的蛋白表达水平,下调Bax的蛋白表达水平,对氧化损伤引起的肝细胞凋亡起到保护作用.     

高压氧预处理对正常和糖尿病大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨高压氧预处理对正常和糖尿病大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白的影响.方法 雄性Wistar大鼠75只,随机分为正常大鼠对照组,正常大鼠缺血-再灌注组,正常大鼠高压氧预处理组,糖尿病大鼠对照组,糖尿病大鼠缺血-再灌注组,糖尿病大鼠高压氧预处理组,检测各组心肌凋亡及心肌Bax、Bcl-2蛋白表达.结果 ①正常大鼠高压氧预处理组凋亡指数与正常大鼠缺血-再灌注组相比[(33.15±4.36)％vs(41.72±3.47)％],糖尿病大鼠高压氧预处理组凋亡指数与糖尿病大鼠缺血-再灌注组相比[(41.69±5.79)％vs( 52.73±6.71)％]均明显降低,有统计学差异(P＜0.05).②正常大鼠高压氧预处理组Bax蛋白灰度值与正常大鼠缺血-再灌注组相比[(170.17±7.35)vs(157.50±8.12)],糖尿病大鼠高压氧预处理组Bax蛋白灰度值与糖尿病大鼠缺血-再灌注组相比[(141.17±6.77) vs (134.0±4.73)]均明显降低,有统计学差异(P＜0.05).③正常大鼠高压氧预处理组Bcl-2蛋白灰度值与正常大鼠缺血-再灌注组相比[(158.67±7.69) vs (171.83±8.66)],糖尿病大鼠高压氧预处理组Bcl-2蛋白灰度值与正常大鼠缺血-再灌注组相比[(166.0±10.53)vs(183.33±9.15)]相比均明显增高,有统计学意义(P＜0.05).结论 高压氧预处理对正常及糖尿病大鼠均有抗心肌细胞凋亡的作用,但对正常大鼠保护作用更强,其保护机制可能与下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达有关.     

健脾理气合剂对糖尿病胃轻瘫大鼠胃组织凋亡及相关基因Bcl-2、Bax的影响

[目的]观察健脾理气合剂对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠胃组织细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。[方法]建立DGP模型,分别予生理盐水、吗丁啉混悬液、健脾理气合剂(高、低剂量)连续灌胃给药3周,检测血糖、胃组织细胞凋亡率,以及胃组织中Bax,Bcl-2蛋白表达。[结果]健脾理气合剂高剂量组与低剂量组、吗丁啉组比较,其胃平滑肌细胞凋亡率明显降低(P0.05),胃壁组织的Bax基因表达明显减少(P0.05),Bcl-2基因表达明显增加(P0.05)。[结论]健脾理气合剂可以减少糖尿病轻瘫大鼠胃壁组织平滑肌细胞凋亡,良性调控胃壁组织的Bax和Bcl-2蛋白表达。     

miR-423-5p通过调控UCHL1表达对H2O2诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响

目的探讨miR-423-5p对过氧化氢(H₂O₂)诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响及作用机制。方法采用H₂O₂诱导人晶状体上皮细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-423-5p和泛素羧基末端水解酶(UCH)L1 mRNA表达水平,Western印迹检测UCHL1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡。转染miR-423-5p抑制剂或UCHL1过表达载体至人晶状体上皮细胞,上述相同方法检测干扰miR-423-5p表达或UCHL1过表达对H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激及凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-423-5p与UCHL1靶向关系。结果H₂O₂诱导可促进人晶状体上皮细胞凋亡、MDA和miR-423-5p表达及Bax蛋白表达(P<0.05),抑制细胞SOD和GSH-Px表达、UCHL1 mRNA和蛋白表达及Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。干扰miR-423-5p或过表达UCHL1均可抑制人晶状体上皮细胞凋亡、MDA和Bax表达(P<0.05),促进细胞SOD和GSH-Px表达及Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。miR-423-5p靶向负调控UCHL1表达,抑制UCHL1表达逆转了干扰miR-423-5p表达对人晶状体上皮细胞凋亡、MDA和Bax表达的抑制作用及对SOD、GSH-Px和Bcl-2蛋白表达的促进作用。结论miR-423-5p可能通过抑制UCHL1表达促进H₂O₂诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡,保护人晶状体上皮细胞免受H₂O₂损伤。     

人参皂苷Rg3对糖尿病肾脏疾病大鼠氧化应激和凋亡的影响

目的探讨人参皂苷Rg3干预STZ诱导的糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠氧化应激和细胞凋亡的作用。方法 STZ一次性尾静脉注射诱导DKD模型并随机分为DKD组,人参皂苷Rg3低、中、高剂量干预组,另设正常对照组。干预组连续灌胃给药10周,收集24h尿量测定尿蛋白,处死大鼠测定血清中FPG、BUN、Scr及氧化应激相关指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;取肾脏组织观察结构变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测肾脏组织中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达。结果与DKD组比较,Rg3干预后大鼠一般状况及肾功能BUN、Scr等指标改善,24h尿蛋白量减少,血清SOD活性增强,同时MDA含量减少;肾组织中细胞凋亡率降低,促凋亡蛋白Bax表达减少而Bcl-2表达增强。结论人参皂苷Rg3对糖尿病大鼠肾脏损伤有一定的保护作用,可能与增强血清中抗氧化酶活性、抑制肾脏细胞凋亡有关。     

6-姜酚抑制氧化应激减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的:研究6-姜酚抑制氧化应激减轻心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)的作用与机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,按随机原则分为随机分为4组(每组10只):假手术组、6-姜酚组(6-G组)、MIRI组、6-G+MIRI组。6-G组大鼠不行手术,在6-G+MIRI组手术前30min同时经尾静脉给药(6mg/kg)。各组大鼠经ELISA法检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、心肌酶(CK、CK-MB、TnT、TnI)水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数,TTC双染色法测量心肌梗死面积,ELISA法检测血清Bcl-2、Bax、Caspase-3等水平。结果:与MIRI组比较,6-G+MIRI组MDA水平降低(P0.05)、SOD水平升高(P0.05);心肌酶水平下降(P0.05);心肌细胞凋亡减轻,凋亡指数降低(P0.05);心肌梗死面积缩小(P0.05);血清Bcl-2水平升高(P0.05)、Bax水平下降(P0.05)、Bcl-2/Bax比值升高(P0.05)、Caspase-3水平下降(P0.05)。结论:6-G可减轻MIRI,其机制可能是通过抑制氧化应激减轻心肌细胞凋亡。     

黄芩苷对糖尿病大鼠组织醛糖还原酶活性及肾脏细胞凋亡的影响

目的研究醛糖还原酶(AR)、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax与糖尿病肾病(DN)的关系,探讨醛糖还原酶抑制剂(ARIs)对DN的治疗作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、糖尿病组、依帕司他组、黄芩苷组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射STZ(60mg/kg),72h后建立糖尿病大鼠模型。依帕司他组灌胃依帕司他10mg.kg-1.d-1,黄芩苷组灌胃黄芩苷150mg.kg-1.d-1。16w后处死大鼠,测定晶体、肾脏组织AR活性,观察Bcl-2、Bax的表达,取部分肾皮质病理观察、电镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果与正常对照组相比,糖尿病组晶体、肾脏皮质AR活性明显升高(P<0.001),两治疗组AR活性明显较糖尿病组降低(P<0.01),而血糖无明显变化。糖尿病组肾脏Bcl-2、Bax蛋白表达增加,治疗组的Bcl-2蛋白表达较糖尿病组增多,而Bax蛋白表达较糖尿病组减少。透射电镜下见糖尿病组肾脏肾小管上皮细胞呈典型的凋亡形态学改变,治疗组大鼠肾组织细胞凋亡改变明显减轻。糖尿病组肾小球基底膜增厚,系膜区域扩大,治疗组病变减轻。结论ARIs通过抑制AR活性,调节Bax、Bcl-2的表达抑制细胞凋亡,延缓DN的发展。黄芩苷对AR抑制作用与依帕司他相似。     

氧化苦参碱改善肝硬化大鼠细胞凋亡性肠黏膜损伤的机制

目的探究氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)在肝硬化大鼠肠黏膜损伤改善中与肠上皮细胞凋亡的关系。方法SD大鼠30只,随机分为空白组(4只)、肝硬化造模组(26只)。空白组:常规饲养9周后,按体质量肌注5%葡萄糖水4周,消毒饲料及水自由摄入,标记为空白对照组A组;肝硬化造模组:采用改良四因素复合造模法9周后制成肝硬化成模大鼠(16只),随机选择8只予以40%CCl4橄榄油溶液皮下注射及按体质量肌注5%葡萄糖水4周,标记为模型组B组;剩余8只予以40%CCl4橄榄油溶液皮下注射及按体质量肌注氧化苦参碱葡萄糖水4周,标记为治疗组C组;消毒饲料及含甘草甜味素的10%乙醇溶液自由摄入。TUNEL法检测各组肠黏膜上皮细胞的凋亡率、RT-PCR法检测肠黏膜Bcl-2和Bax的mRNA表达。结果 B组回肠上皮细胞凋亡率明显高于A组(P0.01),C组凋亡率低于B组(P0.05);A组Bcl-2mRNA呈现高表达,Bax mRNA呈现为低表达;B组Bcl-2mRNA的表达明显低于A组(P0.01),Bax mRNA表达明显高于A组(P0.01);C组Bcl-2mRNA的表达水平明显增加高于B组(P0.05),Bax mRNA的表达水平明显减少低于B组(P0.01),均差异有统计学意义。结论 OMT通过上调肝硬化大鼠回肠组织中凋亡相关基因Bcl-2mRNA的表达、下调Bax mRNA的表达抑制肠黏膜上皮细胞凋亡,从而改善肠黏膜损伤,可能是保护肠黏膜屏障功能的机制之一。     

黄连对糖尿病脑缺血再灌注模型大鼠Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨黄连对糖尿病合并脑缺血再灌注模型大鼠Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达的影响及其保护糖尿病合并脑缺血再灌注大鼠的脑损伤作用机制。方法本实验将SD雄性大鼠60只随机分为4组,即假手术组和糖尿病脑缺血再灌注黄连高、中、低(100 g/kg,50 g/kg,25 g/kg)剂量组,每组15只。黄连干预组给予佐链脲菌素(STZ)注射造糖尿病模型。连续监测血糖7 d,待血糖稳定后,用线栓法造脑缺血再灌注模型。观察黄连对糖尿病大鼠脑缺血再灌注120 min后脑组织Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达的影响。结果假手术组的Bax蛋白较其他各组低,差异有统计学意义(P0.05),而黄连低、中、高剂量组的Bax蛋白表达呈降低趋势(P0.05)。假手术组的Bcl-2蛋白表达亦较其他各组低,各黄连剂量组的Bcl-2蛋白表达随黄连剂量增加而增高(P0.05),降低血糖,可明确改善神经功能缺损症状(P0.05)。结论高剂量黄连能下调Bax蛋白、上调Bcl-2蛋白表达,降低血糖,改善神经功能缺损症状,抑制糖尿病合并脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡,从而对糖尿病合并脑缺血再灌注损伤起到保护作用。